专利名称：新颖二氢喋啶酮,其制备方法及作为药物组合物的用途的制作方法
技术领域：
本发明是关于通式(I)新颖二氢喋啶酮及其异构物体， 其中基团X、R1、R2、R3、R4、R5及R7，都具有权利要求和说明书中所述意义，还涉及制备这种二氢喋啶酮的方法，及其作为药物组合物的用途。
背景技术：
现有技术已知喋啶酮衍生物是作为具有抗增生活性的活性物质。WO01/019825是描述喋啶酮衍生物在治疗肿瘤与病毒疾病的用途。为抵抗许多肿瘤类型，要求发展新颖医药组合物以对抗肿瘤。
本发明的目的是为制备具有消炎与抗增生活性的新颖化合物。
发明详述令人惊讶地发现，通式(I)化合物，其中基团X与R1至R7都具有下文所述的含义，可作为特异细胞循环激酶的抑制剂。因此，根据本发明的化合物可用于治疗例如与特异细胞循环激酶活性有关的，且其特征为过度或异常细胞增生的疾病。
因此，本发明是关于通式(I)化合物
其中R1表示选自氢、NH2、XH、卤素及视情况被一个或多个卤原子取代的C1-C3-烷基中之一的基团，R2表示选自氢、CHO、XH、-X-C1-C2-烷基及视情况经取代的C1-C3-烷基中之一的基团，R3、R4，其可相同或不同，表示选自视情况经取代的C1-C10-烷基、C2-C10-烯基、C2-C10-炔基、芳基、杂芳基、C3-C8-环烷基、C3-C8-杂环烷基、-X-芳基、-X-杂芳基、-X-环烷基、-X-杂环烷基、-NR8-芳基、-NR8-杂芳基、-NR8-环烷基及-NR8-杂环烷基中之一的基团，或选自氢、卤素、COXR8、CON(R8)2、COR8及XR8中之一的基团，或R3与R4一起表示2-至5-员烷基桥基，其可含有1至2个杂原子，R5表示氢，或选自视情况经取代的C1-C10-烷基、C2-C10-烯基、C2-C10-炔基、芳基、杂芳基及-C3-C6-环烷基中之一的基团，或R3与R5或R4与R5一起表示饱和或不饱和的C3-C4-烷基桥基，其可含有1至2个杂原子，R6表示视情况经取代的芳基或杂芳基，R7表示氢或-CO-X-C1-C4-烷基，及X于各情况中互相独立地表示O或S，R8于各情况中互相独立地表示氢，或选自视情况可经取代的C1-C4-烷基、C2-C4-烯基、C2-C4-炔基及苯基中之一的基团，视情况呈其互变异构体、外消旋物、对映体、非对映异构体及混合物形式，以及视情况为其药理上可接受的酸加成盐。
优选的式(I)化合物为其中X与R6具有所给的含义，且R1表示氢，
R2表示选自CHO、OH及CH3中之一的基团，R3、R4，可相同或不同，表示选自氢、视情况经取代的C1-C6-烷基、C2-C6-烯基、C2-C6-炔基、C3-C7-环烷基中之一的基团，或R3与R4一起表示C2-C5-烷基桥基，R5表示选自视情况经取代的C1-C10-烷基、C2-C10-烯基、C2-C10-炔基、C3-C6-环烷基及C3-C6-环烯基中之一的基团，或R3与R5或R4与R5一起表示饱和或不饱和的C3-C4-烷基桥基，其可含有1至2个杂原子，及R7表示氢，视情况其呈互变异构体、外消旋物、对映体、非对映异构体及混合物形式，以及视情况为其药理学上可接受的酸加成盐。
特别优选的式(I)化合物为其中R1-R5、R7、R8及X都具有所给的含义，且R6表示以下通式的基团 其中n表示1、2、3或4，R9表示选自视情况经取代的C1-C6-烷基、C2-C6-烯基、C2-C6-炔基、CONH-C1-C10-亚烷基、-O-芳基、-O-杂芳基、-O-环烷基、-O-杂环烷基、芳基、杂芳基、环烷基及杂环烷基中之一的基团，或选自-O-C1-C6-烷基-Q1、-CONR8-C1-C10-烷基-Q1、-CONR8-C2-C10-烯基-Q1、-CONR8-Q2、卤素、OH、-SO2R8、-SO2N(R8)2、-COR8、-COOR8、-N(R8)2、-NHCOR8、CONR8OC1-C10烷基Q1及CONR8OQ2中之一的基团，Q1表示氢、-NHCOR8，或选自视情况经取代的-NH-芳基、-NH-杂芳基、芳基、杂芳基、C3-C8-环烷基-及杂环烷基中之一的基团，Q2表示氢，或选自视情况经取代的芳基、杂芳基、C3-C8-杂环烷基、C3-C8-环烷基-及C1-C4-烷基-C3-C8-环烷基中之一的基团，R10可相同或不同，表示选自视情况经取代的C1-C6-烷基、C2-C6-烯基与C2-C6-炔基、-O-C1-C6-烷基、-O-C2-C6-烯基、-O-C2-C6-炔基、C3-C6-杂环烷基及C3-C6-环烷其中之一的基团，或选自氢、-CONH2、-COOR8、-OCON(R8)2、-N(R8)2、-NHCOR8、-NHCON(R8)2、-NO2及卤素中之一的基团，或相邻基团R9与R10一起表示以下通式的桥基 Y表示O、S或NR11，m表示0、1或2R11表示氢或C1-C2-烷基，及R12表示氢，或选自视情况经取代的苯基、吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、哒嗪基、-C1-C3-烷基-苯基、-C1-C3-烷基-吡啶基、-C1-C3-烷基-吡嗪基、-C1-C3-烷基-嘧啶基及-C1-C3-烷基-哒嗪基中之一的基团，R13表示C1-C6-烷基，视情况呈其互变异构体、外消旋物、对映体、非对映异构体及混合物形式，以及视情况为其药理学上可接受的酸加成盐。
特别优选式(I)化合物为其中R3-R6、R8及X均具有所给定的含义，且R1表示氢，R2表示CH3，及R7表示氢，视情况呈其互变异构体、外消旋物、对映体、非对映异构体及混合物形式，以及视情况为其药理学上可接受的酸加成盐。
本发明另一主题是式(I)化合物，其中X与R1-R7均具有所给定的含义，作为药物组合物使用。
根据本发明具有特别重要性的，为式(I)化合物，其中X与R1-R7均具有所给定的含义，作为具有抗增生活性的药物组合物使用。
本发明再一目的是关于式(I)化合物，其中X与R1-R7均具有所给定的含义，在治疗及/或预防癌症、感染、炎性及自身免疫疾病的药物组合物制备中的用途。
本发明又一目的关于治疗及/或预防癌症、感染、炎性及自身免疫疾病的方法，其特征在于给予患者以有效量的式(I)化合物，其中X与R1-R7均具有所给定的含义。
本发明也关于药物制剂，它含有一种或多种通式(I)化合物，其中X与R1-R7均具有所给定的含义，或其生理学上可接受的盐，作为活性物质，视情况与惯用的赋形剂及/或载剂组合。
本发明又一目的是制备通式(I)化合物的方法， 其中R1-R7与X均如上文所定义，其特征在于使通式(II)化合物与视情况经取代的通式(III)化合物反应 式(II)中R1-R5与X均如上文所定义，且L为去离基，
式(III)中R6与R7如前文定义。
本发明也关于式(II)化合物， 其中R1-R5与X都如上文所定义。式(II)化合物为用于制备本发明式(I)化合物的重要中间产物。
本发明亦关于制备通式(I)化合物的方法， 其中R6表示以下通式的基团， R9表示视情况经取代的基团-CONH-C1-C10-亚烷基，或选自-CONR8-C1-C10-烷基-Q1、-CONR8-C2-C10-烷基-Q1、-CONR8-Q2及-COOR8中之一的基团，且R1-R5、R7、R10、n及X均如上文所定义，其特征在于使通式(IA)化合物与伯胺或仲胺反应，以形成其相应的酰胺，或与醇反应，以形成其相应的酯。
式(IA)中R1至R5、R7至R10都如上文所定义，及L表示去离基，作为烷基及包括是其他基团一部分的烷基，是具有1至10个碳原子，较佳为1-6个，最佳为1-4个碳原子的支链与直链烷基，例如甲基、乙基、丙基、丁基、戊基、己基、庚基、辛基、壬基及癸基。除非另有说明，否则上文所提及的术语丙基、丁基、戊基、己基、庚基、辛基、壬基及癸基，包括所有可能的异构体形式。例如，丙基一词包括两种异构基团，正-丙基与异丙基，丁基一词是包括正-丁基、异丁基、仲丁基及叔-丁基，戊基一词是包括异戊基、新戊基等。
在上文所提及的烷基中，一个或多个氢原子可视情况被其他基团置换。例如，这种烷基可被卤原子氟、氯、溴或碘取代。取代基氟与氯为优选。特佳为取代基氯。烷基的所有氢原子，亦可视情况被置换。
同样地，在上文所提及的烷基中，除非另有说明，否则一或多个氢原子可视情况被置换，例如视情况经取代的基团，选自CN、OCOCH3、芳基、优选为苯基、杂芳基、较佳为噻吩基、噻唑基、咪唑基、吡啶基、嘧啶基或吡嗪基，饱和或不饱和杂环烷基，优选为吡唑基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基或四氢噁嗪基、氨基，优选为甲氨基、苄氨基、苯氨基或杂芳基氨基，饱和或不饱和双环状环系统，优选为苯并咪唑基，及环烷基，优选为环己基或环丙基。
作为烷基桥基，除非另有说明，其表示具有2至5个碳原子的支链与直链烷基，例如亚丙基、异亚丙基、正-亚丁基、异丁基、仲丁基及叔-丁基等桥基。优选为亚丙基与亚丁基桥基。在所提及的烷基桥基中，1至2个碳原子可视情况被一个或多个选自氧、氮或硫中的杂原子置换。
作为烯基一词(包括成为其他基团的一部分)表示具有2至10个碳原子，较佳为2-6个碳原子，最佳为2-3个碳原子的支链或直链烯基，其条件是具有至少一个双链。实例包括乙烯基、丙烯基、丁烯基、戊烯基等。除非另有说明，上文所提及的术语丙烯基、丁烯基等，亦包括所有可能的异构形式。例如，丁烯一词是包括正-丁烯基、1-甲基丙烯基、2-甲基丙烯基、1，1-二甲基乙烯基、1，2-二甲基乙烯基等。
在上文所提及的烯基中，除非另有说明，其一个或多个氢原子可视情况被其他基团置换。例如，这种烷基可被卤原子氟、氯、溴或碘取代。优选的取代基为氟与氯。取代基氯为特佳。烯基的所有氢原子可视情况被置换。
作为炔基(包括成为其他基团一部分的)是表示具有2至10个碳原子的支链或直链炔基，其条件是其具有至少一个三链，例如乙炔基、炔丙基、丁炔基、戊炔基、己炔基等，优选为乙炔基或丙炔基。
在上文所提及的炔基中，除非另有说明，其一个或多个氢原子可视情况被其他基团置换。例如，这种烷基可被卤原子氟、氯、溴或碘取代。优选为取代基氟与氯。取代基氯为特佳。炔基的所有氢原子亦可视情况被置换。
芳基一词是表示具有6至14个碳原子，优选为6或10个碳原子，较佳为苯基的芳族环系统，除非另有说明，其可带有一或多个下列取代基，例如OH、NO2、CN、-OCHF2、-OCF3、-NH2，卤素，例如氟、氯、溴或碘，优选为氟或氯，C1-C10-烷基，优选为C1-C5-烷基，优选为C1-C3-烷基，最佳为甲基或乙基、-O-C1-C3-烷基，优选为-O-甲基或-O-乙基，-N-甲基-四氢-噁嗪基，-COOH，-COO-C1-C4-烷基，优选为-COOCH2CH3，-COO-C(CH3)3或-COOCH3，-CONH2，-CONH-C1-C10-烷基，而其中这烷基可视情况进一步经取代，视情况经取代的-CONH-C3-C6-环烷基，优选为视情况经取代的-CONH-环戊基，视情况经取代的-CONH-杂环烷基，优选为哌啶基、吡咯烷基或哌嗪基，视情况经取代的-CONH-杂芳基，优选为视情况经取代的-CONH-吡啶基，视情况经取代的-CONH-芳基，较佳为视情况经取代的-CONH-苯基，-CONMeC1-C3-烷基，而其中这烷基可视情况进一步经取代，优选为-CONMeCH2-吡啶基，苯并咪唑，或下式基团
作为5-10-员单-或双环状杂芳基环，其中至多三个C-原子可被一个或多个选自氧、氮或硫中的杂原子置换，其实例包括呋喃、噻吩、吡咯、吡唑、咪唑、三唑、四唑、吡啶、哒嗪、嘧啶、吡嗪、三嗪、噁唑、异噁唑、噻唑、噻二唑及噁二唑，而其中各上述杂环亦可视情况可稠合在苯环上，较佳为苯并咪唑，且除非另有说明，这些杂环可例如带有一个或多个下列取代基OH、NO2、CN、-OCHF2、-OCF3、-NH2，卤素，优选为氟或氯，C1-C10-烷基，优选为C1-C5-烷基，优选为C1-C3-烷基，最佳为甲基或乙基，-O-C1-C3-烷基，优选为-O-甲基或-O-乙基，-甲基-N-四氢-噁嗪基，-COOH，-COO-C1-C4-烷基，优选为-COO-C(CH3)3或-COOCH3，-CONH2，视情况经取代的苯基，视情况经取代的杂芳基，优选为视情况经取代的吡啶基或吡嗪基，-CONH-C1-C10-烷基，而其中这烷基本身可视情况经取代，视情况经取代的-CONH-C3-C6-环烷基，优选为视情况经取代的-CONH-环戊基，视情况经取代的-CONH-杂芳基，优选为视情况经取代的-CONH-吡啶基，视情况经取代的-CONH-芳基，优选为视情况经取代的-CONH-苯基，-CONMeC1-C3-烷基，而其中这烷基本身可视情况经取代，优选为-CONMeCH2-吡啶基，苯并咪唑或下式基团 作为环烷基表示具有3-8个碳原子的饱和或不饱和环烷基，例如环丙基、环丁基、环戊基、环戊烯基、环己基、环己烯基、环庚基或环辛基，优选为环丙基、环戊基或环己基，而其中各上述环烷基亦可视情况带有一或多个取代基，优选为＝O，或可稠合在苯环。
“＝O”是表示通过由双键连结的氧原子。
作为杂环烷基，除非在定义中另有说明，可表示5-、6-或7-员饱和或不饱和杂环，其可含有氮、氧或硫作为杂原子，例如四氢呋喃、四氢呋喃酮、γ-丁内酯、α-吡喃、γ-吡喃、二氧伍环、四氢吡喃、二噁烷、二氢噻吩、硫伍环(Thiolan)、二硫伍环、吡咯啉、吡咯烷、吡唑啉、吡唑烷、咪唑啉、唑咪烷、四唑、哌啶、哒嗪、嘧啶、吡嗪、哌嗪、三嗪、四嗪、吗啉、硫代吗啉、二氮杂、噁嗪、四氢噁嗪基、异噻唑及吡唑烷，优选为吡唑基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基或四氢噁嗪基，其中杂环可视情况经取代。
作为卤素一般表示氟、氯、溴或碘。
作为去离基L表示相同或不同的去离基，例如氯、溴、碘、甲磺酰基、三氟甲磺酰基或对-甲苯磺酰基，优选为氯。
根据本发明的化合物可以以个别光学异构体的形式，个别对映体的混合物，非对映异构体或外消旋物存在，呈互变异构体的形式，以及呈游离态碱的形式，或其与药理学上可接受的相应酸加成盐，例如与氢卤酸，例如氢氯酸或氢溴酸，或有机酸类，例如草酸、富马酸、二乙醇酸或甲磺酸的酸加成盐。
取代基R1可表示选自以下中之一的基团，氢，NH2，XH，优选为OH，卤素，优选为氟或氯，及视情况可被一个或多个，优选为一、二或三个卤原子，优选为氟或氯取代的C1-C3-烷基，优选为甲基或乙基。取代基R1最佳为氢。
取代基R2可表示选自以下中之一的基团，氢，CHO，XH，优选为OH，-X-C1-C2-烷基，优选为-O-CH3或-O-CH2CH3，及视情况经取代的C1-C3-烷基，而其中烷基优选为包含1至2个碳原子，优选为一个碳原子，且可视情况经取代，优选是被卤原子，最佳被氟原子。特别是，取代基R2表示甲基。
取代基R3与R4可为相同或不同，并可表示选自以下中的一种基团，视情况经取代的C1-C10-烷基，优选为C1-C6-烷基，较佳为C1-C4-烷基，最佳为甲基、乙基或丙基，特佳为甲基或乙基，C2-C10-烯基，较佳为乙烯基或丙烯基，较佳为乙烯基，C2-C10-炔基，优选为乙炔基或丙炔基，芳基，优选为视情况经取代的苯基，杂芳基，C3-C8-环烷基，优选为环丙基与环丁基，C3-C8-杂环烷基，-X-芳基，-X-杂芳基，-X-环烷基，-X-杂环烷基，-NR8-芳基，-NR8-杂芳基，-NR8-环烷基及-NR8-杂环烷基，或选自氢、卤素、COXR8、CON(R8)2、COR8及XR8中之一的基团，优选为氢，或基团R3与R4可一起表示2-至5-员烷基桥基，优选为亚乙基、亚丙基或亚丁基桥基，其中亚丙基或亚丁基桥基可含有1至2个杂原子，优选为氧、氮或硫，最佳为亚乙基桥基。
取代基R3最佳表示甲基或乙基。取代基R4最佳表示氢或甲基。特佳为其中R3与R4均表示甲基的化合物。
于R3与R4定义中的所有基团，可视情况经取代。
基团R5可代表氢，或选自以下中之一的基团，视情况经取代的C1-C10-烷基，例如C1-C6-烷基-芳基或C1-C6-烷基-杂芳基，优选为C1-C6-烷基，最佳为C1-C5-烷基，特佳为丙基、丁基、戊基、己基、-CH2-环己基、(CH2)1-2环丙基或(CH2)4-OCOCH3，C2-C10-烯基，优选为丙烯基、丁烯基、戊烯基或己烯基，优选为丙烯基或己烯基，C2-C10-炔基，优选为丙炔基、丁炔基或戊炔基，优选为丙炔基，芳基，优选为苯基、杂芳基、-C3-C6-环烷基，优选为环丙基、环丁基、环戊基或环己基，及-C3-C6-环烯基，优选为环己烯基或环戊烯基，或取代基R3与R5或R4与R5一起表示饱和或不饱和C3-C4-烷基桥基，其可含有1至2个杂原子，优选为氧、硫或氮。
于R5定义中的所有基团，可视情况经取代。
取代基R6可表示视情况经取代的芳基或杂芳基，优选为芳基，较佳为苯基。
取代基R6最佳是苯基，其可被下文所述的基团R9与R10之一取代，而其中苯环可带有一个基团R9，优选在对位，及基团R10的一、二、三或四个，优选为一或两个，优选是在邻或间位。
取代基R7可表示氢或-CO-X-C1-C4-烷基，优选为氢。
X于各情况中为互相独立的O或S，优选为O。
在取代基R3与R4的定义中的基团R8，在各情况中是互相独立地是氢，或选自以下中之一的基团，视情况经取代的C1-C4-烷基、C2-C4-烯基、C2-C4-炔基及苯基，优选为氢或C1-C2-烷基。
取代基R9可表示选自以下中之一的基团，视情况经取代的C1-C6-烷基，优选为C1-C4-烷基，较佳为甲基、乙基或丙基，最佳为甲基，C2-C6-烯基，C2-C6-炔基，-CONH-C1-C10-亚烷基，优选为-CONH-C1-C3-亚烷基，优选为-CONH-C1-C2-亚烷基，-O-芳基，优选为O-C6-C10-芳基，最佳为O-苯基，-O-杂芳基，-O-环烷基，优选为O-C3-C6-环烷基，最佳为O-环丙基，-O-杂环烷基，芳基，优选为C6-C10-芳基，最佳为苯基，杂芳基，环烷基，优选为C3-C6-环烷基，最佳为环丙基，及杂环烷基，或选自以下中之一的基团，-O-C1-C6-烷基-Q1、-CONR8-C1-C10-烷基-Q1、-CONR8-C1-C10-烯基-Q1、-CONR8-Q2，卤素，例如氟、氯、溴或碘，OH、-SO2R8、-SO2N(R8)2、-COR8，-COOR8、-N(R8)2、-NHCOR8、CONR8OC1-C10-烷基Q1及CONR8OQ2，其中Q1与Q2均如上文定义。
R9优选为下列基团之一，-CONH-C1-C10-烷基，优选为-CONH-C1-C3-烷基，最佳为-CONH-C1-C2-烷基，而其中这烷基本身可视情况被CN，视情况经取代的芳基，优选为视情况经取代的苯基，杂芳基，优选为噻吩基、噻唑基、咪唑基、吡啶基、嘧啶基或吡嗪基，饱和或不饱和杂环基，优选为吡唑基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基或四氢噁嗪基，氨基，优选为甲氨基、苄氨基、苯氨基或杂芳基氨基，饱和或不饱和双环状环系统，优选为苯并咪唑基，及环烷基，优选为环己基所取代。
再者，R9优选表示-CONH-杂芳基，优选为-CONH-吡啶基，-CONH-C3-C10-环烷基，优选为-CONH-环丙基、-CONH-环丁基或-CONH-环戊基，最佳为-CONH-环丙基；-CONH-C3-C10-杂环烷基，-CONH-C6-C10-芳基，优选为-CONH-苯基，COO-C1-C3-烷基，最佳为COOCH3、COOH，卤素，优选为氯、OH或下式基团 于R9定义中的所有基团，可视情况经取代，优选被一或多个选自OH、OCH3、Cl、F、CH3、COOH、CONHCH2Ph及CONHCH2-吡嗪基-CH3中之一的基团取代。
取代基R10于各情况中可为相同或不同，且可表示选自以下中之一的基团，视情况经取代的C1-C6-烷基，优选为C1-C3-烷基，C2-C6-烯基，优选为C2-C3-烯基，及C2-C6-炔基，优选为C2-C3-炔基，-O-C1-C6-烷基，优选为-O-C1-C3-烷基，-O-C2-C6-烯基，-O-C2-C6-炔基，C3-C6-杂环烷基及C3-C6-环烷基，或选自以下中之一的基团，氢、-CONH2、-COOR8、-OCON(R8)2、-N(R8)2，-NHCOR8、-NHCON(R8)2、-NO2及卤素，例如氟、氯、溴或碘。
取代基R10优选表示氢、甲基、甲氧基、氟或氯，最佳为氢或甲氧基，特佳为甲氧基。
相邻基团R9与R10可一起表示以下通式的桥基 其中Y表示O、S或NR11，优选为NR11，M表示0，1或2，优选为1，R11表示氢或C1-C2-烷基，优选为氢或甲基，最佳为氢，R12表示氢，或选自以下中之一的基团，视情况经取代的苯基、吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、哒嗪基、-C1-C3-烷基-苯基、-C1-C3-烷基-吡啶基、-C1-C3-烷基-吡嗪基、-C1-C3-烷基-嘧啶基及-C1-C3-烷基-哒嗪基，优选为苯基、吡啶基及吡嗪基，及R13表示C1-C6-烷基，优选为甲基或乙基。
根据本发明的化合物可通过下文所述的合成方法A与B进行制备，而其中通式(A1)至(A6)的取代基都具有上文所给的含义。应理解这种方法为说明本发明，而非限制于该主题。
方法A步骤1A使式(A1)化合物与式(A2)化合物反应，以获得式(A3)化合物(流程1A)。此反应可根据WO 0043369或WO 0043372进行。化合物(A1)可市购而得自例如City化学LLC，139 Allings Crossing Road，West Haven，CT，06515，USA。化合物(A2)可通过文献上已知的程序制成(a)F.Effenberger，U.Burkhart，J.Willfahrt Liebigs，Ann.Chem.1986，314-333；b)T.Fukuyama，C.-K.Jow，M.Cheung，Tetrahedron Lett.1955，36，6373-6374；c)R.K.Olsen，J.Org.Chem.1970，35，1912-1915；d)F.E.Dutton，B.H.Byung；Tetrahedron Lett.1998，30，5313-5316；e)J.M.Ranajuhi，M.M.Joullie，Synth.Commun.1996，26，1379-1384)。
流程1A 于步骤1A中，将1当量化合物(A1)，与1至1.5当量，优选为1.1当量的碱，优选为碳酸钾、碳酸氢钾、碳酸钠或碳酸氢钠、碳酸钙，最佳为碳酸钾，在稀释剂中搅拌，例如丙酮、丙酮水溶液、四氢呋喃、乙醚或二噁烷，优选为丙酮或乙醚，最佳为丙酮。于0至15℃，优选为5至10℃的温度下，逐滴添加已溶于有机溶剂，例如丙酮、四氢呋喃、乙醚或二噁烷，较佳为丙酮中的1当量式(A2)氨基酸。将反应混合物在搅拌下加热至18℃至30℃，优选为约22℃的温度，然后继续搅拌10至24小时，优选为约12小时。然后，蒸馏出稀释剂，将残留物与水合并，并将混合物以有机溶剂，如乙醚或醋酸乙酯，优选为醋酸乙酯，萃取二至三次。使合并的有机萃取液脱水干燥，并蒸馏出溶剂。残留物(化合物A3)可使用于步骤2而无需任何预先纯化。
步骤2A使步骤1A中获得的化合物(A3)在硝基处还原，并环化而形成式(A4)化合物(流程2A)。
流程2A 在步骤2A中，使1当量硝基化合物(A3)溶于酸中，优选为冰醋酸、甲酸或盐酸，较佳为冰醋酸，并加热至50至70℃，优选为约60℃。然后，添加还原剂，例如锌、锡或铁，优选为铁屑，以完成这放热反应，并将混合物在100至125℃下，优选在约117℃下搅拌0.2至2小时，优选0.5小时。于冷却至环境温度后，滤除铁盐，并蒸馏出溶剂。使残留物溶于溶剂或溶剂混合物中，例如醋酸乙酯或二氯甲烷/甲醇9/1及半饱和NaCl溶液，并经过例如硅藻土过滤。使有机相脱水干燥及蒸干。残留物(化合物(A4))可通过色层或通过结晶化作用纯化，或作为合成步骤3A中的粗产物使用。
步骤3A在步骤2A中获得的化合物(A4)，可如流程3A中所示，通过亲电子性取代而进行反应，获得式(A5)化合物。
流程3A 在步骤3A中，使1当量式(A4)酰胺溶于有机溶剂中，例如二甲基甲酰胺或二甲基乙酰胺，优选为二甲基乙酰胺，并冷却至约-5℃至5℃，优选为0℃。然后，添加0.9至1.3当量氢化钠与0.9至1.3当量烷基卤化物，例如碘代甲烷。将反应混合物在约0至10℃下，优选在约5℃下搅拌0.1-3小时，优选约1小时，并可视情况在这温度下再放置12小时。使反应混合物蒸干，并以水及有机溶剂，优选为二氯甲烷或醋酸乙酯萃取。使有机相蒸干。残留物(化合物(A5))可通过柱色层纯化，优选是在硅胶上纯化。
步骤4A胺化在步骤3A中所获得化合物(A5)而产生式(A7)化合物(流程4A)，可使用文献上已知的改型4.1A的方法进行(a)M.P.V.Boarland，J.F.W.McOmie，J.Chem.Soc.1951，1218-1221；b)F.H.S.Curd，F.C.Rose J.Chem.Soc.1946，343-348.，4.2A(a)Banks J.Am.Chem.Soc.1944，66，1131，b)Ghosh与Dolly J.Indian Chem.Soc.1981，58，512-513。
流程4A 例如，在改型4.1A中，是将1当量化合物(A5)，与1至3当量，优选为约2当量的化合物(A6)不使用溶剂，或在有机溶剂中，例如环丁砜、二甲基甲酰胺、二甲基乙酰胺、甲苯、N-甲基吡咯烷酮、二甲基亚砜或二噁烷，优选为环丁砜，在100至220℃下，优选于约160℃下加热0.1至4小时，优选为1小时。冷却后，通过添加有机溶剂或溶剂混合物，例如乙醚/甲醇、醋酸乙酯、二氯甲烷或乙醚，优选为乙醚/甲醇9/1，使产物(A7)结晶，或通过色层纯化。
例如，在变型4.2A中，将1当量的化合物(A5)与1至3当量的化合物(A6)，以及酸，例如1-10当量的10-38％盐酸，和/或醇，例如乙醇、丙醇、丁醇，优选为乙醇，在回流温度下一起搅拌1至48小时，优选为约5小时。
滤出已沉淀的产物(A7)，并视情况以水洗涤，脱水干燥，并由适当有机溶剂中结晶。
若R6表示视情况经取代的苯并咪唑，则可使用文献上已知的如按下流程中所示的方法制备化合物(A6)
因此，例如将33毫摩尔化合物(Z1)、49毫摩尔化合物(Z2)及49毫摩尔1-乙氧羰基-2-乙氧基二氢喹啉(EEDQ)在50毫升有机溶剂，优选在二甲基甲酰胺中，在约100至130℃下，优选在约115℃下，搅拌1至4小时，优选为约3小时，然后，将已冷却的反应溶液添加至50至400毫升，优选为约200毫升的水/醋酸乙酯混合物(混合比约1∶1)中。将所形成的结晶(Z3)抽滤并洗涤。
然后，将4.2毫摩尔的化合物(Z3)与12.5毫摩尔的氯化锡(II)及30毫摩尔碳酸钾，在约50毫升的有机稀释剂，优选醋酸乙酯中，在约22℃下，一起搅拌4至48小时，优选约24小时。在添加22克硅藻土后，将混合物以有机稀释剂或稀释剂混合物，优选使用二氯甲烷/甲醇(9∶1)的混合物进行萃取，使合并的萃液蒸干，并将所形成的沉淀物(Z4)或所形成的结晶(Z4)分离。
步骤5A若R9表示-CONR8-C1-C10-烷基-Q1、-CONH-C1-C5-亚烷基或-CONR8-Q2，其中取代基都具有上文所给的意义，则根据本发明的化合物可使用文献上已知的方法，例如按流程5A中所示进行制备。
可使步骤4A中所获得的化合物质(A7′)进行反应，无论是通过皂化作用，并接着氨化，以获得通式(A10)酰胺(流程(5A)改型5.1A)，或通过皂化作用，并接着转化成氯化酰(A9)并接着胺化(流程(5A)变型5.2A)。
流程5A 变型5.1A在变型5.1A中，例如，将20毫摩尔酯(A7′)在约100毫升碱，优选为1N氢氧化钠溶液或氢氧化锂溶液，及约500毫升醇，例如与乙醇，二噁烷或甲醇，优选为甲醇中，一起加热，直到酯完全反应为止。然后，蒸馏出醇。使残留物溶于约200毫升水中，并用酸，例如盐酸，优选使用2N盐酸进行酸化，同时冷却。滤出产物(A8)并干燥。
例如，使约0.5毫摩尔化合物(A8)与约0.5毫摩尔四氟硼酸O-苯并三唑基-N，N，N′，N′-四甲基(TBTU)及约1.4毫摩尔二异丙基乙胺(DIPEA)溶解在约5毫升的有机稀释剂中，例如四氢呋喃、二甲基甲酰胺、N-甲基吡咯烷酮、二甲基乙酰胺，优选为二甲基甲酰胺。在添加约0.75毫摩尔，用于形成取代基R9的胺之后，将反应混合物于20℃至100℃下，搅拌0.1至24小时，较佳约12小时。例如通过结晶化作用或色层纯化而获得式(A10)产物。
变型5.2A在变型5.2A中，使例如约1毫摩尔酸(A8)悬浮于约2.7毫升亚硫酰氯中。将混合物加热至40℃至80℃，优选约50℃，并于恒温搅拌下，滴加2至10滴，优选约3滴二甲基甲酰胺至反应混合物中。然后，在90℃下持续搅拌，直到反应完成为止。蒸馏出过量的亚硫酰氯。使约1毫摩尔所形成的酰基氯(A9)溶于约30毫升有机稀释剂，例如二氯甲烷中，在添加用于形成取代基R9的胺之后，将混合物在约22℃下搅拌。滤出所形成的沉淀物，并以水洗涤。将留下的残留物以有机稀释剂例如甲醇洗涤。使母液通过例如色层纯化，并蒸干。留下产物(A10)。
方法B替代上述方法，可按示于流程B的文献已知方法进行，在步骤1A后，首先使化合物(A3)胺化，然后可使产物(B1)环化，而产生化合物(B2)。化合物(B2)的进一步取代，可例如按步骤3A进行产生化合物(A7)。
流程B
新颖通式(I)化合物可类似于下述合成例合成而得。但是，这些实施例仅作为进一步说明本发明程序的实例，并不将限制本发明在其主题事项。
实施例63和实施例109为合成化合物63与109，首先将中间化合物4 按下文所述进行制备。
将38.9毫升(0.263摩尔)2-溴基丁酸乙酯与36.4克(0.263摩尔)碳酸钾，置于350毫升醋酸乙酯中，然后迅速滴加已溶于70毫升醋酸乙酯中的46.7毫升(0.402摩尔)异戊胺。混合物回流加热20小时。滤出所形成的盐，使滤液通过蒸发浓缩，与50毫升甲苯合并，及再一次蒸发至干涸。
产量54.3克化合物1(红色油)使已溶于400毫升丙酮中的54.3克化合物1，与30.7克(0.222摩尔)碳酸钾，在冷却至8℃下进行搅拌，与43.1克(0.222摩尔)2，4-二氯-5-硝基嘧啶在250毫升丙酮中的溶液合并，然后在室温下搅拌24小时。
将所形成的悬浮液通过蒸发浓缩，将残留物以水及醋酸乙酯萃取，有机相以水及NaCl溶液洗涤，以MgSO4脱水干燥，并蒸发至干。
产量87.3克化合物2(褐色油)使44.1克化合物2溶于800毫升冰醋酸中，并加热至65℃，且分批添加36克铁屑。然后，将混合物在70℃下搅拌3小时，滤出沉淀物，并使滤液通过蒸发浓缩。
将残留物以二氯甲烷/甲醇90∶10形式加到硅胶上，通过蒸发浓缩，并通过柱色层析纯化(淋洗液醋酸乙酯/环己烷1∶1)。
使残留物从醋酸乙酯/石油醚中沉淀。
产量16.1克化合物3(米黄色粉末)使16.1克化合物3溶于75毫升二甲基乙酰胺中，并在氮气氛下冷却至5℃，并搅拌。然后，添加2.51克(0.063摩尔)NaH，在矿油中的60％分散液，其中温度暂时上升至16℃。30分钟后，添加已溶于75毫升二甲基乙酰胺中的3.94毫升(0.063摩尔)碘代甲烷，并将混合物在22℃下搅拌24小时。
使溶剂通过蒸发浓缩，与200毫升水合并，并将所形成的沉淀物抽滤，然后通过与石油醚一起搅拌，进行萃取。
产量15.1克化合物4(黄色粉末)1H-NMR(250MHz)＝7.80(1Hs)，4.35(m，1H)，3.92(m，1H)，3.22(s，3H)，3.14(m，1H)，1.81(m，2H)，1.60-1.40(m，3H)，0.90(m，6H)，0.70(t，3H).
实施例63的合成使2.5克化合物4、1.43克4-氨基-3-甲氧基苯甲酸、1.25毫升浓盐酸，150毫升蒸馏水及37.5毫升乙醇加热回流10小时。滤出沉淀物，以水洗涤，并在甲醇中搅拌进行萃取。然后，使用石油醚与醚，使沉淀物再结晶。
产量1.6克化合物5(白色粉末)使0.2克化合物5、5毫升苄基胺、0.16克TBTU、0.17克DIPEA溶于2毫升二甲基甲酰胺(DMF)中，并于环境温度下搅拌48小时。然后，使反应混合物溶于二氯甲烷中，以水洗涤，并将有机相蒸干。当添加石油醚/醋酸乙酯9∶1时，产物是以淡米黄色结晶沉淀。
产量0.18克。溶点178℃实施例109的合成使5克2-氨基-5-硝基苯胺，6.03克4-吡啶基羧酸、12.1克EEDQ溶于50毫升DMF中，并于115℃下搅拌1.75小时，然后在真空中蒸馏出DMF，接着将反应混合物在180℃加热1小时。使残留物溶于30毫升DMF中，并与200毫升水及100毫升醋酸乙酯合并。滤出所获得的晶体，并以水、醋酸乙酯及醚洗涤。
产量5.8克化合物6将2克化合物6与0.2克5％Pd/C在30毫升乙醇中合并，并在氢存在下进行氢化。然后，使其蒸干，并从乙醇及甲苯中结晶。
产量1.75克化合物7的白色粉末。
使0.2克化合物5、0.28克化合物7、0.001克叔丁醇钠、2.5毫升乙二醇二甲基醚、0.006克醋酸钯(II)及0.22克2-(二-叔丁基膦基)联苯溶于1.5毫升N-甲基吡咯烷酮(NMP)中。然后，将混合物在160℃加热0.5小时。接着，使反应混合物在20克硅胶上纯化，并使产物自醚、醋酸乙酯及石油醚中结晶。
产量0.04克黄色晶体。熔点180℃实施例218、58及4为合成化合物218、58及4，首先将中间化合物11 按下文所述进行制备。
使55.8克DL-丙胺酸甲酯xHCl溶于500毫升甲醇中，然后添加76.1毫升30％甲醇钠溶液，并滤出该盐。将37.8克三甲基乙醛添加至滤液中，然后放置22小时。接着，添加9.5克10％Pd/C，并使混合物在0.5巴及20℃下氢化3.1小时。使反应混合物经过硅藻土抽滤，并蒸发浓缩。使残留物溶于乙醚中，使盐经过硅藻土过滤，并蒸发浓缩滤液。
产量55.8克化合物8(透明液体)将48.5克2，4-二氯-5-硝基嘧啶置于400毫升乙醚中，添加在400毫升水中的41.0克碳酸氢钾，并冷却至-5℃。使43.3克化合物8溶于400毫升乙醚中，并于-5℃下逐滴添加。将混合物在-5℃下搅拌1小时，并在0℃下2小时，然后加热至环境温度，及将反应混合物放置24小时。
分离有机相，在MgSO4上脱水干燥，并蒸发至干涸。
产量79.2克化合物9(黄色树脂)使79.0克化合物9溶于1000毫升冰醋酸中，并在70℃加热。移除热源后，分批添加52克铁。使温度上升至约110℃，并将混合物在该温度下搅拌1小时。将悬浮液趁热过滤，并使滤液蒸发浓缩。
使残留物溶于醋酸乙酯中，并与150毫升浓HCl合并，分离有机相，并将水相以二氯甲烷萃取多次。将合并的有机相蒸发浓缩，施加到硅胶上，并通过柱色层纯化(淋洗剂石油醚/醋酸乙酯1∶1)。
由于分离的物质仍然高度污染，故将其再一次于硅胶上纯化。所要的化合物以结晶析出，抽滤晶体。蒸发浓缩母液，并从醋酸乙酯/乙醚再结晶。
产量17.63克化合物10将7.6克化合物10与6.4毫升碘代甲烷置于75毫升二甲基乙酰胺(DMA)中，并冷却至-15℃。分批添加1.25克NaH，在矿物油中的60％分散液，并于-10℃至-5℃下搅拌30分钟。然后，添加150毫升冰水，抽滤结晶，并以水及石油醚洗涤。使结晶溶于二氯甲烷中，经硅藻土过滤，并蒸发滤液至干。将其从石油醚中再结晶。
产量6.3克化合物11(米黄色结晶)1H-NMR(250MHz)＝7.73(1H，s)，4.35(d，1H)，4.25(m，1H)，3.35(s，3H)，2.55(d，1H)，1.31(d，3H)，0.95(s，9H).
实施例218的合成将0.2克化合物11、3，5-二氟-4-羟基苯胺及0.75毫升环丁砜在130℃加热15分钟，在140℃加热15分钟，及在170℃加热10分钟。然后，将混合物与醚合并，倾析上层清液，并使残留物从甲醇/醚结晶，及再一次从甲醇再结晶。
产量0.15克白色结晶。熔点＞250℃实施例4的合成于100℃下，使6.3克化合物11溶于25毫升环丁砜中，然后与4.0克4-氨基苯甲酸乙酯合并，并在170℃加热1小时。接着，将混合物与50毫升醚合并。在结晶化作用开始后，添加另外50毫升醚与50毫升甲醇。使结晶从甲醇再结晶。
产量6.6克化合物12(黄色结晶)，熔点65℃分解凝固使3.55克化合物12悬浮于250毫升甲醇中，并在60℃下，与25毫升4N氢氧化钠溶液合并。6小时后，添加15毫升冰醋酸，滤出所形成的结晶，并以甲醇/醚洗涤。
产量1.2克化合物13(白色结晶)使1.5克化合物13溶于7.5毫升亚硫酰氯中，并在80℃加热1小时。然后，藉蒸馏掉亚硫酰氯，将残留物与醚一起搅拌，抽滤结晶，并以醚洗涤。
产量1.7克化合物14(黄色结晶)使0.18克3-氨基吡啶溶于10毫升四氢呋喃(THF)中，并与0.4毫升三乙胺合并。然后，添加0.22克化合物14，并将混合物于环境温度下搅拌16小时。使混合物蒸发至干，溶于醋酸乙酯中，以水萃取，再一次蒸干，并使产物从醋酸乙酯结晶。
产量0.07克(米黄色结晶)，熔点215-216℃实施例58的合成使0.05克化合物13悬浮于10毫升二氯甲烷中，然后与0.15毫升DIPEA及0.05克TBTU合并。接着，将此溶液搅拌30分钟，并与0.01毫升4-甲基吡啶胺合并。18小时后，将混合物与20毫升水合并，分离有机相，并将产物通过硅胶色层纯化，然后从醋酸乙酯/石油醚再结晶。
产量0.044克(白色结晶)，熔点238-240℃实施例65与125为合成化合物65与125，首先将中间化合物18 按下文所述进行制备。
使28.3克异丁基胺、36克R，S-2-溴基丙酸乙酯及28克碳酸钾，在150毫升醋酸乙酯中加热回流6小时。冷却后，抽滤该盐，蒸发浓缩母液。
将残留物与100毫升甲苯合并，并蒸发至干。
产量37.2克化合物15(黄色油)将38.4克2，4-二氯-5-硝基嘧啶置于300毫升乙醚中，添加在300毫升水中的30克碳酸氢钾，并使混合物冷却至0℃。使37.0克化合物15溶于300毫升乙醚中，并在0℃-3℃下逐滴添加。3小时后，分离液相，使有机相脱水干燥并蒸发至干。
产量71.6克化合物16使40.0克化合物16溶于300毫升冰醋酸中，并加热至70℃。在移除热源后，分批添加30克铁。使温度上升至110℃。使反应混合物冷却至90℃，并在该温度下搅拌20分钟。然后，趁热过滤，并蒸发浓缩滤液。将残留物与300毫升水及300毫升二氯甲烷一起搅拌，并经过硅藻土过滤。分离液相。将有机相以水洗涤，以MgSO4脱水干燥，并蒸发至干。由石油醚萃取。
产量26.7克化合物17将15.0克化合物17置于100毫升DMA中，添加4.13毫升碘代甲烷，并使混合物冷却至5℃。分批添加2.60克NaH在矿物油中的60％分散液。使温度上升至13℃。30分钟后，添加300毫升冰水，抽滤已沉淀的结晶，并以石油醚洗涤。
产量13.9克化合物181H-NMR(250MHz)＝7.95(1H，s)，4.30(m，1H)，3.95(m，1H)，3.24(s，3H)，2.95(m，1H)，2.05(m，1H)，1.30(d，3H)，0.96(d，3H)，0.92(d，3H).
实施例65的合成将2.1克化合物18与4-氨基苯甲酸乙酯在10毫升环丁砜中合并，并于160℃下搅拌2小时。然后，添加醚，并将已沉淀的结晶以醚洗涤。
产量3.0克化合物19将3克化合物19与200毫升甲醇及25毫升4N NaOH合并，并在60℃下搅拌4小时。然后，添加冰醋酸，将已沉淀的结晶滤出，并以醚洗涤。
产量2.3克化合物20(白色结晶)使0.1克化合物20悬浮于3毫升二氯甲烷与3毫升DMF中，然后与0.13克DIPEA、0.095克TBTU及0.045克羟基苯并三唑(HOBT)合并。接着，搅拌溶液30分钟，并与0.035克N-甲基-3-甲基吡啶胺合并。0.5小时后，将混合物与水及1克碳酸钾合并，将水相以50毫升醋酸乙酯萃取两次，并使产物通过硅胶色层纯化，然后从乙醇/丙酮再结晶。
产量0.08克实施例125的合成使3.7克化合物20、3.8克TBTU、1.6克HOBT、5毫升DIPEA溶液溶解在40毫升DMF中，并于环境温度下搅拌4小时。使混合物蒸干，溶于200毫升醋酸乙酯中，并以5毫升5％碳酸钾溶液萃取两次。使有机相蒸干，滤出已沉淀的结晶，并以醋酸乙酯与乙醚洗涤。
产量1.65克化合物21(黄色结晶)将0.486克化合物21与0.33克1，2-苯二胺在10毫升甲苯中，加热回流0.5小时，然后使混合物蒸干。将残留物与100毫升醋酸乙酯合并，有机相以水萃取两次。使有机相蒸干，抽滤已沉淀的结晶，并以少量醋酸乙酯洗涤。
产量0.25克化合物22(白色结晶)
将0.22克化合物22置于20克多磷酸中，在150℃下搅拌0.5小时，然后将混合物倾倒在冰上，并添加氨水。然后，以100毫升醋酸乙酯萃取两次，将有机相以水洗涤，并蒸干。抽滤已沉淀的产物(结晶)，并以醋酸乙酯与乙醚洗涤。
产量0.115克黄色结晶，熔点287℃(分解)实例171为合成化合物171，首先中间化合物27 将34.4克N-异戊基-苄胺、36.2克2-溴-丙酸乙酯及42.0克碳酸钾置于250毫升DMF中，并在110℃下搅拌3小时。于冷却后，滤除无机盐，使滤液藉蒸发浓缩。将残留物以水及乙醚萃取，将有机相以水洗涤，脱水干燥，并蒸发至干涸。
产量55.5克化合物23将55.5克化合物23置于600毫升乙醇中，并以20毫升32％HCl及6克10％Pd/C在20℃及5巴下氢化20分钟。然后，使其经过硅藻土过滤，及蒸发浓缩。将残留物与400毫升乙醚合并，抽滤沉淀物并以乙醚洗涤。
产量23.5克化合物24，熔点105℃使23.5克化合物24溶于200毫升水中，并与20.0克(0.103摩尔)2，4-二氯-5-硝基嘧啶在400毫升乙醚中合并。在反应混合物已经冷却至-10℃后，分批添加50.0克(0.499摩尔)碳酸钾。将混合物在-5℃下搅拌1小时，及在0℃下1小时，然后加热至环境温度。分离出水相，将有机相以水洗涤，干燥，并蒸发至干。
产量36.9克化合物25使20.0克化合物25溶于280毫升冰醋酸中，并加热至70℃。在移除热源后，添加17克铁。使温度上升至100℃，然后将混合物在此温度下搅拌30分钟。
接着，将其趁热过滤，并蒸发浓缩滤液。将残留物与300毫升二氯甲烷及30毫升32％HCl合并，分离液相，将水相以二氯甲烷萃取，合并的有机相以水及氨水溶液洗涤，干燥，并蒸发至干。以乙醚萃取残留物。
产量10.5克化合物26，熔点182℃-185℃将2.7克化合物26与2.5毫升碘代甲烷置于27毫升DMA中，并冷却至-10℃。添加0.45克NaH在矿油中的60％分散液，并在-5℃下搅拌30分钟。然后，添加10克冰与5毫升2NHCl，并使混合物蒸发浓缩。将残留物以醋酸乙酯及水萃取，使有机相干燥，蒸发至干，及经过硅胶过滤。
产量3.0克化合物27(油)1H-NMR(250MHz)＝7.67(1H，s)，4.32-4.07(m，2H)，3.32(s，3H)，3.08(m，1H)，1.70-1.50(m，3H)，1.42(d，3H)，0.95(m，6H).
实例171的合成将0.28克化合物27、0.9毫升环丁砜及0.22克对-氨基苯甲酸-苄基酰胺，在170℃下搅拌0.5小时，然后将混合物与醚合并，并滤出结晶。使产物自乙醇再结晶。
产量0.15克，熔点228-240℃(黄色结晶)类似上述方法获得示于表1中的式(I)化合物。
使用于表1中的缩写X2、X3、X4、X5及X6，于各情况中，表示对表1所示通式中一个位置的链结，代替其相应的基团R2、R3、R5、R5及R6。
表1
正如已发现的，通式(I)化合物的特征为其在治疗领域上的广泛应用。特别指出的应用为其对特异细胞循环激酶的抑制，特别是对于经培养的人类肿瘤细胞的增生，以及其他细胞如内皮细胞的增生的抑制作用。
正如可通过FACS分析所证实，通过本发明化合物所产生的增生抑制，是通过细胞滞留，特别是在细胞循环的G2/M阶段下。细胞滞留，与所使用的细胞有关，是在程序设计的细胞死亡之前，在细胞循环的这阶段中，引发经历一段特定长的时间。于细胞循环的G2/M阶段中的滞留，通过例如抑制特异细胞循环激酶而被触发。在模式生物体如粟酒裂殖酵母(Schizgosaccharomyces pombe)或爪蟾属(Xenopus)中的研究，或在人类细胞中的探究，已证实从G2阶段转变至有丝分裂，是由CDK1/环素B激酶所调节(Nurse，1990)。这种激酶也称为“有丝分裂促进因子”(MPF)，进行磷酰基化并由此调节多种蛋白质，如核层、类激动素运动蛋白质、缩合素及Golgi氏间质蛋白质，这种蛋白质在核被膜的破裂中，在中心体分离，有丝分裂锤体装置的形成，染色体缩合及高尔基氏体破裂中，具有重要作用(Nigg.E.，2001)。具有温度-敏感性CDK1激酶突变体的老鼠细胞系，在温度增加后，显示CDK1激酶的快速破裂，并接着在G2/M阶段中滞留(Th′ng等人，1990)。以抵抗CDK1/环素B的抑制剂，譬如丁内酯，治疗人类肿瘤细胞，也会导致在G2/M阶段中的滞留，并接着细胞凋零(Nishio等人，1996)。另一种涉及G2与有丝分裂阶段的激酶为极状激酶1(Plk1)，它是负责中心体的成熟，磷酯酶Cdc25C的活化作用，以及后期促进复合物的活化作用(Glover等人，1998，Qian等人，2001)。注射Plk1抗体会导致G2滞留在未经转化的细胞中，然而肿瘤细胞是滞留在有丝分裂阶段中(Lane与Nigg，1996)。此外，蛋白激酶极光体B已描述为进入有丝分裂期间，具有重要功能。极光体B使组蛋白H3在Serll处磷酰基化，并从而引发染色体缩合(Hsu，J.Y.等人，2000)。但是，特异细胞循环滞留在G2/M阶段中，亦可通过例如抑制特异磷酸酶譬如Cdc25C而被触发(Russell与Nurse，1986)。具有缺损cdc25基因的酵母滞留在G2阶段中，而cdc25的过度表达导致早期进入有丝分裂阶段中(Russell与Nurse，1987)。但是，在G2/M阶段中滞留，也可通过抑制某些运动蛋白质，所谓激动素，如Eg5(Mayer等人，1999)，或通过所使微管稳定化或去稳定化的药剂而被触发(例如秋水仙素、紫杉醇、衣托糖苷(etoposide)、长春花碱、长春新碱)(Schiff与Horwitz，1980)。
鉴于其生物学性质，根据本发明通式I化合物、其异构体及其生理学上可接受的碱，适用于治疗其特征为过度或异常细胞增生的疾病。
此种疾病包括例如病毒感染(例如HIV与卡波济肉瘤)；炎性与自身免疫疾病(例如结肠炎、关节炎、阿耳茨海默氏疾病、肾小球性肾炎及伤口愈合)；细菌、真菌及/或寄生感染；白血病、淋巴瘤及固态肿瘤、皮肤病(例如牛皮癣)；骨质疾病；心血管疾病(例如再狭窄与肥大)。其亦适于保护增生性细胞(例如毛发、肠、血液及原始细胞)免于因辐射、UV治疗及/或抑制细胞生长治疗所引起的对其DNA的伤害(Davis等人，2001)。
这些新颖化合物可用于预防、短期或长期治疗上述疾病，也可与其他用于相同症状的活性物质，例如细胞抑制剂组合使用。
根据本发明化合物的活性，是在经培养的人类肿瘤细胞，和/或在FACS分析中的细胞毒性试验中，对于例如HelaS3细胞进行测定。在两种试验方法中，这些化合物显示良好至极好的活性，即，例如在HeLaS3细胞毒性试验中的EC50值为低于5微摩尔，一般低于1微摩尔。
在经培养人类种瘤细胞上的细胞毒性测量为测量经培养人类肿瘤细胞上的细胞毒性，将子宫颈癌肿瘤细胞系HeLaS3(得自美国培养物收集处(ATCC))的细胞，在Ham氏F12培养基(生命技术)与10％牛胎血清(生命技术)中培养，并在对数生长期中采集。然后，将HeLaS3细胞以每孔1000个细胞的密度，置于96-孔板(Costar)中，并在培养器(于37℃及5％CO2下)培养过液，同时在各板中，有6个孔仅充填培养基(3个孔作为培养基对照组，3个孔用于以减量的AlamarBlue进行培养)。将活性物质以不同浓度(溶于DMSO中；最后浓度1％)添加至细胞中(各情况下，为三次重复测量)。72小时培养后，将20微升的AlamarBlue(AccuMed国际)添加至各孔中，并将细胞再培养7小时。将作为对照将20微升减量的AlamarBlue(AlamarBlue试剂，已经高压热处理30分钟)添加至3个孔中。7小时培养后，AlamarBlue试剂在个别孔中的颜色改变，在Perkin Elmer萤光分光光度计(激发530毫微米，发射590毫微米，狭缝15，积分时间0.1)中测定。经反应的AlamarBlue试剂量，代表细胞的代谢活性。相对细胞活性是以对照组(没有抑制剂的HeLaS3细胞)的百分比计算而得，并获得抑制细胞活性达50％的活性物质的浓度(IC50)。这数值是由三次个别测量值的平均值所计算，对于对照值(培养基对照组)进行校正。
FACS分析碘化普罗匹定(propidium iodide)(PI)是以化学计量方式结合至双股DNA，且因此适用于测定细胞在细胞循环的G1、S及G2/M阶段中基于细胞含量的百分比。在G0与G1阶段中的细胞，具有二倍体DNA含量(2N)，而在G2或有丝分裂中的细胞具有4N DNA含量。
为进行PI染色，将0.4百万个HeLaS3细胞接种在例如75cm2的细胞培养烧瓶上，并于24小时后，无论是添加1％DMSO作为对照组，或以不同浓度添加物质(在1％DMSO中)。在将细胞以2xPBS洗涤及以胰蛋白酶/EDTA脱离之前，将细胞与该物质或与DMSO一起培养24小时。将细胞离心(1000rpm，5分钟，4℃)，并将细胞沉淀以PBS洗涤2次，然后使细胞再悬浮于0.1毫升PBS中。接着，以80％乙醇使细胞在4℃下固定16小时。或者，在-20℃下2小时。使已固定的细胞(106个细胞)离心(1000rpm，5分钟，4℃)，以PBS洗涤，然后再一次离心。使细胞沉淀再悬浮于0.25％PBS中的2毫升Triton X-100内，并在冰上培养5分钟，然后添加5毫升PBS，并将混合物再一次离心。使细胞沉淀再悬浮于350微升PI染色溶液(0.1毫克/毫升RazeA，10微克/毫升碘化普瑞西啶(presidium iodide)在1xPBS中)中。将细胞在黑暗中，与染色缓冲剂一起培养20分钟，然后转移至供FACS扫描的试样测量容器中。DNA测量是在具有氩激光(500mW，发射488毫微米)的Becton DickinsonFACS分析器中进行，及DNA Cell Quest程序(BD)。对数PI萤光是以带通滤波器(BP 585/42)测定。在细胞循环个别阶段中的细胞群体，是以BectonDickinson的ModFit LT程序定量。
通式(I)化合物可单独使用，或可与本发明的其他活性物质组合使用，视情况也可组合其他具药理学活性的物质。适当制剂包括例如片剂、胶囊、栓剂、溶液，特别是注射(皮下、静脉内、肌肉内)与灌注用的溶液，糖浆、乳化液或可分散粉末。药物活性的化合物于各情况的量，为在总组合物的0.1-90重量％，优选为0.5-50重量％的范围内，即在足以达成下文所给予剂量范围的量下。所指定的剂量，若必要可一天给药数次。
适当的片剂可通过例如将活性物质与已知赋形剂混合而获得，例如惰性稀释剂，如碳酸钙、磷酸钙或乳糖，崩解剂，如玉米淀粉或藻酸，粘合剂，如淀粉或明胶，润滑剂，譬如硬脂酸镁或滑石，和/或用于延迟释放的制剂，如羧甲基纤维素、醋酸苯二甲酸纤维素或聚醋酸乙烯酯。片剂也可包含多层。
因此，包衣片剂可通过以片剂涂层中的常用物质，例如可力酮或虫胶、阿拉伯胶、滑石、二氧化钛或糖，以类似片剂制成的核芯进行涂覆而制成。为达到延迟释出或防止不相容性，核芯也可由多层组成。同样地，片剂涂层也可由多层构成，以达到延迟释放，其中可使用上文关于片剂所提及的赋形剂。
含有本发明活性物质或其组合物的糖浆，可另外含有甜味剂，譬如糖精、环己氨磺酸盐、甘油或蔗糖，以及增味剂，例如香味剂，譬如香草醛或橙提取液。其也可含有悬浮助剂或增稠剂，譬如羧甲基纤维素钠，润湿剂，例如脂肪醇与环氧乙烷的缩合产物，或防腐剂，譬如对-羟基苯甲酸酯。
供注射与灌注用的溶液是以常用方式制备，例如添加等渗剂、防腐剂，譬如对-羟基苯甲酸酯，或稳定剂，譬如乙二胺四醋酸的碱金属盐，视情况使用乳化剂和/或分散剂，而若使用水作为稀释剂，则可视情况使用有机溶剂作为增溶剂或助溶剂，并转移至注射小瓶或安瓿瓶或灌注瓶中。
含有一或多种活性物质或活性物质组合物的胶囊，可通过例如将活性物质与惰性载体如乳糖或山梨醇混合，并填充至明胶胶囊中而制成。
适宜的栓剂可通过例如与用于此目的的载剂混合而制成譬如中性脂肪类或聚乙二醇或其衍生物。
适当赋形剂可为例如水，药学上可接受的有机溶剂，如石蜡(例如石油馏份)、植物源的油类(例如花生油或芝麻油)、单-或多元醇类(例如乙醇或甘油)，载剂，如天然矿物粉末(例如高岭土、粘土、滑石、白垩)、合成矿物粉末(例如高度分散的硅石与硅酸盐)、糖(例如粗糖、乳糖及葡萄糖)、乳化剂(例如木质素、亚硫酸盐废液、甲基纤维素、淀粉及聚乙烯基吡咯烷酮)及润滑剂(例如硬脂酸镁、滑石、硬脂酸及月桂基硫酸钠)。
使用常用方式进行投药，优选是通过口服或经皮途径，特别是口服。当经口投予时，除了上文所提及的载剂以外，这种片剂还可含有添加剂，如柠檬酸钠、碳酸钙及磷酸二钙，以及各种添加剂，如淀粉，优选为马铃薯淀粉、明胶及其类似物。另外还有润滑剂，如硬脂酸镁、月桂基硫酸钠及滑石，也可一起形成片剂。在含水悬浮液时，除了上文所提及的赋形剂以外，活性物质还可和各种增味剂或着色剂混合。对非经肠施用而言，活性物质的溶液可使用适当液体载剂物质制成。静脉用剂量为每小时1-1000毫克，优选为每小时5-500毫克之间。
但是，视情况可偏离所指定的量，并取决于体重或投药方法、对药物的个别反应、所使用制剂的性质及投药的时间或间隔而定。因此，在一些情况中，使用低于上文所指定的最少量可能已足够，而在其他情况中，必须超过所指定的上限。当投予大量时，最好将其以多次单一剂量分配在一天中。
下述配方实例是说明本发明，而非限制其范围药物配方的实施例A)片剂每片剂活性物质 100毫克乳糖 140毫克玉米淀粉 240毫克聚乙烯基吡咯烷酮 15毫克硬脂酸镁5毫克500毫克将微细研磨过的活性物质、乳糖及一部分玉米淀粉混合在一起。将混合物过筛，然后以聚乙烯基吡咯烷酮在水中的溶液湿润，捏合，湿式造粒并干燥。将此颗粒、其余的玉米淀粉及硬脂酸镁过筛，并混合在一起。将混合物压制成适当形状与大小的片剂。
B)片剂每片剂活性物质 80毫克乳糖 55毫克玉米淀粉 190毫克微晶性纤维糸 35毫克聚乙烯吡咯烷酮15毫克羧甲基淀粉钠 23毫克硬脂酸镁2毫克400毫克将微细研磨过的活性物质、一部分玉米淀粉、乳糖、微晶性纤维素及聚乙烯吡咯烷酮混合在一起，将混合物过筛，并与其余玉米淀粉和水一起制成颗粒，使其干燥与过筛。添加羧甲基淀粉钠与硬脂酸镁，并混合，及将混合物压制成适当大小的片剂。
C)安瓿瓶溶液活性物质50毫克氯化钠 50毫克注射用水5毫克使活性物质溶于水中，在其原有的pH，或视情况在pH5.5至6.5下，并添加氯化钠，使其成为等渗性。将所获得的溶液过滤除去热原，并将滤液在无菌条件下转移至安瓿瓶中，然后将其杀菌及通过熔融密封。这些安瓿瓶含有5毫克、25毫克及50毫克活性物质。
权利要求
1.一种通式(I)的化合物 其中R1表示选自氢、NH2、XH、卤素及视情况被一个或多个卤原子取代的C1-C3-烷基中之一的基团，R2表示选自氢、CHO、XH、-X-C1-C2-烷基及视情况经取代的C1-C3-烷基中之一的基团，R3、R4，其可相同或不同，表示选自视情况经取代的C1-C10-烷基、C2-C10-烯基、C2-C10-炔基、芳基、杂芳基、C3-C8-环烷基、C3-C8-杂环烷基、-X-芳基、-X-杂芳基、-X-环烷基、-X-杂环烷基、-NR8-芳基、-NR8-杂芳基、-NR8-环烷基及-NR8-杂环烷基中之一的基团，或选自氢、卤素、COXR8、CON(R8)2、COR8及XR8中之一的基团，或R3与R4一起表示2-至5-员烷基桥基，其可含有1至2个杂原子，R5表示氢，或选自视情况经取代的C1-C10-烷基、C2-C10-烯基、C2-C10-炔基、芳基、杂芳基及-C3-C6-环烷基中之一的基团，或R3与R5或R4与R5一起表示饱和或不饱和的C3-C4-烷基桥基，其可含有1至2个杂原子，R6表示视情况经取代的芳基或杂芳基，R7表示氢或-CO-X-C1-C4-烷基，及X于各情况中互相独立地表示O或S，R8于各情况中互相独立地表示氢，或选自视情况可经取代的C1-C4-烷基、C2-C4-烯基、C2-C4-炔基及苯基中之一的基团，视情况呈其互变异构体、外消旋物、对映体、非对映异构体及混合物形式，以及视情况为其药理上可接受的酸加成盐。
2.根据权利要求1的化合物，其中X与R6具有所给的含义，且R1表示氢，R2表示选自CHO、OH及CH3中之一的基团，R3、R4，可相同或不同，表示选自氢、视情况经取代的C1-C6-烷基、C2-C6-烯基、C2-C6-炔基、C3-C7-环烷基中之一的基团，或R3与R4一起表示C2-C5-烷基桥基，R5表示选自视情况经取代的C1-C10-烷基、C2-C10-烯基、C2-C10-炔基、C3-C6-环烷基中之一的基团，或R3与R5或R4与R5一起表示饱和或不饱和的C3-C4-烷基桥基，其可含有1至2个杂原子，及R7表示氢，视情况其呈互变异构体、外消旋物、对映体、非对映异构体及混合物形式，以及视情况为其药理学上可接受的酸加成盐。
3.根据权利要求1或2的化合物，其中R1-R5、R7、R8及X都具有所给的含义，且R6表示以下通式的基团 其中n表示1，2，3或4，R9表示选自视情况经取代的C1-C6-烷基、C2-C6-烯基、C2-C6-炔基、CONH-C1-C10-亚烷基、-O-芳基、-O-杂芳基、-O-环烷基、-O-杂环烷基、芳基、杂芳基、环烷基及杂环烷基中之一的基团，或选自-O-C1-C6-烷基-Q1、-CONR8-C1-C10-烷基-Q1、-CONR8-C2-C10-烯基-Q1、-CONR8-Q2、卤素、OH、-SO2R8、-SO2N(R8)2、-COR8、-COOR8、-N(R8)2、-NHCOR8、CONR8OC1-C10烷基Q1及CONR8OQ2中之一的基团，Q1表示氢、-NHCOR8，或选自视情况经取代的-NH-芳基、-NH-杂芳基、芳基、杂芳基、C3-C8-环烷基-及杂环烷基中之一的基团，Q2表示氢，或选自视情况经取代的芳基、杂芳基、C3-C8-杂环烷基、C3-C8-环烷基-及C1-C4-烷基-C3-C8-环烷基中之一的基团，R10可相同或不同，表示选自视情况经取代的C1-C6-烷基、C2-C6-烯基与C2-C6-炔基、-O-C1-C6-烷基、-O-C2-C6-烯基、-O-C2-C6-炔基、C3-C6-杂环烷基及C3-C6-环烷基中之一的基团，或选自氢、-CONH2、-COOR8、-OCON(R8)2、-N(R8)2、-NHCOR8、-NHCON(R8)2、-NO2及卤素中之一的基团，或相邻基团R9与R10一起表示以下通式的桥基 Y表示O、S或NR11，m表示0、1或2R11表示氢或C1-C2-烷基，及R12表示氢，或选自视情况经取代的苯基、吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、哒嗪基、-C1-C3-烷基-苯基、-C1-C3-烷基-吡啶基、-C1-C3-烷基-吡嗪基、-C1-C3-烷基-嘧啶基及-C1-C3-烷基-哒嗪基中之一的基团，R13表示C1-C6-烷基，视情况呈其互变异构体、外消旋物、对映体、非对映异构体及混合物形式，以及视情况为其药理学上可接受的酸加成盐。
4.根据权利要求1或2的化合物，其中R3-R6、R8及X均具有所给定的含义，且R1表示氢，R2表示CH3，及R7表示氢，视情况呈其互变异构体、外消旋物、对映体、非对映异构体及混合物形式，以及视情况为其药理学上可接受的酸加成盐。
5.根据权利要求1或2的式I化合物，其是作为药物组合物使用。
6.根据权利要求1或2的式I化合物，其是作为具有抗增生活性的药物组合物使用。
7.一种式I化合物在制备药物组合物中的用途，以用于治疗及/或预防癌症、感染、炎性及自身免疫疾病。
8.一种用于治疗和/或预防癌症、感染、炎性及自身免疫疾病的方法，其特征在于，给予患者以有效量的权利要求1-4的式I化合物。
9.一种医药制剂，其含有一或多种权利要求1-4的通式(I)化合物或其生理学上可接受的盐，作为活性物质，视情况与习用赋形剂和/或载剂组合。
10.一种制备通式(I)化合物的方法， 其中R1-R7与X均具有权利要求1至4中所给定的含义，其特征在于使通式(II)化合物与视情况经取代的通式(III)化合物反应 式(II)中R1-R5与X均具有权利要求1至4中所给定的含义，及L为去离基。 式(III)中R6与R7都具有权利要求1至4所给定的含义。
11.一种式(II)化合物， 其中R1-R5与X都具有权利要求1至4中所给定的含义。
12.一种制备通式(I)化合物的方法， 其中R6表示以下通式的基团， R9表示视情况经取代的基团-CONH-C1-C10-亚烷基，或选自-CONR8-C1-C10-烷基-Q1、-CONR8-C2-C10-烯基-Q1、-CONR8-Q2及-COOR8中之一的基团，及R1-R5、R7、R10、n及X都如权利要求1至4中所给定的含义，其特征在于使通式(IA)化合物与伯胺或仲胺反应以形成其相应的酰胺，或与醇反应以形成其相应的酯。 式IA中R1至R5、R7、R10及n均如权利要求1至4中所述的含义，及L表示去离基。
全文摘要
本发明是关于通式(I)的新颖二氢喋啶酮及其异构物体，其中基团X、R
文档编号A61P37/00GK1551881SQ02817288
公开日2004年12月1日 申请日期2002年8月30日 优先权日2001年9月4日
发明者马赛厄斯·霍夫曼, 马赛厄斯·格劳尔特, 斯蒂芬·布赖特费尔德, 克里斯琴·艾克迈克, 杰拉尔德·波尔, 索尔斯坦·莱曼－林茨, 诺伯特·雷德曼, 吉塞拉·施纳普, 马丁·斯蒂格梅尔, 埃克哈特·鲍尔, 詹斯·J·匡特, 布赖特费尔德, 施纳普, 雷德曼, J 匡特, 坦 莱曼-林茨, 德 波尔, 斯 格劳尔特, 斯蒂格梅尔, 特 鲍尔, 琴 艾克迈克, 马赛厄斯 霍夫曼 申请人:贝林格尔英格海姆法玛两合公司