专利名称：局部用l－肉毒碱组合物的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种局部用组合物，该组合物包含在药理学可接受的赋形剂中的下列组分(a)L-肉毒碱，及其盐或混合物，和(b)一种或多种羟酸，蛋白水解酶，皮肤光亮剂(skin lightening agents)，或其混合物，用来改善或防止有害皮肤症状(如，表皮脱落和失去皮肤弹性)，剥脱皮肤，加速皮肤更新，和/或使皮肤光亮。
背景技术：
美国专利4,839,159揭示用于改善或愈合皮肤病症的局部L-肉毒碱组合物，皮肤症状包括皱纹，干燥或剥离皮肤，和灼伤(如，日光灼伤)，以及用于治愈和防止疤痕形成。
日本专利申请8291039揭示一种化妆品，它含有0.01-30重量％肉毒碱和/或氯化肉毒碱和0.01-3重量％的抗坏血酸衍生物。
因此，需要一种改善皮肤的改进的局部用组合物。
发明概述本发明涉及一种局部用组合物，该组合物包含在用于局部应用的药理学上可接受的赋形剂中的下面组分(a)L-肉毒碱，酰基L-肉毒碱，及其盐或混合物，和(b)一种或多种羟酸，蛋白水解酶，皮肤光亮剂，或它们的混合物。可给予局部用组合物，以改善或防止皮肤的有害症状(如，表皮脱落和失去皮肤弹性)，剥脱皮肤，加速皮肤更新，和/或使皮肤光亮。例如，可给予该组合物来使水痘感染引起的疤痕形成最少，日光灼伤引起的干燥和剥离最小，并提高皮肤弹性。局部用组合物的pH较好在约3.5-8范围，更好约6-6.5或7。根据一个实施方式，局部用组合物的pH在约3.5-6.5或7范围。根据另一个实施方式，局部用组合物的pH在约6-8范围，较好在约6.5-7.5范围。根据一个实施方式，局部用组合物基本上不含D-肉毒碱，酰基D-肉毒碱，及其盐，更好的，所述组合物还基本上不含LD-肉毒碱，酰基LD-肉毒碱及其盐。
已发现，pH为7的局部用组合物与pH为4、5或6的类似组合物相比，L-肉毒碱能更有效更快剥脱皮肤。还发现，L-肉毒碱单独或与木瓜酶组合，能比乙醇酸更快更有效地剥脱皮肤。最后，发现，L-肉毒碱比外消旋肉毒碱(即，DL-肉毒碱)能更有效快速剥脱皮肤。
另一个实施方式是一种局部用组合物，该组合物包含在药理学可接受的赋形剂中的下面组分(或基本上由下面组分组成)(a)一种或多种添加剂，如一种或多种羟酸，蛋白水解酶，皮肤光亮剂，或它们的混合物，和(b)有效量的L-肉毒碱，酰基L-肉毒碱，及其盐或混合物，以改善或防止皮肤的有害症状，剥脱皮肤，和/或加速皮肤更新。局部用组合物的pH约为6-8，较好约6.5-7。根据一个较好实施方式，局部用组合物包含最佳pH约为6-7的添加剂(即，添加剂能最有效达到其预期目的的pH约为6-7)。例如，添加剂可以是蛋白水解酶(如，木瓜酶)或皮肤光亮剂(如，葡糖氧化酶)，其最佳pH约为6-7。
不受任何具体理论的限制，申请人相信L-肉毒碱的内盐在改善或防止有害的皮肤症状，剥脱皮肤，加速皮肤更新，和/或使皮肤光亮方面比L-肉毒碱的酸形式具有更高的活性。在pH约为3.8，L-肉毒碱以50％酸和50％内盐存在。在更高pH时，L-肉毒碱主要以内盐存在。在本申请所述的所有实施方式中，以局部用组合物中L-肉毒碱总量为100％计，L-肉毒碱的内盐在局部用组合物中的浓度较好为至少80、85、90或95重量％。
另一个实施方式是一种治疗干燥、剥离、疤痕或缩皱皮肤的方法，该方法是局部施用有效量的本发明局部用组合物。
又一个实施方式是一种剥脱皮肤的方法，该方法是局部施用有效量的本发明局部用组合物。用来剥脱皮肤的蛋白水解酶，如木瓜酶在使用大多数剥脱剂的pH下常常是无活性的，例如羟酸(如，乙醇酸，乳酸和水杨酸)通常在pH等于或低于4下使用。相反，本发明局部用组合物中的L-肉毒碱对这样的蛋白水解酶没有不利的作用，并发现，在对酶的最佳pH，即pH约为7(如，约6-7的pH)下最有效。
又一个实施方式是加速皮肤更新的方法，该方法是局部施用有效量的本发明局部用组合物。
又一个实施方式是使皮肤光亮的方法，该方法是局部施用有效量的本发明局部用组合物。
附图简述
图1是显示完全剥脱的参与者百分数与用L-肉毒碱乳膏在4.0、5.0、6.0或7.0(实施例7)pH下剥脱天数的直方图。
图2是显示完全剥脱的参与者百分数与(a)没有治疗，(b)用乙醇酸乳膏在pH为4.0，(c)用L-肉毒碱乳膏在pH为4.0，(d)用L-肉毒碱乳膏在pH为7.0下剥脱天数的直方图，如实施例8所述。
图3是显示完全剥脱的参与者百分数与(a)没有治疗，(b)用5.6％L-肉毒碱乳膏，(c)用5.6％外消旋DL-肉毒碱乳膏，(d)用2.8％L-肉毒碱乳膏，和(e)用2.8％外消旋DL-肉毒碱乳膏剥脱天数的直方图。
图4是显示完全剥脱的参与者百分数与(a)没有治疗，(b)用6PU蛋白(水解单位)木瓜酶乳膏在pH为7.0，(c)用5.6％L-肉毒碱乳膏在pH为7.0，(d)用5.6％乙醇酸乳膏在pH为4.0，和(e)用6PU木瓜酶和5.6％L-肉毒碱乳膏在pH为7.0时剥脱天数的直方图。
发明详细说明本文中，术语“约”指在给定值的10％内，较好5％内，更好1％内。或者，术语“约”指在这类值的科学上可接受的误差范围内，这取决于用可得到的工具进行的测定如何定性。
词语“药理学上可接受的”指添加剂或组合物，当给药予哺乳动物时，它们是药理学上可容忍的，通常不会产生过敏或类似的不良反应，如反胃，眩晕等。
合适的酰基L-肉毒碱包括但不限于，其中的酰基是有2-8个碳原子，较好有2-6个碳原子的直链或支链的烷酰基的那些。较好的酰基L-肉毒碱包括但不限于乙酰基、丙酰基、丁酰基、戊酰基和异戊酰基L-肉毒碱。
L-肉毒碱的盐包括但不限于L-肉毒碱的酒石酸盐(如，L-肉毒碱L-酒石酸盐)，L-肉毒碱柠檬酸镁和L-肉毒碱乙醇酸盐。其它L-肉毒碱盐包括L-肉毒碱的酸加成盐，并含有下列阴离子乙酸根，己酸根，藻酸根，天冬氨酸根，苯甲酸根，苯磺酸根，硫酸氢根，丁酸根，柠檬酸根，樟脑酸根，樟脑磺酸根，环戊烷丙酸根，digluconate，十二烷基硫酸根，乙磺酸根，富马酸根，葡庚糖酸根，甘油磷酸根，半硫酸根(hemisulfate)，庚酸根，己酸根，氯化物，溴化物，碘化物，2-羟基乙烷-磺酸根，乳酸根，马来酸根，甲磺酸根，2-萘磺酸根，烟酸根，草酸根，棕榈酸根，果胶酸根(pectinate)，过硫酸根，3-苯基丙酸根，苦味酸根，三甲基乙酸根，丙酸根，琥珀酸根，酒石酸根，硫氰酸根，甲苯磺酸根，十一烷酸根等。
L-肉毒碱较好是高纯度(即，含0.0％的D-肉毒碱)，由美国食品和药品管理局对食品颁布的级别。L-肉毒碱可采用本领域已知的任何方法制备，包括Kulla，H.(1991)，Chemia 45:81中所述。可从从Lonza Inc.of Fair Lawn，NJ，以L-肉毒碱结晶L-CARNIPURE和L-CARNIPURE PC获得L-肉毒碱。L-肉毒碱可以结晶固体(如，纯度＞99％)或以水溶液(如，50％水溶液，可从Lonza Inc.以L-CARNIPUREPC-50获得的水溶液)配制到本发明的局部用组合物。在中性pH，L-肉毒碱以内季盐存在。在皮肤上，这种高吸湿材料显示了增湿作用。在pH为4-7，L-肉毒碱显示剥脱能力，并明显缩短皮肤更新所需时间。
L-肉毒碱，酰基L-肉毒碱，及其盐或混合物(统称“L-肉毒碱”)在局部用组合物中的浓度应能充分获得所需效果。通常L-肉毒碱存在量至少约0.1-20％w/w较好约1-10％w/w。L-肉毒碱在液体赋形剂中的浓度约为0.01-1.0g/ml，更常用约0.05-0.15g/ml，最常用约0.1g/ml。当赋形剂是一种油膏，洗液或乳膏时，L-肉毒碱的存在量约为0.1-25％w/w，更常用约1-15％。
合适的羟酸包括但不限于，能剥脱皮肤和/或增强或加速皮肤更新的那些。羟酸可以是α-羟酸，β-羟酸，以及它们的混合物。α-羟酸和β-羟酸包括烷基羟基羧酸，如乙醇酸，乳酸，甲基乳酸，阿卓乳酸，柠檬酸，α-羟基丙酸丁酸，α-羟基异丁酸，苹果酸，酒石酸，α-羟基戊酸(α-羟基异戊酸)，α-羟基己酸(α-羟基己酸)，α-羟基异己酸(α-羟基异己酸)，糖精酸，α-羟基庚酸，α-羟基辛酸(α-羟基辛酸)，α-羟基壬酸，α-羟基癸酸，葡萄糖单羧酸(葡糖庚酸)，半乳糖醛酸，葡糖醛酸，α-苯基羟基乙酸(扁桃酸)，四羟基己二酸(粘酸)，丙酮酸，β-苯基乳酸，β-苯基丙酮酸，3-羟基丁酸(β-羟基丁酸)，丙醇二酸，内酯(如葡醛内酯(glucoronolactone)和葡糖内酯(gluconolactone))，这些化合物的酯和烷基和链烯基的衍生物，以及它们的混合物。优选的羟酸包括但不限于，乙醇酸，乳酸，水杨酸，以及它们的混合物。通常，组合物包含约0.1-8重量％羟酸(不包括L-肉毒碱，其酰基衍生物，盐和混合物)。通常，含羟酸的制剂能在pH为3.5-5下获得最佳效果。然而，存在L-肉毒碱或其盐，这样的制剂在更高并对皮肤更温和的pH系有效，如pH为约5.5-8。
合适的蛋白水解酶包括但不限于，木瓜酶，菠萝蛋白酶，胃蛋白酶(pepsin)，肽酶，胰蛋白酶，肠激酶，α-胰凝乳蛋白酶，以及它们的混合物。通常，组合物包含约0.1-10PU(溶解蛋白单位)的蛋白水解酶。蛋白水解单位(PU)定义为每小时释放1微克酪氨酸的等价物的酶的量。组合物一般包含0.1至约10个蛋白水解单位(PU)的蛋白水解酶。根据一个实施方式，所述组合物包含约1-6或8PU的蛋白水解酶，更好约2-6PU的蛋白水解酶。
合适的皮肤光亮剂包括但不限于，黑色素抑制剂，黑色素漂白剂，以及它们的混合物。黑色素抑制剂通常抑制酶酪氨酸酶或模仿氨基酸酪氨酸。黑色素抑制剂的非限制性例子有熊果苷，曲酸，典酸模提取物，以及它们的混合物。黑色素漂白剂的非限制性例子有过氧化物，氢醌，葡糖氧化酶，以及它们的混合物。根据本发明的一个实施方式，局部用组合物不含抗坏血酸衍生物，如日本专利申请No.8291039中所述的那些，该专利申请参考结合于本文。通常，组合物包含0.01-2或3重量％的皮肤光亮剂。
局部用组合物通常包含药理学可接受的赋形剂。含水溶液和非水溶液以及悬浮液都是合适的。赋形剂的性能各异，可以在宽范围包含并且能用于所需局部或持久应用中。乳膏，凝胶，洗液，油膏，悬浮液，和乳液基产品都是合适的。对大多数应用优选水包油乳剂。这样的用途包括痤疮治疗，这种治疗不需要在皮肤施涂另外的油。此外，不着色的水溶液可施用在衣服下面或施用到不希望水-油基组合物的其它部位。
局部用组合物的pH可以在下表列出的任一pH范围。
不受任一具体理论的束缚，使用L-肉毒碱来加速皮肤更新可以缩短皮肤细胞将黑色素加入到其结构中所能利用的时间，从而在皮肤上产生光亮效果。因此，使用L-肉毒碱与皮肤光亮剂将产生改善的性能，如，加快光亮。此外，由于L-肉毒碱在相对高的pH加速皮肤更新，所述局部用组合物能与一定pH的敏化光亮剂、剂相容，如在pH为6-6.5时最有效的葡糖氧化酶和在pH为6-7时最有效的剥脱酶如木瓜酶。
在皮肤上局部应用的乳膏或油膏基料还宜经常使用。在组合物用于干燥和剥脱的皮肤时以及需要增湿赋形剂时尤其如此。合适的基料包括羊毛脂，SILVADENETM(磺胺嘧啶银)(Hoechst Marion Roussel，Kansas City，MO)，尤其对治疗灼伤，AQUAPHORTM(Duke Laboratories，South Norwalk，Conn.)等基料。如果需要，可以在绷带或其它创口敷料上加入水性或水-油基的组合物，向持续暴露的受到影响部位提供局部用组合物。发现也可以使用气溶胶。
任选地，混合有效量的其它添加剂与本发明的局部用组合物。合适的添加剂包括但不限于，着色剂，香料，防腐剂，表面活性剂，颜料，抗氧化剂，增湿剂，保湿剂(或水合剂(如，十甘油(decaglycerol))，防晒剂，以及它们的混合物。例如，当该组合物用来处理易于或涉及感染如创口或痤疮的皮肤症状时，可加入一种抗菌剂。这类抗菌剂包括抗细菌剂，包括治疗痤疮的那些，以及抗真菌剂或其它抗菌剂。此外，L-肉毒碱可加入到防晒，遮光剂和晒黑后(post-tanning)制剂中；不含抗菌剂的痤疮治疗制剂中；化妆品制剂中；以及用于皮肤的其它目的的类似组合物中。局部用组合物中可包含抑菌剂，以防止细菌污染，因为肉毒碱组合物是细菌的良好培养基质。所有组分都在由Cosmetic Toiletry Fragrance Association(ISBN1882621298)出版的International Cosmetic Ingredient Dictionary and Handbook，第9版，2002中列出，其全部内容参考结合于本文，这些组分可加入到本发明的局部用组合物中。例如，局部用组合物可包含润肤剂(如，丙酸肉豆蔻基酯和辛酸/癸酸甘油三酸酯)。
根据较好的实施方式，局部用组合物包含保湿剂。较好的保湿剂是十甘油。十甘油提供(1)对皮肤保湿，(2)更美观愉悦的产品，和(3)一种产品，施涂到皮肤上时，留给皮肤调理后的感觉。
组合物通常局部施用到皮肤的目标部位。所述局部用组合物可每天施用，通常至少几天施用。然而，还可以设想更经常施用。例如，在治疗受伤的组织如皮疹，痤疮，或病原体-诱发的皮肤问题时，需要将治疗用组合物在治疗期间持续保持在受侵袭的部位，需要每天两次至四次或更多次施用治疗用组合物。还可在延长周期包括数年使用。
本发明除提供上述组合物外，还提供改善损害的皮肤症状的方法。所述方法包括在受侵袭部位施用局部用组合物。这种方法能促进治疗，并使下面各种皮肤受伤的疤痕减至最小，如灼伤包括日光灼伤；痤疮；接触性皮炎；由于病原体，如细菌如金黄色葡萄球菌(Stapholoccocal aureus)，或病毒如水痘或单纯疱疹的感染。
虽然局部用组合物和方法大多数多用于人和治疗人的皮肤，设想也可用于治疗其它哺乳动物的皮肤。例如，本发明的局部用组合物能治疗导致剥脱或失去皮肤弹性的动物疾病，如兽疥癣。除用于人外，这种局部用组合物可给予动物皮肤，特别是家畜，如狗、猫、马和牛。
浓缩物为制备含局部L-肉毒碱组合物的产品，一般首先制备局部L-肉毒碱组合物的浓缩物。本发明的局部L-肉毒碱组合物的制备可通过L-肉毒碱与水混合，以及任选的其它添加剂如上面所述的添加剂来进行。可加热和/或搅拌该混合物来进行混合。
例如，浓缩物可以是液体形式，包含L-肉毒碱和水。根据一个优选的实施方式，浓缩物还包含一种或多种保湿剂(如，十甘油)，一种或多种防腐剂，或它们的混合物。浓缩物的一个非限制性例子包含L-肉毒碱、水和保湿剂，如十甘油。
浓缩物的另一个非限制性例子包含L-肉毒碱、水和一种或多种防腐剂。浓缩物的又一个非限制性例子包含L-肉毒碱、水、一种或多种防腐剂和一种或多种保湿剂(如十甘油)。
浓缩物还可以包含一种或多种羟酸，蛋白水解酶，皮肤光亮剂，或它们的混合物。换句话说，浓缩物包含(1)L-肉毒碱，(2)一种或多种羟酸，蛋白水解酶，皮肤光亮剂，或它们的混合物，(3)水，和(4)任选地其它添加剂，如上述的那些。
以浓缩物总重量为100重量％为基准，浓缩物可包含约0.01-100重量％L-肉毒碱，较好包含约5-80重量％L-肉毒碱。浓缩物更好地含有25-60重量％L-肉毒碱，最好约45-55重量％L-肉毒碱。
使用稀释物使用前，浓缩物进行稀释，较好用和浓缩物中使用的相同溶剂进行，和/或加入到一种产品中。
通常，产品含有剥脱有效量的局部L-肉毒碱组合物。使用的稀释物一般含有约0.001重量％或约0.01-40重量％的浓缩物。根据一个优选的实施方式，使用的稀释物含有约1-20重量％的浓缩物。根据另一个实施方式，使用的稀释物含有约5-15重量％的浓缩物。
下面的实施例说明本发明，但不构成限制。所有的份数和百分数都以重量给出，除非另外指出。
组分从Lonza Inc.of Fair Lawn，NJ可获得下面的组分LONZEST_143-S是丙酸肉豆蔻基酯(一种润肤剂)。
ALDO_MCT是辛酸/癸酸甘油三酸酯(一种润肤剂)。
LONZEST_MSA是硬脂酸甘油酯和PEG100硬脂酸酯的混合物(一种乳化剂)。
PEGOSPERSE_1750MS是PEG1750单硬脂酸酯(一种乳化剂)。
LONZEST_SMS是山梨醇单硬脂酸酯(一种乳化剂)。
LONZEST_GMS-C是单硬脂酸甘油酯(一种乳化剂)。
GLYCOMUL_L是山梨醇单月桂酸酯(一种乳化剂)。
ETHOSPERSE_LA-23是POE(23)月桂醇(一种乳化剂)。
GEOGARD_361是一种防腐剂。
NATRULON_H-10是84％十甘油和16％水。
下面组分可从指定的来源获得。
POLYALDOL_10-1-O是单油酸十甘油酯，能从Lonza Inc.of Fair Lawn，NJ获得。
POLYALDOL_(6-2-S)是二硬脂酸六甘油酯，能从Lonza Inc.of Fair Lawn，NJ获得。
二甲基环硅氧烷200TM可从Dow Corning of Midland，MI获得。
TIOVEIL FINTM是苯甲酸C12-15烷基酯(和)二氧化钛(和)氧化铝(和)多羟基硬脂酸(和)二氧化硅，可从Uniqema of New Castle，DE获得。
实施例1和2所示的制剂是剥脱/修补体系的例子，其中，组合使用L-肉毒碱与另一种羟酸，在实施例1和2中是乙醇酸。实施例3的制剂是含L-肉毒碱，与之组合有蛋白水解酶、木瓜酶和菠萝蛋白酶的体系的例子。
实施例1按照下面所述制备有无机UV防晒剂的修补/剥脱乳膏(下面所示的制剂1)。混合在A相的组分，搅拌加热至75-80℃。将B相组分加在一起，加热至75-80℃，剧烈搅拌下将A向缓慢加入到B相。搅拌该混合物直到均匀，在继续混合时开始冷却。当该批料冷却到低于45℃时，加入C相。进行混合和冷却至35℃，然后加入D相。进行混合，冷却该混合物至25℃。该制剂通过了50℃两个月的稳定性测试。该制剂的pH为4.5。
制剂1组分重量％A相硬脂酸 3.00苯甲酸烷基酯中的二氧化钛5.00矿物油 1.50鲸蜡醇 1.00LONZEST_143-S 1.50ALDO_MCT 1.50LONZEST_MSA2.25PEGOSPERSE_1750MS 0.75LONZEST_SMS1.50B相脲 10.00丁二醇 3.00去离子水43.18C相乙醇酸(70％)6.57L-肉毒碱2.00氢氧化钠(50％) 3.50
去离子水13.50D相GEOGARD_3610.25实施例2按照实施例1所述制备有UV防晒剂的修补/剥脱乳膏(下面所示的制剂2)。该制剂通过了50℃两个月的稳定性测试。该制剂的pH为4.5。
制剂2组分重量％A相硬脂酸 3.00丁基甲氧基二苄基甲烷0.50对甲氧基肉桂酸辛酯 2.00矿物油 1.50鲸蜡醇 1.00LONZEST_143-S 1.50ALDO_MCT 1.50LONZEST_MSA1.50PEGOSPERSE_1750MS 0.75LONZEST_SMS2.25B相脲 10.00丁二醇 3.00去离子水45.50C相乙醇酸(70％)6.57L-肉毒碱1.00氢氧化钠(50％) 3.18
去离子水 15.00D相GEOGARD_361 0.25实施例3按照实施例1所述制备有蛋白水解酶的修补/剥脱乳膏(下面所示的制剂3)。该制剂通过了45℃两个月的稳定性测试。该制剂的pH为6.5。
制剂3组分 重量％A相硬脂酸3.00丁基甲氧基二苄基甲烷 0.50对甲氧基肉桂酸辛酯2.00矿物油1.50鲸蜡醇1.00LONZEST_143-S1.50ALDO_MCT 1.50LONZEST_MSA 1.50PEGOSPERSE_1750MS0.75LONZEST_SMS 2.25B相脲3.00丁二醇3.00去离子水 50.00C相乙醇酸(70％) 2.00L-肉毒碱 1.00甘油 7.00
去离子水 16.25D相GEOGARD_361 0.25木瓜酶&菠萝蛋白酶 2.00加速剥脱更新速率的一个结果是在基层生成的新的皮肤细胞在向表面移动时从黑色素细胞获取黑色素的机会减少。结果，L-肉毒碱可以单独使用或与其它组分(如，曲酸，熊果苷，典酸模提取物，或葡糖氧化酶)组合使用，使皮肤光亮(Hasunuma，K等“含肉毒碱和抗坏血酸的皮肤光亮化妆品”Jap.Patent 1996)。实施例4-6是皮肤光亮制剂。实施例4和5包含化学光亮剂，而实施例6包含一种酶光亮剂葡糖氧化酶。
实施例4按照下面所述制备有UV防晒剂的光亮乳膏(下面所示的制剂4)。混合A相的组分，加热至约80℃。将B相组分加在一起，并且持续搅拌下加热至约80℃。搅拌下将B相缓慢加入到A相。当掺混物均匀时(15分钟)开始冷却。继续混合该批料，直到温度冷却到低于40℃。加入C相。继续混合，直到该掺混物冷却到25℃时。制剂通过了45℃两个月的稳定性测试。制剂pH为6.5。
制剂4组分 重量％A相去离子水 41.0B相鲸蜡醇 4.0ALDO_MCT 3.0二甲基环硅氧烷(Dimethicone)2.0200液体凡士林 3.0醋酸生育酚(Tocopheryl acetate) 1.0
Tioveil FIN 4.0LONZEST_GMS-C3.0POLYALDOL_10-1-O 3.0GLYCOMUL_L 3.0C相去离子水 28.7L-肉毒碱 1.00熊果苷2.00氢氧化钠(50％)0.8GEOGARD_361 0.5实施例5按照实施例4所述制备有熊果苷，酸模属和肉毒碱的酸光亮剂膏(下面所示的制剂)。该制剂通过了45℃3个月的稳定性试验，制剂的pH为4.5。
制剂5组分 重量％A相去离子水 40.0甘油 4.0B相ALDO_MCT 5.0二甲基环硅氧烷200 1.7凡士林1.7鲸蜡醇3.4硬脂酸3.4醋酸生育酚0.9丁基甲氧基二苄基甲烷 1.7对甲氧基肉桂酸辛酯5.0POLYALDOL_(6-2-S)3.5
ETHOSPERSE_LA-23 2.5LONZEST_MSA 4.0C相去离子水 6.2典酸模(Rumex)(4％活性) 12.5L-肉毒碱 1.0熊果苷 1.0乙醇酸 1.0GEOGARD_3610.5氢氧化钠(50％) 1.0实施例6按照下面所述制备有葡糖氧化酶的光亮剂膏(下面所示的制剂6)。混合A相组分混合并加热至75-80℃。将B相组分加在一起，并加热到75-80℃。剧烈搅拌下，将A相缓慢加入到B相。搅拌该掺混物直到均匀，开始冷却，同时继续搅拌。当该批料冷却至低于45℃时，加入C相。混合并继续冷却至35℃，然后加入D相。缓慢混合下冷却该掺混物至25℃。调节掺混物的pH至6.5。制剂通过了45℃两个月的稳定性测试。
制剂6组分 重量％A相硬脂酸 3.00丁基甲氧基二苄基甲烷 0.50对甲氧基肉桂酸辛酯 2.00矿物油 1.50鲸蜡醇 1.00LONZEST_143-S 1.50ALDO_MCT 1.50LONZEST_MSA 1.50PEG0SPERSE_1750MS 0.75
LONZEST_SMS 2.25B相脲3.00丁二醇3.00去离子水 50.00C相L-肉毒碱 1.00甘油 7.00熊果苷1.00去离子水 17.25D相GEOGARD_36 10.25葡糖氧化酶2.00实施例7按照下面所述测定改变局部L-肉毒碱组合物的pH对剥脱作用的影响。按照实施例2所述制备有UV防晒剂的含L-肉毒碱的修补/剥脱乳膏，不同之处是(1)B相包含10.00％脲，3.0％Natrulon_H-10，和45.50％去离子水，(2)C相包含(a)5.6％L-肉毒碱，(b)将所述膏的pH调节至4、5、6或7的适量(q.s.)氢氧化钠和盐酸，和(c)20.1％去离子水。
各局部用组合物(乳膏)如下进行测试。在皮肤上每天施用两次所述组合物(约0.2g/10cm2)，20天的周期，使用丹磺酰氯法测定剥脱。还测定不含L-肉毒碱(即，仅有赋形剂)的对照局部用组合物。
丹磺酰氯法是测定皮肤更新时间的一种方法。该方法涉及首先用荧光染料(即，丹磺酰氯)处理皮肤，然后用UV光，观察荧光性随时间的消失。当该位置不再发出荧光时，可以认为皮肤已经转变。
结果示于图1。
实施例8按照实施例2上所述制备有UV防晒剂的修补/剥脱乳膏，不同之处是(1)B相包含10.00％脲，3.0％Natrulon_H-10，和45.55％去离子水，(2)C相包含(a)5.6％乙醇酸(100％活性)，(b)5.6％氢氧化钠(50％)，和14.50％去离子水。该膏的pH为4.0。
比较乙醇酸乳膏的剥脱效果与按照实施例7所述方法在实施例7的L-肉毒碱膏在pH为4和为7使的剥脱效果。还测定不含L-肉毒碱或乙醇酸的对照局部用组合物。结果示于图2。
实施例9采用实施例7所述的方法，测定含2.8％或5.6％L-肉毒碱或2.8％或5.6％外消旋(DL)肉毒碱的局部用组合物(pH都为7)的剥脱效果。测试的5.6％L-肉毒碱的组合物是实施例7中所述的。5.6％DL-肉毒碱组合物按照实施例7所述制备，只是5.6％L-肉毒碱被5.6％DL-肉毒碱替代。2.8％L-肉毒碱和2.8％DL-肉毒碱组合物按照实施例7所述制备，只是5.6％L-肉毒碱分别被(1)2.8％L-肉毒碱和2.8％DL-肉毒碱替代，以及(2)2.8％去离子水。DL-肉毒碱是一种含50％L-肉毒碱和50％D-肉毒碱的混合物。还测定不含L-肉毒碱或DL-肉毒碱的对照局部用组合物。
结果示于图3。图3显示，在同样浓度，L-肉毒碱比外消旋肉毒碱能更有效剥脱。
实施例10按照下面所述测定包含(1)木瓜酶，(2)5.6％L-肉毒碱，(3)5.6％乙醇酸，或(4)木瓜酶与5.6％L-肉毒碱的局部用组合物的剥脱效果。
分别按照实施例7和8所述，制备5.6％L-肉毒碱组合物(pH7)和5.6％乙醇酸组合物。
按照下面所述制备具有下面制剂的含木瓜酶的局部用组合物(含6蛋白水解单位(PU)的木瓜酶，整个pH为7.0)。混合A相的组分并加热至75-80℃。将B相组分加在一起，加热至75-80℃，剧烈搅拌下将A相缓慢加入到B相。搅拌该混合物直到均匀，开始快速冷却，同时继续混合。当该批料冷却至低于45℃时，加入C相。混合并继续冷却至35℃时，加入D相。
该混合物冷却混合至25℃。按照需要用NaOH或HCl调节pH。
有防晒剂和酶的修补/剥脱乳膏组分 重量％A相硬脂酸 3.00丁基甲氧基二苄基甲烷 0.50对甲氧基肉桂酸辛酯 2.00矿物油 1.50鲸蜡醇 1.00LONZEST_143-S 1.50ALDO_MCT 1.50LONZEST_MSA 1.50PEGOSPERSE_1750MS 0.75LONZEST_SMS 2.25B相脲 10.00Natrulon_H-10 3.00去离子水 45.55C相GEOGARD_361 0.25D相木瓜酶溶液(7克水，5克十甘油12.02和0.02克木瓜酶)NaOH(浓) 适量HCl(浓)适量去离子水 13.68按照制备木瓜酶组合物所述相同的方法，制备含5.6％L-肉毒碱和木瓜酶的组合物，除了D相包含(1)12.02％木瓜酶溶液，(2)5.6％L-肉毒碱，(3)适量氢氧化钠(浓)和盐酸(浓)，和(4)8.08％去离子水。
按照实施例7所述的方法测定所述组合物。还测试不含L-肉毒碱，木瓜酶或乙醇酸的对照局部用组合物。
结果示于图4。图4表明L-肉毒碱和酶木瓜酶在pH为7时的掺混物比它们单独使用时更有效和作用更快。
实施例11按照下面所述测定含5％十甘油或5％甘油的组合物的增湿效果。
该组合物通过混合下面组分制备(1)10％油相组分，(2)5％十甘油或5％甘油，和(3)1％NovemerTMECS-1水溶液(从Noveon of Cleveland，Ohio获得)(增稠剂/第二乳化剂)。
将各组合物每天两次施用于皮肤(0.2g/10cm2)，10天的周期，用corneometer测定皮肤的水含量。还测定未处理的皮肤作为对照。结果示于下表1。
表1
实施例12主观的评价小组投票，评价含4％(w/w)甘油和4％十甘油的组合物的皮肤性能。按照实施例11所述的方法制备组合物(即，有10％油相组分和1％NovemberTMECS-1)。将该组合物施涂在皮肤上，要求参与者根据特定标准列出组合物的性能。要求参与者以1-5的规格记下每个标准的分，1是最差，5是最好。结果列于下表2。
表2
在此列出的所有参考文献都参考结合于本文。对本说明书和参考文献间存在矛盾的内容，揭示内容的语言在此作为对照。
权利要求
1.一种用于改善或防止有害的皮肤症状，剥脱皮肤，加速皮肤更新或使皮肤光亮的局部用组合物，该局部用组合物包含在对局部应用的药理学可接受的赋形剂中的有效量的下面组分(a)L-肉毒碱，酰基L-肉毒碱，及其盐或它们的混合物，和(b)一种或多种羟酸，蛋白水解酶，皮肤光亮剂，或它们的混合物。
2.如权利要求1所述的局部用组合物，其特征在于，局部用组合物的pH约为3.5-8。
3.如权利要求1所述的局部用组合物，其特征在于，局部用组合物的pH约为6-8。
4.前述权利要求中任一项所述的局部用组合物，其特征在于，所述羟酸是乙醇酸，乳酸，水杨酸，或它们的混合物。
5.如权利要求1-3中任一项所述的局部用组合物，其特征在于，蛋白水解酶是木瓜酶，菠萝蛋白酶，或它们的混合物。
6.如权利要求1-3中任一项所述的局部用组合物，其特征在于，皮肤光亮剂是黑色素抑制剂。
7.如权利要求6所述的局部用组合物，其特征在于，黑色素抑制剂是熊果苷，曲酸，典酸模提取物，或它们的混合物。
8.如权利要求1-3中任一项所述的局部用组合物，其特征在于，皮肤光亮剂是黑色素漂白剂。
9.如权利要求8所述的局部用组合物，其特征在于，黑色素漂白剂是过氧化物，氢醌，酶葡糖氧化酶，或它们的混合物。
10.前述权利要求中任一项所述的局部用组合物，其特征在于，局部用组合物选自油膏，洗剂，凝胶，悬浮液，乳剂和乳膏。
11.一种剥脱皮肤的方法，包括局部施用有效量的前述权利要求中任一项所述的局部用组合物。
12.一种加速皮肤更新的方法，包括局部施用有效量的权利要求1-10中任一项所述的局部用组合物。
13.一种使皮肤光亮的方法，包括局部施用有效量的权利要求1-10中任一项所述的局部用组合物。
14.一种局部用组合物，包含在药理学可接受的赋形剂中的下面组分(a)一种或多种添加剂，和(b)有效量的L-肉毒碱，酰基L-肉毒碱，及其盐，或它们的混合物，以改善或防止有害的皮肤症状，剥脱皮肤，和/或加速皮肤更新，所述局部用组合物的pH在约6-8范围。
15.如权利要求14所述的局部用组合物，其特征在于，局部用组合物的pH约为6.5-7。
16.如权利要求14或15所述的局部用组合物，其特征在于，添加剂的最佳pH为约6-7。
17.如权利要求14-16中任一项所述的局部用组合物，其特征在于，添加剂是蛋白水解酶或皮肤光亮剂。
18.如权利要求17所述的局部用组合物，其特征在于，蛋白水解酶是木瓜酶。
19.如权利要求17所述的局部用组合物，其特征在于，皮肤光亮剂是葡糖氧化酶。
全文摘要
本发明提供一种局部用组合物，该局部用组合物包含在对局部应用的药理学可接受的赋形剂中的有效量的下面组分(a)L－肉毒碱，酰基L－肉毒碱，及其盐或它们的混合物，和(b)一种或多种羟酸，蛋白水解酶，皮肤光亮剂，或它们的混合物。给予局部用组合物，以改善或防止有害的皮肤症状(表皮剥脱和失去皮肤弹性)，剥脱皮肤，加速皮肤更新和/或使皮肤光亮。例如，给予该组合物，来使水痘感染引起的疤痕形成最少，日光灼伤引起的干燥和剥离最小，并提高皮肤弹性。局部用组合物的pH较好在约3.5－8范围。根据一个实施方式，局部用组合物的pH在约3.5－6.5或7范围。根据另一个实施方式，局部用组合物的pH在约6－8范围，较好在约6.5－7.5范围。根据一个优选实施方式，局部用组合物基本上不含D－肉毒碱，酰基D－肉毒碱，及其盐，更好的，所述组合物还基本上不含LD－肉毒碱，酰基LD－肉毒碱及其盐。
文档编号A61K31/19GK1964695SQ200480008473
公开日2007年5月16日 申请日期2004年3月29日 优先权日2003年3月28日
发明者J·古斯, M·F·楚扎克, V·伦蒂纳 申请人:隆萨股份有限公司