一种细胞总rna的提取方法
【专利摘要】本发明公开了一种细胞总RNA的提取方法。步骤如下：首先收集所需要的细胞，并加入保质液；然后加入200ul的氯仿，震荡摇匀后放置6-8分钟；用高速离心机，11000rpm，室温离心10分钟；分离提纯；再用台式离心机，室温离心5分钟；分离提纯；用浓度不少于80%的酒精洗涤至少一次，再在室温下离心处理4分钟；在40摄氏度下将酒精挥发，准备的细胞密度为30-50%。本发明的有益效果是，与预期的结果一致，可以证明重组蛋白表达成果。
【专利说明】—种细胞总RNA的提取方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种实验方法，具体来说，一种细胞总RNA的提取方法。
【背景技术】
[0002]核糖核酸(英语:Ribonucleic acid,缩写:RNA)是一种重要的生物大分子，因为分子由核糖核苷酸组成而得名。每个RNA分子都由核苷酸单元长链组成，每个核苷酸单元含有一个含氮碱基、一个核糖和一个磷酸基。RNA是具有细胞结构的生物的遗传讯息中间载体，并参与蛋白质合成；还参与基因表达调控。对一部分病毒而言，RNA是其唯一的遗传物质。RNA存在于一切细胞的细胞质和细胞核中，也存在于大多数已知的植物病毒和部分动物病毒以及一些噬菌体中。嘧啶碱有一个不同:RNA是尿嘧啶，DNA则为胸腺嘧啶。五碳糖不同=RNA是核糖，DNA是脱氧核糖，这样一来组成RNA的基本单位就是核糖核苷酸；DNA则为脱氧核苷酸DNA为双链结构，RNA为单链结构。
【发明内容】
[0003]为克服上述技术问题，我们提出了以下技术方案: 一种细胞总RNA的提取方法，步骤如下:首先收集所需要的细胞，并加入保质液；然后加入200ul的氯仿，震荡摇匀后放置6-8分钟；用高速离心机，IlOOOrpm,室温离心10分钟；分离提纯；再用台式离心机，室温离心5分钟；分离提纯；用浓度不少于80%的酒精洗涤至少一次，再在室温下离心处理4分钟；在40摄氏度下将酒精挥发。
[0004]本发明中，准备的细胞密度为30-50%。
[0005]本发明中，所需要的酒精浓度为85%。
本发明的有益效果是，与预期的结果一致，可以证明重组蛋白表达成果。
【具体实施方式】
[0006]一种细胞总RNA的提取方法，步骤如下:首先收集所需要的细胞，并加入保质液；然后加入200ul的氯仿，震荡摇匀后放置7分钟；用高速离心机，llOOOrpm，室温离心10分钟；分离提纯；再用台式离心机，室温离心5分钟；分离提纯；用浓度85%的酒精洗涤至少一次，再在室温下离心处理4分钟；在40摄氏度下将酒精挥发。准备的细胞密度为50%。
[0007]以上所述，仅为本发明较佳的【具体实施方式】，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本【技术领域】的技术人员在本发明披露的技术范围内，根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变，都应涵盖在本发明的保护范围之内。
【权利要求】
1.一种细胞总RNA的提取方法，其特征在于，步骤如下:首先收集所需要的细胞，并加入保质液；然后加入200ul的氯仿，震荡摇匀后放置6-8分钟；用高速离心机，llOOOrpm，室温离心10分钟；分离提纯；再用台式离心机，室温离心5分钟；分离提纯；用浓度不少于80%的酒精洗涤至少一次，再在室温下离心处理4分钟；在40摄氏度下将酒精挥发。
2.如权利要求1所述的一种细胞总RNA的提取方法，其特征在于，准备的细胞密度为30-50%ο
3.如权利要求1所述的一 种进行蛋白印迹的方法，其特征在于，所需要的酒精浓度为85%。
【文档编号】C12N15/10GK103602663SQ201310525054
【公开日】2014年2月26日 申请日期:2013年10月31日 优先权日:2013年10月31日
【发明者】徐丽 申请人:徐丽