专利名称：一种锝标记的美金刚胺二硫二氮衍生物药盒的制备方法
技术领域：
本发明涉及"，c-N-[2-(N-(2-巯基乙基))氨基乙酰基]-N-(2-巯基乙基)-3， 5-二甲基金刚烷氨基乙酰胺药盒的制备方法，属于放射性药物标记技术领域。
技术背景99mTc-N-acetyl-Amantadine(99mTc- NCAM)是我们通过设计在美金刚胺氨基 位上连接二硫二氮配体，并用之与锝形成一种稳定的络合物(99mTc- NCAM)， 该络合物在CA上无登记号，国内外也没有相关报道。"mTc-NCAM呈电中性，1ogP1.8，(脂水分配系数P的大小决定其能否穿透 血脑屏障BBB， 1ogP0.5时，药物很难通过BBB， logP应在0.5~2之间才能较 好地穿透BBB)，分子量413 (药物的相对分子量决定其能否穿透BBB，分子量 小于600才可能进脑)。实验结果从理论上说明99mTc- NCAM能够穿透血脑屏 障。9^Tc-NCAM的小鼠体内动物分布试验结果显示在纹状体、海马处浓聚，在 肝脏、肺、胰摄取较高。目前国外文献报道的都是用18F、 1231或"C标记NMDA受体拮抗剂用于研 究精神类疾病受体的变化，还没有99mTc标记NMDA受体的报道。根据王学斌等的"mTc放射性药物的分子设计原则，①设计的""^Tc配合物应具有一定的生物分布性能，可浓集于特定的组织或耙器官。②设计的""^TC配合 物的制备方法应简单快捷，可药盒化，质量容易控制。③设计的"mTc药物应安全性高，毒副作用小。我们设计的"，c-NCAM符合这三大原则，是一种潜在的新型脑受体显像剂。发明内容本发明的目的是提供"mTc-N-[2-(N-(2-巯基乙基))氨基乙酰基]-N-(2-巯基乙 基)-3， 5-二甲基金刚烷氨基乙酰胺药盒的制备方法，提供标记率高、稳定性好、 标记方法简单的脑受体显像药盒。本发明的技术方案 一种"，c-N-[2-(N-(2-巯基乙基))氨基乙酰基]-N-(2-巯基 乙基)-3， 5-二甲基金刚垸氨基乙酰胺药盒，简称"mTc-NCAM药盒，的制备方法， 制备过程为(1) N-[2-(N-(2-巯基乙基》氨基乙酰基]-N-(2-巯基乙基)-3， 5-二甲基金刚 烷氨基乙酰胺药盒的制备称取1.8g Na2HPCV12H2O和0.2g KH2P04溶于70 mL水中，再加0.20-2.0g葡庚
糖酸钠(GH)和20-400mg乙二胺四乙酸(EDTA),加入50.0-2000.0 mg / L SnF2 的O.IM的盐酸溶液IO.O mL中，最后加入200.0-2000.0mg / L NCAM的70。/。浓度的 甲醇溶液10.0mL，再补加蒸馏水到总体积100mL，混匀后无菌过滤，按1.00mL /瓶分装于10mL规格西林瓶中，冷冻干燥后即得NCAM药盒，每支药盒中含 20-200|igNCAM、 5-200|ig SnF2.2H20、 0.2-4mg乙二胺四乙酸、2-20mg葡庚糖酸 钠和pH 4.0-7.0磷酸盐缓冲液；1^[2-(^(2-巯基乙基))氨基乙酰蜀-:^(2-巯基乙基)-3， 5-二甲基金刚烷氨基 乙酰胺(简称NCAM)，该化合物为本研究所自制合成，其制备工艺路线为<formula>formula see original document page 4</formula>其制备方法已另行申请专利，与本发明申请日为同一天。<formula>formula see original document page 4</formula>(2) 99mTc标记药盒冻干的NCAM药盒，加入淋洗的50-1000MBq的 Na99mTc04溶液1.0mL，置于沸水浴上加热30 min后冷却，即为""^-1^[2-(^(2-巯基乙基))氨基乙酰基]-1^(2-巯基乙基)-3， 5-二甲基金刚烷氨基乙酰胺药盒。 标记率的测定采用薄层色谱(TLC)法，固定相采用聚酰胺薄膜，展开剂为乙酸乙酯:乙醇 (体积比)=1:1 。用不含NCAM的试剂盒按同样方法标记后进行TLC分析比较， 确定标记溶液中各种组分的Rf值，99mTc-NCAM为0.8 1.0、 99mTc -GH为0 0.2、 "，c(V为0 0.2、 99mTc胶体为0 0.2;各种条件下的标记率均测定3 次以上再取平均值。或采用HPLC法，柱子LichrospherC18(4.6x250mm,5pin)， 85%甲醇作流动 相，流速0.8mL/min, 99mTc胶体和不含NCAM的标记液保留时间在3min左右， 络合物"mTc-NCAM的保留时间在ll,27min，两种方法测定结果一致，标记率均 大于95%。本发明的有益效果制备的药盒标记率>90%，稳定性好。药盒中各组分含 量在下列范围内标记率>90%， NCAM 20-200jig、 SnF2 5-200吗、EDTA 0.2-4.0 mg、 GH2-20mg、 pH值4.0-7.0。可成功制备标记率>90%的药盒，其稳定性较 好。
图l pH值对标记率的影响。图2葡庚糖酸钠对标记率的影响。图3 EDTA对标记率的影响。图4亚锡对标记率的影响。图5 NCAM对标记率的影响。图6不含NCAM的标记液的HPLC色谱图。图7 99mTc- NCAM HPLC色谱图。85%甲醇，Waters 1525 Binary HPLC pump, 检测器PerkinElmer Radiomatic 610 TR，柱子Lichrospher C18 (4.6 X 250mm，5nm): 0.8ml/min。
具体实施方式
按每支药盒含NCAM 50pg、 SnF220jag、 EDTA0.5mg、 Na2HP04.12H20 17.6 mg， KH2P04 2.37mg和葡庚糖酸钠(GH)5mg制备药盒。 实施例lpH值的变化对标记率的影响。取除缓冲剂(Na2HP04和KH2P04)外的各组 分，加入新配制的不同pH值(l 12)缓冲溶液中，再加入Na""^Tc04，标记完成后 按TLC法和HPLC法测定标记率。pH在4.0-7.0之间标记率稳定，且>95%。见图l。 实施例2药盒中各组分含量对标记率的影响。保持其他组分含量不变，分别改变药 盒中NCAM、 SnF2， 、 EDTA和GH的含量，标记后测定标记率。GH在2-20 mg 之间标记率大于95%; EDTA在0.2-4.0mg之间标记率大于95。/。；亚锡在5-200吗 之间标记率大于95%; NCAM在20-200jug之间标记率大于95。/。。见图2-5。实施例3稳定性试验将标记好的反应液室温放置l、 2、 3、 4、 5、 6小时分别测定标记率，放置 6小时后标记率仍大于90%。
权利要求
1、一种99mTc-N-[2-(N-(2-巯基乙基))氨基乙酰基]-N-(2-巯基乙基)-3，5-二甲基金刚烷氨基乙酰胺药盒，简称99mTc-NCAM药盒，的制备方法，其特征是制备过程为(1)N-[2-(N-(2-巯基乙基))氨基乙酰基]-N-(2-巯基乙基)-3，5-二甲基金刚烷氨基乙酰胺药盒的制备称取1.8g Na2HPO4·12H2O和0.2g KH2PO4溶于70mL水中，再加入0.20-2.0g葡庚糖酸钠和20-400mg乙二胺四乙酸，加入50.0-2000.0mg/L SnF2的0.1M的盐酸溶液10.0mL中，最后加入200.0-2000.0mg/L NCAM的70％浓度的甲醇溶液10.0mL，再补加蒸馏水到总体积100mL，混匀后无菌过滤，按1.00mL/瓶分装于10mL规格西林瓶中，冷冻干燥后即得NCAM药盒，每支药盒中含20-200μgNCAM、5-200μg SnF2·2H2O、0.2-4mg乙二胺四乙酸、2-20mg葡庚糖酸钠和pH在4.0-7.0磷酸盐缓冲液；(2)99mTc标记药盒冻干的NCAM药盒，加入淋洗的50-1000MBq的Na99mTc O4溶液1.0mL，置于沸水浴上加热30min后冷却，即为99mTc-N-[2-(N-(2-巯基乙基))氨基乙酰基]-N-(2-巯基乙基)-3，5-二甲基金刚烷氨基乙酰胺药盒。
全文摘要
一种锝标记的美金刚胺二硫二氮衍生物药盒的制备方法，属于放射性药物标记技术领域。具体涉及一种<sup>99m</sup>Tc-N-[2-(N-(2-巯基乙基))氨基乙酰基]-N-(2-巯基乙基)-3，5-二甲基金刚烷氨基乙酰胺药盒，简称<sup>99m</sup>Tc-NCAM药盒的制备方法，以N-[2-(N-(2-巯基乙基))氨基乙酰基]-N-(2-巯基乙基)-3，5-二甲基金刚烷氨基乙酰胺(NCAM)为原料，先与辅料葡庚糖酸钠、乙二胺四乙酸、SnF<sub>2</sub>等配制NCAM药盒，再加入新淋洗的50-1000MBq的Na<sup>99m</sup>TcO<sub>4</sub>溶液进行<sup>99m</sup>Tc标记，制得<sup>99m</sup>Tc-NCAM药盒。药盒中各组分含量在下列范围内NCAM20-200μg、SnF<sub>2</sub>5-200μg、乙二胺四乙酸0.2-4.0mg、葡庚糖酸钠2-20mg、pH值4.0-7.0。制备的药盒标记率＞90％，其稳定性较好。
文档编号A61K51/04GK101156953SQ20071013551
公开日2008年4月9日 申请日期2007年11月16日 优先权日2007年11月16日
发明者周杏琴, 张建康, 张荣军, 徐希杰, 曹国宪, 罗世能, 邹美芬, 钦晓峰 申请人:江苏省原子医学研究所