专利名称：液体的微生物封装的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种减少微生物细胞臭味的方法。本发明也涉及所得去臭细胞在封装某材料过程中的应用，其中微生物细胞与所说材料接触，该材料为液体形式的，从而可通过微生物细胞壁被吸收并保留在微生物细胞内。本发明还涉及已用这种方式封装的液体。
将材料封装到微生物细胞内是已知的。在EP-B-0，085，805，(Dunlop有限公司)中描述了一种封装方法，其中微生物与有机脂类扩散物质接触，该有机脂类扩散物质是一种溶剂或微分散介质，为使材料被封装，微生物同时和/或继后与被封装的物质接触，所说材料在有机脂类扩散物质中，或在其它有机脂类扩散物中，或在一种易于与第一次提到的脂类扩散物混溶的液体中，被用作溶液或微分散体系，从而使有机脂类扩散物质和待封装的材料被摄入并被动地保留在微生物中。合适的微生物包括酵母，合适的脂类扩散物质包括脂族醇、酯、芳族烃和氢化芳族烃。可被封装的材料的一个例子是一种适用于“无碳”复印纸的无色染料。与某些较早的揭示(参看US-A-4，001，480和FR-A-2，179，528)相比，在上述欧洲专利中描述的方法的显著优点是它可使用具有少于重量40%的天然脂类内容物的微生物，而无需使用质壁分离物(Plasmolyser)。
EP-A-O，242，135(AD2有限公司)公开了一种生产被封装材料的方法，该方法是使液态的材料与具有少于重量40%的微生物脂类内容物的生长的微生物接触。可封装材料必须能扩散到微生物细胞里去而不引起其总体溶胞作用，微生物的处理是在没有作为可封装材料之溶剂或微分散剂的有机脂类扩散物质和质壁分离物存在下进行的。需封装材料通过微生物细胞壁扩散而被微生物(一般是酵母)吸收，并被动地保留在微生物内。提到的多种可封装材料包括用作调味剂或香料的本质上是油类的物质、无色染料、维生素、月桂醚硫酸酯之类的去污剂、食品着色剂及农药等。
EP-A-0，414，282(QuestInternational)公开了含有芳香剂的漂白组合物，包括洗衣去污剂、洗衣漂白剂和盘碟洗涤或去污产品，而EP-A-0，414，283(QuestInternational)公开了含有芳香剂的纤维软化组合物。这两种例子中芳香剂均是按US-A-4，001，480或EA-A-0，242，135中描述的常规方法封装在微生物细胞中的。
使用微生物细胞封装所产生的问题是它们可能具有不易被接受的气味，也可能具有不悦目的颜色，还可能因此减少顾客对含有它们的封装产品或组合物的要求。
业已发现用过氧(Peroxygen)漂白剂处理至少可部分除去微生物细胞的臭味，至少使在部分细胞保持完整，从而使之适用于封装目的。
因此本发明一方面是提供一种减少微生物细胞臭味的方法，其特征是以过氧漂白剂处理所说的细胞。
本发明另一方面是提供一种封装材料的方法，其中微生物细胞与所说的材料接触，这种材料为液体形式的，它透过微生物细胞壁被吸收并保留在微生物细胞内。其特征在于也用过氧漂白剂处理微生物细胞。
尽管细菌和藻类可能适合，但优选的微生物是真菌，特别是丝状真菌(例如黑曲霉)，尤其是酵母。可用于本发明的酵母的例子有脂肪酵母属如L.lipofer和斯达氏脂肪酵母、丝孢酵母如茁芽丝孢酵母和皮装丝孢酵母、假丝酵母如C.curvata和产朊假丝酵母、Kluvveromycesfragilis和酿酒酵母。通常全部使用生长的微生物细胞，即那些从培养基中收获的细胞。这些细胞必须是未受损伤的，也就是说没有发生任何明显的胞溶作用的，优选的是平均直径为5～20μm的大的细胞。在封装前或封装过程中不发生胞溶作用也是所希望的。
通常微生物要经选择，在需要使用时，它们能解体或发生有效地分裂或容许其内含物扩散，以便使被封装液体在应用中于合适的时候释放出来。
按照本发明，微生物细胞用过氧漂白剂处理，过氧精漂白剂的例子有过酸(包括所谓的“低活性”的过酸，例如过-硫酸、间-氯过苯甲酸、双过间苯二酸、单过苯二甲酸和它们的衍生物如单过硫酸钾(“oxone”)或单过苯二甲酸(“H48”)之类的盐。那些当溶于水时释放过氧化氢的化合物也在考虑之列，尤其是那些商业上可获得的;这一类物质包括如过硼酸盐、特别是过硼酸钠之类的盐，如过碳酸盐之类的加合物。不过，现在优选的过氧物漂白剂是过氧化氢(H2O2)。
尽管申请人不希望被任何理论所束缚，但据信过氧漂白剂可攻击微生物体内的胺中心。一般说来，以过氧漂白剂处理应在达到显著减少或者完全除去微生物特有的气味和/或颜色，而又不会引起任何明显的溶胞作用或裂解细胞壁的(这将削弱微生物作为封装材料和作用)条件下完成。用过氧清漂白剂的水溶液处理微生物，过氧漂白剂浓度一般为0.01-10%(W/V)，较好为0.02-5%(W/V)，且最好是0.1-2%(W/V)。相对于微生物的重量来说，过氧漂白剂的重量一般是0.02-100%，较好是0.04-50%，最好是0.1-20%。过氧漂白剂的溶液在去离子水中制备。
含有过氧漂白剂的处理液最好是碱性的，一般含有碱-通常是碱金属或碱土金属的氢氧化物或碳酸盐，优选的是氢氧化钠，碱的浓度一般在0-2.0M，较好为0.01-1.0M，最好为0.05-0.5M。也可在高pH值简单地缓冲该溶液。
业已证明，含有过氧漂白剂的处理液中含有硅酸钠时是有利的，尤其是在浓度为20-60g/l时，更好的是在浓度为30-50g/l时。硅酸钠是一种有用的助滤剂、是一种碱性来源，可用作消泡剂，还可控制分解过氧漂白剂的重金属。当然，其它硅酸盐，例如，其它碱金属硅酸盐，也可与硅酸钠同时使用或代替硅酸钠。用作助滤剂，如可以是硅藻土或赛力特硅藻土，螯合剂，如磷酸盐，乙二氨四乙酸(EDTA)和三聚磷酸钠(STP)。
一般在每升含过氧漂白剂溶液中微生物的使用量可达到250g，较好是50-150g。通过将微生物细胞悬浮在处理液中并轻轻搅动悬浮液即可方便地处理之。处理过程中的合适时间和温度可由简单试验测定。总的说来，已经发现足够的悬浮搅拌时间是5分钟到4小时。较好是30分钟到2小时，更好是1小时;温度可以是0°-100℃，较好是10°～50℃，通常是在室温下。然后用任何方便的方法(如离心法)分离处理过的微生物，并在使用之前用冷冻干燥等方法干燥之。
尽管用过氧漂白剂处理微生物细胞的主要目的是减少或消除微生物的气味，但处理过的微生物在下面的叙述中也可被称作“漂白的”微生物。已发现在减轻气味的同时，通常都伴有微生物细胞材料的颜色的减轻。
处理过的微生物可以用来以任何现有技术中已知原理的方法封装各种各样可封装的材料，例如使用US-A-4，001，480，EP-B-0，085，805，特别是EP-A-0，242，135(这些文献中的教导一并列为参考文献)中描述的方法。
在封装条件下，被封装材料应是液态的。在封装条件下本身不是液态的材料可以使用其在合适溶剂或分散剂中形成的溶液或微分散液。所说的溶剂或分散剂通常应为不与可出现在微生物中的脂类互溶的溶剂。合适的溶剂包括C1-C4醇，例如甲醇、乙醇或异丙醇。可在封装处理完毕后蒸发除去溶剂。在水存在下完成封装过程也是可能的，有时还是优选的。
尽管较好在封装之前用过氧漂白剂处理微生物，但从理论上说在封装期间甚至封装步骤之后进行这种处理也是可以的。例如，倘若被封装材料与漂白剂能共存，则封装可在含有过氧漂白剂水溶液和被封装材料两者的体系中进行。
本发明的方法特别适于封装用在清洗组合物中的漂白活化剂，例如用于特殊或一般用途的洗衣去污剂组合物、漂白组合物、盘碟洗涤组合物和硬表面或其它清洁产品中。
这些漂白活化剂一般易于吸潮，导致水解或过早予水解，它们的产物易于破坏清洁组合物中的其它成分。合适的漂白活化剂公开在US-A4，179，390号(Spadinietal)，4，412，934号(Chungetal)和4，915，854号(Mao等)中。
下列实施例用来举例说明本发明。
实施例1(a)酵母处理将100g面包酵母(Saccharomycescerevisiae)悬浮在含有40g硅酸钠的1升0.2M过氧化钠的水溶液中。加入过氧化氢直至其浓度达到1%(W/V)。将所得悬浮液在室温下轻轻搅拌1小时，然后经离心除去酵母并冷冻干燥之。
(b)封装将按上述描述处理方法所获得的漂白的酵母1份(重量)悬浮在3份水中，并于60℃下搅拌1小时。加入0.6份待封装的乙酰基三乙基柠檬酸酯;并将悬浮液在45℃下搅拌6小时。离心移去酵母细胞并冷干。所得到的酵母包装的乙酰基三乙基柠檬酸酯适于作为漂白活化剂用于去污剂配方中。
实施例2用上面实施例1(a)中描述的方法制备几种漂白酵母微胶囊样品，但在酵母浓度、碱性、有无硅酸钠的存在和过氧化氢浓度等方面有所差异。估价样品的酵母气味和过氧化氢处理中的浮沫生成量。结果总给于下表中(其中样品5代表按实施例1(a)所述方法制得的样品)。
表1样品酵母浓度碱性硅酸钠 H2O2酵母气味浮沫生成(g/l)(M)(+/-)(%)(1-5)(1-5)1250--10152100--11531002+101141001+11151000.2+11261000.05+135注气味1＝最好，即很少或无气味5＝最坏，即几乎接近起始材料的气味浮沫生成1＝最好，即很少浮沫生成5＝最坏，即过多的浮沫生成对于用作封装目的很适用的酵母细胞来说，其细胞膜必须完整。显微镜下显示只有样品5和6是这样，样品5较样品6好，表现出较低的气味和较少的浮沫生成。
实施例3将已按实施例1(b)所述方法制成了微胶囊的含有液体漂白活化剂乙酰基三乙基柠檬酸酯的漂白酵母微胶囊混入标准的清洁剂组合物中，并且在强迫的贮藏条件下(32℃和80%湿度)贮藏于密封盒中。为了比较，制备一种类似的组合物，这种组合物含有封装在按现有技术(EP-A-O，242，135)制备的未漂白之酵母微胶囊中的液体漂白活化剂。制备另一颗粒状的比较组合物，其中含常规活化剂四乙酰基乙烯基二胺(TAED)，而不是被封装的液体漂白活化剂。这些比较组合物在上述特定的强迫贮藏条件下贮藏在密封盒中。
一定时间后，组合物被制成试样，分析试样以测定有多少漂白漂白活化剂(可能是乙酰基三乙基柠檬酸酯)被保留(以原含量的百分率表示)。具有地说，通过溶解样品，分析过酸和与预期100%活性的结果相比较。结果如下表所示。
表2时间未漂白的漂白的TAED(周)%保留%保留%保留01001001002817698567(29)678274061漂白的胶囊5周的结果异常，并被认为是由于产品扩散较差。特别是，使用这样的强迫贮藏条件时，常遇到的问题是结块，它使产品溶解困难。总的来说，可认为漂白的胶囊在保存漂白活化剂上的作用可与常规的未漂白的胶囊的作用差不多。
将会看到，以上虽已单纯借助实施例描述了本发明，但还可在本发明的范围内改变某些细节。
权利要求
1.一种减少微生物细胞臭味的方法，其特征在于用过氧漂白剂处理所说的细胞。
2.根据权利要求1的方法，其中在含浓度为大约0.01-10%(W/V)的过氧漂白剂含水介质中处理所说的细胞。
3.根据权利要求1的方法，其中在碱性条件下用过氧漂白剂处理所说的细胞。
4.根据权利要求3的方法，其中用过氧漂白剂处理所说的细胞是在浓度高达大约2M的氢氧化钠存在下进行的。
5.根据权利要求1的方法，其中用过氧漂白剂处理所说的细胞是在硅酸钠存在下进行的。
6.根据权利要求1的方法，其中在每升含过氧漂白剂的处理介质中约处理50至250g微生物细胞。
7.根据权利要求1的方法，其中过氧漂白剂的用量约占微生物细胞重量的0.02至100%。
8.根据权利要求1的方法，其中的过氧漂白剂是过氧化氢。
9.根据权利要求1的方法，其中的微生物细胞是酵母细胞。
10.根据权利要求9的方法，其中的酵母选自酿酒酵母、Kluvveromyces fragilis和辛朊假丝酵母。
11.一种封装某材料的方法，其中微生物细胞与所说的材料接触，这种材料为液态的，它通过微生物细胞壁被吸收并保留在微生物细胞内，其特征在于微生物细胞也用过氧漂白剂处理。
12.根据权利要求11的方法，其中被封装的材料包括适用于洗衣清洁剂组合物的漂白活化剂。
13.根据权利要求12的方法，其中细胞在与被封装材料接触之前先用过氧漂白剂处理。
14.根据权利要求12的方法，其中细胞按权利要求2-10中任一项所定义的方法用过氧漂白剂处理。
15.微生物细胞，其特征在于它的基本上是完整的并已经过了氧漂白剂处理。
16.一种封装在微生物细胞内的液体，其特征在于酵母细胞也已用过氧漂白剂处理过。
全文摘要
用过氧漂白剂(如过氧化氢)处理，以使适用于封装液体(如用于洗衣去污剂组合物的液体漂白活化剂)的酵母或其它微生物除臭。
文档编号C12R1/865GK1074481SQ9211489
公开日1993年7月21日 申请日期1992年12月12日 优先权日1991年12月13日
发明者F·E·哈迪, A·D·威利, S·夏拉 申请人:普罗格特-甘布尔公司