酯/盐与[ 13C4]琥珀酸比较）。所监测的离子的 m/z比值如下：117(乙酸），131(丙酸），145(丁酸），146(异戊酸），159(异戊酸和戊酸），173 (己酸），187(庚酸），201(辛酸），261(乳酸），287(延胡索酸），289(琥珀酸），121([ 2H2]-和[1 -13C]乙酸酯/盐），136([2H 5]丙酸酯/盐），146(^-1?]异丁酸酯/盐），149([13C4] 丁酸酯 / 盐），160([1-13C]异戊酸酯 / 盐），175([1，2-13(：2]己酸酯/盐），264([13(：]乳酸酯/盐)和293 ([%4]琥珀酸）。
[0161]关于人的排泄物微生物模式的结果
[0162] 16S rRNA基因条形码扩增子的焦磷酸测序导致755963条高品质序列，平均每个样 品12599条序列（范围为7018-21116)，其中在每次处理后在反应者(R)和非反应者(NR)中生 成的序列的量相似。厚壁菌门（Firmicutes)(~70%)为各研究组中最丰富的门，然后为拟 杆菌门（Bacteroidetes)(~20% )。然而，在反应者或非反应者之间或者通过任何处理，未 观察到厚壁菌门和拟杆菌门的相对丰度的显著差异。然而，在反应者组中，在补充大麦粒面 包的膳食后，记录到拟杆菌门的丰度的非显著增加（图8A)。
[0163] 拟杆菌门包括普雷沃氏菌属和拟杆菌属(Bactero ides )，并且有趣地，在普雷沃氏 菌属的反应者组中发现显著较高的相对丰度（图8B，双向AN0VA，P〈0.01)。此外，在反应者组 中在大麦粒面包食用后，普雷沃氏菌属的水平增加，这在非反应者中未观察到。
[0164] 此外，在反应者组中，在补充大麦粒面包的膳食后，测量到排泄物的琥珀酸酯/盐 水平显著升高（表6)。已知琥珀酸酯/盐是来自普雷沃氏菌属物种的发酵活动的主要代谢 物。
[0165] 表6.排泄物的有机酸浓度
[0166]
[0167] 小鼠中的接种实验
[0168] 使用IO8CFU多形拟杆菌菌株VPI-5482 (在YCFA培养基中的过夜培养物）或肠道普 雷沃氏菌菌株DSM18205(在PYG培养基中的过夜培养物）的单独的或一起的单次灌胃法，接 种10周至12周龄的无菌Swiss Webster雄性小鼠。两种菌株均从人排泄物分离。培养两种菌 株，并转移至15ml Hungate管中的小鼠设备中。在隔离笼系统中将单一定植的和双重定植 的小鼠饲养14天。在处死小鼠之前，执行口服葡萄糖耐受测试(OGTT)。在OGTT之前，使所有 小鼠空腹4h。使用qPCR测定（其使用物种特异性引物)验证定植密度。还将年龄匹配的定菌 雄性Swiss Webster对照组小鼠自由饲养相同的高压蒸汽处理的饲料膳食。
[0169] 使小鼠空腹4小时，然后口服灌胃给予60%D-葡萄糖（3g/kg体重）。在0、30、60、90 和120分钟时从尾静脉抽取血液，并使用HemoCue?血糖仪测量血糖水平。在〇, 15和30 分钟时，从尾静脉收集额外的血液，用于使用胰岛素 ELISA测定(Crystal Chem，Inc.)分析 血清胰岛素的水平。
[0170] 结果
[0171] 为了研究普雷沃氏菌属是否影响葡萄糖耐受的改善，我们使用人排泄物来源的普 雷沃氏菌属菌株(肠道普雷沃氏菌)单一定植定菌小鼠，并将这些小鼠的葡萄糖耐受与单一 定植多形拟杆菌和双重定植两种菌株的小鼠的葡萄糖耐受进行比较。与定植肠道普雷沃氏 菌的小鼠相比，定植多形拟杆菌导致葡萄糖耐受受损（图9A-B)。此外，与单一定植多形拟杆 菌的小鼠相比，在葡萄糖口服灌胃之后，在15和30min时，单一定植肠道普雷沃氏菌的小鼠 中的血清胰岛素水平更低（图9C)。重要地，当多形拟杆菌定植的小鼠用肠道普雷沃氏菌共 定植时，它们展现出改善的葡萄糖耐受。这些数据表明尽管多形拟杆菌损害葡萄糖耐受，但 是肠道普雷沃氏菌阻止这种损害。
[0172] 实施例3
[0173] 产品的实例
[0174] A)包含一份酸奶的烧杯，其中大麦DF和/或RS和普雷沃氏菌属（IO7CFU或更多）密 封地封在盖中并通过膜分开。
[0175] B)包含一份饮用酸奶的瓶，其中大麦DF、RS和普雷沃氏菌属（IO9CFU)密封地封在 随附的饮用吸管中。
[0176] C) -份大麦DF、RS和普雷沃氏菌属，其密封地封在单一剂量的包装中。
[0177] D)包含一份水果饮料的瓶，其中大麦DF和/或RS和普雷沃氏菌属（IO9CFU)密封地 封在随附的饮用吸管中。
[0178] E)包含一份水果饮料的瓶，其中大麦DF和RS及普雷沃氏菌属（IO9CFU)密封地封在 盖中并通过膜分开。
[0179] F)包含在具有或不具有益生元碳水化合物成分的基质中包封的普雷沃氏菌属的 乳化食物产品。
[0180] A-F) -份大麦DF和RS及普雷沃氏菌属(7g不溶性大麦DF、3.3g可溶性大麦DF、8.5g RS和IO9CFU普雷沃氏菌属）。
[0181] 参考文献
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【主权项】
1. 一种用于治疗肥胖、代谢综合征、2型糖尿病、心血管疾病、痴呆、阿尔茨海默病和炎 性肠病的产品，其包含来自物种普雷沃氏菌科的至少一种分离的细菌菌株，其中所述菌株 选自肠道普雷沃氏菌（Prevotellacopri)，Prevote1lastercorea，Prevotella ]^81：；[(3〇1&，栖瘤胃普雷沃氏菌(？16￥(^611&1'11111；[11；[(3〇1&)，布氏普雷沃氏菌(？16￥(^611& Bryantii)25A和狄氏普雷沃氏菌(Prevotelladistasonis)。2. 根据权利要求1所述的用于治疗肥胖、代谢综合征、2型糖尿病、心血管疾病、痴呆、阿 尔茨海默病和炎性肠病的产品，其中所述产品包含肠道普雷沃氏菌。3. 根据权利要求1-2所述的用于治疗肥胖、代谢综合征、2型糖尿病、心血管疾病、痴呆、 阿尔茨海默病和炎性肠病的产品，其中所述产品包含至少一种类型的膳食纤维。4. 根据权利要求3所述的用于治疗肥胖、代谢综合征、2型糖尿病、心血管疾病、痴呆、阿 尔茨海默病和炎性肠病的产品，其中所述产品包含至少一种抗性淀粉。5. 根据之前任意一项权利要求所述的用于治疗肥胖、代谢综合征、2型糖尿病、心血管 疾病、痴呆、阿尔茨海默病和炎性肠病的产品，其中所述细菌菌株是经遗传修饰的。6. 根据权利要求1-5所述的用于治疗肥胖、代谢综合征、2型糖尿病、心血管疾病、痴呆、 阿尔茨海默病和炎性肠病的产品，其中所述膳食纤维和抗性淀粉与任何形式的谷物有关， 例如大麦_、小麦_、黑麦_、燕麦-纤维、葡聚糖。7. 根据权利要求6所述的用于治疗肥胖、代谢综合征、2型糖尿病、心血管疾病、痴呆、阿 尔茨海默病和炎性肠病的产品，其中所述膳食纤维来自大麦。8. 根据权利要求1-7所述的用于治疗肥胖、代谢综合征、2型糖尿病、心血管疾病、痴呆、 阿尔茨海默病和炎性肠病的产品，其中所述抗性淀粉为任何形式，例如大麦粒固有的淀粉、 回生淀粉、植物地包封的淀粉、天然非糊化淀粉、环糊精或化学改性的淀粉。9. 根据权利要求1-8所述的用于治疗肥胖、代谢综合征、2型糖尿病、心血管疾病、痴呆、 阿尔茨海默病和炎性肠病的产品，其包含其它的细菌菌株，其中所述菌株为产生琥珀酸酯/ 盐的菌株。10. 根据权利要求1-9所述的用于治疗肥胖、代谢综合征、2型糖尿病、心血管疾病、痴 呆、阿尔茨海默病和炎性肠病的产品，其包含琥珀酸酯/盐。11. 根据权利要求1-10所述的用于治疗肥胖、代谢综合征、2型糖尿病、心血管疾病、痴 呆、阿尔茨海默病和炎性肠病的产品，其中来自物种普雷沃氏菌科的所述细菌菌株被包封 或冻干。12. -种包含来自物种普雷沃氏菌科的一种分离的细菌菌株作为唯一的细菌菌株的产 品，其中所述菌株选自肠道普雷沃氏菌，Prevotella stercorea,Prevotella histicola, 栖瘤胃普雷沃氏菌，布氏普雷沃氏菌25A或狄氏普雷沃氏菌。13. -种产品，其包含来自物种普雷沃氏菌科的一种分离的细菌菌株以及至少一种类 型的膳食纤维。
【专利摘要】本发明涉及一种用于治疗肥胖、代谢综合征、2型糖尿病、心血管疾病、痴呆、阿尔茨海默病和炎性肠病的产品，其包含来自物种普雷沃氏菌科的至少一种分离的细菌菌株，其中所述菌株选自肠道普雷沃氏菌，Prevotella？stercorea,Prevotella？histicola,栖瘤胃普雷沃氏菌,布氏普雷沃氏菌25A和狄氏普雷沃氏菌。所述产品可以为食物产品。
【IPC分类】A23L33/21, A61K35/74, A23L33/00, C12R1/01
【公开号】CN105451576
【申请号】CN201480043869
【发明人】I·比约克, A·尼尔松, F·贝克赫德, P·科瓦切瓦-达特查里
【申请人】普罗普瑞弗股份公司
【公开日】2016年3月30日
【申请日】2014年5月27日
【公告号】EP3016527A1, US20160113972, WO2014196913A1