用布氏乳杆菌、黑曲霉和植物乳杆菌组合固态发酵木薯渣的方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于混菌固态发酵饲料制备技术领域，具体是用布氏乳杆菌、黑曲霉和植 物乳杆菌组合固态发酵木馨渣的方法。
【背景技术】
[0002] 木馨渣是木馨加工淀粉和酒精后的副产物，其干物质主要成分为淀粉、纤维素及 少量的蛋白质，碳水化合物含量高，矿物质、微量元素和氨基酸含量丰富，而且价格低廉，是 一种有开发潜力的新型饲料资源，但木馨渣在实际应用过程中存在水分含量高(新鲜木馨 渣水分含量为80~90%)不易胆存，蛋白质含量低及适口性差等问题，成为制约木馨渣发展 的瓶颈，导致木馨渣一直没有得到很好的利用，目前，木馨渣主要是用作生产酒精、饲料、栽 培平茹等方面，使用量有限，绝大部分的木馨渣被丢弃，不仅造成资源浪费，而且对环境造 成严重的污染。应用微生物混合固态发酵木馨渣，通过微生物和相关化学物质发生一系列 的复杂的生物化学反应，不仅可W降解木馨渣中的纤维含量，改善其适口性，还可W全面的 提高木馨渣的营养价值，从而解决上述问题。应用微生物发酵木馨渣，菌株的选择非常关 键，许多研究表明，混合菌种发酵木馨渣比单一菌种效果好，目前菌种的选择由单一菌种向 混合菌种方向发展。目前研究的微生物品种及搭配非常有限，布氏乳杆菌、黑曲霉和植物乳 杆菌=菌组合处理木馨渣的研究基本未见报道。本发明为探索最佳木馨渣发酵条件，改善 木馨渣品质，提高其适口性，为木馨渣在饲料行业中的更广泛的应用打下基础。
【发明内容】
[0003] 本发明的目的是提供用布氏乳杆菌、黑曲霉和植物乳杆菌组合固态发酵木馨渣的 方法。
[0004] 本发明应用的微生物菌种来源：黑曲霉（Aspergillus niger);植物乳杆菌 (Xactobacillus plantarum);布氏乳杆菌(XactobasiIlus buchneri)均购买于中国工业 微生物菌种保藏管理中屯、。
[0005] 本发明应用的尿素和红糖来源:尿素和红糖均为市购。
[0006] 本发明应用的培养基:MRS的液体培养基用于植物乳杆菌、布氏乳杆菌活化和菌液 培养;MRS固体培养基用于植物乳杆菌和布氏乳杆菌涂板计数;M邸液体培养基用于黑曲霉 的活化和菌液培养;M邸固体培养基用于黑曲霉涂板计数；
[0007] 试验菌种的活化及扩培：安飯管冻干菌种^活化^按5%添加量接种到相应的液 体培养基中，黑曲霉的培养条件为溫度30°C，150rpm摇床培养，植物乳杆菌和布氏乳杆菌的 培养条件为溫度37°C，静态培养。
[000引接种液计数:采用涂板对各菌种接种液进行计数。
[0009] 用布氏乳杆菌、黑曲霉和植物乳杆菌组合固态发酵木馨渣的方法，包括如下步骤：
[0010] (1)将新鲜木馨渣在65°C下烘干后作为发酵原料；
[0011] 间向经过步骤(1)处理过的木馨渣中按木馨渣干物质的质量百分比添加 I %的尿素 或者添加1%尿素+0.6%红糖，添加尿素作为氮源，添加红糖用于调节木馨渣的可溶性糖浓 度；
[0012] 间将布氏乳杆菌、黑曲霉和植物乳杆菌的菌液Wl: 1:1的体积比混合，W木馨渣干 物质5%的量进行接种，使每克干木馨渣中布氏乳杆菌、黑曲霉和植物乳杆菌的活菌含量分 别达到 1.3 X l〇5cfu/g，9.7 X l〇2cfu/g，2.2 X l〇5cfu/g;
[0013] (4)将步骤间添加了布氏乳杆菌、黑曲霉和植物乳杆菌混合制剂的木馨渣，用生理 盐水调制含水量为60~65%，混合均匀，装入聚乙締薄膜袋中，用真空累抽出袋内的空气至 真空状态，密封，置于室溫下胆藏；
[0014] 间将步骤(4)包装好的木馨渣在室溫下固态发酵10天，得到木馨渣发酵产物。
[0015] 除另有说明外，本发明所述的百分比均为质量百分比，各组分含量百分数之和为 100%。
[0016] 本发明的有益效果：
[0017] 1.经产品检测，采用布氏乳杆菌+黑曲霉+植物乳杆菌+尿素固态发酵木馨渣后，得 到木馨渣发酵产物中性洗涂纤维NDF含量由24.11 %降低到19.48%，酸性洗涂纤维ADF含量 由20.00%降低到15.77%;采用布氏乳杆菌+黑曲霉+植物乳杆菌+尿素+红糖固态发酵木馨 渣后，得到木馨渣发酵产物中性洗涂纤维NDF含量由24.11 %降低到19.42%，酸性洗涂纤维 (ADF)含量由20.00 %降低到15.66 %。通过在木馨渣固体发酵过程中添加布氏乳杆菌、黑曲 霉和植物乳杆菌能够有效改善木馨渣品质。
[0018] 2.制备方法简单，便于操作，原料丰富易得。
【具体实施方式】
[0019] 下面结合实施例对本发明的技术方案作进一步说明。
[0020] W下实施例仅为本发明示意性的【具体实施方式】，并非用W限定本发明的范围。任 何本领域的技术人员，在不脱离本发明的构思和原则的前提下所作的等同变化、修改与结 合，均应属于本发明保护范围。
[0021] 实施例1
[0022] 本发明所述的用布氏乳杆菌、黑曲霉和植物乳杆菌组合固态发酵木馨渣的方法的 一个实例，操作步骤如下：
[0023] (1)将新鲜木馨渣在65°C下烘干后作为发酵原料；
[0024] 间向经过步骤(1)处理过的木馨渣中按木馨渣干物质的质量百分比添加1 %的尿素 作为氮源；
[0025] 间将布氏乳杆菌、黑曲霉和植物乳杆菌的菌液Wl: 1:1的体积比混合，W木馨渣干 物质5%的量进行接种，使每克干木馨渣中布氏乳杆菌、黑曲霉和植物乳杆菌的活菌含量分 别达到 1.3 X l〇5cfu/g，9.7 X l〇2cfu/g，2.2 X l〇5cfu/g;
[0026] (4)将步骤间添加了布氏乳杆菌、黑曲霉和植物乳杆菌混合制剂的木馨渣，用生理 盐水调制含水量为60~65%，混合均匀，装入聚乙締薄膜袋中，用真空累抽出袋内的空气至 真空状态，密封，置于室溫下胆藏；
[0027] 间将步骤(4)包装好的木馨渣在室溫下固态发酵10天，得到木馨渣发酵产物。
[002引应用ANKOM 2000纤维测定仪测定木馨渣发酵产物中的DNF和ADF含量，产品检测结 果为：
[0029] 采用布氏乳杆菌+黑曲霉+植物乳杆菌+尿素固态发酵木馨渣后，得到木馨渣发酵 产物中性洗涂纤维NDF含量由24.11 %降低到19.48 %，酸性洗涂纤维ADF含量由20.00 %降 低到15.77%。
[0030] 实施例2
[0031] 本发明所述的用布氏乳杆菌、黑曲霉和植物乳杆菌组合固态发酵木馨渣的方法的 另一个实例，操作步骤如下：
[0032] W新鲜木馨渣在65°C下烘干后作为发酵原料；
[0033] 间向经过步骤(1)处理过的木馨渣中按木馨渣干物质的质量百分比添加1 %的尿素 +0.6 %红糖，添加尿素作为氮源，添加红糖用于调节木馨渣的可溶性糖浓度。
[0034] 间将布氏乳杆菌、黑曲霉和植物乳杆菌的菌液Wl: 1:1的体积比混合，W木馨渣干 物质5%的量进行接种，使每克干木馨渣中布氏乳杆菌、黑曲霉和植物乳杆菌的活菌含量分 别达到 1.3 X l〇5cfu/g，9.7 X l〇2cfu/g，2.2 X l〇5cfu/g。
[0035] (4)将步骤间添加了布氏乳杆菌、黑曲霉和植物乳杆菌混合制剂的木馨渣，用生理 盐水调制含水量为60~65%，混合均匀，装入聚乙締薄膜袋中，用真空累抽出袋内的空气至 真空状态，密封，置于室溫下胆藏；
[0036] 间将步骤(4)包装好的木馨渣在室溫下固态发酵10天，得到木馨渣发酵产物。
[0037] 应用ANKOM 2000纤维测定仪测定木馨渣发酵产物中的DNF和ADF含量；应用 F0SS8400凯氏定氮仪测定木馨渣发酵产物中的粗蛋白质含量，产品检测结果为：
[0038] 采用布氏乳杆菌+黑曲霉+植物乳杆菌+尿素+红糖固态发酵木馨渣后，得到木馨渣 发酵产物中性洗涂纤维NDF含量由24.11 %降低到19.42 %，酸性洗涂纤维ADF含量由 20.00% 降低到15.66%。
[0039] 不同微生物添加剂对木馨渣营养成分的影响见表1。
[0040] 表1不同微生物添加剂对木馨渣营养成分的影响(风干基础）
[0042]注：同列无字母或肩标相同字母表示差异不显著(P〉0.05)，不同小写字母表示差 异显著(P〈〇. 05)。
【主权项】
1.用布氏乳杆菌、黑曲霉和植物乳杆菌组合固态发酵木薯渣的方法，其特征在于，操作 步骤如下： ⑴将新鲜木薯渣在65°c下烘干后作为发酵原料； ⑵向经过步骤⑴处理过的木薯渣中按木薯渣干物质的质量百分比添加1%的尿素或者 添加1 %尿素+0.6 %红糖，添加尿素作为氮源，添加红糖用于调节木薯渣的可溶性糖浓度； (3)将布氏乳杆菌、黑曲霉和植物乳杆菌的菌液以1:1:1的体积比混合，以木薯渣干物质 5%的量进行接种，使每克干木薯渣中布氏乳杆菌、黑曲霉和植物乳杆菌的活菌含量分别达 至lj 1 · 3 X 105cfu/g，9 · 7 X 102cfu/g，2 · 2 X 105cfu/g; ⑷将步骤⑶添加了布氏乳杆菌、黑曲霉和植物乳杆菌混合制剂的木薯渣，用生理盐水 调制含水量为60~65%，混合均匀，装入聚乙烯薄膜袋中，用真空栗抽出袋内的空气至真空 状态，密封，置于室温下贮藏； (5)将步骤⑷包装好的木薯渣在室温下固态发酵10天，得到木薯渣发酵产物。
【专利摘要】用布氏乳杆菌、黑曲霉和植物乳杆菌组合固态发酵木薯渣的方法，以木薯渣为发酵原料，将布氏乳杆菌、黑曲霉和植物乳杆菌的菌液以1:1:1的体积比混合，以木薯渣干物质5％的量进行接种，按木薯渣干物质的质量百分比添加0.6％的红糖调节木薯渣的可溶性糖浓度，按木薯渣干物质的质量百分比添加1％的尿素作为氮源，用生理盐水调制含水量为60～65％，混合均匀，装入聚乙烯薄膜袋中，用真空泵抽出袋内的空气至真空状态，密封，置于室温下贮藏发酵10天。经过发酵处理后，能显著降低木薯渣的中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维含量，能有效改善木薯渣品质。
【IPC分类】A23K10/12
【公开号】CN105494918
【申请号】CN201510953727
【发明人】唐庆凤, 邹彩霞, 彭开屏, 韦升菊, 梁辛, 杨炳壮, 梁贤威, 黄锋, 李丽莉, 林波, 杨承剑, 彭丽娟
【申请人】广西壮族自治区水牛研究所
【公开日】2016年4月20日
【申请日】2015年12月18日