一种红曲苦荞麦功能性食品的制备方法及其应用_2

文档序号:9384862阅读:来源:国知局
所述三级种子罐种子培养工艺为:按接种量为1-20%将二级种子罐菌种接种于种子 罐培养基中,在温度20-43°C,搅拌转速为50-160转/分,通气量为0. 2-1. 8:1的条件下,培 养18-50h,制成三级种子罐菌种;所述接种量为二级种子罐菌种与三级种子罐的种子罐培 养基的体积比;所述通气量为每分钟通入气体的体积与种子罐培养基体积比; 本发明另一方面提供了以红曲功能性食品为原料,经过后续加工生产其他功能性食品 的方法。这些方法包括红曲苦荞麦功能性食品粉碎后可以直接加工成袋装粉剂,或者加工 成胶囊,片剂;也可作为其他食品辅料生产具有辅助降血糖降血脂的饼干、面包、冲剂、酸 奶、挂面、饮料等等;或者作为原料生产具有辅助降低血糖调节血脂的黄酒、酸奶、酱油、酱、 醋。
[0017] 本发明另一方面提供一种从红曲苦荞麦功能性食品为原料生产降血糖降血脂药 物的方法,该方法包括以本发明所述的红曲苦荞麦功能性食品为原料,以乙醇作为提取液 进行提取的方法。
[0018] 进一步的改进,所述方法包括如下步骤: a) 将红曲霉苦荞麦功能性食品粉碎,与酒精混合,加热回流提取2-3次; b) 酒精提取液合并真空浓缩至干; c) 浓缩残渣用红外干燥至恒重,粉碎得到含有黄酮、洛伐他汀和红曲色素的红曲苦荞 麦药品原料; d) 红曲苦荞麦药品原料可以加工成片剂剂和胶囊,该片剂和胶囊具有显著的降低血糖 和降低血脂功效。
[0019] 优选的所述的生产降血糖降血脂药物的方法为 a) 红曲霉苦荞麦功能性食品粉碎,与60-100%酒精按1:10-40的比例混合,60-90°C保 温4-6小时;过滤,残渣再与60-100%酒精按1:10-40的比例混合,60-90°C保温4-6小时, 重复2-3次。
[0020] 优选地,所述的粉碎度为20-100目;红曲霉苦荞麦功能性食品与酒精混合比例是 特指功能性食品重量和酒精体积比;60-100%酒精特指体积比浓度; b) 酒精提取液合并在温度20-50°C,真空浓缩至干; c) 上述浓缩物红外烘干至恒重,粉碎得到含有黄酮、洛伐他汀和红曲色素原料药品,该 药品含有黄酮10-30%,洛伐他汀2-8%,红曲色素1. 5-6%;可以作为生产降血糖降血脂的原 料药物; 优选地黄酮、洛伐他汀和红曲色素的含量为质量比。
[0021] d)利用上述原料药物可以生产降血糖降血脂的药物组合包括胶囊、片剂。含有这 些原料药物组合的片剂或胶囊具有降低血糖和血脂功效。
[0022] 为了进一步阐述本发明的技术方案所涉及的材料及工艺,给出了以下实施例,但 是这些实施例不以任何形式限制本发明的范围。
【具体实施方式】
[0023] 本发明黄酮含量采用亚硝酸钠一硝酸铝测定方法(邓斌,蒋刚彪,陈六平.分光 光度法测定食品包装纸用紫甘薯总黄酮的含量[J].包装工程,2008, 29(1) :27~29)。精 密量取0. 3mg/mL芦丁标准溶液0. 2、0. 4、0. 6、0. 8、1.0mL,置于25mL刻度试管中,分别加 入无水乙醇定容至1mL。先加入质量分数5%的亚硝酸钠溶液0. 5mL,室温放置6min,其 次加入质量分数10%的硝酸铝0. 5mL,室温放置6min,最后加入质量分数4%的氢氧化钠 溶液4.0mL,室温放置10min,同时用乙醇代替芦丁标准溶液重复上述操作为空白,在506 nm处测定吸光度,绘制浓度-吸光度关系曲线。用样品溶液代替芦丁标准溶液重复上述操 作,在506nm处测定样品吸光度,记做&,根据标准曲线计算样品中总黄酮含量。
[0024] 本发明洛伐他汀含量采用双波长紫外分光光度法测定:精确称取样品lg用 30mL75%酒精重复提取3次,提取液合并。6000rpm离心10分钟,上清液以0. 5mL/分钟流速 流过直径9mm的层析柱,层析柱填料为10克100°C活化30分钟的中性氧化铝,过虑液分别 在246nm和254nm处测定吸光度A246和A254,根据吸光度差」Asaniple=A246-A254和浓度为lmg/ mL标准洛伐他汀的吸光度差」Astandy=A246-A254,根据下列公式计算洛伐他汀含量代
这里n:为稀释倍数。
[0025] 本发明红曲色素含量法测定按照《中华人民共和国国家标准食品添加剂红曲米 GB4926-85》方法测定。
[0026] 本发明的动物实验评价产品的降血糖功能:体重为21-33g雄性昆明小白鼠,适 应性喂养5天后,禁食24小时后,按200mg/kg剂量腹腔注射四氧嘧啶造模型,5天后禁食 5小时,测血糖,血糖值> 13mmol/L为实验性糖尿病模型鼠。实验模型鼠按禁食3-5小时 的血糖水平随机分组,分为一个模型对照组、阳性对照组和试验组,每组小鼠10只。试验组 为任意一种实施例的样品。其中实施例试验剂量为26mL/Kg体重,阳性对照组给药二甲双 胍,剂量为l〇〇mg/Kg体重。对照组给以等量的蒸馏水,连续给药28天后,禁食5小时,眼眶 静脉取血,分析血清中血糖值的变化。实验结果进行统计学分析,与模型对照组相比,试验 鼠血糖值低于模型对照组血糖值30%以上,统计学分析误差〈0. 05,认为具有显著降血糖作 用。
[0027] 本发明的动物实验评价产品的降血脂功能:体重为150g左右的SD大鼠,适应性 喂养5天后,给药高脂饲料(正常饲料:猪油:白糖=5:3:1)饲喂2个月。利用南京建成 生物工程公司试剂盒测定,磷酸甘油三酯、总胆固醇含量。磷酸甘油三酯>3mmo1 /L,总胆固 醇>10mmol/L的大鼠被认为是高血脂症大鼠。高血脂症大鼠分为一个模型对照组、阳性 对照组和试验组,每组小鼠8只。试验组为任意一种实施例的样品。其中实施例试验剂量 为26mL/Kg体重,阳性对照组给药洛伐他汀,剂量为lOOmg/Kg体重。对照组给以等量的蒸 馏水,连续给药28天后,禁食5小时,眼眶静脉取血,分析血清中甘油三酯,总胆固醇值的变 化。实验结果进行统计学分析,与模型对照组相比,试验组甘油三酯和总胆固醇分别低于模 型对照组的甘油三酯和总胆固醇值的30%以上,统计学分析误差〈0. 05,认为具有显著降血 脂作用。
[0028] 实施例1一种红曲苦荞麦功能性食品制备方法 所述红曲苦荞麦功能性食品外观为粉红色至紫红色,具有特有的发酵香味,含有黄酮 2-10mg/g,洛伐他汀0. 5-5mg/g,红曲色素0. 4-6mg/g;所述红曲苦荞麦功能性食品是以苦 荞麦为主要原料,红曲霉为菌株,经试管扩大培养、液体摇瓶培养、种子罐种子培养和固体 发酵培养制备得到的。
[0029] 实施例2 一种红曲苦荞麦功能性食品制备方法,所述方法包括如下步骤: a. 试管扩大培养:将红曲霉菌种接种于马铃薯葡萄糖培养基中,在温度为20°C下培 养I0d,进行rc保藏,制得红曲霉试管斜面孢子; b. 液体摇瓶培养:将一环红曲霉试管斜面孢子接种于装有20mL液体摇瓶培养基的 250mL三角瓶中,三角瓶在转速为50转/分,温度20°C的条件下,摇床培养18h,制成液体摇 瓶菌种;其中每1L培养基中含有的原料各成分的重量为:麸皮5g,葡萄糖5g,蛋白胨lg,酵 母浸膏2g,硫酸镁0.Olg,磷酸氢二钾0.Olg,培养基经过100°C,60min灭菌。
[0030] C.一级种子罐种子培养:按接种量为1%将液体摇瓶菌种接种于种子罐培养基中, 在温度为20°C,搅拌转速为50转/分,通气量为0. 2:1的条件下,培养18h,制成一级种子 罐菌种;其中接种量为液体摇瓶菌种与种子罐培养基的体积比;通气量为每分钟通入气体 的体积与种子罐培养基体积比;所使用的培养基同于液体摇瓶培养的培养基; d.固体发酵培养:按接种量为1%将种子罐菌种和固体发酵培养基混合均匀,摊在固 态发酵床上,厚度6cm,宽度60cm,长度不限。在温度20°C,通气量为0.05 :1固态发酵培养 室中培养3d,得到红曲霉苦荞麦固态发酵物;所述接种量为一级种子罐菌种液体体积与发 酵培养基的重量比;所述通气量为每分钟通入气体的体积与固体发酵培养的重量比。其中 固体培养基每l〇〇Kg苦荞麦主要原料添加的辅料成分和水的重量为:蛋白胨5Kg,葡萄糖 4Kg,酵母浸膏2Kg,硫酸镁0. 01Kg,磷酸氢二钾0. 01Kg,玉米蛋白0.lKg,水50L即料水比为 0. 5: 1,培养基经过100°C,120min灭菌。该固态发酵物经过红外干燥至恒重,得到红曲霉苦 荞麦功能性食品。该功能性食品外观为粉红色,具有特有的发酵香味,含有黄酮2mg/g,洛伐 他汀0. 5mg/g,红曲色素0. 4mg/g;该食品具有显著的降低血糖和血脂功效,用于生产治疗 或辅助治疗糖尿病和高血脂症的功能性食品或药品。
[0031] 实施例3 一种红曲苦荞麦功能性食品制备方法,所述方法包括如下步骤: a. 试管扩大培养:将红曲霉菌种接种于马铃薯葡萄糖培养基中,在温度为20°C下培 养5d,进行4°C保藏,制得红曲霉试管斜面孢子; b. 液体摇瓶培养:将一环红曲霉试管斜面孢子接种于装有20mL液体摇瓶培养基的 250mL三角瓶中,三角瓶在转速为80转/分,温度28°C的条件下,摇床培养40h,制成液体摇 瓶菌种;其中每1L培养基中含有的原料各成分的重量为麸皮5g,葡萄糖8g,蛋白胨2g,酵 母浸膏3. 5g,硫酸镁0. 05g,磷酸氢二钾0. 05g,培养基经过110°C,50min灭菌; c. 一级种子罐种子培养:按接种量为1%将液体摇瓶菌种接种于种子罐培养基中,在 温度为28°C,搅拌转速为80转/分,通气量为0. 7:1的条件下,培养28h,制成一级种子 罐菌种;其中接种量为液体摇瓶菌种与种子罐培养基的体积比;通气量为每分钟通入气体 的体积与种子罐培养基体积比;所使用的培养基同于液体摇瓶培养的培养基,培养基经过 110°C,50min灭菌; d. 二级种子罐种子培养:按接种量为1%将一级种子罐菌种接种于二级种子罐培养基 中,在温度为28°C,搅拌转速为80转/分,通气量为0. 7:1的条件下,培养28h,制成一级种 子罐菌种;其中接种量为液体摇瓶菌种与种子罐培养基的体积比;通气量为每分钟通入气 体的体积与种子罐培养基体积比;所使用的培养基同于液体摇瓶培养的培养基,培养基经 过 110°C,50min灭菌; e. 固体发酵培养:按接种量为1%将种子罐菌种和固体发酵培养基混合均匀,摊在固态 发酵床上,厚度9cm,宽度90cm,长度不限。在温度31 °C,通气量为0. 3:1固态发酵培养室中 培养9d,得到红曲霉苦荞麦固态发酵物;所述接种量为一级种子罐菌种液体体积与发酵培 养基的重量比;所述通气量为每分钟通入气体的体积与固体发酵培养的重量比。其中固体 培养基每l〇〇Kg苦荞麦主要原料添加的辅料成分和水的重量为:蛋白胨5Kg,葡萄糖17Kg, 酵母浸膏6Kg,硫酸镁0.lKg,磷酸氢二钾0.lKg,玉米蛋白3Kg;水100L即料水比为1:1,培 养基经过110°C,110min灭菌。该固态发酵物经过冷冻干燥至恒重,得到红曲霉苦荞麦功 能性食品。该功能性食品外观为粉红色,具有特有的发酵香味,含有黄酮6mg/g,洛伐他汀 2. 5mg/g,红曲色素3. 2mg/g;该食品具有显著的降低血糖和血脂功效,用于生产治疗或辅 助治疗糖尿病和高血脂症的功能性食品或药品。
[0032]实施例4 一种红曲苦荞麦功能性食品制备方法,所述方法包括如下步骤: a. 试管扩大培养:将红曲霉菌种接种于马铃薯葡萄糖培养基中,在温度为20°C下培 养3d,进行8°C保藏,制得红曲霉试管斜面孢子; b. 液体摇瓶培养:将一环红曲霉试管斜面孢子接种于装有20mL液体摇瓶培养基的 250mL三角瓶中,三角瓶在转速为120转/分,温度36°C的条件下,摇床培养60h,制成液体 摇瓶菌种;其中每1L培养
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