包含钙调神经磷酸酶抑制剂或mTOR抑制剂的眼科组合物的制作方法

专利名称：包含钙调神经磷酸酶抑制剂或mTOR抑制剂的眼科组合物的制作方法
技术领域：
本文公开的实施方案涉及包含钙调神经磷酸酶抑制剂(calcineurininhibitor) 或mTOR抑制剂的稳定的眼科组合物，更具体地，涉及使用所公开组合物治疗眼部疾病和/ 或病症的方法。
背景技术：
在美国，眼睛前表面的疾病和损伤是到医师处就诊寻求眼医学护理的主要原因。 这些疾病和损伤位列最痛苦的眼部病症，可导致残疾和失明。眼表的主要临床问题包括眼 部表面干燥、泪液膜异常和相关并发症；导致病态和瘢痕形成的眼部表面创伤；角膜功能 障碍性萎缩(cornealdysfunction dystrophy)和遗传性疾病；炎性疾病；和外部眼感染 (external ocular infections)。眼部疾病和损伤可具有发痒、眼流出物(runny eyes)至 视力受损等症状。因此，立即解决眼睛问题很重要，因为某些疾病可逐渐恶化乃至引发其它 严重的问题。眼部疾病的大多数药理学控制包括向眼表局部施用溶液如滴剂。尽管最终到 达前段眼部组织的局部施用药物剂量的比例相对小，但是局部用制剂仍然有效，很大程度 上是因为所施用药物的浓度非常高。在工业化社会中，眼睛后段组织(包括视网膜和脉络膜)的疾病和损伤涉及许多 最常见的失明疾病。单是年龄相关性黄斑变性(AMD)就影响超过1千万美国人。由AMD和 影响所述后段的其它疾病(包括糖尿病性视网膜病、青光眼和色素性视网膜炎)所引起的 严重视力丧失是全世界大多数不可逆失明病例的原因。目前，由于递送有效剂量的药物至 眼后部的靶组织存在困难，对后段疾病的治疗受到显著限制。

发明内容
本文公开了包含钙调神经磷酸酶抑制剂或mTOR抑制剂的眼科组合物。本发明的 眼科组合物是混合胶束的水溶液。本文公开的眼科组合物是生物相容的，尤其可用于局部 施用于眼睛以治疗眼部病症。根据本文阐述的一些方面，提供了一种药物组合物，其包含钙 调神经磷酸酶抑制剂或mTOR抑制剂；HLB指数大于约10的第一表面活性剂；和HLB指数大 于约13的第二表面活性剂，其中所述第一表面活性剂的HLB指数与所述第二表面活性剂的 HLB指数之间的绝对差值大于约3，并且其中所述组合物形成混合胶束。根据本文阐述的一些方面，提供了一种药物组合物，其包含钙调神经磷酸酶抑制 剂；维生素E TPGS和辛苯聚醇(octoxynolMO，其中所述组合物适于局部施用于眼部组织。根据本文阐述的一些方面，提供了一种药物组合物，其包含mTOR抑制剂；维生素E TPGS和辛苯聚醇40，其中所述组合物适于局部施用于眼部组织。根据本文阐述的一些方面，提供了一种制备混合胶束组合物的方法，其包括将钙 调神经磷酸酶抑制剂或mTOR抑制剂与HLB指数大于约10的第一表面活性剂和HLB指数大 于约13的第二表面活性剂在溶剂中相混合，形成溶剂溶液；蒸发所述溶剂溶液，形成近固 体物；用水溶液水合所述近固体物；以及溶解所述近固体混合物以形成混合胶束组合物，其中所述组合物是光学上澄清的。根据本文阐述的一些方面，提供了一种用于在有此需要的患者中治疗眼部疾病的 方法，其包括向患者的眼睛局部施用包含治疗有效量的钙调神经磷酸酶抑制剂或mTOR抑 制剂的组合物，所述组合物还含有维生素E TPGS和辛苯聚醇-40，其中所述组合物是混合 胶束的水溶液。根据本文阐述的一些方面，提供了一种用于治疗、减轻、改善或缓解动物的炎性眼 部疾病的方法，其包括提供含有包囊在胶束中的钙调神经磷酸酶抑制剂或mTOR抑制剂的 混合胶束药物组合物，所述胶束是由HLB指数大于约10的第一表面活性剂和HLB指数大于 约13的第二表面活性剂形成的；以及以足以治疗、减轻、改善或缓解所述炎性眼部疾病的 频率向所述动物施用一定量的所述药物组合物。根据本文阐述的一些方面，提供了一种用于治疗、减轻、改善或缓解对象的眼后部 (back-of-the-eye)症状或病症的方法，其包括提供包含包囊在胶束中的钙调神经磷酸酶 抑制剂的混合胶束药物组合物，所述胶束是由HLB指数大于约10的第一表面活性剂和HLB 指数大于约13的第二表面活性剂形成的；以及向所述对象以足以治疗、减轻、改善或缓解 眼后部症状或病症的频率施用一定量的所述药物组合物。根据本文阐述的一些方面，提供了一种人工泪液组合物，其包含混合胶束的水溶 液，所述混合胶束由维生素E生育酚聚乙二醇琥珀酸酯(TPGS)衍生物和乙氧基化辛基苯酚 表面活性剂形成。


将进一步参照附图来阐述本发明公开的实施方案，其中在全部附图中，相同的数 字表示相同的结构。所述附图不一定按比例显示，而是将重点通常放在阐述本文所公开实 施方案的原理上。图1显示了通过用本发明公开内容的包含0. 2%沃罗孢素(voclosporin)的混合 胶束制剂的一个实施方案处理30天，犬科KCS患者的平均施默泪液试验(Schirmer Tear Test) (STT)值的图示。图2显示了在向雌性新西兰白兔单次(1天)局部施用含有14C-沃罗孢素的本文 所公开实施方案的混合胶束药物组合物之后的沃罗孢素的组织水平。甚至在24小时时观 察到了治疗水平的沃罗孢素，证实了可每日一次(QD)施用本文所公开实施方案的含水混 合胶束组合物。包括雄性兔的实验也具有类似的结果(数据没有显示)。图3A-D显示了在向雌性新西兰白兔单次(1天)或重复(7天)、双侧、每日一次、 局部施用含有14C-沃罗孢素的本文所公开实施方案的混合胶束药物组合物之后的沃罗孢 素的平均眼部组织浓度。图3A显示了角膜中沃罗孢素的平均眼部组织浓度。图3B显示了 虹膜/睫状体中沃罗孢素的平均眼部组织浓度。图3C显示了泪腺中沃罗孢素的平均眼部 组织浓度。图3D显示了晶状体中沃罗孢素的平均眼部组织浓度。图4A-D显示了在向雌性新西兰白兔单次(1天)或重复(7天)、双侧、每日一次、 局部施用含有14C-沃罗孢素的本文所公开实施方案的混合胶束药物组合物之后，沃罗孢素 的平均眼部组织浓度。图4A显示了下结膜中沃罗孢素的平均眼部组织浓度。图4B显示了 下眼睑中沃罗孢素的平均眼部组织浓度。图4C显示了瞬膜中沃罗孢素的平均眼部组织浓度。图4D显示了巩膜中沃罗孢素的平均眼部组织浓度。图5A-D显示了在向雌性新西兰白兔单次(1天)或重复(7天)、双侧、每日一次、 局部施用含有14C-沃罗孢素的本文所公开实施方案的混合胶束药物组合物之后，沃罗孢素 的平均眼部组织和流体浓度。图5A显示了上结膜中沃罗孢素的平均眼部组织浓度。图5B 显示了上眼睑中沃罗孢素的平均眼部组织浓度。图5C显示了房水中沃罗孢素的平均眼部 流体浓度。图5C显示了玻璃体中沃罗孢素的平均眼部流体浓度。图6A-D显示了在向雌性新西兰白兔单次(1天)或重复(7天)、双侧、每日一次、 局部施用含有14C-沃罗孢素的本文所公开实施方案的混合胶束药物组合物之后，沃罗孢素 的平均眼部组织和流体浓度。图6A显示了泪液中沃罗孢素的平均眼部流体浓度。图6B显 示了下颂下淋巴结中沃罗孢素的平均眼部组织浓度。图6C显示了视神经中沃罗孢素的平 均眼部组织浓度。图6D显示了脉络膜/视网膜中沃罗孢素的平均眼部组织浓度。图7为显示在向雌性新西兰白兔重复(7天)、双侧、每日一次、局部施用含有 14C-沃罗孢素的本文所公开实施方案的混合胶束药物组合物之后的沃罗孢素的Cmax值的 图。虽然上述附图阐明了本文所公开的实施方案，但是本发明也涉及到其它实施方 案，如在讨论中提及的。本公开内容通过代表性的而非限定性的方式描述了示例性的实施 方案。本领域技术人员可以设计出许多其它的改良和实施方案，其均在本文所公开实施方 案之原理的范围和精神内。详细说明本文所公开的实施方案涉及混合胶束局部用剂型中的药物组合物，其包含钙调神 经磷酸酶抑制剂或mTOR抑制剂。已经发现，本发明的药物组合物可用于治疗、减轻、改善和 缓解患者或对象的眼部病症。在一个实施方案中，所述组合物可用于治疗眼部疾病，包括炎 性眼表疾病。这些疾病的实例包括但不限于干眼综合征(DES)，舍格伦综合征(Sjogren’ s syndrome)，葡萄膜炎，结膜炎(红眼病)，角膜炎，角膜结膜炎，春季角膜结膜炎(VKC)，特应 性角膜结膜炎(AKC)，包括结疤性结膜炎(cicatrizing conjunctivitis)、睑缘炎和巩膜炎 在内的自身免疫性眼表病。在一个实施方案中，所述组合物可用于治疗眼后部症状和/或病症。这样的症状 /病症的实例包括但不限于后葡萄膜炎、年龄相关性黄斑变性(AMD，湿型或干型)、糖尿病 性眼部症状比如糖尿病性视网膜病(DR)糖尿病性黄斑水肿(DME)、青光眼、高眼压、手术后 眼痛和炎症、眼部新生血管形成比如后段新生血管形成(PSNV)、增殖性玻璃体视网膜病变 (PVR)、巨细胞病毒(CMV)视网膜炎、脉络膜新血管膜(CNVM)、血管闭塞性疾病、色素性视网 膜炎、视神经炎、结疤性眼表疾病、眼部感染、炎性眼部疾病、眼表疾病、角膜疾病、视网膜疾 病比如黄斑前膜(印iretinal membrane)、全身性疾病的眼部表现、遗传性眼部症状和眼部 肿瘤。在一个实施方案中，所述组合物可用于预防例如角膜同种异体移植物移植后的排 斥反应。众所周知，在炎症中，T淋巴细胞在介导对外来组织的排斥反应中起关键作用。预 防排斥反应对于保持移植角膜的健康极其重要。排斥反应可能出现在包含角膜的任何层 中，例如角膜上皮、角膜基质或角膜内皮。角膜的功能可能在内皮排斥反应后受损。内皮层 起着使角膜保持紧密状态(compact state)的作用，充当从角膜基质中除去水的泵。如果
7内皮层功能受损，则可发生胶原纤维的定向障碍，并且角膜的透明性可能丧失。人内皮细胞 是不可复制的，因此在排斥反应情况下供体细胞的损失是不可逆的，并且可导致移植物的 功能和存活率的降低。因此，预防或治疗角膜移植接受者的排斥反应的目标是尽可能减少 内皮细胞的损失。本发明的组合物可用于预防角膜同种异体移植后的排斥反应。用本发明的任一种组合物或方法治疗的患者或对象可以是人或非人动物。在一个 实施方案中，本发明提供了用于治疗有此需要的人患者的眼部疾病的方法。在一个实施方 案中，本发明提供了用于治疗有此需要的人患者的炎性眼部疾病的方法。在另一个实施方 案中，本发明提供用于治疗有此需要的动物患者的眼部疾病的方法，所述动物患者包括但 不限于狗、马、猫、兔、沙鼠、仓鼠、啮齿类、鸟类、水生哺乳动物、牛、猪、羊驼(camelids)及 其它动物。本文使用的术语“眼部疾病”、“眼部症状”和“眼部病症”指可能威胁视力、导致眼 睛不适和可预示全身健康问题的眼睛的疾病/症状。本文使用的术语“前段疾病”指影响眼表面、眼的前房、虹膜和睫状体及晶状体的 所有病症。所述眼表面由角膜、结膜、眼睑、泪腺和睑板腺以及互连的神经组成。本文使用的术语“眼后段疾病”和“眼后部疾病”指影响眼后段的所有病症。眼后 段疾病是主要影响眼后段部位的疾病，所述眼后段部位比如脉络膜或巩膜、玻璃体、玻璃体 腔、视网膜、视神经和使眼后段部位血管化或使其受神经支配的血管和神经。本文使用的术语“生物相容的”和“无刺激性的”指生物学相容的性质，不会在活 组织中产生有毒反应、有害反应或免疫反应。本发明的组合物是生物相容的。类似地，本发 明组合物中没有一种组分固有地对眼部组织有刺激性。本文使用的术语“乳剂”指两种或更多种不互溶液体的混合物，其中一种液体分散 在另一种中。乳剂例如油和水的紧密混合物通常具有混浊或乳状的外观。本文使用的术语“胶束”指表面活性剂分子的聚集体(或簇)。仅当表面活性剂的 浓度大于临界胶束浓度(CMC)时，才形成胶束。表面活性剂是两亲性化学物质，这意味着它 们同时包含疏水性基团和亲水性基团。胶束可以以不同的形状存在，包括球形、圆柱形和盘 形。包含至少两种不同分子种类的胶束是混合胶束。本发明的眼科组合物包括含水的澄清 混合胶束溶液。聚合物胶束被研究作为递送水溶性差(即不溶于水的)或疏水性药物的药物纳米 载体，其可以溶解在胶束的疏水性内核中。因此，胶束可以起改善各种疏水性药物的溶解度 和生物利用度的作用。小尺寸的胶束(通常为约10至约IOOnm)能够使缔合的活性部分有 效地积聚在靶组织中。而且，小尺寸的胶束还具有通过用0.22 μ m截留尺寸的膜过滤来对 胶束除菌的优点。胶束可以由一种或多种聚合物非离子表面活性剂形成。因为胶束的尺寸 小于可见光波长，所以认为光不能被导致透明、澄清溶液的小胶束所散射。本文使用的术语“光学透明性”指在1. O厘米的路径上透过90%或更多的400nm 波长的光。溶液的透明性由胶束的尺寸引起，所述胶束的尺寸通常小于可见光辐射的最小 波长(约350nm)。在一个实施方案中，本发明的眼科组合物是基本上澄清的，在400nm测量 时，吸光度通常小于0. 1 ；优选吸光度小于0. 05。HLB(亲水/亲油平衡)指数值是1950年由Griffin引入作为衡量非离子表 面活性剂的亲水性或亲油性的概念。其可以通过Marszall的苯酚滴定法来进行实验测
8定；参见“Parfumerie，Kosmetik”，第60卷，1979年，第444-448页；进一步的参考文献 可见于Rompp，Chemistry Lexicon，第8版，1983年，第1750页。还可参见例如美国专利 No. 4，795，643(Seth)。干眼综合征(DES，长期干眼，干燥性角膜炎；干眼症；干燥性角膜结膜炎)可定义 为一种包括各种症状的疾症，其导致保留在眼表面的天然泪液膜的组分丧失或改变。没有 该泪液膜，视力受损，患者可遭受严重的眼部不适。DES可以由过量泪液蒸发或者泪腺中泪 液生成减少引起，泪腺是泪液生成的部位。尽管该病症的确切原因未知，但是存在支持泪液 生成减少和泪腺炎症之间联系的证据。目前可获得的用于DES的药物为开发更有效且更好 耐受的产品提供了充分的可能性。DES还可以是舍格伦综合征的一个症状，舍格伦综合征是一种产生泪液和唾液的 腺体被破坏的自身免疫病症。这导致口干、泪液减少和其它的粘膜干燥。葡萄膜炎是一种影响葡萄膜的眼内炎症。葡萄膜是巩膜和视网膜之间的眼层，包 括虹膜、睫状体和脉络膜。葡萄膜向视网膜提供大部分的血液供给。葡萄膜炎可以被认为 是一种引起眼睛慢性炎症的自身免疫疾病。大量证据表明T-淋巴细胞参与葡萄膜炎的发 展，T-淋巴细胞是参与炎性过程的关键细胞。炎症可以在脉络膜和视网膜上引起瘢痕形成 区域，其是引起视力丧失的区域。存在各种形式的葡萄膜炎，包括前葡萄膜炎、睫状体平坦 部炎(pars planitis)和后葡萄膜炎。如果不对葡萄膜炎加以治疗，则可能出现严重的并 发症；包括白内障、青光眼、视网膜剥离、视网膜水肿和永久性视力丧失。前葡萄膜炎(虹膜炎)发生在眼前部，是葡萄膜炎的最常见形式。睫状体平坦部 炎是睫状体平坦部的炎症，睫状体平坦部是虹膜和脉络膜之间的狭窄区域。该病症更经常 地发生在年轻男性中，但通常与其它疾病无关。后葡萄膜炎(chondroitis)主要影响脉络 膜；葡萄膜的后部。如果还涉及视网膜，则其被称为脉络膜视网膜炎。后葡萄膜炎可以与自 身免疫疾病一起发生，或者在全身感染之后发生。在后葡萄膜炎中，炎症可以持续几个月到 几年，并且可以引起永久性视力损害，即使进行了治疗。葡萄膜炎可以引起视力障碍、眼疼和视力丧失。据估计在美国，约10%的新失明病 例是由葡萄膜炎引起的。仅在美国，约300，000人患有葡萄膜炎，其中大部分受到前葡糖膜 炎的影响。FDA批准用于葡萄膜炎的唯一治疗剂种类为皮质类固醇类，其以多种副作用而著 称，例如高血压、高血糖症和高胆固醇血症。以及在眼睛方面青光眼和白内障的形成。结膜炎(红眼病)描述了一类引起结膜肿胀、发痒、灼伤和发红的疾病，所述结膜 是沿着眼睑并覆盖巩膜的暴露区域或白眼球的保护膜。角膜炎是一种角膜(眼前部的透明部分)炎症。角膜炎可以由感染因子(细菌、 真菌、病毒、寄生虫等)或非感染因子(例如，某些类型的自身免疫疾病与各种非感染性角 膜炎相关)引起。角膜结膜炎指角膜和结膜的炎症。春季角膜结膜炎(VKC)是一种在上眼睑上以硬的、隆起的、圆石样肿块为特征的 复发性眼部炎性疾病。还可存在结膜的肿胀和增厚。结膜是沿着眼睑以及眼裸露部分的最 外面的膜，不包括角膜。特应性角膜结膜炎是一种称为特应性的病症的结果。特应性是一种遗传病症，其 中对于给定的变应原，免疫系统产生比正常抗体更高的应答。
全身性免疫介导的疾病比如结疤性结膜炎及眼部表面的其它自身免疫病症代表 临床上的多种病症，其中急性和慢性自体反应机制可引起对眼睛的显著损害。当严重且影 响结膜的上皮和固有层时，继而出现结疤，作为纤维化的结果，导致显著的机械变化。尽管 这些病症通常并不常见，但其可导致复杂病态和视力残疾。睑缘炎是一种引起眼睑炎症的常见病症。巩膜炎是一种严重的炎性疾病，其影响被称为巩膜的眼的白色外层。钙调神经磷酸酶是钙/钙调蛋白-调节的蛋白磷酸酶，其参与细胞内信号传导。 钙调神经磷酸酶抑制剂是通过靶向钙调神经磷酸酶(PP2B，PP3)而阻断合适底物的钙调 神经磷酸酶脱磷酸的物质，钙调神经磷酸酶是一种参与基因调节的细胞酶。显示出全身治 疗特性的另一类化合物是mTOR抑制剂。mTOR抑制剂靶向被称为“雷帕霉素的哺乳动物靶 点”(mTOR)的分子靶点。该类的原型化合物是西罗莫司(sirolimus)。年龄相关性黄斑变性(AMD)是一种与衰老相关的疾病，其逐渐破坏清晰的中心视 力。AMD影响位于视网膜中心的黄斑。AMD以两种形式发生湿型和干型。当视网膜后的异 常血管开始在黄斑下生长时，发生湿型AMD。这些新的血管往往非常脆，且通常渗漏出血液 和液体。所述血液和液体使黄斑由其眼后部的正常位置升高。对黄斑的损害快速发生。当 黄斑中的感光细胞慢慢分解，受影响眼的中心视力逐渐模糊时，发生干型AMD。糖尿病可以以多种途径影响眼睛。糖尿病性视网膜病(DR)是一种由于眼后部的 感光组织(视网膜)的血管受损而引起的糖尿病并发症。起初，糖尿病性视网膜病可能不 会引起症状或者仅引起轻微的视力问题。然而，最终，糖尿病性视网膜病可导致失明。糖尿 病性黄斑水肿(DME)是糖尿病中的视网膜肿胀，其是由于液体从黄斑内的血管中渗漏出而 引起的。眼部新生血管形成是眼内血管的异常或过度形成。在糖尿病性视网膜病和年龄相 关性黄斑变性(ARMD)中已经显示出眼部新生血管形成。增殖性玻璃体视网膜病变(PVR)是眼内的瘢痕组织形成。“增殖性”是因为细胞增 殖，“玻璃体视网膜病变”是因为该问题涉及玻璃体和视网膜。在PVR中，瘢痕组织在收缩的 视网膜上的薄层(sheet)中形成。该显著的收缩将视网膜拉向眼中心，并严重地剥离视网 膜和使其变形。PVR可以在后部或前部发生，视网膜的折叠也可以在前部或周围发生。巨细胞病毒(CMV)与疱疹病毒有关，几乎存在于每个人中。当个人的免疫系统因 为疾病(HIV)、器官或骨髓移植或者化疗而受到抑制时，CMV病毒可以引起眼睛和身体其余 部位的损伤和疾病。CMV影响约30%的视网膜损害的病例中的眼睛。这被称为CMV视网膜 炎。当视神经发炎和髓鞘受损害或被破坏时，发生视神经炎。发生在位于眼后部的视 神经段的神经损伤称为球后视神经炎，其为有时用于视神经炎的另一个术语。又称为黄斑皱褶的视网膜前膜(印iretinal membrane)是一种在黄斑上形成的瘢 痕组织样膜。其通常通过引起模糊和变形而缓慢发展和影响中心视力。随着其发展，黄斑 上膜的拉伸可引起肿胀。本发明的钙调神经磷酸酶抑制剂优选为具有钙调神经磷酸酶抑制活性的亲免 蛋白结合化合物。亲免蛋白结合钙调神经磷酸酶抑制剂是与亲免蛋白(例如亲环蛋白 (immunophilin)和巨菲蛋白(macrophilin))形式钙调神经磷酸酶抑制复合物的化合物。
10亲环蛋白结合钙调神经磷酸酶抑制剂的实例为环孢素类(cyclosporines)或环孢素衍生 物(在下文中称为环孢素类)，巨菲蛋白结合钙调神经磷酸酶抑制剂的实例为子囊霉素 (FR 520)和子囊霉素衍生物(在下文中称为子囊霉素类)。大量子囊霉素衍生物是已知 的，其为在真菌种类中天然存在的，或者可通过发酵方法处理或化学衍生化作用而获得。子 囊霉素型大环内酯包括子囊霉素、他克莫司(tacrolimus) (Π(506)、西罗莫司和吡美莫司 (pimecrolimus)。环孢素(cyclosporine)，最初是从土壤真菌 Potypaciadium infilatum 中提取 的，其具有11个氨基酸的环状结构，包括例如环孢素A到I，比如环孢素A、B、C、D和G。 环孢素与有免疫活性的淋巴细胞(特别是T-淋巴细胞)的胞浆蛋白亲环蛋白相结合，形 成复合物。该复合物抑制钙调神经磷酸酶，钙调神经磷酸酶在正常环境中诱导白细胞介 素-2(IL-2)的转录。环孢素还抑制淋巴因子生成和白细胞介素释放，导致效应器T-细胞 的功能降低。沃罗孢素是第二代钙调神经磷酸酶抑制剂，其是一种更有效且毒性更小的环孢素 A的半合成衍生物。与该类其它分子一样，沃罗孢素可逆地抑制有免疫活性的淋巴细胞，特 别是T-淋巴细胞，以及抑制淋巴因子的生成和释放。该作用主要是通过抑制钙调神经磷酸 酶介导的，钙调神经磷酸酶是一种在细胞胞浆中发现的磷酸酶。沃罗孢素具有用双键延伸 的单个碳，已经显示出所述双键更深地延伸到钙调神经磷酸酶的锁销区(latch region)/ 调节区。在一个实施方案中，本发明的组合物包含反式的沃罗孢素、反式ISA247 CAS RN 368455-04-3，其描述在例如美国专利公布No. 2006/0217309中，该专利公布在此通过引用 并入本文。沃罗孢素的进一步组合物描述在例如美国专利No. 7，060, 672中，该专利在此通 过引用并入本文。他克莫司(Π(506)是另一种钙调神经磷酸酶抑制剂，其也是一种真菌产物，但具 有大环内酯的内酯结构。他克莫司已被用作与肝、肾、心脏、肺和心脏/肺移植有关的免 疫抑制剂。他克莫司还显示出抑制IL-2的生成。他克莫司与亲免蛋白(Π(结合蛋白12， FKBP12)结合，然后与钙调神经磷酸酶复合物相结合以抑制其磷酸酶活性。西罗莫司(雷帕霉素)是一种从放线菌吸水链霉菌 (Streptomyceshygroscopicus)中分离出的微生物产物。西罗莫司与亲免蛋白O7K-结合 蛋白12，FKBP12)结合而形成复合物，其通过直接结合mTOR复合物l(mTORCl)而抑制雷帕 霉素的哺乳动物靶点(mTOR)通路。西罗莫司抑制白细胞介素_2 (IL-2)的应答，从而阻断 T细胞和B细胞的活化。相反，他克莫司和环孢素则抑制IL-2的产生。吡美莫司是一种新的钙调神经磷酸酶抑制剂，已经发现其具有抗马拉色氏霉菌 (Malassezia spp.)的抗真菌性质，在这一点上与他克莫司一样。钙调神经磷酸酶抑制剂比如环孢素A、沃罗孢素、子囊霉素、他克莫司、吡美莫司、 其类似物或其可药用盐可用于本发明的混合胶束组合物中。在一个实施方案中，所述钙调 神经磷酸酶抑制剂为沃罗孢素。mTOR抑制剂比如西罗莫司(雷帕霉素)、坦西莫司(temsirolimus)、依维莫司 (evero 1 imus)、其类似物或其可药用盐可以用于本发明的混合胶束组合物中。本发明提供了药物组合物，其包含钙调神经磷酸酶抑制剂或mTOR抑制剂、HLB指 数大于约10的第一表面活性剂和HLB指数大于约13的第二表面活性剂，其中所述药物组合物形成混合胶束。通常，所述混合胶束以水溶液形式提供，从而实现所述组合物的局部施 用。在一个实施方案中，所述第一表面活性剂的HLB指数和所述第二表面活性剂的HLB指 数之间的绝对差值大于约3。所述组合物可被用于局部施用于眼，以治疗各种眼部病症，包 括前段和后段病症。在一个实施方案中，本发明的药物组合物包含环孢素A、HLB指数大于约10的第一 表面活性剂和HLB指数大于约13的第二表面活性剂。在一个实施方案中，所述组合物包含 环孢素A、维生素E TPGS和辛苯聚醇-40。在一个实施方案中，本发明的混合胶束组合物包 含沃罗孢素、HLB指数大于约10的第一表面活性剂和HLB指数大于约13的第二表面活性 剂。在一个实施方案中，所述组合物包含沃罗孢素、维生素ETPGS和辛苯聚醇-40。在一个 实施方案中，本发明的混合胶束组合物包含他克莫司、HLB指数大于约10的第一表面活性 剂和HLB指数大于约13的第二表面活性剂。在一个实施方案中，所述组合物包含他克莫司、 维生素E TPGS和辛苯聚醇-40。在一个实施方案中，本发明的混合胶束组合物包含mTOR抑 制剂、HLB指数大于约10的第一表面活性剂和HLB指数大于约13的第二表面活性剂。在 一个实施方案中，所述mTOR抑制剂选自西罗莫司、坦西莫司、依维莫司、其类似物或其可药 用盐。在一个实施方案中，所述组合物包含西罗莫司、维生素E TPGS和辛苯聚醇-40。在 另一个实施方案中，本发明的混合胶束组合物包含吡美莫司、HLB指数大于约10的第一表 面活性剂和HLB指数大于约13的第二表面活性剂。在一个实施方案中，公开了包含吡美莫 司、维生素E TPGS和辛苯聚醇-40的所述组合物。在本发明的一个实施方案中，使用两种表面活性剂产生沃罗孢素的混合胶束制 剂，引起沃罗孢素的水溶性和生物利用度增加。在一个实施方案中，所述混合胶束结构包含 HLB指数大于约10的第一表面活性剂和HLB指数大于约13的第二表面活性剂。在一个实 施方案中，所述第一表面活性剂的HLB指数和所述第二表面活性剂的HLB指数之间的绝对 差值大于约3。在一个实施方案中，所述HLB大于约10的第一表面活性剂选自维生素E的各种化 学衍生物，其将不同化学部分通过酯和醚与不同长度的聚乙二醇相连接。特别优选的是PEG 分子量为约500至6000Da之间的维生素E生育酚聚乙二醇琥珀酸酯(TPGS)衍生物。在一 个优选的实施方案中，所述HLB指数大于约10的维生素E聚合物衍生物为维生素E生育酚 琥珀酸聚乙二醇1000酯(维生素E TPGS, tocopherlosan) 0在一个实施方案中，维生素E TPGS在所述组合物中的存在量为约0. 01衬％至约20wt% /体积。在一个实施方案中，维生 素E TPGS在所述组合物中的存在量为约0. 1衬％到约10wt% /体积。应当理解，除非另有 说明，否则在整个说明书中，术语重量％ (wt%)指每单位体积的质量。维生素E生育酚聚乙二醇1000琥珀酸酯(维生素E TPGS)是一种两亲性赋形剂， 其为天然来源的维生素E的水溶性衍生物。维生素E TPGS或PEG基化维生素E，是一种维 生素E衍生物，其中聚乙二醇亚基通过琥珀酸二酯连接到维生素E分子的环羟基上。维生 素E TPGS是一种HLB指数为约13的亲水性非离子表面活性剂。包括不同化学部分的酯键 和醚键的维生素E TPGS的不同化学衍生物包括在维生素E TPGS的定义内。除了用作水溶 性维生素E来源之外，维生素E TPGS已被提议用作用于脂溶性药物递送制剂的乳化剂、增 溶剂、吸收促进剂和载体。在一个实施方案中，所述HLB大于13的第二表面活性剂为亲水性聚乙二醇(PEG)-烷基醚表面活性剂或聚乙二醇(PEG)-烷基芳基醚表面活性剂。在一个实施方案中， 所述表面活性剂选自PEG 5-100辛基苯基醚，其HLB大于约13。所述PEG辛基苯基化合物选 自辛苯聚醇_9、辛苯聚醇-10、辛苯聚醇-11、辛苯聚醇-12、辛苯聚醇-13、辛苯聚醇-16、辛 苯聚醇-20、辛苯聚醇-25、辛苯聚醇-30、辛苯聚醇-33、辛苯聚醇-40和辛苯聚醇-70。在一 个实施方案中，所述PEG-烷基苯基醚表面活性剂为辛苯聚醇-40。在一个实施方案中，所述 HLB大于约10的表面活性剂选自PEG-5-100壬基苯基醚；四丁酚醛(乙氧基化对叔辛基苯 酚甲醛聚合物)，PEG-脂肪酸单酯表面活性剂、PEG-甘油脂肪酸酯和PEG-山梨醇脂肪酸酯。 PEG-脂肪酸单酯表面活性剂包括但不限于PEG-15油酸酯、PEG-20月桂酸酯、PEG-20油酸 酯、PEG-20硬脂酸酯、PEG-32月桂酸酯、PEG-32油酸酯、PEG-32硬脂酸酯、PEG-40月桂酸酯、 PEG-40油酸酯和PEG-40硬脂酸酯。PEG-甘油脂肪酸酯包括但不限于PEG-15甘油基月桂 酸酯、PEG-20甘油基月桂酸酯、PEG-30甘油基月桂酸酯、PEG-40甘油基月桂酸酯和PEG-20 甘油基硬脂酸酯。PEG-山梨醇脂肪酸酯包括但不限于PEG-4山梨醇单月桂酸酯、PEG-4山 梨醇单硬脂酸酯、PEG-5山梨醇单油酸酯、PEG-20山梨醇单月桂酸酯、PEG-20山梨醇单棕榈 酸酯、PEG-20山梨醇单硬脂酸酯和PEG-20山梨醇单油酸酯。在一个实施方案中，所述HLB 大于约13的第二表面活性剂是辛苯聚醇-40。辛苯聚醇-40 (IGEPAL CA-897)的HLB指数 为约18。在一个实施方案中，辛苯聚醇-40在所述组合物中的存在量为约0.001wt%至约 IOwt % /体积。在一个实施方案中，辛苯聚醇-40的存在量为约0. Olwt %至约5. Owt % / 体积。可根据本发明配制的钙调神经磷酸酶抑制剂和mTOR抑制剂包括但不限于环孢素 A、沃罗孢素(LX211)、子囊霉素、他克莫司(Π(506)、西罗莫司、依维莫司和吡美莫司，包括 其类似物、可药用盐、酯和前药。还包括钙调神经磷酸酶或mTOR抑制剂与一种或多种药物、 维生素和诊断剂的混合物。可使用或者不使用防腐剂来保存所述制剂。在一个实施方案中， 规定量的辛苯聚醇-40和维生素E TPGS的混合物形成混合胶束，建立填充所述混合胶束内 核的水不溶性药物的稳定性和溶解性。在一个实施方案中，所述混合胶束组合物包含钙调 神经磷酸酶抑制剂、维生素E TPGS和辛苯聚醇-40。所述混合胶束制剂是钙调神经磷酸酶 抑制剂或mTOR抑制剂的澄清、均勻的水溶液。在一个实施方案中，维生素E TPGS有助于增 溶所述钙调神经磷酸酶抑制剂或mTOR抑制剂，并可以减少在水性条件下的眼部不适。在一 个实施方案中，辛苯聚醇-40有助于减少眼部不适，以及形成光学上澄清的、稳定的混合胶 束制剂。在本文所公开实施方案的组合物中，所述钙调神经磷酸酶抑制剂或mTOR抑制剂 的存在浓度范围为约0. 01重量％ (wt% )至约10衬％、约0. 1至约3. 0wt%。在一个实施 方案中，本发明的组合物包含约0. 2至约0. 5wt%的沃罗孢素，如在实施例中所阐述的。在 一个实施方案中，维生素E TPGS的浓度为约0.01至约20wt%、约0. 1至约5wt%。辛苯聚 醇-40或其同系物混合物的存在浓度为约0. 001至约10wt%、约0. 01至约3. 0wt%。在一 个实施方案中，表面活性剂在本发明组合物中的总量为全部组合物的30%或更少，余下的 主要组分是水。在一个实施方案中，本发明的组合物包含约0. 2wt%的沃罗孢素、约2. 5wt%的维 生素E TPGS和约2. Owt %的辛苯聚醇-40。在一个实施方案中，本发明的组合物包含约 0. 5wt%的沃罗孢素、约3. 5衬％的维生素E TPGS和约2. Owt%的辛苯聚醇-40。在另一个
13实施方案中，本发明的组合物包含约2. Owt %的沃罗孢素。向包括脉络膜的眼后部，特别是视网膜的位点特异性递送是眼科学治疗领域的研 究人员所面临的挑战之一。存在对于在局部施用后以合适治疗水平到达视网膜的药物载体 的不断增长但未满足的需要。如将在随后的实施例中显示的，发现在局部施用本文所公开 实施方案的组合物之后，钙调神经磷酸酶抑制剂或mTOR抑制剂药物能够到达眼后部，因而 提供了一种用于眼后部的眼部病症的治疗方法。本发明的组合物可以用作局部施用药物递送平台，用于向眼后部递送各种疏水性 的水不溶性药物，比如钙调神经磷酸酶抑制剂或mTOR抑制剂，以用于各种眼后部的病症。 合适种类的水不溶性药物包括但不限于肽、类花生酸类(例如前列环素和前列腺素)、抗炎 药物、植物性神经药物(例如β _阻断剂、α -阻断剂、β -激动剂和α _激动剂)、生物制品、 基因治疗剂(例如病毒载体)、抗感染剂(例如抗真菌药、抗生素和抗病毒剂)、维甲酸类、 RNAi、光敏剂、类固醇(例如雌激素及其衍生物)、混合物药物、免疫调节剂、化疗剂、G蛋白 偶联受体拮抗剂、受体酪氨酸激酶(RTK)抑制剂、生长激素抑制剂、整联蛋白抑制剂、Sdfl/ CXCR4通路抑制剂和nACh受体拮抗剂。优选地，所述水不溶性药物是钙调神经磷酸酶抑制 剂或mTOR抑制剂。本发明的组合物可以用作局部施用药物递送平台，用于向眼后部递送皮质类固 醇，以治疗例如DME。皮质类固醇的实例包括但不限于泼尼松龙、氢化可的松、曲安西龙和布 地奈德。本发明的组合物可以用作局部施用药物递送平台，用于向眼后部递送非留体抗炎 药(NSAID)，以治疗例如DME。NSAID的实例包括但不限于Cox-2抑制剂，比如塞来考昔、鲁 伯斯塔(ruboxistaurin)和尼美舒利。本发明的组合物可以用作局部施用药物递送平台，用于向眼后部递送抗生长因子 分子，以治疗例如AMD。抗生长因子分子的实例包括但不限于血管内皮生长因子(VEGF)抑 制剂，比如哌加他尼(pegaptanib) (macugen)、雷尼珠单抗(ranibizumab) (Iucentis)和贝 伐单抗(avastin)。在一个实施方案中，本发明的混合胶束组合物含有填充到混合胶束内核的钙调神 经磷酸酶抑制剂或mTOR抑制剂，可以局部应用至眼的方式用于治疗眼后部的眼部病症。在 一个实施方案中，钙调神经磷酸酶抑制剂或mTOR抑制剂在所述组合物中的存在浓度范围 为约0.01重量％ (wt% )至约10wt%，优选约0. 1衬％至约3. 0wt%。在一个实施方案中， 所述钙调神经磷酸酶抑制剂或mTOR抑制剂为沃罗孢素，沃罗孢素在所述组合物中的存在 浓度为约0. 2wt%至约0. 5wt%。在一个实施方案中，维生素E TPGS在所述组合物中的存 在浓度为约0. 01至约20wt%，优选约0. 1至约5wt%。在一个实施方案中，辛苯聚醇-40 或其同系物混合物在所述组合物中的存在浓度范围为约0. OOlwt %至约IOwt %，优选约 0. Olwt %至约3. Owt %0优选地，表面活性剂在本文所公开实施方案的组合物中的总量为所 述全部组合物的约30 %或更少，余下的主要成分是水。在一个实施方案中，本文所公开实施方案的混合胶束组合物包含约0. 2wt%的沃 罗孢素、约2. 5衬％的维生素E TPGS和约2. Owt %的辛苯聚醇-40。在一个实施方案中，本 文所公开实施方案的混合胶束组合物包含约0. 5wt%的沃罗孢素、约3. 5wt%的维生素E TPGS和约2. 0wt%的辛苯聚醇-40。在另一个实施方案中，本文所公开实施方案的混合胶束组合物包含约2. 0wt%的沃罗孢素。目前，大多数眼部疾病采用局部施用溶液来治疗，如水溶性药物的滴眼剂和水不 溶性药物的软膏剂或含水混悬液。这些剂型占目前市售制剂的约90%。角膜代表了局部施 用药物的眼部渗透的主要途径。药物吸收主要通过穿过角膜和进入房水和以及扩散到后段 进行。药物可以扩散到虹膜根，接着扩散到后房房水并进入后部组织中。药物可以直接通 过睫状体平坦部进入，而不会遭遇血液-视网膜屏障。药物可以通过侧向扩散而扩散通过 巩膜，接着穿透布鲁赫膜(Brunch’ s membrane)和视网膜色素上皮(RPE)。在较小的程度 上，药物可以通过结膜血管或经由鼻泪管被吸收到体循环中并可以通过系统进入视网膜血 管中。如下述实施例中所示，在施用本发明的药物组合物后24小时，观察到治疗水平的 沃罗孢素，表明可每日一次(QD)施用本文所公开实施方案的含水混合胶束组合物。如实施 例所示，可以在脉络膜/视网膜中检测到高水平的以本发明的混合胶束组合物给予的沃罗 孢素，而在玻璃体液中则检测到低水平的沃罗孢素。当在本文所描述的混合胶束制剂中局 部施用时，钙调神经磷酸酶抑制剂沃罗孢素到达眼后部。本发明的组合物还可包含其它组分，例如但不限于添加剂、辅助剂、缓冲剂、张力 调节剂(tonicify agent)、生物粘附性聚合物和防腐剂。在用于局部施用给眼的本发明的 任一种组合物中，该混合物优选在约PH 5至约pH 8下配制。这一 pH范围可以通过向所述 组合物中加入缓冲剂而达到，如在实施例中描述的。在一个实施方案中，制剂中组合物的PH 范围为约PH 6.6至约？!1 7.0。应当理解，本发明的组合物可以通过任一种常用缓冲系统来 缓冲，所述缓冲系统例如磷酸盐、硼酸盐、乙酸盐、柠檬酸盐、碳酸盐和硼酸盐-多元醇络合 物，PH和摩尔渗透压根据众所周知的技术调节至合适的生理学值。本发明的混合胶束组合 物在缓冲水溶液中是稳定的。即，所述缓冲剂和可引起所述组合物不稳定的任何其它组分 之间没有不利的相互作用。张力调节剂包括例如甘露醇、氯化钠、木糖醇等。这些张力调节剂可用于调节 所述组合物的摩尔渗透压。在一个方面，所述制剂的摩尔渗透压被调节至约250至约 350m0smol/kg的范围内。在一个优选的方面，所述制剂的摩尔渗透压被调节至约280至约 300m0smol/kg 之间。添加剂(比如糖、甘油及其它糖醇)可以包括在本发明的组合物中。可以加入药 用添加剂，以增强组合物中其它成分的功效或效力。例如，可以将药物添加剂加入到本发明 的药物组合物中，以改善钙调神经磷酸酶抑制剂或mTOR抑制剂的稳定性、调节组合物的摩 尔渗透压、调节组合物的粘度、或者是为了其它原因，比如影响药物递送。本发明的药物添 加剂的非限制性实例包括糖，例如海藻糖、甘露糖、D-半乳糖和乳糖。在一个实施方案中， 可以在水合所述薄膜之前将所述糖掺入到组合物中(即内加法)。在另一个实施方案中，可 以在水合步骤期间将所述糖掺入到组合物中(即外加法)(参见实施例17)。在一个实施方 案中，本发明的水性澄清混合胶束溶液包含添加剂例如糖。在一个实施方案中，本发明的组合物还包含一种或多种生物粘附性聚合物。生物 粘附指某些合成高分子和生物高分子和水胶体粘附生物组织的能力。生物粘附是一种复杂 的现象，部分取决于聚合物的性质、生物组织和周围环境。已经发现几种因素有助于聚合物 的生物粘附能力能够形成氢桥(-0H、C00H)的官能团的存在、阴离子电荷的存在和强度、聚合链的弹性足够插入粘膜层和高分子量。生物粘附系统已经用于牙科学、矫形外科学、眼 科学和外科应用中。然而，最近，在其它领域比如基于软组织的人工置换术和用于局部释放 生物活性剂的控释系统中，对使用生物粘附材料表现出了显著的兴趣。这些应用包括用于 在口腔或鼻腔中释放药物的系统和用于肠或直肠施用的系统。在一个实施方案中，本发明的组合物包含至少一种生物粘附性聚合物。所述生物 粘附性聚合物可以增加所述组合物的粘度，从而增加在眼中的停留时间。本发明的生物 粘附性聚合物包括，例如羧基聚合物如Carbopol (卡波姆)、Noveon (聚卡波非) (polycarbophil)；纤维素衍生物包括烷基纤维素和羟烷基纤维素如甲基纤维素、羟丙基纤 维素、羧甲基纤维素；树胶如槐树豆胶、黄原胶、琼脂糖、卡拉胶、瓜尔胶；以及其它聚合物， 包括但不限于聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙二醇、Pluronic (泊洛沙姆)、西黄蓍胶 和透明质酸；用于提供缓释和控释递送封闭药物(enclosed medicaments)至眼的相转移 聚合物(例如海藻酸、角叉菜胶(例如Eucheuma)、黄原胶和豆角胶混合物、果胶、邻苯二甲 酸乙酸纤维素酯、烷基羟基烷基纤维素及其衍生物、羟烷基化的聚丙烯酸及其衍生物、泊洛 沙姆及其衍生物等。这些聚合物的物理性质可根据环境因素的改变而调节，所述环境因素 比如单独的离子强度、PH或温度，或者与其它因素的组合。在一个实施方案中，所述任选的 一种或多种生物粘附性聚合物在所述组合物中的存在量为约0. 01w/v%至约10w/v% /体 积，优选约0. 1至约5w/v%/体积。在一个实施方案中，本发明的组合物还包含至少一种亲 水性聚合物赋形剂，其选自例如PVP-K-30、PVP-K-90、HPMC, HEC和聚卡波非。在一个实施 方案中，所述聚合物赋形剂选自PVP-K-90、PVP-K-30或HPMC。在一个实施方案中，所述聚 合物赋形剂选自PVP-K-90或PVP-K-30。在一个实施方案中，如果需要防腐剂，则可任选地使用任何众所周知的系统，比如 苯甲醇(含/不含EDTA)、苯扎氯铵、氯己定、Cosmocil CQ或Dowicil 200来保存所 述组合物。所述眼科组合物可以作为生物相容的含水澄清混合胶束溶液局部施用至眼。所述 组合物含有掺入到和/或包囊于分散在含水介质中之胶束中的药物。在一个实施方案中，本发明提供了一种制备混合胶束组合物的方法，其包括将钙 调神经磷酸酶或mTOR抑制剂与HLB指数大于10的第一表面活性剂在溶剂中相混合，以形 成溶剂溶液；蒸发所述溶剂溶液，形成近固体物；用含有HLB指数大于13的第二表面活性 剂的水溶液水合所述近固体物，形成混合物；以及溶解该混合物以得到混合胶束组合物，其 中得到的组合物是光学上澄清的。可用于制备本发明混合胶束组合物的合适溶剂包括短链醇类，例如甲醇、乙醇、正 丙醇、异丙醇和丁醇，以及氯仿、丙酮、二氯甲烷、二甲基亚砜、二甲基甲酰胺和丙二醇。可以 使用两种或三种短链醇的组合。挥发性有机溶剂如氯仿和丙酮可以与短链醇组合使用。在 一个实施方案中，本发明提供了一种制备混合胶束组合物的方法，其包括在短链醇中将钙 调神经磷酸酶抑制剂与维生素E TPGS相混合，以形成短链醇溶液；蒸发所述短链醇溶液， 形成近固体物；用含有辛苯聚醇-40的水溶液水合所述近固体物，形成混合物；以及溶解该 混合物以得到混合胶束组合物，其中得到的组合物是光学上澄清的。 在一个实施方案中，所述短链醇是乙醇。在一个实施方案中，本发明提供了 一种制 备混合胶束组合物的方法，其包括在乙醇中将钙调神经磷酸酶抑制剂与维生素E TPGS和辛
16苯聚醇-40相混合，以形成乙醇溶液。在一个实施方案中，所述乙醇是95%乙醇。在另一个 实施方案中，所述方法提供蒸发乙醇溶液，以形成近固体物。所述近固体物可以通过真空旋 转蒸发乙醇溶液而得到，在该情况下，所述近固体物可以是薄膜。所述近固体物还可以通过 例如冻干、冷冻干燥、喷雾干燥或使用大规模和小规模的蒸发器比如薄膜蒸发器、离心蒸发 器和涡旋蒸发器蒸发乙醇溶液得到。所述近固体物基本上不含乙醇(约<2% EtOH)，但可 以包含至多约5%的水。在一个实施方案中，所述方法提供用水溶液水合所述近固体物；以 及溶解该混合物以得到混合胶束组合物，其中得到的组合物是光学上澄清的。所述溶解步 骤可以通过超声处理、混合、涡旋、搅拌、在旋转蒸发器中通过旋转运动混合和/或振摇在 水溶液中的所述近固体物而进行，或者通过本领域已知的其它方法进行。在一个实施方案 中，所述方法还包括在水合步骤之前，将生物粘附性聚合物混合进所述水溶液中。在一个实 施方案中，所述生物粘附性聚合物选自PVP-K-30、PVP-K-90、HPMC、HEC和聚卡波非。在一 个实施方案中，所述生物粘附性聚合物选自PVP-K-30或PVP-K-90。在一个实施方案中，在 混合胶束组合物中的钙调神经磷酸酶抑制剂为沃罗孢素。在一个实施方案中，沃罗孢素在 所述混合胶束组合物中的存在量为约0. 001%至约10%。用于所述组合物的可药用包装材料包括但不限于聚丙烯、聚苯乙烯、低密度聚乙 烯(LDPE)、高密度聚乙烯(HDPE)、聚碳酸酯、聚氯乙烯以及本领域技术人员已知的其它 材料。所述组合物可以应用吹塑-填充-密封技术进行无菌包装。吹塑-填充-密封 (BFS)描述了一种无菌填充方法，其中将空容器吹塑成形，用无菌制品填充，密封，各步骤 均在一个连续的机器周期中进行。该技术是常规无菌填充和加盖操作的替代方法，其常通 过高产量和加工效率而节约成本。在一个实施方案中，将本发明的组合物填充到一次性 (single-use)的瓶(bottle)、包、瓶(vial)、安瓿、LDPE BFS 容器或 HDPE BFS 容器中。在一个实施方案中，可以以多个一次性包装提供多个剂量。在另一个实施方案中， 所述组合物方便地包装在能够计量应用的瓶、容器或装置中，包括配有用于眼科局部应用 之滴管的容器。虽然精确用药方案要由临床医师的判断来确定，但建议每日1至4次通过向每只 眼滴加一滴至两滴或更多滴来局部施用本发明组合物。例如，所述组合物可以每日施用1、 2、3、4、5、6、7或8次，或者更多次。在一个实施方案中，所述组合物是通过每日一次或两次 向每只眼滴加一至两滴来局部施用。人工泪液是润滑的滴眼剂，用于治疗干燥性角膜结膜炎(干眼)中与泪液生成不 足相关的干燥和刺激。人工泪液还可以用于润湿隐形眼镜，以及在眼睛检查期间润湿眼睛。 通常，人工泪液包含水、盐和聚合物，但缺少存在于天然泪液中的蛋白质。有多种人工泪液 是非处方可获得的，其包含诸如羧甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素(也称为HPMC或羟丙甲 基纤维素)和羟丙基纤维素的成分。已知的非处方人工泪液已经显示出副作用，其通常由 羧甲基纤维素成分及其它类似润滑剂所引起。这些副作用包括例如眼痛、刺激、持续发红或 视力变化。在一个方面，本文公开了独特的生物相容性人工泪液组合物。本发明的人工泪液 组合物配制成无菌的混合胶束水溶液，其包含由HLB指数大于约10的第一表面活性剂和 HLB指数大于约13的第二表面活性剂形成的胶束。在一个实施方案中，所述水溶液包含多 种成分，其选自亲水性聚合物赋形剂、张力调节剂、缓冲剂、防腐剂、共溶剂或抗氧化剂中的
17一种。所述生物相容性人工泪液组合物可用于治疗刺激、发红、肿胀、变态反应、由于使用隐 形眼镜引起的刺激、角膜葡萄疮及眼睛擦伤。可以应用多种亲水性聚合物赋形剂，包括但不限于PVP-K-30、PVP-K_90、HPMC、HEC 和聚卡波非。在一个实施方案中，所述亲水性聚合物赋形剂为PVP-K-90。可以应用多种张力调节剂来调节人工泪液组合物的张力，优选来调节天然泪液的 张力。例如，可以将氯化钠、氯化钾、氯化镁、氯化钙和/或甘露醇加入到所述组合物中以使 其接近生理学张力。在一个实施方案中，所述张力调节剂为氯化钠。张力调节剂的量将根 据待加入的具体试剂而变化。然而，通常，所述组合物的张力调节剂浓度为约0. 1-1. 5% W/
Vo可以加入合适的缓冲体系(例如，在水中的磷酸钠、乙酸钠、柠檬酸钠、硼酸钠或 硼酸)以防止储存条件下PH的变化。具体的浓度将根据所使用的试剂而变化。通常，这样 的浓度为约0.02至2.0% w/v。在一个实施方案中，所述缓冲体系包含磷酸钠。进一步，所 述磷酸钠可以包括磷酸二氢钠(即，一元磷酸盐)和磷酸氢二钠(即，二元磷酸盐)。在一 个实施方案中，调节缓冲体系的PH，使得本文所公开实施方案的人工泪液组合物的pH范围 为约6. 5至约7. 5。可以向本发明的人工泪液组合物中加入防腐剂，以增加所述组合物的货架期和便 于使用多剂量瓶。防腐剂的实例包括但不限于苯扎氯铵(BAC)、氯丁醇、GenAqUa(过硼酸 钠)和Polyquad (聚季铵盐_1)。一种根据本文所公开实施方案的用于人工泪液组合物的代表性制剂显示在实施 例16中。尽管给出了具体的浓度值，但本领域技术人员应认识到各种成分的浓度可以变 化。类似地，在每种人工泪液组合物中，不必包含实施例16中列出的所有成分。一种制备混合胶束组合物的方法，包括将钙调神经磷酸酶或mTOR抑制剂与HLB指 数大于约10的第一表面活性剂和HLB指数大于约13的第二表面活性剂在溶剂中相混合， 形成溶剂溶液；蒸发所述溶剂溶液，形成近固体物；用水溶液水合所述近固体物；以及溶解 该近固体混合物，得到混合胶束组合物，其中所述组合物是光学上澄清的。一种用于在有此需要的患者中治疗眼部疾病的方法，包括向患者的眼睛局部施用 包含治疗有效量的钙调神经磷酸酶抑制剂或mTOR抑制剂的组合物，所述组合物还含有维 生素E TPGS和辛苯聚醇-40，其中所述组合物是混合胶束的水溶液。一种用于治疗、减轻、改善或缓解动物的炎性眼部疾病的方法，包括提供混合胶束 药物组合物，该药物组合物包含包囊在胶束中的钙调神经磷酸酶抑制剂或mTOR抑制剂，所 述胶束是由HLB指数大于约10的第一表面活性剂和HLB指数大于约13的第二表面活性剂 形成的；和给所述动物以足以治疗、减轻、改善或缓解所述炎性眼部疾病的频率施用一定量 的药物组合物。一种用于治疗、减轻、改善或缓解对象的眼后部症状或病症的方法，包括提供混合 胶束药物组合物，该药物组合物包含包囊在胶束中的钙调神经磷酸酶抑制剂，所述胶束是 由HLB指数大于约10的第一表面活性剂和HLB指数大于约13的第二表面活性剂形成的； 和给所述对象以足以治疗、减轻、改善或缓解所述眼后部症状或病症的频率施用一定量的 药物组合物。实施例通常，使用的所有试剂都是可商购的，并且无需进一步纯化而使用，除非有另外 的说明。沃罗孢素(voclosporin, LX211, ISA247)得自 Isotechnika, Inc.，Edmonton, Alberta，Canada。从Isotechnika获得的原料由Lux Biosciences C存在新泽西生物材料 中心(New Jersey Centerfor Biomaterials)；环抱素 A得自 Xenos Bioresources, Inc., SantaBarbara，CA ；西罗莫司和他克莫司得自 Haorui Pharma-ChemjInc0 维生素E TPGS(NF 级)得自 Eastman Chemical Company, IGEPALCA-897 (辛苯聚醇-40)得自 Rhodia，Inc.， 蒸馏的去离子水是通过使用EASY Pure UV Compact超纯水系统(Barnstead，ΙΑ)自行制 备的。Kollidon 30(PVP)和Kollidon 90F(聚维酮K90)得自BASF。羟乙基纤维素 IOOcps 和 5000cps 得自 Spectrum，Methocel , HPMC 得自 Colorcon，Noveon 聚卡波非 得自 Lubrizol Advanced Materials。实施例1.基础制剂的一般制备方法为了制备药物浓度为0. 02,0. 2,0. 4,0. 5和1. 的制剂，采用了下述方案。按 表1中所示比例制备了基础药物制剂。在第一个方案中，例如，计算针对50mL所需要的钙 调神经磷酸酶抑制剂和维生素ETPGS，称重，然后混合进5mL 95%乙醇中，直到获得澄清溶 液。在真空下，蒸发乙醇溶液，得到薄膜状近固体物。将25mL去离子水和辛苯聚醇-40混 合，将该溶液加入到所述薄膜状近固体物中，超声处理约20分钟，确保完全形成混合胶束。 将制备的2X制剂贮存在室温下。或者，在第二个方案中，计算针对50mL所需要的药物、维 生素E TPGS和辛苯聚醇-40的量，称重，然后混合进5mL 95%乙醇中，在真空下蒸发，形成 薄膜状近固体物。然后，将该薄膜状近固体物溶于25mL去离子水中，超声处理或通过在旋 转蒸发器中旋转运动混合约20分钟，确保完全形成混合胶束。将制备的2X制剂贮存在室 温下。表1.基础2X制剂(wt% /体积)
I标签/成分 I 123药物 0.40. 81. 0维生素E TPGS 4. 06. 07. 0辛苯聚醇-40 1.01. 01. 0实施例2.制剂的一般制备方法如实施例1中的第二个方案中所述制备表1中所示的基础2X制剂。制备基础制 剂，其中所述钙调神经磷酸酶或mTOR抑制剂为沃罗孢素、环孢素A、西罗莫司和他克莫司。 在一种50mL制剂的制备方法中，通过将在表2中所示的一定量的组分溶解在25mL去离子 水中以制备2X缓冲液，从而制备缓冲混合物。所述2X缓冲混合物包括加入和不加入防腐 剂而制得。表2缓冲剂混合物
19 N.A.=未加入将表3A中所示的需要量的聚合物赋形剂分散在2. 5mL 2X缓冲混合物中，轻轻地 涡旋，得到澄清溶液。加入等体积的基础2X制剂，并混合，得到均勻溶液。用NaOH或HCl调 节溶液的PH至约6. 8的目标。用NaCl调节该溶液的摩尔摩尔渗透压至约280-300m0smOl/ kg的范围内。用尼龙膜滤器(0.22μπι)对所述制剂除菌，并在室温下贮存，备用。表3Α.制剂 在另一种制备IOOmL制剂的方法中，使用沃罗孢素制备了表1中所示的基础2Χ制剂。为制备沃罗孢素浓度为0. 2,0. 4和0. 5wt% /体积的制剂，计算针对IOOmL所需药物、 维生素E TPGS和辛苯聚醇-40的合适量，称重，然后混合进IOmL 95%乙醇中，并在真空下 蒸发约12小时，形成薄膜状近固体物。然后，将该薄膜状近固体物溶于50mL去离子水中并 超声处理，或者通过在旋转蒸发器中旋转运动混合约20分钟，以确保完全形成混合胶束； 然后贮存在室温下。将表3B和3C中所示的需要量的聚合物赋形剂分散到40mL去离子水 中，搅拌，得到澄清的聚合物溶液。将表3B和3C中所示的其它组分加入到50mL基本2X制 剂中，充分搅拌，得到澄清的缓冲溶液。将所述澄清的缓冲溶液慢慢地转移到所述澄清的聚 合物溶液中并充分混合。用NaOH或HCl调节溶液的pH至约6. 8的目标。将溶液的摩尔 摩尔渗透压维持在280-300m0smOl/kg的范围内。加水使体积达到100mL。用尼龙膜滤器 (0. 22 μ m)对该制剂除菌，然后贮存在室温下，备用。
表3B.制剂 一种含有沃罗孢素浓度为0. 2% /体积的最佳制剂显示在表3D中。表3D. 0. 2wt% /体积的沃罗孢素制剂 除非另有说明，否则下述数据是针对约0.2%的沃罗孢素的。使用锥板粘度计测量 所述制剂的粘度。如所述，在400nm测量所述制剂的透明度。含有0. 2%沃罗孢素的各种制 剂的摩尔摩尔渗透压、PH、粘度和在400nm的吸光度显示在表4A中。表4A.制剂特征 如在实施例1的第二个方案中所描述的类似方式，制备了显示在表4B中浓度的环 孢素A (CsA)制剂。表4B. CsA 制剂 调节所述CsA制剂至pH 6. 88和摩尔渗透压为320m0sm/kg。实施例3.药物含量的测定用HPLC分析每种制剂的药物含量。HPLC流动相的组成为乙腈/水/三氟乙酸 (75 25 0.1，v/v/v)，流速为ImL/分钟，从反相苯基柱(5微米，15X4. 6mm)上洗脱目 标化合物。用UV检测器在210nm测量药物的吸光度，并与不同已知浓度的目标药物的标准 曲线相比较。所观察到的沃罗孢素洗脱峰值为约5. 5分钟。实施例4.过滤效率试骑测试不同类型的膜在无菌过滤包含0. 2wt%沃罗孢素的制剂中的用途。0. 22 μ M 孔径的膜包括多种材料，包括尼龙、聚四氟乙烯和聚碳酸酯。如上所述通过HPLC测定药物 含量并与离心样品相比较来评价膜的回收率。比较过滤效率试验的结果显示在表5Α和5Β 中。一般来说，发现0.22 μ M的尼龙、聚四氟乙烯和聚碳酸酯膜各自都是无菌过滤可接受 的。表5Α.过滤效率试验1 表5B.过滤效率试验2 如上所述，制备表3C中的0. 2wt%沃罗孢素与不同生物粘附性聚合物赋形剂的制 剂。测量制剂特征，并在通过0.22μπι尼龙膜过滤之后，用HPLC测定药物含量。结果显示 在表6中。表6. 0. 2wt%沃罗孢素制剂中的药物含量 实施例5.制剂的诱明度目视测量制剂的透明度，并使用UV-可见光分光光度计记录样品在400nm的吸光 度。将一毫升制剂和相应的不含药物的赋形剂放置在塑料比色杯中，并记录在400nm的吸 光度。使用水作为空白。在一个优选的方面，所述混合胶束制剂是澄清的制剂，在400nm的 吸光度小于约0. 1。不同制剂在400nm的吸光度显示在表4A中，在稀释试验中的结果显示 在表9-14中。在制剂试验中也使用目视透明度作为指标。例如，表7和8显示了按照实施例1 中第二个方案所描述而制备的不同IX基础制剂中的不同的沃罗孢素、维生素E TPGS 和辛苯聚醇-40的目视透明度。表7.制剂试验 在表7中，使用所示浓度的食品级维生素E TPGS ；所有的样品都是乳状的。在表8 中，样品1和2是目视澄清的，但样品3和4则包含未溶解的药物。表8.制剂试验 _仿丨丨6.碰λ工應在稀释研究中评价了沃罗孢素制剂。目的是在类似于眼的条件下将制剂稀释。沃 罗孢素在每个试验制剂中的浓度为0. 2wt%。将表3A中所述的制剂与在药房中各种商标 的可获得的非处方(OTC)人工泪液以ι ι、ι 5禾πι ο相混合。应用Systane (润 滑滴眼液，Alcon, Inc. ；ViSine (润滑滴眼液，Pfizer, Inc. ；Refresh Tears (润滑滴 眼液)，Allergan, Inc.和Hypo Tears (润滑滴眼液)，Novartis0在环境条件下进行测 量。数据(在400nm的吸光度)显示在表9至14A中。结果表明浊度没有增加，因此没有 沃罗孢素从溶液中沉淀出来。表9.稀释前在400nm的样品吸光度 表10.稀释后在400nm的样品吸光度 表12.稀释后在400nm的样品吸光度 表14A.稀释后在400nm的样品吸光度
对表3B第1栏中所示的制剂用缓冲盐水作为稀释剂进行了进一步的稀释研究。对 稀释的制剂进行表征，数据显示在表14B中。证实了在缓冲盐水中至少20倍稀释的胶束稳 定性。表14B.稀释后的胶束稳定性 DST-解离温度，RS-再稳定化，PD-多分散性实施例7.不含药物的制剂和包含沃罗孢素的制剂的解离温度测试表3A中所示的制剂，以测定含有和不含有0. 2衬％沃罗孢素/体积的解离温 度。准备恒温 60°C的水浴，用于测定含有药物的样品。将盛有所述制剂的玻璃瓶插入到 水浴中，将温度计插入所述制剂中。一旦目视观察到一些混浊，就记录温度读数。将混浊的 溶液冷却至室温，药物又返回到混合胶束中，结果是所有的溶液都再次变澄清。记录再稳定 (恢复目视透明度)的时间。含有沃罗孢素的样品的数据显示在表15中。使用加热单元加 热，以类似的方式测试不含药物的样品。不含沃罗孢素的样品的数据显示在表16中。数据表明，在不存在沃罗孢素的情况下，所述胶束制剂的解离温度通常为约20-40 摄氏度，高于在存在沃罗孢素下所述胶束制剂(除包含HPMC的制剂之外)的解离温度。包 含药物的胶束制剂的解离温度降低表明药物掺入到了所述胶束中，从而增溶。表15.含有0. 2wt%沃罗孢素的制剂的解离温度 ND=未测得表16.不含沃罗孢素的制剂的解离温度 进行另外的热解离试验，其中在维持在 50°C的水浴中加热包含ImL 0. 2%沃罗 孢素制剂(基础制剂、HPMC和PVP-K-90)的瓶约5分钟。使所述混合胶束不稳定，所述溶 液变混浊或呈乳白色。将该溶液冷却至室温，药物又返回到混合胶束中，结果是所有的溶液 都再次变澄清。记录再稳定的时间。再次重复所述PVP-K-90样品，得到相同的结果。通常，含有衬％增加的辛苯聚醇-40的制剂表现出解离温度升高，再生时间(再稳 定所需的时间)减少，如在表17和18中所示。表17.含有0. 2衬％沃罗孢素和不同衬％辛苯聚醇-40的基础制剂的解离温度 18.含有0. 5衬％沃罗孢素和不同衬％辛苯聚醇-40的基础制剂的解离温度
另一个解离温度实验(其中在含有0. 2wt%沃罗孢素的PVP-K-90制剂中辛苯聚 醇-40的浓度从0. 5%增加至2. 5% )得到解离温度从45°C升高至55°C。在冷却后3分钟 之内，所述制剂重构为澄清溶液。评价了其它赋形剂的加入量以确定其对解离温度的影响。向表3B中制备的含有 0. 2衬％沃罗孢素的制剂中加入5% PEG 400得到类似的解离温度，再稳定所需的时间稍微 增加，如表19所示。表19.解离温度加入5% (v/v)PEG 400的作用 向表3B中制备的含有0. 2wt%沃罗孢素和PVP_K_90的制剂中加入HPMC得到 类似的解离温度，但是再稳定所需的时间减少了，如表20所示。表20.解离温度向PVP-K-90制剂中加入1 % HPMC的作用
实施例8.粒径测量使用动态光散射技术(Brookhaven 90Plus粒度分析仪，Holtsville, NY)测量混 合胶束的平均粒径和多分散性指数，取三次测量的平均值。将不同的溶液置于一次性塑料 池中。使用200 μ L的样品体积来测定粒径。实施例2中制备的含有0. 2wt%沃罗孢素的 制剂的粒径和多分散性显示在表21中。含有0. 2wt%沃罗孢素和PVP-K-90的制剂显示 出13. 3nm的平均胶束直径，其具有非常窄的粒径分布和0.005的多分散性。相反，含有 0. 2wt%沃罗孢素和HEC的制剂显示出23. 8的平均胶束直径，但具有宽的双峰的粒径分布， 得到了 0. 482的大的多分散性。表21.粒径分析 含有0. 2衬％和0. 5衬％沃罗孢素的制剂(含有2%辛苯聚醇-40)的粒径、多分散 性、解离温度和再稳定时间显示在表22和23中。表22.含有0. 2wt%沃罗孢素和2%辛苯聚醇-40的制剂的特征
样品 编号制剂摩尔渗透 压 (mOsm/kg)粒径 (nm)多分散性指 数解离温 度CC )再稳定所 需的时间1不含缓冲剂 和聚合物的759. 90. 103572分钟 表23.包含0. 5wt%沃罗孢素和2%辛苯聚醇-40的制剂的特征 实施例9.滴重量和体积的测定为了测定每滴所递送的钙调神经磷酸酶抑制剂的量，测定了每种制剂的滴重量和 体积。因为滴尺寸取决于制剂的表面张力，测试表3A中描述的包含0. 2衬％沃罗孢素/体 积的两种制剂所递送的滴尺寸和体积。分别将包含PVP-K-90的制剂和包含HPMC的制剂各 0. 5mL装到0. SmL容量的BFS (吹塑-填充-密封)容器中，所述容器由制造商提供。瓶材 料为LDPE，研究在环境条件下进行。将十滴每种制剂挤入去皮的皿中并称重。类似地，将十 滴制剂挤入量筒中，并记录体积。数据显示在表24和25中。表24. 10滴的重量 表25. 10滴的体积 实施例10.稳定件研究在适于药物递送的三种瓶中进行稳定性和制剂相容性研究。将已知体积的实施例 1的六种制剂转移到三种不同类型的容器即LDPE、聚丙烯和聚氯乙烯的容器中，并贮存在 室温下。在预定时间间隔(0、6、24和48hr)，从所述容器中取出样品，通过HPLC方法分析药 物含量。在研究期间，贮存在各种类型容器中的制剂中没有一种显示出药物含量的降低。实施例11.包含钙调神经磷酸酶抑制剂的制剂在兔中的局部耐警件在兔中进行研究，以测试包含沃罗孢素的混合胶束制剂(IX基础制剂，表3A第1 栏，含0. 2衬％或0. 5wt%的沃罗孢素，每次一只兔)对盐水溶液的耐受性。使用健康的刚成 年新西兰白兔(3_4kg)进行该研究。将一滴(约30 μ L)盐水滴入兔的一只眼中，并将一滴 含有沃罗孢素的制剂滴入该兔的另一只眼中。注意到下述观测参数没有差异眨眼、流泪、 瞳孔尺寸、发红、眼睛运动。实施例12.包含钙调神经磷酸酶抑制剂的制剂在兔中的局部耐警件在兔中进行进一步的研究，以测试不同混合胶束制剂的耐受性。使用表26和27 所示的制剂F1-F16进行这些研究。表26.制剂 Fl 至 F8 表27.制剂 F9 至 F16 使用健康的刚成年新西兰白兔(3_4kg)进行该研究。将一滴(约30yL)含有沃
39罗孢素的制剂(LX211)滴入兔的眼中。一式三份测试每种制剂。由委员会授予合格证书的兽医眼科医师使用手提式裂隙灯和间接检眼镜 检查每只动物的双眼。使用Hackett/McDonald评分系统(参见例如，Hackett, R. B.禾口 McDonald, Τ.0.Ophthalmic Toxicology andAssessing Ocular Irritation. Dermatoxicology,第5版，F. N. Marzulli禾口H. I. Maibach编，Washington,D. C. :Hemisphere PublishingCorporation. 1996 ；299-305 和 557-566.)，根据结膜充血、肿胀和排泄物、房水 闪耀、虹膜光反射和干涉、角膜混浊严重性和区域、血管翳、荧光素检查和晶状体混浊对对 照和测试的眼进行分级。在荧光素检查中，将约一滴0. 9%氯化钠(USP)应用于荧光素浸渍 条的末端，然后应用于左眼和右眼的上部巩膜(每只动物使用一个荧光素浸渍条)。在暴露 约15秒之后，用0. 9%氯化钠(USP)从每只眼中轻轻地洗除荧光素染料。然后，使用具有钴 蓝过滤光源的裂隙灯检查眼睛。对于晶状体检查，将约一滴短效扩瞳药溶液滴入到每只眼 上，以便扩大瞳孔。在出现可接受的扩张之后，使用裂隙灯活组织显微镜检查每只眼的晶状 体。借助于裂隙灯活组织显微镜很容易地观察到晶状体，可以通过垂直照明和后部照 明容易地辨别晶状体混浊的位点。可以任意地将晶状体混浊的位点分成从前囊开始的下述 晶状体区域前囊下、前皮层、核、后皮层、后囊下、后囊。在眼部评价期间，按常规评价晶状 体，并分为0级(正常)或1级(异常)。应当描述存在的晶状体混浊，并注明位点。将多 种制剂的结果显示在表28至31中。表28.含有0. 2wt%沃罗孢素的各种制剂在兔眼中的耐受性测试结果 表29.含有0. 2wt%沃罗孢素的各种制剂在兔眼中的耐受性测试结果
量)、角膜临床观察的反应和参与眼科学家对功效的整体评价。被诊断患有慢性(持续时间> 3个月)免疫介导的KCS的狗选自美国北卡罗来 纳州兽医教学医院的临床种群。通过排除KCS的其它原因对免疫介导的KCS进行了诊断。 所选的进入该研究的狗证实了残留的泪腺功能，且显示出对市售可获得的局部环孢素有反应。在该研究中，没有洗脱期，将动物从局部施用环孢素A(在凡士林中的0.2%环孢
素，USP;玉米油，NF;和Amei<eh()i CAB基质(:Optimmune Schering Plough Animal
Health))直接转换到施用本发明公开实施方案的混合胶束组合物中的0. 2wt%沃罗孢素， 每12个小时局部给药。在0、7、14和28天进行身体检查和眼科检查。设计该研究，使得与 预研究的值相比，对沃罗孢素的有利反应被认为是维持或增加STT值。六只狗进入并完成了该研究。对于这6只狗，在第0天的平均STT为21. 9士SD 3. 2謹/分钟；在治疗第7天，STT为22. 4士4. 0謹/分钟；在第14天，STT为20. 3士2. 5謹/ 分钟，在第30天，STT为21.0士 1.9mm/分钟。这清楚地表明，沃罗孢素在这些狗中保持了 STT为30天。参见图1中的平均STT值。所有的狗都是舒适的，没有任何与所述药物有关 的副作用或刺激的体征。在30天的治疗期间，没有在任何动物中发现副作用。实施例14.制剂的稳健件(Robustness)和稳定件通过使样品接受多次加热/冷却循环、冷藏循环、强力振摇或长期暴露于日光来 测试包含0. 2wt%沃罗孢素的本发明制剂的稳健性。热循环将一组包含制剂的玻璃瓶放置在设定于 70°C温度的水浴中。加热样 品，直到出现混浊，然后在室温下冷却使溶液变澄清，这构成一轮热循环。重复该热循环5 或10次。在完成5或10次热循环之后，如上所述，先分析样品的解离温度，接着分析再生 时间和测定胶束粒径。冷藏循环使一组样品接警冷藏条件。将样品置于冰箱(4°C )中12个小时，然后 恢复到室温，并在室温下保持12小时。重复该热循环5或10次。在完成5或10次循环之 后，如上所述，先分析样品的解离温度，接着分析再生时间和测定胶束粒径。强力振摇将样品置于搅拌器的振动平台上,在室温下以 75rpm操作搅拌器。在 4小时或24小时之后取出样品，如上所述分析解离温度、再生时间和胶束粒径。日光暴露将溶液肓接置于日光下4小时。在暴露后，如上所述分析样品的解离温 度、接着分析再生时间和胶束粒径。使包含0. 2衬％沃罗孢素的本发明混合胶束制剂接受不同应激条件(加热/冷却 循环、冷藏/室温循环、强力振摇和暴露于日光)。包含0. 2wt%沃罗孢素的根据本发明公 开实施方案的混合胶束组合物没有显示出解离温度、再生时间和胶束粒径的变化，如表32 所示。表32 应激对解离温度、再生时间和胶束粒径的影响，三个重复样品的平均值 稳定件研究将溶液一式三份转移到干净的玻璃瓶中，并贮存在不同温度下 (45°C、30°C、RT和4°C )。在预定的时间间隔(0、7、14和30天)，取出样品，评价颜色、相分 离、PH、药物含量、解离温度、再生时间和胶束粒径的变化。贮存在30°C、RT和4°C的样品多达30天未显示出颜色、相、pH、药物含量、解离温 度、再生时间和胶束粒径的变化。贮存在45°C下的溶液形成沉淀，显示出该制剂在高温下的 热不稳定性。实施例15.句,含不同钙调神经磷__g￡mT0R抑制剂的制剂的制各和胶束表渐表33.包含不同钙调神经磷酸酶和mTOR抑制剂的制剂
称量IOmL所需的计算量的药物、维生素E TPGS和辛苯聚醇-40，然后在4mL 95% 乙醇中混合，并在真空下蒸发，形成薄膜状近固体物。然后，将该薄膜状近固体物溶于5mL 去离子水中，并超声处理约40分钟，以确保完全形成混合胶束。将制备的基础制剂贮存在 室温下。通过溶于去离子水中制备包含磷酸氢二钠、磷酸二氢钠和氯化钠的缓冲混合物。 在水中制备PVP-K-90储备溶液。将所需量的聚合物溶液和缓冲溶液加入到基础制剂中，并 轻轻地涡旋，得到澄清溶液。用NaOH或HCl调节所述溶液的pH至约6. 8的目标。用尼龙 膜滤器(0.22μπι)将所述制剂除菌，然后贮存在室温下直至使用。通过使用动态光散射技 术(Brookhaven 90Plus粒径分析仪，HoltSVille，NY)测量制剂的胶束粒径，取三次测量的 平均值。研究的结果描述如下发现所述制剂在室温下是澄清透明的。在表34中给出了所 述制剂的胶束粒径和多分散性(PDI)指数。表34 制剂的观测胶束粒径和PDI 实施例16.人工泪液组合物表35 生物相容的人工泪液组合物 为了表明本发明的人工泪液组合物的组分均不是天然对眼部组织有刺激性，进行 研究以测定所述人工泪液的眼部耐受性和毒性。向新西兰白兔(NZW) (5只雌性/5只雄性)的每只眼局部给施用一滴约35 μ 1的 滴剂或本发明的人工泪液组合物，施用间隔为1小时，每日多达8次。在施用人工泪液14 天后处死动物。在研究期间评价了下述参数发病率/死亡率、身体检查、临床观察、体重、 饲料消耗、肉眼和显微镜目镜观察、视网膜电描记法(ERG)、眼内压测量(IOP)，以及在尸体 剖检时对下述组织进行组织病理学检查眼，胸腺，下颂骨、喙和尾部的淋巴结，脾。所有的 动物都是健康的，显示出没有测定结果在正常范围之外。下述更详细地提供与眼相关的检 查报告显微镜目镜分级使用包括插入蓝色滤光器的裂隙灯生物显微镜，应用显微镜目镜分级系统进行眼 部观察，以评价荧光素染料的保留。通过在给药前和在应用人工泪液组合物14天(每天8 次)后进行的间接检眼镜检查表明没有损伤。眼压测量(IOP)数据观测值在试验前和应用人工泪液组合物14天后进行的兔眼内压的平均眼压测量 (Tono-pen)读数为ll-17mm/Hg压力之间，这在正常的生理范围(10-20/mm Hg)之内。总之，没有观察到与施用局部治疗(每日8次)相关的IOP作用。ERG数据观测值利用ISCEV方案和HMsERG单元在兔中进行双侧全视野闪烁ERG。在应用人工泪液 组合物14天(每天8次)后，在暗视条件下，对于使用IOcd. s/m2的高强度刺激、30Hz闪烁 刺激以及使用IOcd. s/m2刺激的最大a-和b_波幅的初步评价均显示出没有任何发现。组织病理学观测值在应用人工泪液组合物14天(每天8次)后，没有发现组织病理学变化。实施例17.包含糖添加剂的混合胶束制剂将糖添加剂，例如海藻糖、甘露糖、D-半乳糖和乳糖加入到本发明的各种制剂中， 在不同温度下进行稳定性研究。在再水化步骤期间(外加)，或者在形成薄膜之前(内加)， 将糖加入所述制剂中。发现在辅助剂糖的存在下，所述制剂是稳定的。还制备了包含降低浓度的辛苯聚醇-40与糖的制剂，其中糖是在制备基础制剂期 间加入的(内加)。对于稳定性研究，用0. 05%和0. 的辛苯聚醇-40以及0. 5%和1. 0% 的糖进行研究。在研究期间获得的结果表明，所述制剂在30°C保持稳定35天。表36 制剂的组分(糖为内加) 方法称量IOOmL制剂所需的计算量的药物(约0. 2%，即200mg)、维生素E TPGS(约 2. 5%, BP 2. 5g)和辛苯聚醇-40 (约 0. 05/0. 1%，即 50/100mg)。将 200mg 的药物、约 2. 5g TPGS和约50/100mg的辛苯聚醇_40分别溶于约2ml、约Iml和约50/100 μ L的95%乙醇 中。对于糖，将约Ig海藻糖单独溶于约4. 5ml水/乙醇混合物(约2. 5ml水+约2. Oml乙 醇)中，并与其它内容物混合。使用相同的水乙醇比例制备包含不同量的糖的制剂。然 后，在真空下蒸发混合物过夜，形成薄膜。然后，将该薄膜溶于约45mL的去离子水中，并超 声处理约45分钟，以确保完全形成混合胶束。通过将一定量的组分溶于约45mL去离子水中制备包含磷酸氢二钠(约 0.8092% )、磷酸二氢钠(约0.9287 %)、氯化钠(约0. 18 % )和聚合物PVP-K 90 (约
461.2%)的再水化溶液。然后，将该聚合物溶液加入到在量筒中的预先制备的胶束中，用去 离子水(适量)使体积达到约100mL。最后，用NaOH或HCl调节该制剂的pH至约6. 8。通 过尼龙膜滤器(0. 22 μ m)对该制剂除菌。在稳定性研究期间，以预定的时间间隔取出样品，离心，并收集上清液溶液用于分 析药物含量。结果在开始稳定性研究之前，发现所述制剂在室温下是澄清透明的。观察到胶束粒径 在12-14nm的范围之内。含有辛苯聚醇_40和海藻糖的实施例制剂如下表37A 含有糖添加剂的制剂 表37B 在30°C下不同制剂所余留的药物百分数 实施例18.在本发明馄合胶束制剂中2wt% /体积的沃罗孢素的眼部分布和药 代动力学本研究的目的是通过测定新西兰白兔(NZW)和荷兰黑带兔(DutchBelted rabbit,DB)的眼部组织、泪液和血液中的放射性，评价眼部应用后本发明的0. 2% 14C-放射 标记的沃罗孢素组合物(眼用溶液)的时间分布、重复给药的潜在累积、性别差异和潜在的 黑色素结合。方法在单剂量(SD)和7天重复剂量(RD)研究中使用NZff兔(30只雌性/8只雄性) (参见表38)。在单剂量研究中使用DB兔(16只雌性)(参见表39)。动物分为未处理的
47(对照)或单剂量给药或每日眼部局部给药7天(向一只或两只眼施用35 μ L在混合胶束 制剂中的0.2% 14C-沃罗孢素)。在指定时间点，通过燃烧和接着的液体闪烁计数来评价血 液和眼部组织的放射性水平。没有发生任何兔的死亡、发病或临床刺激的迹象。表38.混合胶束组合物中14C-沃罗孢素的眼部组织分布 b用作处理组2 (SD组)的预剂量浓度.c用于药代动力学评价(SD组)d用作处理组5 (RD组)的预剂量浓度e用于药代动力学评价(MD组)
表39.混合胶束组合物中14C-沃罗孢素的眼部组织分布 a局部剂量制剂包含0.2%的沃罗孢素。目标剂量为 3 μ Ci/35 μ L和70ng的沃
罗孢素/剂量b用作处理组2 (SD组)的预剂量浓度c用于药代动力学评价(SD组)在每个采样点，使用t检验比较两兔之内或之间的组织浓度。使用SigmaStat 3. 5 (Systat，Inc.，San Jose, CA)进行统计分析(ρ < 0. 05)。对平均组织14C-沃罗孢素浓 度 _ 时间数据进行非隔室分析。使用 WinNonlin5. 2(Pharsight，Corporation, Mountain View, CA)进行药代动力学分析。报告Cmax和Tmax以及其中可计算的AUC和t1/2。药代动力学参数:对于NZW和DB兔，用于来自14C-沃罗孢素的放射性的所选药代动力学参数(Cmax、 AUC、Tfflax和t1/2)分别归纳在表40和41中。在单剂量施用后，药物快速渗透(作为放射性 而测量)到眼部组织中，在眼睑、结膜、角膜、瞬膜和泪液中出现最高浓度(> Img当量/g 组织)，在房水和玻璃体液以及晶状体中出现最低浓度(1-llng当量/g组织)。其余眼部 组织达到了不同水平(20-223ng当量/g组织)的沃罗孢素和/或相关残余物。图2显示 了在向雌性新西兰白兔单次(1天)局部施用0. 2% 14C-沃罗孢素混合胶束制剂后14C-沃 罗孢素的组织水平。在24-小时点观察到了沃罗孢素的治疗水平，这支持了可以每日一次 (QD)施用本发明公开实施方案的含水混合胶束组合物。在重复施用多达7天后，基于该研究得到的可获得的有限信息(下球结膜、瞬膜和 上球结膜)，14C-沃罗孢素t1/2没有明显的变化(参见表40)。在放射性测定中，除了一个血 样外所有都低于定量下限(1^00)(3.061^当量/!^)。特别地，单剂量施用导致了所有眼部 组织(除了房水/玻璃体液和晶状体之外)的治疗水平(高于IOng当量药物/克组织)，
49具有可忽略的全身暴露。表40.向雌性NZW兔单次或重复(QD，共7天)、双侧眼部施用混合胶束制剂中的 14C-沃罗孢素后，来自14C-沃罗孢素放射性的药代动力学参数 SD =单次施用；RD =重复施用；比例=重复施用/单次施用；-=组织浓度不足以 测定t1/2 ；BQL =低于定量限(< 0. Ing/mL) ；NC =未计算表41.向雌性DB兔单次双侧眼部施用本发明的混合胶束制剂中的14C-沃罗孢素 之后，来自14C-沃罗孢素的放射性的药代动力学参数 表42.在单次眼部局部施用14C-沃罗孢素后，比较NZW和DB兔中来自14C-沃罗孢 素的放射性的Cmax 表43.在NZW兔中14C-沃罗孢素的眼部组织/流体分布(Cmax) 图3A-D显示了在向雌性新西兰白兔单次(1天)或重复(7天)、双侧、每日一次、 局部施用0. 2%的14C-沃罗孢素混合胶束制剂之后，14C-沃罗孢素的平均眼部组织浓度(图 3A，角膜；图3B，虹膜/睫状体；图3C，泪腺；图3D，晶状体)。
图4A-D显示了在向雌性新西兰白兔单次(1天)或重复(7天)、双侧、每日一次、 局部施用0. 2%的14C-沃罗孢素混合胶束制剂之后，14C-沃罗孢素的平均眼部组织浓度(图 4A，下结膜；图4b，下眼睑；图4C，瞬膜；图4D，巩膜)。图5A-D显示了在向雌性新西兰白兔单次(1天)或重复(7天)、双侧、每日一次、 局部施用0. 2%的14C-沃罗孢素混合胶束制剂之后，14C-沃罗孢素的平均眼部组织和流体浓 度(图5A，上结膜；图5B，上眼睑；图5C，房水；图5D，玻璃体液)。图6A-D显示了在向雌性新西兰白兔单次(1天)或重复(7天)、双侧、每日一次、 局部施用0. 2%的14C-沃罗孢素混合胶束制剂之后，14C-沃罗孢素的平均眼部组织和流体浓 度(图6A，泪液；图6B，淋巴结；图6C，视神经；图6D，脉络膜/视网膜)。图7为显示在向雌性新西兰白兔重复(7天)、双侧、每日一次、局部施用0.2%的 14C-沃罗孢素混合胶束制剂之后，14C-沃罗孢素的Cmax值的图表。来自mC-沃罗孢素的放射件的潜在累积在每日一次、双侧眼部施用14C-沃罗孢素(35口1^，70叫)7天后，角膜、泪腺、虹膜/ 睫状体和晶状体的眼部暴露比14C-沃罗孢素的眼部暴露增加2. 8至6. 7倍(参见表40)。 在多剂量施用后(参见表40-43和图3-7)，即使在所选组织中Cmax-重复施用Cmax-单次施 用的比例升高，但是沃罗孢素的总水平低于表示最小组织累积的表面组织水平。而且，在单 次或重复施用之后，可比较的t1/2强烈表明了最小组织累积。黑饩素结合的可能件在向DB兔单次施用14C-沃罗孢素之后，眼部组织浓度(例如Cmax)与NZW兔的没 有显著不同，这表明缺乏黑色素结合(参见表42)。一次局部施用用(单次施用)本发明的组合物可获得高水平的药物。更具体地， 眼部组织的高药物水平保持多达和超过给药后24小时，这表明使用本发明的组合物可实 现QD(每日一次)给药。在眼前部(角膜、结膜、巩膜)和眼后部(视网膜、视神经)的组 织中药物浓度高，但在眼中部(房水和玻璃体液)中最小，这表明药物转运机制不同于通过 眼的被动转运。在眼后部获得高药物水平使得可以局部施用本发明组合物来治疗眼后部疾 病(例如视网膜疾病，包括视神经疾病比如青光眼)。多种水不溶性药物可以与本发明组合 物使用，所述组合物包括但不限于钙调神经磷酸酶和mTOR抑制剂。已经表明，本发明的组 合物可以获得非常高的水平，尤其是在靶组织如泪腺中。在单次或重复眼部施用后，在除晶状体和眼部流体(房水、玻璃体液)之外的眼部 所有组织中都测量到了超过治疗水平(》IOng当量/g组织)的来自14C-沃罗孢素的放射 性(ng当量/g组织)浓度。血液水平处于定量下限(LLOQ)，表明全身暴露最少，14C-沃罗 孢素在对侧非治疗眼的分布最少，很可能是由于动物的梳理行为(grooming behavior)所 导致。如通过Cmax和AUC所证实的，本发明混合胶束制剂中的14C-沃罗孢素的眼部暴露 在眼部组织间的差异很大。在眼附属器和外部组织(角膜、巩膜、下球结膜、下眼睑、瞬膜、 上球结膜和上眼睑)以及泪液中的14C-沃罗孢素暴露最高，在内部眼部组织和流体(玻璃 体液、晶状体、房水)中的最低；在虹膜/睫状体、泪腺、颂下淋巴结、脉络膜/视网膜以及视 神经中的处于中间范围。因此，大多数眼部组织水平超过了生物效应所需的IOng当量/g 的水平。
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在每日一次施用混合胶束制剂中的14C-沃罗孢素7天之后，在靶组织(例如结膜、 角膜和泪腺)中的14C-沃罗孢素的浓度保持在治疗水平，甚至在24小时点，这证明可以每 日一次(QD)施用本发明公开实施方案的含水混合胶束组合物。在此，将本文中引用的所有专利、专利申请和公布的参考文献的全部内容通过引 用并入本文。应当理解，各种上述公开内容及其它特征和功能或其替代方案均可以按期望 结合成多种其它不同的系统或应用。随后，本领域技术人员可以进行各种目前无法预见或 无法预期的替换、修饰、变化或改进，这些也旨在涵盖在下述权利要求书中。
权利要求
一种药物组合物，其包含钙调神经磷酸酶抑制剂或mTOR抑制剂；HLB指数大于约10的第一表面活性剂；和HLB指数大于约13的第二表面活性剂，其中所述第一表面活性剂的HLB指数与所述第二表面活性剂的HLB指数之间的绝对差值大于约3，和其中所述组合物形成混合胶束。
2.权利要求1的药物组合物，其中所述钙调神经磷酸酶抑制剂或mTOR抑制剂包括沃罗 孢素、环孢素A、吡美莫司、他克莫司、西罗莫司、坦西莫司、依维莫司、其类似物、其可药用盐 或其组合。
3.一种药物组合物，其包含 钙调神经磷酸酶抑制剂； 维生素E TPGS ；和辛苯聚醇-40，其中所述组合物适于局部施用至眼部组织。
4.权利要求3的药物组合物，其中所述组合物形成混合胶束。
5.权利要求3的药物组合物，其中所述组合物形成光学上澄清的混合胶束。
6.权利要求3的药物组合物，其中所述钙调神经磷酸酶抑制剂包括沃罗孢素、环孢素 A、吡美莫司、他克莫司、其类似物、其可药用盐或其组合中的一种。
7.权利要求3的药物组合物，其中所述钙调神经磷酸酶抑制剂为沃罗孢素。
8.权利要求3的药物组合物，其中所述钙调神经磷酸酶抑制剂的存在量为所述组合物 总体积的约0. 01wt%至约IOwt % ο
9.权利要求3的药物组合物，其中所述维生素ETPGS的存在量为所述组合物总体积的 约 0. 01wt% 至约 20wt%o
10.权利要求3的药物组合物，其中所述辛苯聚醇-40的存在量为所述组合物总体积的 约 0. 00 Iwt % 至约 IOwt % O
11.权利要求3的药物组合物，其还包含一种或多种选自PVP-K-30、PVP-K-90、HPMC, HEC和聚卡波非的生物粘附性聚合物。
12.权利要求3的药物组合物，其还包含一种或多种选自海藻糖、甘露糖、D-半乳糖和 乳糖的添加剂。
13.一种药物组合物，其包含 mTOR抑制剂；维生素E TPGS ；和 辛苯聚醇-40，其中所述组合物适于局部施用至眼部组织。
14.权利要求13的药物组合物，其中所述组合物形成混合胶束。
15.权利要求13的药物组合物，其中所述组合物形成光学上澄清的混合胶束。
16.权利要求13的药物组合物，其中所述mTOR抑制剂包括西罗莫司、坦西莫司、依维莫 司、其类似物、其可药用盐或其组合中的一种。
17.一种制备混合胶束组合物的方法，其包括将钙调神经磷酸酶抑制剂或mTOR抑制剂与HLB指数大于约10的第一表面活性剂和 HLB指数大于约13的第二表面活性剂在溶剂中相混合，形成溶剂溶液；蒸发所述溶剂溶液，形成近固体物；用水溶液水合所述近固体物；和溶解所述近固体混合物，形成混合胶束组合物，其中所述混合胶束组合物是光学上澄清的。
18.权利要求17的方法，其中所述第一表面活性剂是维生素ETPGS，所述第二表面活性剂是辛苯聚醇-40。
19.权利要求17的方法，其还包括将生物粘附性聚合物混合到所述水溶液中，其中所 述生物粘附性聚合物选自PVP-K-30、PVP-K-90、HPMC, HEC和聚卡波非。
20.权利要求17的方法，其中所述钙调神经磷酸酶抑制剂为沃罗孢素。
21.权利要求20的方法，其中所述沃罗孢素在所述混合胶束组合物中的存在量为约 0. 01%至约 10%。
22.一种用于在有此需要的患者中治疗眼部疾病的方法，包括向患者的眼局部施用包 含治疗有效量的钙调神经磷酸酶抑制剂或mTOR抑制剂的组合物，所述组合物还含有维生 素E TPGS和辛苯聚醇-40，其中所述组合物为混合胶束的水溶液。
23.权利要求22的方法，其中所述眼部疾病为选自下述的炎性眼表疾病干眼综合征 (DES)，舍格伦综合征，葡萄膜炎，结膜炎(红眼病)，角膜炎，角膜结膜炎，春季角膜结膜炎 (VKC)，特应性角膜结膜炎(AKC)，包括结疤性结膜炎、睑缘炎和巩膜炎在内的自身免疫性眼 表病。
24.权利要求22的方法，其中所述眼部疾病为角膜同种异体移植物的免疫排斥反应。
25.权利要求23的方法，其中所述炎性眼表疾病为干眼综合征。
26.权利要求22的方法，其中所述钙调神经磷酸酶抑制剂为沃罗孢素。
27.一种用于治疗、减轻、改善或缓解动物中炎性眼部疾病的方法，其包括提供含有包囊在胶束中的钙调神经磷酸酶抑制剂或mTOR抑制剂的混合胶束药物组合 物，所述胶束是由HLB指数大于约10的第一表面活性剂和HLB指数大于约13的第二表面 活性剂形成的；和向所述动物以足以治疗、减轻、改善或缓解所述炎性眼部疾病的频率施用一定量的药 物组合物。
28.权利要求27的方法，其中所述钙调神经磷酸酶抑制剂或mTOR抑制剂包括沃罗孢 素、环孢素A、吡美莫司、他克莫司、西罗莫司、坦西莫司、依维莫司、其类似物、其可药用盐或 其组合中的一种。
29.权利要求28的方法，其中所述钙调神经磷酸酶抑制剂为沃罗孢素。
30.权利要求27的方法，其中所述第一表面活性剂是维生素ETPGS，所述第二表面活性 剂是辛苯聚醇-40。
31.权利要求27的方法，其中所述钙调神经磷酸酶抑制剂或mTOR抑制剂在所述药物组 合物中的重量百分数为所述药物组合物总体积的约0. 01衬％至约10wt%。
32.权利要求27的方法，其中所述动物选自狗、马、猫、兔、沙鼠、仓鼠、啮齿类、鸟类、水生哺乳动物、牛、猪、羊驼及动物学上的其它动物。
33.权利要求27的方法，其中局部施用所述药物组合物。
34.权利要求27的方法，其中所述炎性眼部疾病选自干眼综合征(DES)，舍格伦综合 征，葡萄膜炎，结膜炎(红眼病)，角膜炎，角膜结膜炎，春季角膜结膜炎(VKC)，特应性角膜 结膜炎(AKC)，包括结疤性结膜炎、睑缘炎和巩膜炎在内的自身免疫性眼表病。
35.一种用于治疗、减轻、改善或缓解对象的眼后部症状或病症的方法，其包括提供含有包囊在胶束中的钙调神经磷酸酶抑制剂的混合胶束药物组合物，所述胶束是 由HLB指数大于约10的第一表面活性剂和HLB指数大于约13的第二表面活性剂形成的； 和向所述对象以足以治疗、减轻、改善或缓解所述眼后部症状或病症的频率施用一定量 的药物组合物。
36.权利要求35的方法，其中所述第一表面活性剂是维生素ETPGS，所述第二表面活性 剂是辛苯聚醇-40。
37.权利要求35的方法，其中所述钙调神经磷酸酶抑制剂为沃罗孢素。
38.权利要求35的方法，其中所述钙调神经磷酸酶抑制剂包括沃罗孢素、环孢素A、吡 美莫司、他克莫司、其类似物、其可药用盐或其组合中的一种。
39.权利要求35的方法，其中所述钙调神经磷酸酶抑制剂在所述药物组合物中的重量 百分数为所述药物组合物总体积的约0. 01衬％至约10. 0wt%。
40.权利要求35的方法，其中所述对象为人。
41.权利要求35的方法，其中所述对象为动物。
42.权利要求41的方法，其中所述动物选自狗、马、猫、兔、沙鼠、仓鼠、啮齿类、鸟类、水 生哺乳动物、牛、猪、羊驼及动物学上的其它动物。
43.权利要求35的方法，其中局部施用所述药物组合物。
44.权利要求35的方法，其中所述施用频率为每日一次。
45.权利要求35的方法，其中所述施用频率为每日约一次至约八次。
46.权利要求35的方法，其中所述眼后部症状或病症选自糖尿病性视网膜病(“DR”)、 年龄相关性黄斑变性(“AMD”)、糖尿病性黄斑水肿(“DME”)、后葡萄膜炎及其组合。
47.一种人工泪液组合物，其包含混合胶束的水溶液，所述混合胶束由维生素E生育酚 聚乙二醇琥珀酸酯(TPGS)衍生物和乙氧基化辛基酚表面活性剂形成。
48.权利要求47的组合物，其中所述乙氧基化辛基苯酚表面活性剂为辛苯聚醇-40。
49.权利要求47的组合物，其中所述水溶液包含选自以下之一的多种成分亲水性聚 合物赋形剂，张力调节剂，缓冲剂，糖比如海藻糖、甘露糖、D-半乳糖和乳糖，防腐剂，共溶剂 或抗氧化剂。
50.权利要求47的组合物，其中所述水溶液包含PVP-K-90、氯化钠、至少一种磷酸钠和水。
51.权利要求47的组合物，其中所述水溶液的pH为约6.6至约7. 0。
全文摘要
本文公开的实施方案涉及包含钙调神经磷酸酶抑制剂或mTOR抑制剂的眼科组合物，更具体地涉及使用所公开组合物治疗眼部疾病和/或病症的方法。根据本文所阐述的方面，提供了一种药物组合物，其包含钙调神经磷酸酶抑制剂或mTOR抑制剂；HLB指数大于约10的第一表面活性剂；和HLB指数大于约13的第二表面活性剂，其中所述第一表面活性剂的HLB指数与所述第二表面活性剂的HLB指数的绝对差值大于约3，并且其中所述组合物形成混合胶束。
文档编号A61K38/00GK101918019SQ200880110526
公开日2010年12月15日 申请日期2008年10月8日 优先权日2007年10月8日
发明者普纳姆·R·瓦拉加莱蒂, 苏布拉马尼安·纳特桑, 阿希姆·K·米特拉 申请人:卢克斯生物科技公司