专利名称：蜂王浆及冻干粉活性的生物测定方法
技术领域：
本发明涉及一种蜂王浆及冻干粉活性检测方法。
背景技术：
蜂王浆及冻干粉具有神奇的功效，其活性成分由多种物质组成。目前用于检测蜂王浆及冻干粉活性的方法主要是化学分析方法，如RP-HPLC法、高效液相色谱法、气相色谱-质谱法等方法。上述方法均只能检测出蜂王浆或冻干粉中一种或几种活性成份，不能全面反映它们的生物学活性及营养价值。例如目前多数厂家将王浆酸的含量作为衡量蜂王浆质量好坏的标准，但是王浆酸化学性质比较稳定，即使经过高温处理，含量也不会发生变化，而蜂王浆的活性却全部破坏。因此，寻找一种能全面反映蜂王浆及冻干粉营养状况的检测方法就成了蜂产品行业急于解决的问题。
发明内容
本发明要解决的技术问题就是现有检测方法无法全面反映蜂王浆及冻干粉活性即营养状况的问题。
为解决上述技术问题，本发明采用如下技术方案即用蜂王浆及冻干粉饲喂蜜蜂幼虫，严格控制温度，湿度，以蜜蜂幼虫生长的体重变化来反映蜂王浆及冻干粉的活性及营养价值。其原理是由于幼虫的生长发育需要各种营养因子的综合作用，在同等条件下，只要测的幼虫的生长发育状况就能反映蜂王浆及其冻干粉营养物质含量的全面情况。幼虫体重越重，说明该幼虫获得的营养越全面、丰富，从而说明蜂王浆或冻干粉的活性越好。
本发明所述之测定方法包括如下步骤1、制备蜂王浆饲料；2、从无病的蜂群中，挑选出大小、生长一致的一日龄幼虫。
3、将饲料均匀摊入培养器中，保持湿度在90％以上，然后放于培养箱中，温度控制在34℃±1℃。
4、将30只一日龄幼虫移入培养器中，放入柱温箱中培养。
5、每天更换饲料，秤幼虫重量。
6、第7天，对每只幼虫逐一进行称重，结果进行统计。
本发明简便易行，实施方便，能全面而准确地反映蜂王浆或冻干份的营养状况，它比传统的仪器检测更科学，为检测蜂王浆及冻干粉的活性开辟了一条新的途径，为蜂王浆及冻干粉的质量控制提供了一种科学有效的方法。
具体实施例方式
下面具体描述以下本发明的详细内容1、蜂王浆饲料喂的制备蜂王浆应解冻，冻干粉用无菌生理盐水化成王浆，充分研磨，使其均匀分散。
2、幼虫应从无病的蜂群中，选大小、生长一致的一日龄幼虫。
3、所有器具洗净后严格消毒。具体做法是在每次饲喂幼虫前，先用请水将研钵、培养器、移虫工具清洗干净，再对器具进行高压蒸气消毒。不能使用高压整齐消毒的器具，如移虫针可用来苏水浸泡10分钟后，用蒸馏水冲洗干净。
1、将饲料均匀摊入培养器中，并放入沾水棉球，保持湿度在90％以上，放于培养箱中，温度控制在34℃±1℃。饲料的用量应随幼虫日龄增加而递增，以保证幼虫有足够的饲料。
5、移入30只一日龄幼虫，放入柱温箱中培养。
6、每天更换饲料，并在更换饲料之前用分析天平称幼虫重量，并求出各个样品幼虫的平均重量。每次当幼虫移好后，应及时放回恒温箱内，以保证幼虫生长发育所需要的温湿度。
7、第七天，对每只幼虫逐一进行称重，结果进行统计。
以下是采用本发明测定蜂王浆及冻干粉活性的部分实验数据实验一2、实验时间2001年3月12日至3月18日3、实验样品1号南京老山实验蜂场2000年生产并在-18℃下存放的蜂王浆；2号南京老山制药有限公司2000年6月生产的冻干粉；3号南京老山制药有限公司2000年3月生产的冻干粉；4号南京老山制药有限公司2001年4月生产的冻干粉；5号南京老山实验蜂场2001年4月生产的蜂王浆；6号南京老山制药有限公司提供的2000年12月的掺假蜂王浆；
3、实验结果(重量克)
4、结果分析用2001年4月新生产的蜂王浆和2001年4月刚冷冻生产出的冻干粉饲喂幼虫，幼虫最高体重分别为330mg和313mg，比用200年生产并在-18℃下存放的蜂王浆饲喂的幼虫更重，说明还是刚生产出来的蜂王浆和冻干粉质量好。而用掺假蜂王浆饲喂的幼虫最高重仅为136mg，比贮存了1年多的冻干粉饲喂的幼虫还小，符合实际情况。
实验二1、实验时间2001年7月24日至7月30日2、实验样品1号在-18℃下存放2个月的蜂王浆；2号在常温下存放3天的蜂王浆；3号在常温下存放5天的蜂王浆；4号在常温下存放10天的蜂王浆；5号在常温下存放15天的蜂王浆；6号在家用冰箱冷冻室(-10℃)存放30天的蜂王浆；7号在家用冰箱冷藏室(4℃)存放15天的蜂王浆；8号在家用冰箱冷藏室(4℃)存放30天的蜂王浆；9号在家用冰箱冷藏室(4℃)存放60天的蜂王浆；10号南京老山制药有限公司2001年5月生产的冻干粉；3、实验结果(重量克)
4、结果分析用存放在家用冰箱冷藏室内15天的蜂王浆饲喂的幼虫(平均重量只有184.5mg)和用在-18℃下存放了60天的蜂王浆饲喂幼虫(平均重量为288.8mg)平均重量相差104.3mg。经方差分析，差异性显著，说明在家用冰箱冷藏室内存放的蜂王浆，最长时间不能超过15天。
用在家用冰箱冷冻室(-10℃)存放30天的蜂王浆来饲喂的幼虫(平均重量只有178.5mg)和用在-18℃下存放了60天的蜂王浆饲喂幼虫(平均重量为288.8mg)的平均重量相差110.3mg。经方差分析，差异性显著，说明在家用冰箱冷冻室内(-10℃)存放的蜂王浆，最长时间不能超过30天。
经方差分析表明，10号幼虫的平均重量分别与此2号、3号、4号、5号、6号、7号、8号、9号存在显著差异，说明南京老山制药有限公司2001年5月生产的冻干粉的活性比在常温下放置3天、家用冰箱冷藏室放置15天和家用冰箱冷冻室存放30天的蜂王浆的活性更好。
实验三1、实验时间2001年8月20日至3月26日2、实验样品1号在-18℃下存放3个月的蜂王浆；2号在家用冰箱冷冻室(-10℃)存放90天的蜂王浆；3号在家用冰箱冷藏室(4℃)存放90天的蜂王浆；4号南京市场随机购买的2001年5月生产的冻干粉A；5号南京市场随机购买的2001年5月生产的冻干粉B；6号南京市场随机购买的2001年5月生产的冻干粉C；7号南京老山制药有限公司2001年1月生产的冻干粉；8号南京老山制药有限公司2001年2月生产的冻干粉；9号南京老山制药有限公司2001年3月生产的冻干粉；10号南京老山制药有限公司2001年5月生产的冻干粉；3、实验结果(重量克)
5、结果分析用在-18℃下存放3个月的蜂王浆饲喂幼虫的平均重量为287.34mg，比实验二中的1号幼虫轻1.46mg，说明蜂王浆即使在-18℃的条件保存，也会因贮存时间的延长，活性物质也在缓慢减少。
经方差分析表明，10号幼虫的平均重量分别与2号、3号、4号、5号、6号存在明显差异，说明南京老山制药有限公司2001年生产的冻干粉比在家用冰箱冷藏室放置90天和家用冰箱冷冻室内存放90天的蜂王浆活性好。
以上实验表明本发明能全面反映蜂王浆或冻干份的活性和营养状况，可有效鉴别蜂王浆或冻干份质量的好坏。
权利要求
1.一种蜂王浆及冻干粉活性的生物测定方法，其特征在于包括如下步骤(1)制备蜂王浆饲料；(2)从无病的蜂群中，挑选出大小、生长一致的一日龄幼虫；(3)将饲料均匀摊入培养器中，保持湿度在90％以上，然后放于培养箱中，温度控制在34℃±1℃；(4)将30只一日龄幼虫移入培养器中，放入柱温箱中培养；(5)每天更换饲料，秤幼虫重量；(6)第7天，对每只幼虫逐一进行称重，结果进行统计。
2.如权利要求1所述的蜂王浆及冻干粉活性的生物测定方法，其特征在于如用蜂王浆制备饲料，只需解冻即可；如用冻干粉制备饲料，则需将冻干粉用无菌生理盐水化成蜂王浆，充分研磨，使其均匀分散。
3.如权利要求1所述的蜂王浆及冻干粉活性的生物测定方法，其特征在于在测定过程中使用的所有器具均应洗净并严格消毒。
4.如权利要求1所述的蜂王浆及冻干粉活性的生物测定方法，其特征在于用在培养箱放入沾水棉球的方法来保持湿度。
全文摘要
本发明涉及一种蜂王浆及冻干粉活性检测方法，包括如下步骤(1)制备蜂王浆饲料；(2)从无病的蜂群中，挑选出大小、生长一致的一日龄幼虫；(3)将饲料均匀摊入培养器中，保持湿度在90％以上，然后放于培养箱中，温度控制在34℃±1℃；(4)将30只一日龄幼虫移入培养器中，放入柱温箱中培养；(5)每天更换饲料，秤幼虫重量；(6)第7天，对每只幼虫逐一进行称重，结果进行统计。本发明简便易行，实施方便，能全面而准确地反映蜂王浆或冻干份的营养状况，它比传统的仪器检测更科学，为检测蜂王浆及冻干粉的活性开辟了一条新的途径，为蜂王浆及冻干粉的质量控制提供了一种科学有效的方法。
文档编号A61K35/56GK1412556SQ0213845
公开日2003年4月23日 申请日期2002年10月17日 优先权日2002年10月17日
发明者王加聪, 陈坤, 李晓栋, 裴余一, 吴黎明, 张复兴, 邱建勇 申请人:南京老山药业股份有限公司