一种红细胞裂解液及其裂解方法
【专利摘要】本发明提供了一种红细胞裂解液及利用该裂解液裂解红细胞的方法，所述红细胞裂解液包括以下浓度的组份：0.1M～0.5M氯化铵、0.001M～0.2M碳酸氢钾、0.001～0.05M乙二胺四乙酸或乙二胺四乙酸二钠。本发明所述红细胞裂解液试剂具有很好的红细胞裂解效果，对操作人员安全无毒副作用，裂解效率高。并且以甲醛作为固定剂，与其它组份联合使用，实现了该试剂不仅可用于血液中红细胞的去除，而且可以作为血液样本中的非红细胞部分细胞的保护剂用于样本运输，从而克服了现有技术所纯化的血液不能稳定保存剩余细胞组分的缺点。
【专利说明】一种红细胞裂解液及其裂解方法
【技术领域】
[0001]本发明属于分子生物学领域，涉及医学和生物技术，具体的是涉及一种红细胞裂解液及其裂解方法。
【背景技术】
[0002]红细胞也称红血球(RBC)，是血液中数量最多的一种血细胞，也是脊椎动物体内通过血液运送氧气的最主要的媒介，同时还具有免疫功能。红细胞中含有血红蛋白，因而使血液呈红色。但是在利用现代临床诊断方法对血液样品进行诊断检测时，红细胞对许多诊断检测存在干扰作用，这就需要先把红细胞从血液样品中分离出去，然后再进一步对样品进行检测。
[0003]目前去除红细胞的方法主要有:密度梯度离心法、自然沉降法、差异沉降法、氯化铵分离法等。密度梯度离心法分离的肿瘤细胞不纯，分离效率不高，有相当一部分肿瘤细胞丢失，自然沉降法和差异沉降法简便但各层中的细胞种类多，分离的细胞纯度不高，而目前应用最广泛的氯化铵分离法也存在分离细胞纯度差的问题。
[0004]目前，很多常规的红细胞裂解试剂在实际应用中都存在裂解效果不够好的缺陷，例如或是分离细胞纯度差，或是裂解效率不够高等。
【发明内容】
[0005]本发明针对现有技术的不足，提供一种红细胞裂解液，利用该裂解液裂解血液中的红细胞，简单高效，利于高通量的操作，更好地满足实际应用的需要。
[0006]实现上述目的技术方案如下。
[0007]一种红细胞裂解液，其包括有以下浓度的组份:0.1M~0.5M氯化铵、0.0OlM~0.2M碳酸氢钾、0.001~0.05M乙二胺四乙酸或乙二胺四乙酸二钠。
[0008]进一步地，包括有以下浓度的组份:0.3M~0.32M氯化铵、0.018M~0.022M碳酸氢钾、0.003~0.005M乙二胺四乙酸或乙二胺四乙酸二钠。
[0009]在其中一个实施例中，还包括有0.01%~0.2%的甲醛。
[0010]本发明的另一个目的是提供一种红细胞裂解的方法。
[0011]实现上述的目的的技术方案如下:
[0012]一种血液中红细胞裂解的方法，取血液样本，按照体积为1:2-5的比例加入上述的红细胞裂解液，两者混合15-30min。
[0013]与现有技术相比，本发明有益效果主要体现在:
[0014]本发明利用常规红细胞裂解试剂，经过大量的实验和发明人的技术积累，选取新的组份浓度， 达到比现有技术更好的红细胞裂解效果，并且对操作人员安全无毒副作用，裂解效率高。并且以甲醛作为固定剂，与其它组份联合使用，实现了该试剂不仅可用于血液中红细胞的去除，而且可以作为保存血液样本中的非红细胞部分细胞的保护剂用于样本运输，从而克服了现有技术所纯化的血液不能稳定保存剩余细胞组分的缺点。具体实施例
[0015]实施例1.一种红细胞裂解液
[0016]1、一种红细胞裂解液，具有以下组成:
[0017]
【权利要求】
1.一种红细胞裂解液，其特征在于，包括有以下浓度的组份:0.1M~0.5M氯化铵、0.0OlM~0.2M碳酸氢钾、0.001~0.05M乙二胺四乙酸或乙二胺四乙酸二钠。
2.根据权利要求1所述的红细胞裂解液，其特征在于，包括有以下浓度的组份:0.3M~0.32M氯化铵、0.018M~0.022M碳酸氢钾、0.003~0.005M乙二胺四乙酸或乙二胺四乙酸二钠。
3.根据权利要求1或2所述的红细胞裂解液，其特征在于，所述的红细胞裂解液还包括有0.01%~0.2%的甲醛。
4.一种裂解血液中红细胞的方法，其特征在于，取血液样本，按照体积为1:2-5的比例加入权利要求1或2所述的 红细胞裂解液，两者混合反应15-30min。
【文档编号】C12N1/06GK104178424SQ201310200383
【公开日】2014年12月3日 申请日期:2013年5月24日 优先权日:2013年5月24日
【发明者】许嘉森, 刘志明, 吴诗扬, 杨威威 申请人:益善生物技术股份有限公司