专利名称：治疗剂的制作方法
技术领域：
本发明涉及具有神经生长因子产生增强作用的药物、试剂、食品、饮料或饲料。
由于NGF是前脑基底部的大细胞型胆碱能神经细胞的神经营养因子，因而与阿耳茨海默型痴呆症之间的关连受到了瞩目〔Pharmasia，Vol.22，No.2，147～151(1986)、老年精神医学，Vol.3，No.6，751～758(1986)〕。
阿耳茨海默型痴呆症是指伴有发育障碍、病灶症状、下肢强直痉挛、癫痫样发作等临床病状，可见老年斑、阿耳茨海默原纤维变化等病理学表象，是老年性痴呆的一种疾病类型。在近年来的高龄化社会中可见增加的趋势，得到了社会的极大关心，但是尚未找到这种症状的改善方法、治疗方法。
确认在阿耳茨海默型痴呆患者的脑中，以迈内特基底核为中心的前脑基底部显著变性，胆碱乙酰基转移酶(CAT)活性显著降低〔Annu.Rev.Neurosci.，Vol.3，77(1980)〕。1985年使用大鼠脑的研究表明NGF是脑的这一部位的神经营养因子〔EMBO J.，Vol.4，1389(1985)〕，NGF与该疾病的关连受到了注目。另外，亨廷顿氏舞蹈病患者的脑的纹状体中，GABA能神经细胞的脱落以及胆碱能神经细胞的脱落显著，表明NGF也作用于纹状体的内在性胆碱能神经细胞〔Science，Vol.234，1341(1986)〕，指出该疾病可能与NGF有关。有报道指出用能够成为各种神经疾病模型的大鼠等动物研究了NGF的效果，大鼠神经细胞显著变性以前如果在脑内给予NGF，则可以抑制变性，防止CAT活性降低〔J.Neurosci.，Vol.6，2155(1986)、BrainRes.，Vol.293，305(1985)、Science，Vol.235，214(1986)、Proc.Natl.Acad.Sci.USA，Vol.83，9231(1986)〕。已经证明在末梢的交感神经支配组织和脑中生物合成NGF，该NGF的生物合成中末梢组织或脑组织的间质细胞即成纤维细胞或星形神经胶质细胞分别发挥重要作用〔J.Bol.Chem.，Vol.259，1259(1984)、Biochem.Biophys.Res.Commun.，Vol.136，57(1986)〕。另外，已经明确该成纤维细胞或星形神经胶质细胞产生的NGF的抗原性、分子量、等电点、生物活性与以前进行了充分研究的颚下腺NGF相同，而且通过在成纤维细胞(L-M细胞)以及星形神经胶质细胞的培养液中加入各种神经传导物质的实验，发现儿茶酚胺类(去甲肾上腺素、肾上腺素、多巴胺)显示出NGF产生增强作用〔J.Biol.Chem.，Vol.201，6039(1986)〕。
期待NGF在NGF作为神经营养因子发挥作用的部位发生变性的神经疾病中能够用作抑制变性的治疗药。另外，如脑血管障碍、脑肿瘤、脑栓塞(脑尖)、头部外伤变性疾病、麻醉药物中毒等，脑神经细胞一旦发生变性，则一生也不能恢复，结果不仅智力低下、记忆缺陷，还会引起感情障碍、行动异常等各种障碍，但是神经纤维具有可塑性，如果受到损伤，则由其附近的健康正常纤维发芽，形成新的突触代替受伤的突触，因此这时可以期待能够使用NGF作为促进神经机能修复再生的治疗剂。
但是，将NGF应用于各种神经疾病的治疗时，NGF必须到达需要NGF的神经细胞附近，中枢神经疾病的场合也必须将NGF送到脑细胞的患处，而通过血管系统不能将NGF送入脑内。这是由于脑内的血管内皮细胞相互紧密结合(称为血脑屏障)，水、气体、脂溶性物质以外的物质由血液向脑组织移动受到限制，高分子物质——蛋白质(也包括NGF)完全不能通过血脑屏障。即使拥有现在的技术，采用外科手法将该NGF直接给予脑内危险也过大。
另一方面，也进行了不直接给予NGF，而是增强NGF产生的物质的开发。作为显示NGF产生增强作用的物质，除上述儿茶酚胺类以外，还已知咖啡酸、在4位引入了取代基的儿茶酚类，例如作为代表性化合物的4-甲基儿茶酚(特公平第5-29207号公报)，此外特开平第2-104568号公报、日本专利第2719042号说明书、特开平第8-27086号公报以及特公平第7-110812号公报中也公开了具有NGF产生增强活性的化合物。但是，其中多数是显示急性毒性等具有强毒性的物质、出现毒性的浓度与有效浓度非常接近的物质或者产生神经兴奋作用等对神经系统非常严重的副作用的物质(例如上述儿茶酚胺类作为代表性的肾上腺素激动剂是已知的)，而且存在显示NGF产生增强活性的有效浓度范围狭窄，给药量难以控制等多种问题。例如，特公平第7-110812号公报中公开的物质在NGF产生增强活性与化合物浓度之间显示双峰性的关系，作为药物使用时难以控制给药量。另外，特开平第2-104568号公报、日本专利第2719042号说明书、特开平8-27086号公报中公开的化合物确认有NGF产生增强活性的浓度分别仅为一个点，显示活性的有效浓度范围不明确。如上所述存在各种问题，显示NGF产生增强作用的物质尚未达到实用化。
概括地说，本发明涉及〔1〕必需增强神经生长因子产生的疾病的治疗剂或预防剂，其特征在于，含有选自下述通式(1)表示的化合物及其药理学上允许的盐中的至少1种化合物作为有效成分， 〔式中，R1、R2、R3、R4和R5分别相同或不同，为氢原子、羟基、烷氧基或酰氧基；X用下述通式(2)、下述通式(3)或下述通式(4)表示。 (式中，Z为氢原子或者可以引入特性基团的脂肪族基团、芳香族基团或芳香脂肪族基团，Y为氢原子或羟基，m和n分别为0或1。) (式中，Z’为氢原子或者可以引入特性基团的脂肪族基团、芳香族基团或芳香脂肪族基团，Y’为氢原子或羟基，m和n分别为0或1。) (式中，R6和R7分别相同或不同，为氢原子、糖残基或可以引入特性基团的脂肪族基团、芳香族基团或芳香脂肪族基团。)其中，上述通式(1)中，R1、R4和R5均为氢原子，R2和R3均为羟基，X为上述通式(2)，且该通式(2)中n为1，m为0，Z和Y为氢原子的场合除外。〕〔2〕神经生长因子产生增强剂，其特征在于，含有上述〔1〕中所述的选自通式(1)表示的化合物及其药理学上允许的盐中的至少1种化合物作为有效成分。
〔3〕神经生长因子产生的增强方法，其特征在于，将上述〔1〕中所述的选自通式(1)表示的化合物及其药理学上允许的盐中的至少1种化合物给予动物。
〔4〕神经生长因子产生增强用食品、饮料或饲料，其特征在于，含有上述〔1〕中所述的选自通式(1)表示的化合物及其药理学上允许的盐中的至少1种化合物作为有效成分。
〔5〕上述〔1〕中所述的选自通式(1)表示的化合物及其盐中的至少1种化合物在制备必需增强神经生长因子产生的疾病的治疗剂或预防剂、神经生长因子产生增强剂或者神经生长因子产生增强用食品、饮料或饲料中的用途。
〔6〕从下述式(5)～(12)表示的化合物中选择的化合物。
附图的简单说明
图1是表示化合物(5)的1H-NMR光谱的图。
图2是表示化合物(6)的1H-NMR光谱的图。
图3是表示化合物(7)的1H-NMR光谱的图。
图4是表示化合物(8)的1H-NMR光谱的图。
图5是表示化合物(9)的1H-NMR光谱的图。
图6是表示化合物(10)的1H-NMR光谱的图。
图7是表示化合物(11)的1H-NMR光谱的图。
图8是表示化合物(12)的1H-NMR光谱的图。
图9是表示化合物(27)的1H-NMR光谱的图。
发明的最佳实施方式本发明中作为有效成分使用的化合物是选自上述通式(1)表示的化合物及其盐中的至少1种化合物，只要具有NGF产生增强作用并没有特别的限定。作为所述的盐，优选药理学上允许的盐。另外，如下所述也可以是能够作为前体药物发挥功能的该化合物的衍生物。因此，本发明涉及的有效成分包括上述通式(1)表示的化合物及其盐，只要能够获得本发明所需的效果，也包括上述通式(1)表示的化合物的衍生物及其盐。
另外，本说明书中，“NGF产生增强活性”和“NGF产生增强作用”分别是指增强NGF产生的功能以及引起NGF产生增强，在其含意上并没有特别严密的区别。另外，“增强”包括与本发明涉及的有效成分作用前相比，作用后目的物质的量增加的方式，以及通过使本发明涉及的有效成分作用使之产生目的物质的方式(诱导)。
作为用作有效成分的上述通式(1)表示的化合物的优选实例，例如具有3-苯基-2-丙烯-1-酮骨架的化合物、具有3-苯基丙烷-1-酮骨架的化合物、具有4-苯基-3-丁烯-1-酮骨架的化合物以及具有4-苯基丁烷-1-酮骨架的化合物等。另外本说明书中，具有3-苯基-2-丙烯-1-酮骨架和4-苯基-3-丁烯-1-酮骨架的化合物，例如上述式(5)或式(11)记载的化合物的结构，其双键部位的立体构型是作为反式体表示的，但是本发明中使用的化合物并非特别限定于反式体，只要具有NGF产生增强活性也可以是顺式体。另外，只要具有NGF产生增强活性，其他上述通式(1)表示的化合物的光学异构体、酮-烯醇互变异构体、几何异构体等各种异构体均可以在本发明中使用，而且可以是各种异构体分离产物，也可以是其混合物。
以下对上述通式(1)～(4)的各取代基进行说明。本说明书中，烷氧基可以用RiO-表示。其中，作为该Ri，例如甲基、乙基、正丙基等碳原子数1～30的直链状烷基，异丙基、异丁基、仲丁基、叔丁基、异戊基、新戊基、叔戊基等支链状烷基，乙烯基、烯丙基、反-1-丙烯基、顺-1-丙烯基、顺-8-十五碳烯基、顺-8-顺-11-十五碳二烯基、顺-8-顺-11-顺-14-十五碳三烯基、顺-5-顺-8-顺-11-十五碳三烯基、顺-4-顺-7-顺-10-十九碳三烯基、顺-4-顺-7-顺-10-顺-13-十九碳四烯基、顺-4-顺-7-顺-10-顺-13-顺-16-十九碳五烯基、顺-12-二十一碳烯基、顺-3-顺-6-顺-9-顺-12-顺-15-顺-18-二十一碳六烯基等直链状烯基，异丙烯基、顺-1-甲基-1-丙烯基、反-1-甲基-1-丙烯基、反-1-甲基-1-丙烯基、反-1-乙基-1-丙烯基等支链状烯基，后述的芳香族基团等。从表现出本发明所需效果的观点来看，作为所述烷氧基的优选实例，例如甲氧基、乙氧基、烯丙氧基、苯氧基等。
另外，本说明书中，酰氧基可以用RiiCOO-表示。其中，作为该Rii，可以例举上述作为Ri例举的基团。作为所述酰氧基的优选实例，可以例举乙酰氧基、丙酰氧基、苯甲酰氧基等。
本说明书中，作为脂肪族基团的优选实例，可以例举上述作为Ri例举的基团。
本说明书中，作为芳香族基团的优选实例，例如苯基、萘基、联苯基，以及吡咯基、吡啶基、吲哚基、咪唑基、甲苯基、二甲苯基等。
本说明书中，作为芳香脂肪族基团的优选实例，例如烷基的碳原子数为1～15的苯基烷基(例如苯甲基、苯乙基)、苯乙烯基、肉桂基等。
另外，只要具有NGF产生增强活性，也可以在上述脂肪族基团、芳香族基团、芳香脂肪族基团中引入羟基、巯基、氧代基、硫代基、氨基、硝基、硫酸基、磷酸基、烷氧基、卤素原子、酰氧基、酰硫基(ァシルチォキシ)等特性基团。
而且，在本说明书中，作为糖残基可以例举糖的除去1个羟基的结构式表示的基团。作为该糖优选单糖，此外也可以是2～20残基的单糖构成的低聚糖或者21残基以上的单糖构成的糖链。另外，构成糖的单糖成分没有限定，例如D-葡萄糖、D-果糖、L-鼠李糖、半乳糖、甘露糖，此外还可以例举D-葡萄糖胺、2-脱氧-D-核糖等。另外，构成糖的单糖成分中，对D型、L型等立体结构没有特别的限定。
本发明中使用的化合物可以用上述通式(1)表示，但优选例举表1和表2所示的化合物以及式(26)表示的黄腐酚(xanthohumol)、式(27)表示的Safflomin A。所述表中例举的化合物是上述通式(1)中X为上述通式(2)或(3)的化合物。另外，表1和表2中的R1、R2、R3、R4、R5和X与上述通式(1)对应。另外，将式(N)的化合物称为化合物(N)。例如表1中，式(5)的化合物称为化合物(5)。表1 表2
另外，作为本发明中适于用作有效成分的化合物，例如上述通式(1)中，X为上述通式(4)且其结构中具有黄酮醇(flavonol)骨架的化合物。作为所述化合物，例如上述通式(1)中，R1、R4、R5和R7均表示氢，R2和R3均表示羟基，且R6表示α-L-鼠李糖残基的槲皮甙(Quercitrin)；R1、R4、R5、R6和R7均表示氢，且R2和R3均表示羟基的槲皮黄酮(Quercetin，也称为3，3’，4’，5，7-五羟基黄酮)；R1、R5、R6和R7均表示氢，且R2、R3和R4均表示羟基的杨梅酮(Myricetin，也称为3，3’，4’，5，5’，7-六羟基黄酮)；R1、R5和R7均表示氢，R2、R3和R4均表示羟基，且R6表示α-L-鼠李糖残基的杨梅甙(Myricitrin)。
本发明中使用的化合物可以利用市售的化合物，此外也能够以查尔酮类、苯甲醛、具有羟基作为苯环上的取代基的苯甲醛(例如2，5-二羟基苯甲醛)等苯甲醛类、色满类、桂皮酸、桂皮醛或咖啡酸等作为初始原料按照公知的方法适当合成。另外，作为天然物存在的场合，例如可以从植物(例如明日叶(Angelica Keiskei)、红花、蛇麻花等)等中按照常规方法提取、纯化得到。
特别是上述表1和表2所示的化合物中，化合物(5)、化合物(6)、化合物(7)、化合物(8)、化合物(9)、化合物(10)、化合物(11)、化合物(12)是本发明中新合成的新型化合物。也就是说本发明提供具有NGF产生增强活性的这些新型化合物。这些化合物如上所述均可以按照公知方法合成。
作为化合物(6)、(7)、(8)、(9)的合成方法，没有特别的限定，例如可以采用日本专利第2913706号说明书中记载的公知方法。也就是说，能够通过在氢氧化钡等碱存在下，使将羟基用四氢吡喃氧基保护的羟基苯甲醛与具有甲基酮基的化合物通过克莱森缩合反应进行缩合，使得到的缩合体的四氢吡喃氧基在酸催化剂存在下脱保护得到。另外，进行克莱森缩合反应时，也可以不利用四氢吡喃氧基引入保护基。另外，作为克莱森缩合反应的催化剂，除碱以外，也可以使用氯化氢等酸。
作为化合物(12)的合成方法，没有特别的限定，可以采用在二异丙基氨基化锂存在下，在低温下使甲基酮化合物与醛化合物进行醇醛缩合的方法。而且，通过在化合物(12)的β位的羟基上导入适当的离去基团后，通过碱等使之进行离去反应，可以合成化合物(11)。另外，采用与如上所述经由化合物(12)合成化合物(11)的方法同样的方法，也可以合成化合物(6)、(7)、(8)、(9)。
作为化合物(5)的合成方法没有特别的限定，可以通过将化合物(13)乙酰化合成，例如可以通过使化合物(13)与乙酸酐在碱存在下反应得到。另外，作为这时的乙酰基的供体，也可以是乙酰氯等乙酸的卤化物。
作为化合物(10)的合成方法没有特别的限定，例如可以通过在钯等催化剂存在下，向含有化合物(13)的甲醇等溶剂中添加氢气合成。
作为上述通式(1)表示的化合物的盐，例如碱金属盐、碱土金属盐、与有机碱形成的盐等。作为所述的盐，优选药理学上允许的盐。另外，本发明中使用的药理学上允许的盐是指对于生物实质上无毒，而且具有NGF产生增强活性的化合物的盐。作为该盐，例如与钠、钾、钙、镁、铵或质子化的苄星(N，N’-二苯甲基乙二胺)、胆碱、乙醇胺、二乙醇胺、乙二胺、葡甲胺(N-甲基葡糖胺)、苯乙苄胺(benethamine)(N-苯甲基苯乙胺)、哌嗪或氨丁三醇(2-氨基-2-羟甲基-1，3-丙烷二醇)形成的盐。这些盐可以通过使例如上述通式(1)表示的化合物中X为上述通式(2)或(3)，n为1，m为0，Z或Z’为氢原子，Y或Y’为氢原子的羧酸按照公知方法转变得到。另外，例如上述通式(1)表示的化合物中X为上述通式(4)的场合，也可以通过将该化合物中的酚性羟基按照公知方法转变成盐得到。
而且，本发明中使用的上述通式(1)表示的化合物可以形成酯等在体内容易水解，能够发挥所需效果的衍生物(前体药物)。所述前体药物的制备可以按照公知方法进行。另外，所述衍生物也可以是其盐。
本发明中作为有效成分使用的上述通式(1)表示的化合物及其盐如上所述均具有NGF产生增强活性。该活性例如可以按照下述参考例1所示的方法进行评价。另外，由下述实施例可知，作为有效成分的化合物与公知的具有NGF产生增强活性的化合物相比，具有下述特征1)在低浓度下显示较强的增强活性，2)显示增强活性的浓度区域广，和/或3)毒性低。采用本发明中用作有效成分的化合物，基于其NGF产生增强活性，如下述实施例18说明的那样，能够通过增强NGF产生发挥促进神经突起伸长的效果，此外还能够发挥抑制活性氧、营养不良或物理损伤等引起的神经细胞死亡的效果。因此，认为对于下述必需增强NGF产生的疾病的治疗或预防有用。
本发明中用作有效成分的上述通式(1)表示的化合物是从按照下述参考例1所示的方法进行筛选的结果中发现的化合物，因此作为本发明的一种方式，也提供具有NGF产生增强活性的化合物的筛选方法。
本发明中用作有效成分的化合物及其盐即使将其NGF产生增强活性的有效量给予生物体，确认也没有毒性。例如，口服给药的场合，即使将具有查尔酮骨架的化合物紫铆因〔化合物(13)〕或其药理学上允许的盐中任意一种以1000mg/kg对小鼠单次给药，也确认没有死亡例。另外，即使将具有黄酮醇骨架的化合物杨梅酮或其药理学上允许的盐中任意一种以150mg/kg对小鼠单次给药，也确认没有死亡例。
作为本发明第1种方式的必需增强NGF产生的疾病的治疗剂或预防剂，例如将本发明的上述有效成分与公知的药用载体组合制剂化得到的物质。本发明的方式中，有效成分的盐可以使用药理学上允许的盐。
另外，本说明书中必需增强NGF产生的疾病例如痴呆症、神经障碍、末梢神经痛、脑缺血、糖尿病性神经病等。
本发明的治疗剂或预防剂的制备通常通过将上述有效成分与药理学上允许的液状或固体状载体配合进行，可以根据需要加入溶剂、分散剂、乳化剂、缓冲剂、稳定剂、赋形剂、粘合剂、崩解剂、润滑剂等，制成片剂、颗粒剂、散剂、粉末剂、胶囊剂等固体制剂、溶液剂、悬浊剂、乳剂等液体制剂。另外，也可以制成使用前添加适当载体能够形成液状的干燥品以及其它外用剂。
药用载体可以根据治疗剂或预防剂的给药方式和剂型进行选择。固体组合物构成的口服剂的场合，可以制成片剂、丸剂、胶囊剂、散剂、细粒剂、颗粒剂等，可以利用例如淀粉、乳糖、白糖、甘露醇、羧甲基纤维素、玉米淀粉、无机盐等。另外，配制口服剂时，也可以进一步配合粘结剂、崩解剂、表面活性剂、润滑剂、助流剂、矫味剂、着色剂、香料等。例如制成片剂或丸剂的场合，也可以根据需要用蔗糖、明胶、羟丙基纤维素等糖衣或胃溶性或肠溶性物质的薄膜包衣。制成液体组合物构成的口服剂的场合，可以制成药理学上允许的乳浊剂、溶液剂、悬浊剂、糖浆剂等，可以利用例如蒸馏水、乙醇等作为载体。另外，也可以根据需要添加润湿剂、悬浊剂等助剂、甜味剂、风味剂、防腐剂等。
另一方面，非口服剂的场合，可以按照常规方法使本发明的有效成分溶解或悬浊于作为稀释剂的注射用蒸馏水、生理盐水、葡萄糖水溶液、注射用植物油、芝麻油、花生油、大豆油、玉米油、丙二醇、聚乙二醇等中，根据需要加入杀菌剂、稳定剂、等渗剂、止痛剂等进行配制。另外，也可以制备固体组合物，在使用前溶解于无菌水或无菌的注射用溶剂进行使用。
作为外用剂，包括经皮给药用或经粘膜(口腔内、鼻腔内)给药用的固体至半固体状、半固体或液状的制剂。另外，也包括栓剂等。例如可以制成乳剂、洗剂等乳浊剂、外用酊剂、经粘膜给药用溶液剂等液体制剂、油性软膏、亲水性软膏等软膏剂、膜剂、带剂、巴布剂等经皮给药用或经粘膜给药用的贴剂等。
上述各种制剂可以利用各种公知的药用载体等采用常规方法适当制备。另外，所述制剂中有效成分的含量考虑其给药方式、给药方法等，只要是能够以下述给药量范围给予该有效成分的量，并没有特别的限定。
本发明的治疗剂或预防剂可以根据其剂型采用适当的给药途径给药。给药方法也没有特别的限定，可以内用、外用和注射。注射剂可以在静脉内、肌肉内、皮下、皮内等给药，外用剂例如栓剂可以采用其适当的给药方法给药。
本发明的治疗剂或预防剂的给药量并不是一定的，可以根据其剂型、给药方法、使用目的以及作为该治疗剂或预防剂的给药对象的动物(例如患者)的年龄、体重、症状适当设定。例如人的场合，一般制剂中含有的上述有效成分的给药量优选成人每天0.1μg～200mg/kg。当然给药量根据种种条件变化，因此有时采用低于上述给药量的量就足够，或者有时必须超过上述范围。给药在所需的给药量范围内可以1天给药1次或分数次给药。
NGF作用于神经细胞，进行神经突起的伸长、神经突起细胞的维持。因此，通过本发明中使用的有效成分，进行NGF的产生增强，能够维持和活化机体的神经系统。因此，本发明的治疗剂或预防剂对上述各种疾病的治疗或预防有用。
本发明第2种方式的含有本发明上述有效成分的NGF产生增强剂可以是上述有效成分本身，也可以是含有上述有效成分的组合物。本发明的方式中，有效成分的盐使用药理学上允许的盐。NGF产生增强剂可以将上述有效成分以及能够用于与该有效成分相同用途的其它成分配合，按照上述治疗剂或预防剂的制备方法制成通常使用的试剂形态。所述增强剂中上述有效成分的含量考虑增强剂的给药方法、使用目的等，只要是能够得到本发明所需效果的量即可，没有特别的限定。另外，该增强剂的用量也是只要能够得到本发明所需的效果即可，没有特别的限定。特别是给予生物体使用时，优选以能够在上述治疗剂或预防剂中有效成分的给药量范围内给予有效成分的量使用该增强剂。
本发明的NGF产生增强剂可以用于神经细胞活化(例如提高学习记忆能力等)。另外，使用该增强剂，采用下述的NGF产生增强方法，也可以进行有关神经细胞机理的生物化学研究以及痴呆症、神经障碍药的筛选。
作为本发明的第3种方式，提供将本发明的上述有效成分给予动物的NGF产生增强方法。本发明的方式中，有效成分的盐使用药理学上允许的盐。所述方法可以通过对预测必需要增强NGF产生或者必需增强NGF产生的动物，给予上述有效成分进行，优选作为本发明的NGF产生增强剂给予，通过这种给药可以增强NGF的产生。有效成分的给药方法、给药量等优选以上述NGF产生增强剂为基准。另外，本发明的治疗剂或预防剂、下述的食品、饮料或饲料也可以与NGF增强剂同样使用。
按照所述NGF产生增强方法，例如通过按照该方法使神经细胞活化，进行细胞内外相关因子的动向解析，能够进行与神经细胞机理有关的生物化学研究。另外，采用所述NGF产生增强方法，能够进行痴呆症、神经障碍药等的筛选。
作为本发明的第4种方式，提供NGF增强用食品、饮料或饲料。所述食品、饮料或饲料含有本发明的上述有效成分。本发明的方式中，有效成分的盐优选使用药理学上允许的盐或者具有与其同等的安全性的盐。本发明的食品、饮料或饲料由于其NGF产生增强作用，对于改善、预防对该有效成分显示敏感性的上述需要增强NGF产生的各种疾病的症状非常有用。
另外，本发明的食品、饮料或饲料中所谓“含有”这一用语包括含有、添加、稀释的含义，含有是指食品、饮料或饲料中含有本发明使用的有效成分这种方式，添加是指在食品、饮料或饲料的原料中添加本发明使用的有效成分这种方式，稀释是指在本发明使用的有效成分中添加食品、饮料或饲料的原料这种方式。
本发明的食品、饮料或饲料的制备方法没有特别的限定。可以按照配合、烹调、加工等一般食品、饮料或饲料的制备方法进行，只要可以按照所述食品、饮料或饲料的制备方法进行制备，且得到的食品、饮料或饲料中含有具有NGF产生增强作用的本发明有效成分即可。
本发明的食品或饮料没有特别的限定，例如含有本发明的上述有效成分的谷类加工品(小麦粉加工品、淀粉加工品、预混合加工品、面类、通心粉类、面包类、馅类、荞麦面类、麸子、米粉、粉条、包装饼等)，油脂加工品(可塑性油脂、油炸用油、色拉油、蛋黄酱类、调味汁等)，大豆加工品(豆腐类、豆酱、纳豆等)，肉类加工品(火腿、熏猪肉、压缩火腿、香肠等)，水产品(冷冻碎鱼肉、鱼糕、鱼卷、鱼肉山芋蒸饼、油炸鱼丸子、汆鱼丸子、饭卷、鱼肉火腿、香肠、干狐鲣、鱼子加工品、水产品罐头、煮的鱼贝等)，乳制品(原料乳、乳酪、酸乳、奶油、干酪、炼乳、乳粉、冰淇淋等)，蔬菜·果实加工品(馅类、果酱类、腌菜类、果类饮料、蔬菜饮料、混合饮料等)，糖果类(巧克力、饼干类、甜点类、蛋糕、年糕、米糕类等)，酒精饮料(日本酒、中国酒、葡萄酒、威士忌酒、日本蒸馏酒、伏特加酒、白兰地、杜松子酒、糖蜜酒、啤酒、清凉醇饮料、果酒、利口酒等)，嗜好饮料(绿茶、红茶、乌龙茶、咖啡、清凉饮料、乳酸饮料等)，调料(酱油、辣酱油、醋、料酒等)，罐装、瓶装、袋装食品(牛肉盖饭、小锅什锦饭、红小豆饭、咖哩饭、其它各种烹调好的食品)，半干燥或浓缩食品(肝酱、其它涂抹果酱的食品、荞麦·面条的汁、浓缩的汤类)，干燥食品(速食面类、速食咖哩饭、速溶咖啡、果汁粉、汤粉、速食酱类、烹调好的食品、烹调好的饮料、烹调好的汤等)，冷冻食品(素烧、蒸鸡蛋羹、烤鳗鱼串、汉堡包、烧麦、饺子、各种面条、鸡尾酒等)，固态食品、液态食品(汤等)，香料类等农产·林产加工品、畜牧加工品、水产加工品等。
本发明的食品或饮料中上述有效成分的含量没有特别的限定，可以从其功能和活性表达的观点出发适当选择，例如每100重量份食品优选为0.0001重量份以上，更优选0.001～10重量份，例如每100重量份饮料优选为0.0001重量份以上，更优选0.001～10重量份。另外，本发明的食品或饮料优选其中含有的有效成分例如成人每天最好摄取达到0.01～100mg/kg。
另外，按照本发明提供具有NGF产生增强活性的含有本发明上述有效成分的生物用饲料。另外，作为本发明的另一种方式，提供一种生物的饲养方法，其特征在于将上述有效成分给予生物。而且，作为本发明的另一种方式，提供一种生物饲养用剂，其特征在于含有上述有效成分。
在这些发明中，生物是指例如养殖动物、宠物等，作为养殖动物，例如家畜、试验动物、家禽、鱼类、甲壳类或贝类。作为饲料，例如身体状况的维持和/或改善用饲料。作为生物饲养用剂，例如浸渍用剂、饲料添加剂、饮料用添加剂。
按照这些发明，在适用这些的以上例举的生物中，基于本发明使用的上述有效成分的NGF产生增强活性，可以期待出现与本发明的上述治疗剂或预防剂产生的同样的效果。也就是说，可以期待出现该生物中的痴呆症、神经障碍的治疗或预防效果。
本发明中使用的上述有效成分通常是每1kg对象生物的体重，每天优选给予0.01～2000mg/kg。给药可以通过例如该有效成分添加、添加混合到供给对象生物的人工配合饲料的原料中，或与人工配合饲料的粉末原料混合后，再添加、混合到其它原料中进行。另外，上述有效成分在饲料中的含量没有特别的限定，可以根据目的适当设定，优选0.001～15重量％的比例。
作为人工配合饲料例如以鱼粉、酪蛋白、乌贼粉等动物性原料，大豆粕、小麦粉、淀粉等植物性原料，饲料用酵母等微生物原料，鳕鱼肝油、乌贼肝油等动物性油脂，大豆油、菜籽油等植物性油脂，维生素类、矿物类、氨基酸、抗氧化剂等为原料的人工配合饲料。另外，还例如鱼肉绞碎物等鱼类用饲料。
本发明饲料的制备方法没有特别的限定，另外配合只要按照一般饲料进行即可，只要制得的饲料中含有具有NGF产生增强活性的本发明有效成分即可。
另外，也可以通过将具有NGF产生增强作用的本发明的上述有效成分直接添加到池塘、水槽、贮水池或饲养区域的水、海水等中，浸渍对象生物给药。这种浸渍方法在对象生物的饲料摄取量低下时特别有效。水或海水中具有NGF产生增强作用的本发明有效成分的浓度没有特别的限定，可以根据目的使用，优选0.00001～1重量％的比例。
另外，也可以使对象生物摄取含有具有NGF产生增强作用的本发明的上述有效成分的饮料作为饲养用饮料。该饮料中具有NGF产生增强作用的本发明使用的有效成分的浓度没有特别的限定，可以根据目的使用，优选0.0001～1重量％的比例。
含有具有NGF产生增强作用的本发明上述有效成分的生物饲养用剂，例如浸渍用剂、饲料添加剂、饮料用添加剂可以按照其本身公知的方法制备。该生物饲养用剂中有效成分的含量只要能够得到本发明所需的效果，并没有特别的限定。
本发明可以适用的生物没有限定，作为养殖动物，例如马、牛、猪、羊、山羊、骆驼、驼羊等家畜，小鼠、大鼠、土拨鼠、兔等实验动物，鸡、鸭、火鸡、鸵鸟等家禽，真鲷、石鲷、比目鱼、鲽鱼、师鱼、黄尾笛鲷、黄条师、金枪鱼、大甲参、香鱼、鲑类、河豚、鳗鲡、泥鳅、鲇鱼等鱼类，对虾、黑虎虾、タイシヨウエヒ、青蟹等甲壳类等，鲍、蝾螺、扇贝、牡蛎等贝类，作为宠物，例如狗、猫等，可以广泛适用于陆上、水中动物。
通过使之摄取含有具有NGF产生增强作用的本发明使用的上述有效成分的饲料，或者将对象生物浸渍在含有具有NGF产生增强作用的本发明使用的上述有效成分的液体中，能够良好地维持或改善家畜、实验动物、家禽、鱼类、甲壳类、贝类、宠物等的身体状况。
本发明的食品、饮料或饲料中含有本发明的上述有效成分，只要含有表达其NGF产生增强活性所必要的量，其形态并没有特别的限定。也包括例如片状、颗粒状、胶囊状等形态的能够口服摄取的形态物。
而且，作为本发明的第5种方式，提供本发明的上述有效成分在制备必需要增强NGF产生的疾病的治疗剂或预防剂、NGF产生增强剂或者NGF产生增强用食品、饮料或饲料中的用途。作为所述用途的方式，可以例举上述有效成分在本发明的上述治疗剂或预防剂、NGF产生增强剂或者NGF产生增强用食品、饮料或饲料的制备中的用途的方式。例如，作为上述有效成分在必需要增强NGF产生的疾病的治疗剂或预防剂或者NGF产生增强剂的制备中的用途，可以例举在上述片剂、颗粒剂、散剂、粉末剂、胶囊剂等固体制剂、溶液剂、悬浮剂、乳剂等液体制剂，或使用前添加适当载体能够形成液状的干燥品的制备中的用途。
本发明的有效成分如下述实施例说明的那样，与公知的具有NGF产生增强活性化合物相比，具有以下特征1)在较低浓度下显示较强的增强活性，2)显示增强活性的浓度区域广，和/或3)毒性低。因此，含有该有效成分的本发明治疗剂或预防剂、或者食品、饮料或饲料对必需要增强NGF产生的疾病的治疗或预防有用。另外，含有上述有效成分的NGF产生增强剂对于有关神经细胞机理的生物化学研究以及痴呆症、神经障碍药等的筛选有用。
1HNMRδ6.26(1H，d，J3’，5’2Hz，H-3’)，6.38(1H，dd，J5’，6’9Hz，H-5’)，6.80(1H，d，J5，68Hz，H-5)，7.19(1H，dd，J2，62Hz，H-6)，7.26(1H，d，H-2)，7.64(2H，m，H-α，β)，8.12(1H，d，H-6’)其中，样品溶解在重二甲基亚砜中，以残留二甲基亚砜的化学位移值为2.49ppm进行表示。FAB-MSm/z 273(M+H)+(其中，使用甘油作为基质。)制备例2 3，4，5，2’，4’-五羟基查耳酮(3，4，5，2’，4’-Pentahydroxychalcone)〔化合物(17)〕的合成以2’，4’-二羟基苯乙酮0.5g(2.9mmol)和3，4-二羟基苯甲醛0.4g(2.9mmol)为原料，采用与制备例1相同的方法，得到化合物(17)600mg(收率72％)。NMR波谱、质谱的测定结果如下所示。
1H-NMR6.23(1H，d，J3’，5’2Hz，H-3’)，6.36(1H，dd，J5’，6’9Hz，H-5’)，6.78(2H，s，H-2，6)，7.54(2H，m，H-α，β)，8.07(1H，d，H-6’)其中，样品溶解在重二甲基亚砜中，以残留二甲基亚砜的化学位移值为2.49ppm进行表示。FAB-MSm/z 289(M+H)+(其中，使用甘油作为基质。)制备例3 3，4，2’，5’-四羟基查耳酮(3，4，2’，5’-Tetrahydroxychalcone)〔化合物(18)〕的合成以2’，5’-二羟基苯乙酮(2’，5’-Dihydroxy acetophenone；东京化成制)497mg(3.3mmol)和3，4-二羟基苯甲醛451mg(3.3mmol)为原料，采用与制备例1相同的方法，得到化合物(18)760mg(收率85％)。NMR波谱、质谱的测定结果如下所示。
1H-NMRδ6.79(1H，d，J5，68Hz，H-5)，6.81(1H，d，J3’，4’9Hz，H-3’)，6.00(1H，dd，J4’，6’3Hz，H-4’)，7.17(1H，dd，J2，62Hz，H-6)，7.23(1H，d，H-2)，7，44(1H，d，H-6’)，7.55(1H，d，Jα，β15Hz，H-α)，7.66(1H，d，H-β)其中，样品溶解在重二甲基亚砜中，以残留二甲基亚砜的化学位移值为2.49ppm进行表示。FAB-MSm/z 273(M+H)+(其中，使用甘油作为基质。)制备例4 3，4，3’，4’-四羟基查耳酮(3，4，3’，4’-Tetrahydroxychalcone)〔化合物(19)〕的合成以3’，4’-二羟基苯乙酮(3，4’-Dihydroxy acetophenone；东京化成制)515mg(3.4mmol)和3，4-二羟基苯甲醛468mg(3.4mmol)为原料，采用与制备例1相同的方法，得到化合物(19)272mg(收率30％)。NMR波谱、质谱的测定结果如下所示。
1H-NMRδ6.78(1H，d，J5，68Hz，H-5)，6.83(1H，dd，J5’，6’8Hz，H-5’)，7.11(1H，dd，J2，62Hz，H-6)，7.18(1H，d，H-2)，7.46(1H，d，J2’，6’2Hz，H-2’)，7.48(2H，m，H-α，β)，7.54(1H，dd，H-6’)其中，样品溶解在重二甲基亚砜中，以残留二甲基亚砜的化学位移值为2.49ppm进行表示。FAB-MSm/z 273(M+H)+(其中，使用甘油作为基质。)制备例5 3，4，3’，5’-四羟基查耳酮(3，4，3’，5’-Tetrahydroxychalcone)〔化合物(20)〕的合成以3’，5’-二羟基苯乙酮(3’，5’-Dihydroxy acetophenone；东京化成制)816mg(5.4mmol)和3，4-二羟基苯甲醛741mg(5.4mmol)为原料，采用与制备例1相同的方法，得到化合物(20)605mg(收率41％)。NMR波谱、质谱的测定结果如下所示。
1H-NMRδ6.45(1H，dd，J2’，4’2，J4’，6’2Hz，H-4’)，6.77(1H，d，J5，68Hz，H-5)，6.87(2H，d，H-2’，6’)，7.11(1H，dd，J2，62Hz，H-6)，7.18(1H，d，H-2)，7.35(1H，d，Jα，β16Hz，H-α)，7.51(1H，d，H-β)其中，样品溶解在重二甲基亚砜中，以残留二甲基亚砜的化学位移值为2.49ppm进行表示。FAB-MSm/z 272(M+H)+(其中，使用甘油作为基质。)制备例6 3，4，2’-三羟基查耳酮(3，4，2’-Trihydroxy chalcone)〔化合物(21)〕的合成以2’-羟基苯乙酮(2’-Hydroxy acetophenone；东京化成制)890mg(6.5mmol)和3，4-二羟基苯甲醛902mg(6.5mmol)为原料，采用与制备例1相同的方法，得到化合物(21)715mg(收率43％)。NMR波谱、质谱的测定结果如下所示。
1H-NMRδ6.81(1H，d，J5，68Hz，H-5)，6.98(2H，m，H-3’，5’)，7.22(1H，dd，J2，68Hz，H-6)，7.29(1H，d，H-2)，7.53(1H，J3’，4’8，J4’， 5’8，J4’，6’2Hz，td，H-4’)，7.71(2H，m，H-α，β)，8.21(1H，dd，J5’， 6’8Hz，H-β)其中，样品溶解在重二甲基亚砜中，以二甲基亚砜的化学位移值为2.49ppm进行表示。FAB-MSm/z 257(M+H)+(其中，使用甘油作为基质。)制备例7 3，4，2’，3’，4’-五羟基查耳酮(3，4，2’，3’，4’-Pentahydroxychalcone)〔化合物(22)〕的合成以2’，3’，4’-三羟基苯乙酮(2’，3’，4’-trihydroxyacetophenone；东京化成制)605mg(3.6mmol)和3，4-二羟基苯甲醛500mg(3.6mmol)为原料，采用与制备例1相同的方法，得到化合物(22)622mg(收率60％)。NMR波谱、质谱的测定结果如下所示。
1H-NMRδ6.41(1H，d，J5’，6’9Hz，H-5’)，6.80(1H，d，J5，68Hz，H-5)，7.19(1H，dd，J2，62Hz，H-6)，7.26(1H，d，H-2)，7.64(2H，m，H-α，β)，7.68(1H，d，H-6’)其中，样品溶解在重二甲基亚砜中，以残留二甲基亚砜的化学位移值为2.49ppm进行表示。FAB-MSm/z 289(M+H)+(其中，使用甘油作为基质。)制备例8 黄当归醇(Xanthoangelol)〔化合物(24)〕的制备用食品处理器将明日叶干燥品(阪本汉方堂)480g粉碎，用乙酸乙酯约11提取2次，将得到的有机层部分减压浓缩后，将浓缩物供于硅胶色谱。接着，依次使用氯仿∶甲醇＝100∶1(600mL)、12∶1(600mL)阶段性洗脱吸附物，收集每8mL为1级分。收集所得级分的级分号76以后，减压浓缩，将浓缩物供于硅胶色谱，以己烷∶乙酸乙酯＝1.8∶1为展开溶剂，得到级分号25～50中高浓度含有化合物(24)的级分。由该级分用乙酸乙酯和己烷进行重结晶，得到高纯度的化合物(24)约200mg。NMR波谱的测定结果如下所示。
1H-NMRδ1.58(3H，s，-Me)，1.66(3H，s，-Me)，1.81(3H，s，-Me)，2.08(4H，m)，3.48(2H，d，J 7Hz)，5.04(1H，m)，5.29(1H，m)，6.40(1H，d J5’，6’9Hz，H-5’)，6.86(2H，d，J5，69，J2，39Hz，H-2.6)，7.45(1H，d，Jα，β15Hz，H-α)，7.54(2H，d，H-3，5)，7.71(1H，d，H-6’)，7.82(1H，d，H-β)其中，样品溶解在重氯仿中，以残留氯仿的化学位移值为7.24ppm进行表示。制备例9 α-羟基紫铆因(α-Hydroxybutein)〔化合物(25)〕的合成将后述的实施例1中合成的化合物(5)200mg(0.455mmol)溶解在10mM碳酸钠缓冲液455mL中，室温下使之反应5小时。浓缩反应液，供于使用反相柱的色谱(下面称为反相色谱)。柱使用TSK gelODS-80Ts(直径21.5mm×长30cm；东ソ-社制)。溶剂A(0.1％三氟醋酸水溶液)和溶剂B(将蒸馏水和乙腈按体积比1比1混合得到的溶剂，含有0.1％三氟醋酸)的洗脱比为0分钟至120分钟溶剂B比直线地由0％达到100％，接着20分钟保持溶剂B比为100％。洗脱速度为5ml/分钟，检测在215nm下进行。
收集含有保留时间66.0分钟的峰的级分，浓缩干燥固化，得到化合物(25)5.0mg(收率2.5％)。NMR波谱、质谱的测定结果如下所示。
1H-NMRδ6.59(1H，s，-H-β)，6.72(1H，dd，J3’，5’1.5，J5’，6’8.5Hz，H-5’)，6.85(1H，d，H-3’)，6.87(1H，d，J5，68.5Hz，H-5)，7.20(1H，dd，J2，62.0Hz，H-6)，7.46(1H，d，H-2)，7.54(1H，d，H-6’)其中，样品溶解在重二甲基亚砜中，以残留二甲基亚砜的化学位移值为2.49ppm进行表示。FAB-MSm/z 271(M-H2O+H)+(其中，使用甘油作为基质。)制备例10 黄腐酚(Xanthohumol)的制备以黄腐酚的精制为目的，将来源于蛇麻花的黄腐酚级分(Hopstiner社制)1.9mg供于反相色谱。柱使用TSK gel ODS-80TsQA(直径4.6mm×长25cm；东ソ-社制)。溶剂A(将蒸馏水和乙腈按体积比3∶1混合得到的溶剂，含有0.1％三氟醋酸)和溶剂B(将蒸馏水和乙腈按体积比1∶3混合得到的溶剂，含有0.1％三氟醋酸)的洗脱比为0分钟至20分钟溶剂B比直线地由50％达到100％，接着5分钟保持溶剂B比为100％，最后保持溶剂B比为50％5分钟。洗脱速度为1ml/分钟，检测在215nm下进行。收集含有保留时间12.8分钟的峰的级分，将其浓缩干燥固化，得到约0.3mg的化合物。将得到的化合物用NMR解析，确认化合物为式(26)表示的黄腐酚。 NMR波谱、质谱的测定结果如下所示。
1H-NMRδ1.60(3H，s，-Me)，1.69(3H，s，-Me)，3.12(2H，d，7Hz，H-1”a，b)，3.86(3H，s，-OMe)，5.13(1H，s，H-2”)，6.07(1H，s，H-5’)，6.83(2H，d，J2，39Hz，J5，69Hz，H-2，6)，7.56(2H，d，H-3，5)，7.66(1H，d，Ja，b16Hz)，7.75(1H，d)，10.05(1H，s，OH-4)，10.55(1H，s，OH-4’)，14.63(1H，s，OH-2’)其中，样品溶解在重二甲基亚砜中，以残留二甲基亚砜的化学位移值为2.49ppm进行表示。图9表示得到的黄腐酚的1H-NMR波谱。图9中，横轴表示化学位移值(ppm)，纵轴表示信号强度。FAB-MSm/z 355(M+H)+(其中，使用甘油作为基质。)实施例1 3，4，2’，4’-四乙酰基紫铆因(3，4，2’，4’-Tetraacetylbutein)〔化合物(5)〕的合成将制备例1中合成的化合物(13)1g(3.7mmol)溶解在二氯甲烷50mL中，冰冷条件下加入乙酸酐(18.5mmol)、三乙胺(18.5mmol)、二甲基氨基吡啶(1.8mmol)，在室温下搅拌1小时。依次用饱和碳酸氢钠水溶液、10％枸橼酸水溶液、饱和氯化钠水溶液洗涤反应液后，用无水硫酸镁干燥，减压浓缩。由浓缩物用己烷和氯仿重结晶得到化合物(5)(1.5g，收率90％)。NMR波谱、质谱的测定结果如下所示。
1H-NMRδ2.23(3H，s，-OAc)，2.29(3H，s，-OAc)，2.30(3H，s，-OAc)，2.31(3H，s，-OAc)，7.00(1H，d，J3’，6’2，H-3’)，7.09(1H，d，Jα，β16Hz，H-α)，7.12(1H，dd，J5’，6’8Hz，H-5’)，7.23(1H，d，J5，68Hz，H-5)，7.41(1H，d，J2.62Hz，H-2)，7.44(1H，dd，H-6)，7.52(1H，d，H-β)，7.71(1H，d，H-6’)其中，样品溶解在重氯仿中，以残留氯仿的化学位移值为7.24ppm进行表示。图1表示化合物(5)的1H-NMR波谱。图1中，横轴表示化学位移值(ppm)，纵轴表示信号强度。FAB-MSm/z 441(M+H)+(其中，使用甘油作为基质。)实施例2 3，4-二羟基-2’，4’-二氯查耳酮(3，4-Dihydroxy-2’，4’-dichlorochalcone)〔化合物(6)〕的合成以2’，4’-二氯苯乙酮(2’，4’-Dichloroacetophenone；Sigma社制)680mg(3.6mmol)和3，4-二羟基苯甲醛500mg(3.6mmol)为原料，采用与制备例1相同的方法，得到化合物(6)320mg(收率29％)。NMR波谱、质谱的测定结果如下所示。
1H-NMRδ6.76(1H，d，J5，68Hz，H-5)，6.88(1H，d，Jα，β16Hz，H-α)，7.04(1H，dd，J2，62Hz，H-6)，7.11(1H，d，H-2)，7.23(1H，d，H-β)，7.55(2H，m，H-5’，6’)，7.74(1H，s，H-3’)其中，样品溶解在重二甲基亚砜中，以残留二甲基亚砜的化学位移值为2.49ppm进行表示。图2表示化合物(6)的1H-NMR波谱。图2中，横轴表示化学位移值(ppm)，纵轴表示信号强度。FAB-MSm/z 309(M+H)+(其中，使用甘油作为基质。)实施例3 3，4-二羟基-2’，4’-二甲氧基查耳酮(3，4-Dihydroxy-2’，4’-dimethoxychalcone)〔化合物(7)〕的合成以2’，4’-二甲氧基苯乙酮(2’，4’-Dimethoxy acetophenone；东京化成社制)648mg(3.6mmol)和3，4-二羟基苯甲醛500mg(3.6mmol)为原料，采用与制备例1相同的方法，得到化合物(7)600mg(收率56％)。NMR波谱、质谱的测定结果如下所示。
1H-NMRδ4.10(3H，s，-OMe)，4.40(3H，s，-OMe)，6.62(1H，dd，J3’，62，J5’，6’9Hz，H-5’)，6.67(1H，d，H-3’)，6.77(1H，d，J5，68Hz，H-5)，6.99(1H，dd，J2.62Hz，H-6)，7.08(1H，d，H-2)，7.25(1H，d，Jα，β16Hz，H-α)，7.39(1H，d，H-β)，7.67(1H，d，H-6’)其中，样品溶解在重二甲基亚砜中，以残留二甲基亚砜的化学位移值为2.49ppm进行表示。图3表示化合物(7)的1H-NMR波谱。图3中，横轴表示化学位移值(ppm)，纵轴表示信号强度。FAB-MSm/z 301(M+H)+(其中，使用甘油作为基质。)实施例4 4-(3，4-二羟基苯基)-3-丁烯-2-酮〔4-(3，4-Dihydroxyphenyl)-3-butene-2-one〕〔化合物(8)〕的合成以丙酮(Nacaritesc社制)1mL和3，4-二羟基苯甲醛1g(7.2mmol)为原料，采用与制备例1相同的方法，得到化合物(8)180mg(收率14％)。NMR波谱、质谱的测定结果如下所示。
1H-NMRδ2.26(3H，s，-Me)，6.47(1H，d，Jα，β16Hz，H-α)，6.76(1H，d，J5，68Hz，H-5)，7.00(1H，dd，J2，62Hz，H-6)，7.05(1H，d，H-2)，7.43(1H，d，H-β)其中，样品溶解在重二甲基亚砜中，以残留二甲基亚砜的化学位移值为2.49ppm进行表示。图4表示化合物(8)的1H-NMR波谱。图4中，横轴表示化学位移值(ppm)，纵轴表示信号强度。FAB-MSm/z 179(M+H)+(其中，使用甘油作为基质。)实施例5 1-金刚烷基-3-(3，4-二羟基苯基)-2-丙烯-1-酮〔1-Adamantyl-3-(3，4-dihydroxyphenyl)-2-propen-1-one〕〔化合物(9)〕的合成以1-金刚烷基甲基酮(1-Adamantyl methyl ketone；Sigma社制)640mg(3.6mmol)和3，4-二羟基苯甲醛500mg(3.6mmol)为原料，采用与制备例1相同的方法，得到化合物(9)500mg(收率46％)。NMR波谱、质谱的测定结果如下所示。
1H-NMRδ1.65-2.04(15H，m，-adamantyl)，6.74(1H，d，J5，68Hz，H-5)，7.00(1H，dd，J2，62Hz，H-6)，7.11(1H，d，Jα，β16Hz，H-α)，7.13(1H，d，H-2)，7.36(1H，d，H-β)其中，样品溶解在重二甲基亚砜中，以残留二甲基亚砜的化学位移值为2.49ppm进行表示。图5表示化合物(9)的1H-NMR波谱。图5中，横轴表示化学位移值(ppm)，纵轴表示信号强度。FAB-MSm/z 299(M+H)+(其中，使用甘油作为基质。)实施例6 二氢紫铆因(Dihydrobutein)〔化合物(10)〕的合成将制备例1中合成的化合物(13)200mg(0.74mmol)溶解在甲醇15mL中，在钯(Nacaritesc社制)200mg存在的条件下，通入氢气的同时在室温下搅拌1.5小时。过滤反应液，减压浓缩后，供于硅胶色谱，以氯仿∶甲醇＝15∶1为展开溶剂，得到化合物(10)130mg(收率65％)。NMR波谱、质谱的测定结果如下所示。
1H-NMRδ2.74(1H，t，Jα，β7.5Hz，H-β)，3.16(1H，t，H-α)，6.23(1H，d，J3’，5’2.5Hz，H-3’)，6.34(1H，dd，J5’，6’9Hz，H-5’)，6.48(1H，dd，J5，69，J2，62Hz，H-6)，6.60(1H，d，H-5)，6.61(1H，d，H-2)，7.77(1H，d，H-6’)其中，样品溶解在重二甲基亚砜中，以残留二甲基亚砜的化学位移值为2.49ppm进行表示。图6表示化合物(10)的1H-NMR波谱。图6中，横轴表示化学位移值(ppm)，纵轴表示信号强度。FAB-MSm/z 275(M+H)+(其中，使用甘油作为基质。)实施例7 1-金刚烷基-4-(3，4-二羟基苯基)-3-丁烯-1-酮〔1-Adamantyl-4-(3，4-dihydroxyphenyl)-3-butene-1-one〕〔化合物(11)〕的合成采用与实施例1〔化合物(5)的合成〕同样的方法，将后述实施例8中合成的化合物(12)900mg(1.8mmol)乙酰化后，溶解在二氯甲烷40mL中，加入1，8-二氮杂二环(5，4，0)-7-十一碳烯〔1，8-Diazabicyclo(5，4，0)-7-undecene；DBU〕4mmol，室温下使之反应2小时。用10％枸橼酸水溶液洗涤反应液，进行干燥后，将其浓缩固化，将浓缩物供于硅胶色谱，以己烷∶乙酸乙酯＝5∶1为展开溶剂，得到化合物(11)的THP化体。将化合物(11)的THP化体溶解在甲醇10mL中，添加磺基水杨酸酐40g(0.157mmol)，室温下搅拌3小时。用乙酸乙酯稀释反应液后，用饱和氯化钠水溶液洗涤，用无水硫酸镁干燥，减压浓缩。由浓缩物用己烷和乙酸乙酯进行重结晶，得到化合物(11)220mg(收率44％)。NMR波谱、质谱的测定结果如下所示。
1H-NMRδ1.66-2.00(15H，m，-adamantyl)，3.37(1H，dd，Jα，α’，7，Jα，β1Hz，H-α)，5.93(1H，dt，Jβ，δ11Hz，H-β)，6.22(1H，d，H-δ)，6.59(1H，dd，J2，62，J5，68Hz，H-6)，6.63(1H，d，H-5)，6.75(1H，d，H-2)其中，样品溶解在重二甲基亚砜中，以残留二甲基亚砜的化学位移值为2.49ppm进行表示。图7表示化合物(11)的1H-NMR波谱。图7中，横轴表示化学位移值(ppm)，纵轴表示信号强度。FAB-MSm/z 313(M+H)+(其中，使用甘油作为基质。)实施例8 1-金刚烷基-3-羟基-4-(3，4-二羟基苯基)丁烷-1-酮〔1-Adamantyl-3-hydroxy-4-(3，4-dihydroxyphenyl)-3-butane-1-one〕〔化合物(12)〕的合成在冰冷条件，氩气流下，在四氢呋喃(THF)2mL中向二异丙胺(Diisopropylamine；和光纯药制)224μL(1.6mmol)中缓缓加入1.6M丁基锂(Butyl lithium)己烷溶液(Nacaritesc社制)1mL，搅拌30分钟。将反应液用甲醇/干冰冷却至-70℃，加入1-金刚烷基甲基酮285mg(1.6mmol)/500μL THF溶液，搅拌30分钟。向该反应液中缓缓添加将3’，4’-二羟基苯基乙酸(3’，4’-Dihydroxyphenylacetic acid；Nacaritesc社制)完全THP化后，用1M DIBAL己烷溶液(Nacaritesc社制)还原得到的3’，4’-二羟基苯基乙醛(3’，4’-Dihyroxyphenyl acetaldehyde)的THP化体500mg(1.6mmol)/THF500μL，在-70℃下搅拌10分钟。向反应液中加入饱和氯化铵水溶液，接着用乙醚萃取，将得到的有机层部分供于硅胶色谱，以己烷∶乙酸乙酯＝4∶1为展开溶剂，得到化合物(12)的THP化体。将化合物(12)的THP化体溶解在甲醇10mL中，添加磺基水杨酸酐40mg(0.157mmol)，室温下搅拌3小时。用乙酸乙酯稀释反应液后，用饱和氯化钠水溶液洗涤，用无水硫酸镁干燥，减压浓缩。由浓缩物用己烷和乙酸乙酯进行重结晶，得到化合物(12)260mg(收率57％)。NMR波谱、质谱的测定结果如下所示。
1H-NMRδ1.58-1.98(15H，m，-adamantyl)，2.25(1H，dd，Jα，β4.5，Jα，α’，16.5Hz，H-α)，2.41(1H，dd，Jβ，δ6.0，Jδ，δ’，13.5Hz，H-δ)，2.61(1H，dd，Jα’，β4.5Hz，H-α’)，3.99(1H，m，H-β)，6.38(1H，dd，J2，62，J5，68Hz，H-6)，6.55(1H，d，H-2)，6.57(1H，d，H-2)其中，样品溶解在重二甲基亚砜中，以残留二甲基亚砜的化学位移值为2.49ppm进行表示。图8表示化合物(12)的1H-NMR波谱。图8中，横轴表示化学位移值(ppm)，纵轴表示信号强度。FAB-MSm/z 331(M+H)+(其中，使用甘油作为基质。)参考例1 使用咖啡酸的NGF产生增强活性测定方法的讨论将小鼠成纤维细胞L-M细胞(ATCC CCL-1.2)用含有0.5％细菌培养用蛋白胨(Gibco社制)的M199培养基(ICN社制)悬浊至1.5×105细胞/ml，在96孔板中分别接种0.1ml进行无菌培养。培养3天后，除去培养基，更换为含有0.5％牛血清白蛋白(Sigma社制)的M199培养基。对于含有细胞的各孔，添加具有NGF产生增强活性的公知物质咖啡酸〔Caffeic Acid；Sigma社制，二甲基亚砜(DMSO)溶液〕使最终浓度达到0、50、100、200μM，培养24小时。另外，以咖啡酸浓度为0μM的孔作为对照。另外，使各孔中DMSO的最终浓度为0.1％。培养结束后，采用酶免疫分析法(NGF Emax Immuno AsaySystemPromega社制)测定培养液中NGF的浓度。各添加量的咖啡酸的NGF产生增强程度是将阴性对照的细胞培养液中的NGF浓度设定为100％，将各添加量的细胞培养液中的NGF浓度基于百分率作为增强率(％)表示。其结果如表3所示。实验进行2次，取其平均值。表明采用本方法能够测定咖啡酸的NGF产生增强活性。另外，本参考例表明咖啡酸依赖于其浓度使NGF产生增强。
表3
其中，阴性对照的NGF浓度为0.14278ng/ml。实施例9 化合物(13)引起的NGF产生增强采用与参考例1同样的方法，测定化合物(13)(Funacosy社制)的NGF产生增强活性。添加化合物(13)使最终浓度达到0、0.5、1、2、5、10、20、50μM。其结果如表4所示。表明化合物(13)浓度依存地增强L-M细胞的NGF产生，显示较高的NGF产生增强活性，同时其作用有效浓度区域广。
表4
其中，阴性对照的NGF浓度为0.07091ng/ml。实施例10 化合物(14)引起的NGF产生增强采用与参考例1同样的方法，测定化合物(14)(Sigma社制)的NGF产生增强活性。添加化合物(14)使最终浓度达到0、50、100、200μM。其结果如表5所示。表明化合物(14)浓度依存地增强L-M细胞的NGF产生，显示较高的NGF产生增强活性，同时其作用有效浓度区域广。
表5
其中，阴性对照的NGF浓度为0.07091ng/ml。实施例11 化合物(15)引起的NGF产生增强采用与参考例1同样的方法，测定化合物(15)(Sigma社制)的NGF产生增强活性。添加化合物(15)使最终浓度达到0、12.5、25、50μM。其结果如表6所示。表明化合物(15)浓度依存地增强L-M细胞的NGF产生，显示较高的NGF产生增强活性，同时其作用有效浓度区域广。
表6
其中，阴性对照的NGF浓度为0.14278ng/ml。实施例12 化合物(16)引起的NGF产生增强采用与参考例1同样的方法，测定化合物(16)(和光纯药社制)的NGF产生增强活性。添加化合物(16)使最终浓度达到0、25、50、100μM。其结果如表7所示。表明化合物(16)浓度依存地增强L-M细胞的NGF产生，显示较高的NGF产生增强活性，同时其作用有效浓度区域广。
表7
其中，阴性对照的NGF浓度为0.14278ng/ml。实施例13 化合物(5)～(12)和(17)～(25)引起的NGF产生增强采用与参考例1同样的方法，测定制备例2～9和实施例1～8合成的化合物(5)～(12)、(17)～(22)、(24)和(25)、化合物(23)(迷迭香酸；Funacosy社制)和以前作为NGF产生增强物质已知的咖啡酸(CA)、4-甲基儿茶酚(4MC)和肾上腺素(EN)的NGF产生增强活性。添加各化合物达到表8～10所示的最终浓度。另外，化合物添加后的细胞培养时间为20小时。其结果如表8～10所示。各化合物的试验均设阴性对照，实验分别进行2次，取其平均值。表8添加量(μM)NC0 3.125 6.25 12.525 50 100200(ng/ml) 增强率(％)CA0.179 100 N.T. N.T. N.T.N.T. 165.1 169.9 200.54MC 0.239 100 N.T. N.T. 143.0 312.9 1047.7 N.T. N.T.EN0.202 100 N.T. N.T. N.T.N.T. 137.2 218.0 255.0化合物(5) 0.179 100 N.T. 684.5 1330.1 1659.5 N.T. N.T. N.T.化合物(6) 0.167 100 N.T. 762.7 864.3 1280.3 N.T. N.T. N.T.化合物(7) 0.2 100 N.T. 358.9 410.2 899.3 N.T. N.T. N.T.化合物(8) 0.181 100 N.T. N.T. N.T.N.T. 374.8 676.2 2198.0化合物(9) 0.181 100 205.6 549.6 810.3 N.T. N.T. N.T. N.T.化合物(10)0.167 100 N.T. 174.1 333.2 839.3 N.T. N.T. N.T.化合物(12)0.181 100 107.6 363.7 966.5 908.3 1111.7 N.T. N.T.化合物(17)0.179 100 N.T. N.T. 194.6 598.1 1101.1 N.T. N.T.化合物(18)0.2 100 N.T. 471.1 476.0 873.6 N.T. N.T. N.T.化合物(19)0.212 100 N.T. N.T. 268.8 312.5 844.5 N.T. N.T.化合物(20)0.2 100 N.T. N.T. 346.1 482.4 692.4 N.T. N.T.化合物(21)0.212 100 N.T. N.T. N.T.222.7 228.8 501.5 N.T.化合物(22)0.167 100 N.T. N.T. N.T.N.T. 123.8 130.3 242.3化合物(23)0.239 100 N.T. N.T. N.T.N.T. N.T. 110.9 131.1化合物(24)0.199 100 N.T. N.T. N.T.126.1 202.6 265.7 N.T.
表9添加量(μM)NC 00.7811.563(ng/ml) 增强率(％)化合物(11) 0.181 100 775.2865.8
表10添加量(μM)NC 0 31.25 62.5 125 250(ng/ml) 增强率(％)化合物(25)0.325 100160.6 183.6273.6 495.3另外，表中的NC表示阴性对照的NGF浓度。另外，N.T.表示未进行试验。
这些结果表明本发明中使用的化合物(5)～(12)和(17)～(25)与以前作为NGF产生增强物质已知的咖啡酸、4-甲基儿茶酚和肾上腺素相比，在NGF产生增强活性的强度或者显示NGF产生增强活性的浓度区域广的方面具有较高的实用性。
表11添加量(mg/ml) 增强率(％)0 1001.25 277.62.5 441.35 808.4其中，阴性对照的NGF浓度为0.507ng/ml。
(2)使用反相色谱精制分离实施例14-(1)记载的红花黄色色素中的活性成分。以下列出其条件。柱使用TSK gel ODS-90Ts(径21.5mm×长30cm；东ソ-社制)。溶剂A(0.1％三氟醋酸水溶液)和溶剂B(蒸馏水和乙腈按体积比1比1混合得到的溶剂，含有0.1％三氟醋酸)的洗脱比为0分钟至50分钟溶剂B比直线地由0％达到100％，接着15分钟保持溶剂B比为100％，最后保持溶剂B比为0％15分钟。洗脱速度为5ml/分钟，检测在215nm下进行。每3分钟采集级分，按照与实施例13同样的方法测定各级分的NGF产生增强活性。结果可知含有保留时间32.5分钟和41.8分钟的检测峰的级分具有活性。对保留时间为32.5分钟的级分进行质谱解析时，检测出分子量为613的信号。而且1H-NMR波谱(图9)、13C-NMR波谱解析的结果确定活性成分为式(27)表示的化合物(27)的サフロミン A(分子量612.53)。 采用与实施例13同样的方法测定这样得到的精制サフロミンA的NGF产生增强活性。添加精制サフロミン A使最终浓度达到0、2.5mg/ml。结果，精制サフロミンA增强了L-M细胞的NGF产生。サフロミンA的结果如表12所示，保留时间41.8分钟的级分中含有的物质的结果如表13所示(该物质的添加量如表13所示)。
表12添加量(mg/ml)增强率(％)01002.5 130.7其中，阴性对照的NGF浓度为0.739ng/ml。
表13添加量(mg/ml)增强率(％)01001.25 350.72.5 643.4其中，阴性对照的NGF浓度为0.736ng/ml。实施例15 黄腐酚引起的NGF产生增强采用与实施例13同样的方法，测定制备例10制得的黄腐酚的NGF产生增强活性。添加黄腐酚使最终浓度达到0、15.6、31.3、62.5、125μM。其结果如表14所示。表明黄腐酚浓度依存地增强L-M细胞的NGF产生，显示较高的NGF产生增强活性，同时其作用有效浓度区域广。
表14添加量(μm) 增强率(％)0 10015.6 160.331.3 212.162.5 473.2125897.1其中，阴性对照的NGF浓度为0.0575ng/ml。
对含有细胞的各孔添加杨梅酮(Sigma社制)使最终浓度达到0、31.3、62.5、125、250μM，培养24小时。阴性对照添加蒸馏水。培养结束后，采用酶免疫分析法(NGF Emax Immuno Asay System；Promega社制)测定培养液中NGF的浓度。各添加量的NGF产生增强的程度是将阴性对照的细胞培养液中的NGF浓度设定为100％，将各添加量的细胞培养液中的NGF浓度基于百分率作为增强率(％)表示。其结果如表15所示。实验进行2次，取其平均值。杨梅酮浓度依存地增强了L-M细胞的NGF产生。
表15
其中，阴性对照的NGF浓度为0.038ng/ml。
(2)槲皮黄酮引起的NGF产生增强采用与实施例16-(1)同样的方法，测定槲皮黄酮(Sigma社制)的NGF产生增强活性。添加槲皮黄酮使最终浓度达到0、31.3、62.5、125、250μM。其结果如表16所示。槲皮黄酮浓度依存地增强了L-M细胞的NGF产生。
表16
其中，阴性对照的NGF浓度为0.053ng/ml。
(3)杨梅甙引起的NGF产生增强采用与实施例16-(1)同样的方法，测定杨梅甙(Funacosy社制)的NGF产生增强活性。添加杨梅甙使最终浓度达到0、31.3、62.5、125、250μM。其结果如表17所示。杨梅甙浓度依存地增强了L-M细胞的NGF产生。
表17
其中，阴性对照的NGF浓度为0.053ng/ml。
(4)槲皮甙引起的NGF产生增强采用与实施例16-(1)同样的方法，测定槲皮甙(Sigma社制)的NGF产生增强活性。添加槲皮甙使最终浓度达到0、31.3、62.5、125、250μM。其结果如表18所示。槲皮甙浓度依存地增强了L-M细胞的NGF产生。
表18
其中，阴性对照的NGF浓度为0.053ng/ml。
其结果如表19所示。表中的数字表示6例的平均值±标准误差。另外，*标记是指按照Student的t检验，相对于对照组以5％以下的显著水平具有显著差异。也就是说，相对于对照组，紫铆因给药组神经中的NGF含量增加。因而，可以得知通过将紫铆因给予生物，能增强NGF产生。
表19NGF含量(pg/坐骨神经)紫铆因给药组(N＝6) 187.7±26.4*对照组(N＝6)119.2±11.7平均值±标准误差
(2)采用下述方法评价实施例18-(1)配制的紫铆因处理配制培养基以及对照配制培养基中含有的NGF的生物化学活性。
首先，预先将大鼠肾上腺褐色细胞瘤PC-12细胞(ATCC CRL-1721)用含有10％胎牛血清的DME培养基悬浊至2.0×104细胞/ml，在胶原涂膜的96孔板中分别接种0.1ml，无菌培养24小时。接着，使用将含有0.5％牛血清白蛋白的M199培养基和含有20％胎牛血清的DME培养基等量混合得到的培养基(以下称为分析用培养基)，对紫铆因处理配制培养基以及对照配制培养基制备2倍稀释系列(原液、2分之1稀释液、4分之1稀释液、8分之1稀释液、16分之1稀释液、32分之1稀释液)。由培养好的PC-12细胞除去培养基，添加紫铆因处理配制培养基以及对照配制培养基的上述梯度稀释液100μl，无菌培养48小时。另外，作为比较，仅添加分析用培养基100μl代替配制培养基，无菌培养48小时。培养结束后，在显微镜(奥林巴斯社制)观察下随机选择视野，拍摄细胞照片(倍率100倍)。以照片中的300～500个细胞为对象，计数神经突起伸长阳性的PC-12细胞数，按照下式计算出神经突起伸长率(％)。神经突起伸长率(％)＝神经突起阳性的细胞数(个)÷总细胞数(个)×100另外，以神经突起的长度比细胞长径长的为神经突起伸长阳性。对于紫铆因处理配制培养基以及对照配制培养基求得的神经突起伸长率(％)的结果如表20所示。实验进行3次，取其平均值。紫铆因处理配制培养基与对照配制培养基相比，显示较强的神经突起伸长活性。
表20神经突起伸长率(％)稀释液紫铆因处理配制培养基对照配制培养基原液 64.1 33.52分之1稀释液 60.1 21.74分之1稀释液 42.8 11.68分之1稀释液 38.3 10.616分之1稀释液 27.7 8.8732分之1稀释液 21.2 4.02仅添加分析用培养基时的神经突起伸长率为3.66％。实施例19 治疗剂的制备1注射剂I、向生理盐水中以1％浓度加入紫铆因〔化合物(13)〕，制备注射剂。
II、向生理盐水中分别以0.5％和0.1％浓度加入紫铆因〔化合物(13)〕和甘草酸，制备注射剂。
另外，对于化合物(5)～(12)、(14)～(25)也按照与上述I、II同样的方法制备注射剂。片剂III、制备含有紫铆因〔化合物(13)〕100mg和微晶纤维素适量的片剂，包覆糖衣，制备各种片剂。
IV、制备含有紫铆因〔化合物(13)〕0.1mg、甘草酸二钙10mg和微晶纤维素适量的片剂，包覆糖衣，制备片剂。
另外，对于化合物(5)～(12)、(14)～(27)也按照与上述III、IV同样的方法制备片剂。
II、向生理盐水中分别以0.5％和0.1％浓度加入杨梅酮和甘草酸，制备注射剂。片剂I、制备含有杨梅酮100mg和微晶纤维素适量的片剂，包覆糖衣，制备各种片剂。
II、制备含有杨梅酮0.1mg、甘草酸二钙10mg和微晶纤维素适量的片剂，包覆糖衣，制备片剂。试验例1 毒性试验由日本SLC社购入雄性SD大鼠，预饲养后于6周龄用于试验。将紫铆因〔化合物(13)〕溶解于生理盐水中腹腔内给药，或者悬浊于0.5％羧甲基纤维素中强制口服给药。给药浓度在腹腔内给药时每1kg体重为300mg(N＝3)、10mg(N＝3)、1mg(N＝3)、0.1mg(N＝3)，另外强制口服给药时每1kg体重为1g(N＝2)、0.1g(N＝3)。对照组仅同样给予各种溶剂。确认给药后，各给药组中均没有死亡例、一般症状的变化、体重增加的抑制、解剖时的异常表象。
另外，将本发明中作为有效成分使用的化合物口服给予CDF1小鼠(雄性，7周龄，日本SLC社)同样进行试验，能够确认没有毒性或者是低毒性。试验例2 毒性试验与上述试验例1同样将实施例16中使用的化合物口服给予小鼠，能够确认低毒性。
工业实用性本发明提供含有具有NGF产生增强活性的上述有效成分的药物。所述药物作为必须要增强NGF产生的疾病的治疗剂或预防剂对于维持生物体的体内平衡是有用的。另外，本发明还提供含有上述有效成分的NGF产生增强剂。所述增强剂对于有关神经细胞机理的生物化学研究以及痴呆症、神经障碍药等的筛选是有用的。而且在本发明中还提供NGF产生增强用食品、饮料或饲料。这些食品、饮料或饲料对于改善、预防对本发明使用的有效成分显示敏感性的必须增强NGF产生的疾病的症状非常有用。另外，本发明还提供具有NGF产生增强作用的新型化合物。
权利要求
1.必需增强神经生长因子产生的疾病的治疗剂或预防剂，其特征在于，含有选自下述通式(1)表示的化合物及其药理学上允许的盐中的至少1种化合物作为有效成分， 〔式中，R1、R2、R3、R4和R5分别相同或不同，为氢原子、羟基、烷氧基或酰氧基；X用下述通式(2)、下述通式(3)或下述通式(4)表示， (式中，Z为氢原子或者可以引入特性基团的脂肪族基团、芳香族基团或芳香脂肪族基团，Y为氢原子或羟基，m和n分别为0或1) (式中，Z’为氢原子或者可以引入特性基团的脂肪族基团、芳香族基团或芳香脂肪族基团，Y’为氢原子或羟基，m和n分别为0或1) (式中，R6和R7分别相同或不同，为氢原子、糖残基或可以引入特性基团的脂肪族基团、芳香族基团或芳香脂肪族基团)其中，上述通式(1)中，R1、R4和R5均为氢原子，R2和R3均为羟基，X为上述通式(2)，且该通式(2)中n为1，m为0，Z和Y为氢原子的场合除外〕。
2.神经生长因子产生增强剂，其特征在于，含有权利要求1所述的选自通式(1)表示的化合物及其药理学上允许的盐中的至少1种化合物作为有效成分。
3.神经生长因子产生的增强方法，其特征在于，将权利要求1所述的选自通式(1)表示的化合物及其药理学上允许的盐中的至少1种化合物给予动物。
4.神经生长因子产生增强用食品、饮料或饲料，其特征在于，含有权利要求1所述的选自通式(1)表示的化合物及其盐中的至少1种化合物作为有效成分。
5.权利要求1所述的选自通式(1)表示的化合物及其盐中的至少1种化合物在制备必需增强神经生长因子产生的疾病的治疗剂或预防剂、神经生长因子产生增强剂或者神经生长因子产生增强用食品、饮料或饲料中的用途。
6.从下述式(5)～(12)表示的化合物中选择的化合物。
全文摘要
本发明提供含有具有神经生长因子产生增强活性的特定化合物或其盐作为有效成分的必需增强神经生长因子产生的疾病的治疗剂或预防剂、神经生长因子产生增强剂、神经生长因子产生增强用食品、饮料或饲料；将上述化合物或其盐给予哺乳动物的神经生长因子产生的增强方法；以及上述化合物或其盐在制备必需增强神经生长因子产生的疾病的治疗剂或预防剂、神经生长因子产生增强剂或者神经生长因子产生增强用食品、饮料或饲料中的用途。另外，还提供具有神经生长因子产生增强活性的新型化合物。
文档编号A61P43/00GK1419448SQ01807329
公开日2003年5月21日 申请日期2001年1月26日 优先权日2000年1月27日
发明者大野木宏, 白发正宏, 小林英二, 李拖平, 出口寿寿, 西山英治, 佐川裕章, 加藤郁之进 申请人:宝生物工程株式会社