降低代谢炎症和促进食欲调节以及减少代谢综合征中的风险因素的用途。这可 以用于预防和调节与MetS相关的病症，例如肥胖、葡萄糖耐受不良、糖尿病或心血管疾病， 以及患有与MetS有关的认知功能病损的受试者中的病症。本发明的益生菌还可以用于灌肠 制剂或栓剂(具有或不具有益生元底物）中。
[0070] 本发明还涉及上文定义的产品用于减少代谢综合征中的风险因素、改善葡萄糖代 谢、促进体重调节和降低与MetS相关的认知功能减退的风险的用途。
[0071] 最后，本发明涉及琥珀酸酯/盐或产生琥珀酸酯/盐的细菌菌株用于改善葡萄糖代 谢、促进体重调节和减少代谢综合征中的风险因素的用途。
[0072] 产品可以用于人、马以及狗和猫。
[0073] 以下实施例旨在举例说明，但不以任何方式、形状或形式明确地或含蓄地限制本 发明。 实施例
[0074] 实施例1
[0075] 基于大麦粒的产品中的益生元碳水化合物有益地影响健康受试者中的代谢风险 标志物、食欲调节激素和可感知的饱腹感
[0076] 研究内涵和研究设计概述
[0077]本研究的目的是评价固有的难消化的碳水化合物(在基于大麦粒的产品中存在的 DF和RS)对与MetS相关的风险标志物的作用。在交叉设计中，在连续3天中，向具有正常的体 质指数(平均值土 SD = 23.6 ± 2.3kg/m2)的39名健康的中年受试者(年龄为64.5 ± 5.6岁）提 供基于大麦粒的面包或白小麦面包(WB，参照产品）。在接下来的一天(第4天），提供标准化 早餐，并在空腹下以及在餐后时间（O-ISOmin)中重复地测定生理学测试标志物。本研究分 成3个子研究(研究A-C)。研究A中的生理学测试标志物包括血糖、血清胰岛素、呼气氢(H 2) 排出（结肠发酵的标志物）的测定，以及记录受试者的食欲感觉。在队列的亚组中重复收集 静脉血液用于进一步的评价(参见下文）。此外，在开始研究之前和在各干预期后收集排泄 物样品用于表征肠道微生物群(研究A)。
[0078]根据上述队列，测定了来自随机选择的20名受试者(64.1 ± 5.9岁，23.5 ± 2.2kg/ m2)的另外的生理学测试标志物(研究B)。除了血糖、血清胰岛素和呼气H2以外，还测量了食 欲调节激素(PYY，GLP-I)和血浆短链脂肪酸(SCFA)。
[0079] 在研究C中，基于在前一晚摄入基于大麦粒的产品（BB)后在过夜跨度上在标准化 早餐下葡萄糖调节改善的程度来选择来自研究A中队列的20名受试者。其中包含BB对葡萄 糖调节具有最明显作用的10名受试者和BB对葡萄糖调节具有最不明显作用的10名受试者。 研究C在下文中单独地报告。
[0080] 材料和方法
[0081] 测试受试者
[0082] 纳入标准为50-70岁，BMI正常至轻微超重（BMI 18-28kg/m2)，空腹血糖值< 6. lmmol/L，不吸烟者，整体健康以及不具有已知的代谢病症或食物过敏。不具有任何抗炎 作用的抗高血压药剂和非处方止痛药是接受的。研究得到了Regional Ethical Review Board in LuncUSweden(参考2010/457)的批准。
[0083]研究A:6名男性和33名女性的健康志愿者(年龄为64.5±5.6岁，并具有正常的体 质指数(平均值土 SD = 23.6 ± 2.3kg/m2))参与本研究。
[0084]研究B:3名男性和17名女性的20名健康志愿者(年龄为64.1±5.9岁，并具有正常 的体质指数(平均值土 SD 23.5 ± 2.2kg/m2))随机选自研究A中的队列。
[0085] 测试膳食
[0086] 测试膳食为基于大麦粒的面包(BB)和白小麦面包(WB;参照膳食）。间隔2周，在连 续3天中食用各测试产品。分别计算测试和参照产品的量，以提供100g潜在可用淀粉/天，这 根据Holm等人进行分析[2](表1)。在前2天，将每日摄入量分成3等份以在约0800、1400和 2100食用。在第3天，将每日摄入量的一半（50g可利用的淀粉)在0800-和1400膳食之间等 分，而另一半在2100食用。
[0087] 表1.在研究A-C中，大麦粒面包(BB)和白小麦面包参照(WB)的组成。
[0089] 1按差计算；总淀粉减去RS(3_5)。
[0090] 2本申请中提及的DF不包含物理学上不可获得的或难消化的淀粉，即，RS。
[0091] 标准化早餐
[0092]在分别使用BB或WB干预3天后，食用标准化早餐，并且该早餐由122.9g WB(相应于 50g可利用的碳水化合物)和2.5d 1饮用水组成。
[0093]测试产品的食谱和制备
[0094]白小麦面包(TO，参照膳食和标准化早餐）：在家庭烘焙机中，根据标准化的程序烘 焙^(1'#&1家庭面包模式1^.573102;菜单选择，程序2[白面包，100(^，快(时间2 :32)])。由 54(^白小麦面粉（反1111§:8&1*1161^13，1§1'113,3￥6(1611)、 36(^水、4.如干酵母、4.批恥(：1 (不含碘)制作面包。在冷却后，将面包切片，并分成几份包裹在铝箱中，将其置于塑料袋中 并储存在冰箱中（_20°C)。在食用之前的一天，指导测试人员在环境温度下将面包解冻，仍 包裹在铝箱和塑料袋中。
[0095]基于大麦粒的面包(BB):将总计595g大麦粒在520g水中煮沸12min，然后在环境室 温下冷却30min。当蒸煮时所有的水被吸收至大麦粒中。向大麦粒中加入105g小麦粉、6g干 酵母、5g盐和300g水。将生面团揉捏4min(Electrolux AKM 3000，N23N25)，并在碗中醒发 (pr〇〇f)30min，然后在烤盘中再次进行醒发(35min)。使用铝箱覆盖烤盘，并在家庭烤箱中 在225°C下烘焙，其中保留一盘水以最大化存在的蒸汽，直至面包的内部温度达到96°C。在 烘焙后，在无烤盘的情况下将面包在环境室温下在湿润的毛巾中冷却。在冷却后，将面包置 于塑料袋中并在夜间置于室温下。在将面包切片并分成几份包裹于铝箱中之后的一天，将 其放置于塑料袋中并储存在冰箱中（_20°C)。
[0096]测试产品中总淀粉、RS和DF的分析
[0097]关于总淀粉[3]，RS[4]和DF[5]分析测试产品。在分析总淀粉和DF之前，将面包空 气干燥并磨碎。在作为被吃掉的产品中分析测试产品中的RS。由总淀粉减去RS来计算可利 用的淀粉(表1)。
[0098] 实验程序
[0099] 本研究为随机化(测试产品的顺序)交叉研究，这意味着每位受试者参与2个为期3 天的干预，分别食用BB或WB，间隔为大约2周。在食用测试或参照产品的那些天中鼓励受试 者标准化他们的惯常膳食和进餐模式，并避免酒精、过多的体力运动或富含DF的食品。此 外，在之前的2周和整个研究过程中，他们不应食用抗生素或益生菌。在分别食用大麦粒面 包或WB的最后测试晚餐后，使受试者空腹，直至第二天早晨提供标准化早餐。受试者在0730 到达实验部门，并将静脉套管(BD Venf lon，Becton Dickinson)插入肘前静脉中以用于血 液取样。收集空腹血液测试，并且在食用早餐之前记录饱腹感和呼气H2。在~0800和在 13min内食用早餐。此外，使用IOOmm视觉模拟评分法(VAS)获得早餐前和早餐后食欲的量 度。在重复血液取样的2.5h过程中，告知受试者保持恒定和低程度的体力活动。
[0100] 取样以及生理学变量和呼出气中的呼气氢的分析
[0101]取得手指针刺的毛细血管血液样品用于测定血糖（：Beni〇€ue?B -glucose， HemoCue AB， Angelhalm ,Sweden)。收集静脉血液样品用于测定血清（s)(s-胰岛素）和 血浆(P)(P-SCFA，p-GLP-1和ρ-ΡΥΥ)中的生理学测试标志物。通过离心分离血清和血浆，并 立即储存在冰箱(_40°C)中，直至分析。在血液取样之前，使用抑制混合物制备旨在用于分 析血浆GLP-I和PYY的血液收集管，所述抑制混合物由DPPIV(10yl/ml血液）(Millipore，St Charles，USA)和Tra.sylo.1? l〇〇〇〇KIE/ml抑肽酶（50yl/ml血液）（Bayer Healthcare AG， Leverkusen ,Germany)组成。将包含抑制混合物的管保持在冰上直至使用，但最多保持6天。 使用基于酶联免疫吸附测定的商业试剂盒用于测定S-胰岛素（Mercodia，Uppsala， Sweden)、PYY(3-36 和 1-36)和 GLP-I (活性 7-36) (Alpco Diagnostics，Salem USA)。使用GC 法[6]测定SCFA(乙酸酯/盐，丙酸酯/盐，丁酸酯/盐）。使用Gastro + (Bedfont EC60Gastrolyzer ,Rochester ,England)测量呼出气中的呼气氢(?)作为结肠发酵活动的 指示剂。在进行膳食干预之前和在第4天（即，在分别食用测试和参照产品3天之后），收集排 泄物样品。指导受试者收集来自在第4天发生的首次排便的排泄物，并将样品立即冷冻并在 24h内将样品递交至实验部门用于在-80°C下持续储存直至分析。用于测定生理学参数的时 间表不于表2中。
[0102]表2.用于测定测试标志物的时间表。
[0103]
[0105] 计算和统计学方法
[0106] 使用GraphPad Prism(第5版，GraphPad Software，San Diegao，CA，USA)用于图表 绘制。使用梯形模型，针对各受试者和测试膳食来计算递增的血糖和血清胰岛素曲线下面 积(iAUC，浓度作为时间的函数）。测定葡萄糖和胰岛素的递增峰值(iPeak)浓度作为从基线 的个体最大餐后增量。使用ANOVA( -般线性模型）在MINITAB统计软件（发布的第16版； Mini tab，Mini tab Inc，State College，PA)中评估在不同的测试膳食之后测试变量的显著 性差异。在不均勾分布残差的情况(使用Anderson-Dar ling测试，并且当P〈0.05时认为是不 均匀分布)下，在ANOVA之前对数据执行Box Cox转换。使用Pearson相关性在MINITAB统计软 件(发布的第14版;Mini tab，Mini tab Inc，State Col lege，PA)中执行参数之间的相关性分 析。P〈0.05的值认为是显著的。数据表示为平均值土 SEM，P〈0.05的值认为是显著的。实施例 1:研究A: η = 39，研究B: η = 20，研究C: η = 20。
[0107] 结果
[0108] 研究 Α(η = 39)
[0109] 血糖和血清胰岛素
[0110] 关于餐后峰值浓度（iPeak，Ρ〈0 · 01)和iAUC 0-150min(P〈0 · 01)，与参照WB相比，食 用BB 3天显著改善针对标准化早餐的血糖反应(表3)。此外，BB导致显著降低的胰岛素 iAUC (0-150min，P〈0 · 001)和胰岛素 iPeak(P〈0 · 001，图 1，表3)。
[0111] 表3.在分别食用基于大麦粒的面包(BB)或白小麦面包(WB) 3天后，针对标准化早 餐的血糖和血清胰岛素反应。
[0112]
[0113] * ;P〈0 · 05，** ;P〈0 · 01，*** ;P〈0 · 001 (WB与BB之间的差异）。
[0114] 呼气H2排出
[0115] 与参照WB相比，食用BB显著增加呼气H2，表明在BB之后肠道发酵活动增加（P〈 0.001，表4)〇
[0116] 表4.在分别食用基于大麦粒的面包(BB)或白小麦面包(WB)3天后，在空腹和标准 化早餐后的呼气出排出和食欲感觉。
[0118] * ;P〈0 · 05，*** ;P〈0 · 001 (WB与BB之间的差异）。
[0119] 食欲感觉
[0120]与食用WB 3天相比，食用BB 3天导致在下一天空腹下增加的饱腹感和降低的饥饿 感(P〈0.05,表4)。
[0121 ]研究A:概述和结论:摄入基于大麦粒的产品导致在摄入最后一份后的11-14小时 上改善的餐后葡萄糖调节。此外，基于大麦粒的产品增加相同时间跨度上的饱腹感并降低 饥饿感。并行地，呼气氢排出增加，表明结肠发酵活动增加。结果表明在基于大麦粒的产品 之后所获得