专利名称：一种盐酸小檗碱脂质体制剂的制备方法
技术领域：
本发明涉及盐酸小檗碱脂质体制剂的制备方法，尤其涉及一种由主动载药法-薄 膜蒸发、高压均质工艺制备盐酸小檗碱脂质体制剂的方法。
背景技术：
脂质体(liposomes)是由脂质双分子层构成的内部为水相的封闭囊泡。这种由磷 脂质双层结构组曾的脂质体在结构上交替间隔着水层和磷脂质双层，可以包埋亲水性或亲 脂性的物质。作为近年来研究较为广泛的一种药物载体，其主要特点是可以保护被包封药 物，增加药物稳定性，改变药物在体内的分布行为，携载药物被动或主动靶向到病变部位。 在制备含药脂质体时，根据药物装载的机制不同，可分为被动载药法和主动载药法两大类。 对于脂溶性且与磷脂亲和力高的药物，被动载药法较为适用；而对于两亲性药物，其油水分 配系数受介质的PH值和离子强度的影响较大，包封条件的较小变化，就有可能使包封率有 较大的变化，不适合放大生产。所谓主动载药，即通过内外水相的不同离子或化合物梯度进 行载药，主要有K+_Na+梯度和H+梯度(即pH梯度等)。由于采用主动载药法制备的脂质 体包封率高、渗漏率小，非常适合工业化大生产。小檗碱(Berberine)是从黄连等植物中提 取出的一种异喹啉类生物碱，对多种革兰阳性菌和阴性菌有抑制作用，临床上主要用于清 热解毒和治疗肠道感染。近年来发现小檗碱具有多种非抗菌作用，开发了许多新用途。根 据文献报道(韦正步.小檗碱临床应用概况[J].西北药学杂志，1998，13 (4) :178;陶岳多 等.黄连素临床应用进展[J].临床医学，1998，18 (5) :32;周元余.黄连素在心血管疾病 中的应用[J]·山东医药工业，1997，16 (6) :22。)，其具有治疗心律失常、高血压、高脂血症、 糖尿病等。有资料显示(黄林清等.小檗碱抗肿瘤作用实验研究[J].中国药理学通报， 1997，13(1) 189.)小檗碱体内抑瘤作用没有体外明显，可能与其肠道吸收较差，在体内很 难达到对肿瘤细胞有效的血药浓度有关。
发明内容
针对上述技术缺陷，本发明需解决的技术问题是为了提高小檗碱在体内抑瘤作 用，利用药物包裹的方法制备这种盐酸小檗碱脂质体制剂。为解决上述技术问题，本发明是通过以下技术方案实现的一种盐酸小檗碱脂质 体制剂的制备方法，由主动载药法-薄膜蒸发、高压均质工艺处理，步骤为A、将卵磷脂、胆 固醇超声溶解于有机溶剂中，得白色透亮溶液；B、将步骤A的溶液通过减压回收溶剂，在瓶 壁形成薄膜脂材后，注入枸橼酸溶液，使得薄膜脂材完全溶解，薄膜脂材在枸橼酸中水化时 间为0. 5-2h ；C、将步骤B的溶液通过微孔滤膜，得到空白脂质体；D、在步骤C的空白脂质体 溶液中加入盐酸小檗碱溶液，超声完全溶解；E、在步骤D所得的溶液中加入碳酸氢钠溶解， 调整其pH值在4 8之间，使得游离的盐酸小檗碱进入到空白脂质体中；F、将步骤E所得 的溶液在20 80°C下孵化10 60分钟，得到黄色的类脂混悬液；G、将步骤F的类脂混悬 液进行均质方法处理0 2h，得盐酸小檗碱脂质体。
进一步在上述盐酸小檗碱脂质体制剂的制备方法中，所述步骤A中卵磷脂与胆 固醇的质量比为1 6 1。所述步骤A中卵磷脂选自氢化大豆卵磷脂、大豆卵磷脂或蛋黄 卵磷脂中的一种；所述步骤A中的胆固醇选自蛋白胆固醇、血清胆固醇、蛋黄胆固醇或胆囊 胆固醇中的一种；所述步骤A中的有机溶剂为氯仿、甲醇、乙醇、丙酮、甲苯、三氯甲烷或正 己烷中的一种。所述步骤B中的枸橼酸溶液的pH值为3 5。所述步骤C中的微孔滤膜 为0. 22 0. Sum。所述步骤D中的盐酸小檗碱在空白脂质体中的药物含量为0. 6mg/ml 1.2mg/ml。所述步骤G中的均质方法是指采用高速剪切或高压均质。所述盐酸小檗碱脂质 体制剂的盐酸小檗碱纳米微球颗粒的平均粒径为60 lOOnm。与现有技术相比，上述盐酸小檗碱脂质体制剂的制备方法，由主动载药法-薄膜 蒸发、高压均质工艺处理，其纳米盐酸小檗碱脂质体的配方与工艺可使脂质体达到较高的 包封率，且所制备的脂质体粒径均一，稳定性好。该方法适宜工业化大生产，不影响其包封 率和粒径。这种采用药物包裹的方法大大提高了盐酸小檗碱脂质体的生物利用率。
图1为本发明制备的纳米盐酸小檗碱脂质体制剂的SEM电镜扫描图；图2为本发明制备的纳米盐酸小檗碱脂质体制剂的粒径分布图。
具体实施例方式本发明的主旨是选择主动载药法_薄膜蒸发、高压均质工艺制备纳米盐酸小檗碱 脂质体制剂，提高了盐酸小檗碱脂质体的生物利用率。且所制备的脂质体粒径均一，稳定性 好。下面结合实施例对本发明的内容作进一步详述，实施例中所提及的内容并非对本发明 的限定，材料配方及工艺参数的选择可因地制宜而对结果无实质性的影响。实施例1称取SOmg蛋黄卵磷脂，以及20mg血清胆固醇溶于适量氯仿中，超声溶解，使之成 为白色透亮溶液；减压回收溶剂，在瓶壁形成一层脂材薄膜；注入枸橼酸溶液60ml，使得脂 材薄膜溶解，并且脂材薄膜在枸橼酸中水化0. 5h ；将前面溶液过0. 45um微孔滤膜，得到空 白脂质体；在得到的空白脂质体溶液中加入40mg的盐酸小檗碱溶液，超声使之完全溶解； 用碳酸氢钠溶解调整其PH值为6. 0，使得游离的盐酸小檗碱进入到空白脂质体中；在40°C 下孵化10分钟，得到黄色的类脂混悬液；将类脂混悬液在高压均质机中均质lh，此时得到 的包封率高，稳定，粒径均一的盐酸小檗碱脂质体制剂，如图1所示的盐酸小檗碱脂质体制 剂SEM电镜扫描图和如图2所示的盐酸小檗碱脂质制剂体粒径分布图。其检测过程为将 制备的脂质体制剂溶液在超声仪中超声3 5min，取Iml超声后的溶液进行粒径测量，另取 2 4滴溶液滴于铝箔上进行电镜扫描，分别考察其粒径分布及颗粒微观分布情况，以下实 施例的检测过程相同或类似。实施例2称取60mg大豆卵磷脂，以及30mg蛋黄胆固醇溶于适量乙醇中，超声溶解，使之成 为白色透亮溶液；减压回收溶剂，在瓶壁形成一层脂材薄膜；注入枸橼酸溶液80ml，使得脂 材薄膜溶解，并且使脂材薄膜在枸橼酸中水化Ih ；将前面溶液过0. 45um微孔滤膜，得到空 白脂质体；在得到的空白脂质体溶液中加入60mg的盐酸小檗碱溶液，超声使之完全溶解；用碳酸氢钠溶解调整其PH值为6. 4，使得游离的盐酸小檗碱进入到空白脂质体中；在30°C 下孵化20分钟，得到黄色的类脂混悬液；将类脂混悬液在高压均质机中均质0. 5h，此时得 到的包封率高，稳定，粒径均一的盐酸小檗碱脂质体制剂，如图1所示的盐酸小檗碱脂质体 制剂SEM电镜扫描图和如图2所示的盐酸小檗碱脂质制剂体粒径分布图。实施例3称取50mg大豆卵磷脂，以及20mg蛋黄胆固醇溶于适量乙醇中，超声溶解，使之成 为白色透亮溶液；减压回收溶剂，在瓶壁形成一层脂材薄膜；注入枸橼酸溶液70ml，使得脂 材薄膜溶解，并且使脂材薄膜在枸橼酸中水化Ih ；将前面溶液过0. 22um微孔滤膜，得到空 白脂质体；在得到的空白脂质体溶液中加入80mg的盐酸小檗碱溶液，超声使之完全溶解； 用碳酸氢钠溶解调整其PH值为7. 4，使得游离的盐酸小檗碱进入到空白脂质体中；在60°C 下孵化10分钟，得到黄色的类脂混悬液；将类脂混悬液在高压均质机中均质1. 5h，此时得 到的包封率高，稳定，粒径均一的盐酸小檗碱脂质体制剂，如图1所示的盐酸小檗碱脂质体 制剂SEM电镜扫描图和如图2所示的盐酸小檗碱脂质制剂体粒径分布图。实施例4称取80mg大豆卵磷脂，以及20mg蛋黄胆固醇溶于适量乙醇中，超声溶解，使之成 为白色透亮溶液；减压回收溶剂，在瓶壁形成一层脂材薄膜；注入枸橼酸溶液50ml，使得脂 材薄膜溶解，并且使脂材薄膜在枸橼酸中水化Ih ；将前面溶液过0. Sum微孔滤膜，得到空白 脂质体；在得到的空白脂质体溶液中加入80mg的盐酸小檗碱溶液，超声使之完全溶解；用 碳酸氢钠溶解调整其PH值为6. 8，使得游离的盐酸小檗碱进入到空白脂质体中；在50°C下 孵化20分钟，得到黄色的类脂混悬液；将类脂混悬液在高压均质机中均质2h，此时得到的 包封率高，稳定，粒径均一的盐酸小檗碱脂质体制剂，如图1所示的盐酸小檗碱脂质体制剂 SEM电镜扫描图和如图2所示的盐酸小檗碱脂质制剂体粒径分布图。实施例5称取60mg氢化大豆卵磷脂脂，以及30mg蛋黄胆固醇溶于适量甲苯中，超声溶 解，使之成为白色透亮溶液；减压回收溶剂，在瓶壁形成一层脂材薄膜；注入枸橼酸溶液 100ml，使得脂材薄膜溶解，并且脂材薄膜在枸橼酸中水化1. 5h ；将前面溶液过0. 45um微孔 滤膜，得到空白脂质体；在得到的空白脂质体溶液中加入60mg的盐酸小檗碱溶液，超声使 之完全溶解；用碳酸氢钠溶解调整其PH值为6. 8，使得游离的盐酸小檗碱进入到空白脂质 体中；在60°C下孵化25分钟，得到黄色的类脂混悬液；将类脂混悬液在高压均质机中均质 2h，此时得到的包封率高，稳定，粒径均一的盐酸小檗碱脂质体制剂，如图1所示的盐酸小 檗碱脂质体制剂SEM电镜扫描图和如图2所示的盐酸小檗碱脂质体制剂粒径分布图。
权利要求
一种盐酸小檗碱脂质体制剂的制备方法，由主动载药法 薄膜蒸发、高压均质工艺处理，步骤为A、将卵磷脂、胆固醇超声溶解于有机溶剂中，得白色透亮溶液；B、将步骤A的溶液通过减压回收溶剂，在瓶壁形成薄膜脂材后，注入枸橼酸溶液，使得薄膜脂材完全溶解，薄膜脂材在枸橼酸中水化时间为0.5 2h；C、将步骤B的溶液通过微孔滤膜，得到空白脂质体；D、在步骤C的空白脂质体溶液中加入盐酸小檗碱溶液，超声完全溶解；E、在步骤D所得的溶液中加入碳酸氢钠溶解，调整其pH值在4～8之间，使得游离的盐酸小檗碱进入到空白脂质体中；F、将步骤E所得的溶液在20～80℃下孵化10～60分钟，得到黄色的类脂混悬液；G、将步骤F的类脂混悬液进行均质方法处理0～2h，得盐酸小檗碱脂质体制剂。
2.根据权利要求1所述的盐酸小檗碱脂质体制剂的制备方法，其特征在于所述步骤A 中卵磷脂与胆固醇的质量比为1 6 1。
3.根据权利要求2所述的盐酸小檗碱脂质体制剂的制备方法，其特征在于所述步骤A 中卵磷脂选自氢化大豆卵磷脂、大豆卵磷脂或蛋黄卵磷脂中的一种；
4.根据权利要求3所述的盐酸小檗碱脂质体制剂的制备方法，其特征在于所述步骤A 中的胆固醇选自蛋白胆固醇、血清胆固醇、蛋黄胆固醇或胆囊胆固醇中的一种；
5.根据权利要求4所述的盐酸小檗碱脂质体制剂的制备方法，其特征在于所述步骤A 中的有机溶剂为氯仿、甲醇、乙醇、丙酮、甲苯、三氯甲烷或正己烷中的一种。
6.根据权利要求1-5中任意一项所述的盐酸小檗碱脂质体制剂的制备方法，其特征在 于所述步骤B中的枸橼酸溶液的pH值为3 5。
7.根据权利要求1-5中任意一项所述的盐酸小檗碱脂质体制剂的制备方法，其特征在 于所述步骤C中的微孔滤膜为0. 22 0. Sum。
8.根据权利要求1-5中任意一项所述的盐酸小檗碱脂质体制剂的制备方法，其特征在 于所述步骤D中的盐酸小檗碱在空白脂质体中的药物含量为0. 6mg/ml 1. 2mg/ml。
9.根据权利要求1-5中任意一项所述的盐酸小檗碱脂质体制剂的制备方法，其特征在 于所述步骤G中的均质方法是指采用高速剪切或高压均质。
全文摘要
本发明公开了一种盐酸小檗碱脂质体制剂的制备方法，由主动载药法-薄膜蒸发、高压均质工艺处理，步骤为A、将卵磷脂、胆固醇超声溶解于有机溶剂中，得白色透亮溶液；B、将步骤A的溶液通过减压回收溶剂，在瓶壁形成薄膜脂材后，注入枸橼酸溶液，使得薄膜脂材完全溶解；C、将步骤B的溶液通过微孔滤膜，得到空白脂质体；D、在步骤C的空白脂质体溶液中加入盐酸小檗碱溶液，超声完全溶解；E、在步骤D所得的溶液中加入碳酸氢钠溶解，调整其pH值；F、将步骤E所得的溶液在20～80℃下孵化得到黄色的类脂混悬液；G、将步骤F的类脂混悬液进行均质方法处理0～2h。所得脂质体粒径均一，稳定性好且提高了盐酸小檗碱脂质体的生物利用率。
文档编号A61K31/4375GK101978952SQ20101052065
公开日2011年2月23日 申请日期2010年10月22日 优先权日2010年10月22日
发明者丁航, 周克元, 张月飞, 朱君, 李彩虹, 李涛, 王俊玲, 陈立强 申请人:广东医学院