专利名称：甘草酸的磷脂/胆盐复合胶束及其制备方法和制剂的制作方法
技术领域：
本发明属于中药制剂及其制备方法技术领域，具体涉及甘草酸的磷脂/胆盐复合胶束及其制备方法和制剂。
背景技术：
天然植物甘草(Glycyrrhiza Uralensis)的根中主要含18_β构型的甘草酸和极少数的18-α构型的甘草酸，甘草酸的化学名为20β_羧基-11-氧代正齐墩果烷-12-烯-3 β基-2-0- β -D-葡萄吡喃糖苷醛酸，结构式如下通过一定的反应，18-β构型的甘草酸可转化为18-α构型的甘草酸，见中国专利公开号CN1381462A。目前，国内外已有一些甘草酸及其盐的制剂上市。国外以甘草酸单铵为主要成分的制剂有复方甘草甜素片，如日本Minophagen药厂研制的“甘思荣片”(Glycyron)和复方甘草甜素注射液(商品名美能)，主要用于慢性肝病及湿疹、皮炎、 荨麻疹等过敏性疾病的治疗。国内产品主要有以甘草酸单钾为原料的甘草素片，以甘草酸单铵复方甘草甜素注射液(商品名强力宁)、甘草酸二胺胶囊和注射液(商品名甘利辛) 等。对慢性肝病的治疗，甘草酸口服制剂的疗效明显不如注射液，副作用也大，主要原因在于甘草酸属于高极性，亲水性大分子物质，在胃肠道内吸收较差所致。磷脂为含有磷酸根的脂类物质的总称，是动植物细胞中细胞膜、核膜和类脂膜的基本成分，在生物体代谢中有着重要的生理功能。磷脂广泛存在于动物的脑髓、内脏、血液、 乳汁、蛋黄及植物的种子中，具有来源广泛、无毒等优点。磷脂具有乳化、分散，助渗、润湿等特性，并对皮肤和粘膜有很强的亲和力，在药剂中用作分散剂、润滑剂、乳化剂、稳定剂、头皮促进剂、前提药物载体等。胆酸盐类胆盐包括天然胆汁、去氧胆酸钠，鹅去氧胆酸钠、苷氨胆酸钠及牛黄胆酸钠等，作为小分子类的肠道吸收促进剂使用时，可明显增加药物在空肠和结肠的透过和吸收。胶束是过量的表面活性剂在水中自组装形成的胶体溶液
发明内容
为了解决上面提到的现有技术所存在的问题，本发明的一个目的是公开了一种甘
草酸的磷脂/胆盐复合胶束。本发明的另一个目的在于公开了甘草酸的磷脂/胆盐复合胶束的制备方法。本发明的第三个目的在于公开了由甘草酸的磷脂/胆盐复合胶束制备的制剂。本发明的技术方案如下一种甘草酸的磷脂/胆盐复合胶束，其中，所述复合胶束包括甘草酸、磷脂和胆盐，其中复合胶束中磷脂与胆盐的摩尔比为1 0.2 2，甘草酸与磷脂的重量比为 1 0. 2 10。上述技术方案中所述的甘草酸的磷脂/胆盐复合胶束，其中，所述复合胶束中磷脂与胆盐的摩尔比为1 0.8 1，甘草酸与磷脂的重量比为1 0.2 5。上述技术方案中所述的甘草酸的磷脂/胆盐复合胶束，其中，所述甘草酸为18-α 构型的甘草酸、18-β构型的甘草酸或18-α构型和18-β构型混合的甘草酸。上述技术方案中所述的甘草酸的磷脂/胆盐复合胶束，其中，所述磷脂为豆磷脂或卵磷脂；胆盐选自天然胆汁、去氧胆酸钠、鹅去氧胆酸钠、甘氨胆酸钠或牛黄胆酸钠中的一种。上述技术方案中所述的甘草酸的磷脂/胆盐复合胶束，其中，所述卵磷脂选自大豆卵磷脂、蛋黄卵磷脂或氢化卵磷脂中的一种。由上述技术方案中任一技术方案所述的甘草酸的磷脂/胆盐复合胶束制备的制剂，其中，所述制剂为口服制剂或注射制剂，所述口服制剂或注射制剂由复合胶束与药学上可接受的载体组成。上述技术方案中所述的甘草酸的磷脂/胆盐复合胶束制备的制剂，其中，所述口服制剂为肠溶胶囊或肠溶片，所述注射制剂为注射液或冻干粉针。上述技术方案中任一技术方案所述的甘草酸的磷脂/胆盐复合胶束的制备方法， 包括下述步骤(1)将磷脂加至有机溶剂制成标准液，在氮气下吹干大部分溶剂，再放入真空干燥箱常温过夜以除去微量的有机溶剂，制成脂膜；(2)将胆盐溶于PH = 6. 5的磷酸盐缓冲液中，制成所需浓度的胆盐溶液(MBS 液)；(3)将脂膜与胆盐溶液(MBS液)在45°C水浴中超声混合45min，即得空白磷脂/ 胆盐胶束溶液；(4)将甘草酸粉末加入到磷脂/胆盐空白胶束中，充氮密封，置恒温磁力搅拌器上，均勻搅拌Mh，得载药胶束，即甘草酸的磷脂/胆盐复合胶束。上述技术方案中所述的甘草酸的磷脂/胆盐复合胶束的制备方法，其中，所述步骤(1)中的有机溶剂选自氯仿、乙醚、乙醇、石油醚或脂肪油中的一种或几种的以任意比例混合的溶剂，标准液的质量浓度为30 70mmol/L ；所述步骤(2)中的MBS液的质量浓度为 5 20mmol/L。上述技术方案中所述的甘草酸的磷脂/胆盐复合胶束的制备方法，其中，其特征在于所述步骤(1)的有机溶剂为石油醚、氯仿、乙醇、乙醚。本发明具有以下有益效果
1、本发明药物甘草酸的磷脂/胆盐胶束不仅能对甘草酸增溶，还能增加其对小肠壁的粘附和透过作用，从而显著提高甘草酸的生物利用度；2、本发明的制备方法通过甘草酸与一定量的磷脂，胆盐在适宜溶剂和条件下形成磷脂/胆盐胶束，使其理化性质改变，从而促进甘草酸的吸收，提高甘草酸的生物利用度， 进而增加疗效，减少不良反应；3、本发明药物的制备方法简便、重现性好，适合工业化生产。
1、图1为三种药物甘草酸原料药、甘草酸的磷脂/胆盐复合胶束及对照药甘思荣片在空肠段的吸收曲线比较。
具体实施例方式为使本发明的技术方案便于理解，以下结合具体实施例对本发明作进一步的说明。实施例1 甘草酸的磷脂/胆盐复合胶束的制备(1)将豆磷脂16. 67g加入IOOml石油醚中制成标准液，在氮气下吹干大部分溶剂， 再放入真空干燥箱常温过夜以除去微量的有机溶剂，制成脂膜；(2)将牛黄胆酸钠2g溶于200ml的PBS缓冲液(pH = 6. 5的磷酸盐缓冲液)中， 制成所需MBS液；(3)将脂膜与MBS液在45°C水浴中超声混合45min，即得空白磷脂/胆盐胶束溶液；(4)将5g甘草酸粉末加入到磷脂/胆盐空白胶束中，充氮密封，置恒温磁力搅拌器上，均勻搅拌Mh，得载药胶束，即甘草酸的磷脂/胆盐复合胶束；实施例2 甘草酸的磷脂/胆盐复合胶束的制备(1)将豆磷脂16. 67g加入80ml氯仿中中制成标准液，在氮气下吹干大部分溶剂， 再放入真空干燥箱常温过夜以除去微量的有机溶剂，制成脂膜。(2)将去氧胆酸钠2g溶于200ml的PBS缓冲液(pH = 6. 5的磷酸盐缓冲液)中， 制成所需MBS液。(3)将脂膜与MBS液在45°C水浴中超声混合45min，即得空白磷脂/胆盐胶束溶液。 (4)将5g甘草酸粉末加入到磷脂/胆盐空白胶束中，充氮密封，置恒温磁力搅拌器上，均勻搅拌Mh，得载药胶束，即甘草酸的磷脂/胆盐复合胶束。实施例3 甘草酸的磷脂/胆盐复合胶束的制备(1)将豆磷脂16. 67g加入90ml乙醚中制成标准液，在氮气下吹干大部分溶剂，再放入真空干燥箱常温过夜以除去微量的有机溶剂，制成脂膜。(2)将鹅去氧胆酸钠2g溶于200ml的PBS缓冲液(pH = 6. 5的磷酸盐缓冲液) 中，制成所需MBS液。(3)将脂膜与MBS液在45°C水浴中超声混合45min，即得空白磷脂/胆盐胶束溶液。
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(4)将5g甘草酸粉末加入到磷脂/胆盐空白胶束中，充氮密封，置恒温磁力搅拌器上，均勻搅拌Mh，得载药胶束，即甘草酸的磷脂/胆盐复合胶束。实施例4:甘草酸的磷脂/胆盐复合胶束的制备(1)将卵磷脂16. 67g加入IOOml乙醇中制成标准液，在氮气下吹干大部分溶剂，再放入真空干燥箱常温过夜以除去微量的有机溶剂，制成脂膜；(2)将牛黄胆酸钠2g溶于200ml的PBS缓冲液(pH = 6. 5的磷酸盐缓冲液)中， 制成所需MBS液；(3)将脂膜与MBS液在45°C水浴中超声混合45min，即得空白磷脂/胆盐胶束溶液； (4)将5g甘草酸粉末加入到磷脂/胆盐空白胶束中，充氮密封，置恒温磁力搅拌器上，均勻搅拌Mh，得载药胶束，即甘草酸的磷脂/胆盐复合胶束；实施例5 甘草酸的磷脂/胆盐复合胶束的制备(1)将卵磷脂16. 67g加入80ml氯仿中中制成标准液，在氮气下吹干大部分溶剂， 再放入真空干燥箱常温过夜以除去微量的有机溶剂，制成脂膜。(2)将去氧胆酸钠2g溶于200ml的PBS缓冲液(pH = 6. 5的磷酸盐缓冲液)中， 制成所需MBS液。(3)将脂膜与MBS液在45°C水浴中超声混合45min，即得空白磷脂/胆盐胶束溶液。(4)将5g甘草酸粉末加入到磷脂/胆盐空白胶束中，充氮密封，置恒温磁力搅拌器上，均勻搅拌Mh，得载药胶束，即甘草酸的磷脂/胆盐复合胶束。实施例6:甘草酸的磷脂/胆盐复合胶束的制备(1)将卵磷脂16. 67g加入90ml乙醚中制成标准液，在氮气下吹干大部分溶剂，再放入真空干燥箱常温过夜以除去微量的有机溶剂，制成脂膜。(2)将鹅去氧胆酸钠2g溶于200ml的PBS缓冲液(pH = 6. 5的磷酸盐缓冲液) 中，制成所需MBS液。(3)将脂膜与MBS液在45°C水浴中超声混合45min，即得空白磷脂/胆盐胶束溶液。 (4)将5g甘草酸粉末加入到磷脂/胆盐空白胶束中，充氮密封，置恒温磁力搅拌器上，均勻搅拌Mh，得载药胶束，即甘草酸的磷脂/胆盐复合胶束。实施例7 甘草酸的磷脂/胆盐复合胶束冻干粉的制备将实施例1 6制备的甘草酸的磷脂/胆盐复合胶束，即成品胶束于冷冻干燥机中干燥48h，即得甘草酸的磷脂/胆盐胶束冻干粉。实施例8:甘草酸的磷脂/胆盐复合胶束的肠溶胶囊的制备
组分1000粒
甘草酸的磷脂/胆盐胶束冻干粉150g
微晶纤维素45g
泊洛沙姆5g
取过80目筛的实施例7制备所得的甘草酸的磷脂/胆盐胶束冻干粉150g，加入微晶纤维素45g和伯洛沙姆5g，置混勻机混合30min后，测量中间体含量，灌装于肠溶胶囊壳中，铝塑压模，包装。每粒含甘草酸的磷脂/胆盐胶束冻干粉150mg。实施例9:甘草酸的磷脂/胆盐复合胶束的肠溶片
组分1000片
甘草酸的磷脂/胆盐胶束冻干粉150g
微晶纤维素45g
硬脂酸镁5g取过80目筛的实施例7制备所得的甘草酸的磷脂/胆盐胶束冻干粉150g，加入微晶纤维素45g和硬脂酸镁5g，置混勻机混合30min后，测量中间体含量，压片，包肠溶衣，铝塑压模，包装。每粒含甘草酸的磷脂/胆盐胶束冻干粉150mg。实施例10 甘草酸的磷脂/胆盐复合胶束注射液
组分IOOOml
甘草酸的磷脂/胆盐胶束冻干粉15g
氯化钠8. 5g
氢氧化钠适量
注射用水加至IOOOml取过80目筛的实施例7制备所得的甘草酸的磷脂/胆盐胶束冻干粉15g及8. 5g 氯化钠，加至500ml的新鲜注射用水中，搅拌使溶解。加注射用水至900ml，搅勻，加热至 80°C左右，加入针用活性炭，搅拌，保温吸附30min。脱碳，补水至1000ml，搅勻，含量测定， 并用适量氢氧化钠调PH值在6. 0 8. 0之间，经0. 22um微孔滤膜过滤至澄明，灌装，封口， 115°C灭菌30min，即得。每支10ml，含甘草酸的磷脂/胆盐胶束冻干粉150mg。实施例11 甘草酸的磷脂/胆盐复合胶束冻干粉针
组分100瓶
甘草酸的磷脂/胆盐胶束溶液50ml
甘露醇IOg
注射用水加至300ml取甘草酸的磷脂/胆盐胶束溶液50ml，加入甘露醇IOg搅拌溶解，调节pH值至 7. 0，加入针用碳0. 3g，加热至80°C并保温30min，冷至45°C时脱碳，加注射用水至全量，测定中间体含量，精滤，灌装于西林瓶中，每瓶3ml，塞孔，放入冻干机中按冻干曲线冷冻干燥， 即得。以下通过本发明制备的产物甘草酸的磷脂/胆盐复合胶束的药代动力学、肠吸收及药效学试验来进一步阐述本发明产物甘草酸的磷脂/胆盐复合胶束所具有的有益效果试验例一、甘草酸原料药,甘草酸的磷脂/胆盐复合胶束及对照药的生物利用度研究1、材料和方法药物甘草酸原料药、甘草酸的磷脂/胆盐复合胶束是通过本发明的实施例进行制备、甘思荣片(Minophagen药厂)配制方法三种物质用蒸馏水配制成每ml含甘草酸/甘草酸单胺20. 25mg的溶液。动物=Wistar大鼠，市场购买。雄性大鼠200g士5g，每组大鼠6只，试验前动物禁食12h，试验期间所有动物自由饮水。试验步骤(1)药品与试剂乙酸铵为分析纯；无水甲醇为色谱纯；肝素钠注射液；甘草次酸标准品。(2)方法取Wistar大鼠18只，随即分为3组，每组6只。一组大鼠用甘草酸ig， 给药量ani/ioog ；—组用甘草酸的磷脂/胆盐复合胶束溶液ig，给药量ani/ioog ；另一组用对照药 ig,给药量 2ml/100g。给药后 10min、20min、30min、lh、l. 5h、2h、3h、4h、6h、8h、 10h、12h、24h眼眶取血于肝素钠润湿的离心管中，分离血浆，_20°C贮存，待测。(3)样品处理血浆样品200ul，精密加入400ul无水甲醇，涡旋均勻，8000r/min 离心lOmin，移取上清液，氮气吹干后，用无水甲醇复溶，进样20ul作HPLC分析。(4)测定方法采用高效液相色谱法测定。A、色谱条件色谱仪Agilent1200 ；色谱柱Agilent，4. 5X250mm,5ym ；流动相甲醇0. 2%乙酸铵=65 35 ；流速1. 0ml/min ；柱温30°C；检测波长2Mnm。B、标准曲线制备取大鼠空白血浆200ul，分别加入甘草次酸标准品溶液使其浓度分别为0.5、1、2、 4、6、8、10、20mg/L，按“样品处理”项下操作，以甘草次酸的峰面积为变量(X)，甘草次酸浓度为应变量(Y)，作线性回归，回归方程为Υ = 0. 063X+10. 93 (r = 0. 9997)本法测定的线性范围为0. 5 20mg/L。2、实验结果三组大鼠分别口服甘草酸原料药、甘草酸的磷脂/胆盐复合胶束、甘思荣片后，平均血药浓度见表1 ；数据经DAS软件选择模型，结果符合二室模型；主要药物动力学参数计算结果见表2。表1大鼠口服药物后的平均血药浓度(n = 6 x±s, mg/L)
权利要求
1.一种甘草酸的磷脂/胆盐复合胶束，其特征在于所述复合胶束包括甘草酸、磷脂和胆盐，其中复合胶束中磷脂与胆盐的摩尔比为1 0.2 2，甘草酸与磷脂的重量比为 1 0. 2 10。
2.根据权利要求1所述的甘草酸的磷脂/胆盐复合胶束，其特征在于所述复合胶束中磷脂与胆盐的摩尔比为1 0.8 1，甘草酸与磷脂的重量比为1 0.2 5。
3.根据权利要求1或2所述的甘草酸的磷脂/胆盐复合胶束，其特征在于所述甘草酸为18-α构型的甘草酸、18-β构型的甘草酸或18-α构型和18_β构型混合的甘草酸。
4.根据权利要求1或2所述的甘草酸的磷脂/胆盐复合胶束，其特征在于所述磷脂为豆磷脂或卵磷脂；胆盐选自天然胆汁、去氧胆酸钠、鹅去氧胆酸钠、甘氨胆酸钠或牛黄胆酸钠中的一种。
5.根据权利要求4所述的甘草酸的磷脂/胆盐复合胶束，其特征在于所述卵磷脂选自大豆卵磷脂、蛋黄卵磷脂或氢化卵磷脂中的一种。
6.由权利要求1 5中任一权利要求所述的甘草酸的磷脂/胆盐复合胶束制备的制剂，其特征在于所述制剂为口服制剂或注射制剂，所述口服制剂或注射制剂由复合胶束与药学上可接受的载体组成。
7.根据权利要求6所述的甘草酸的磷脂/胆盐复合胶束制备的制剂，其特征在于所述口服制剂为肠溶胶囊或肠溶片，所述注射制剂为注射液或冻干粉针。
8.权利要求1 5中任一权利要求所述的甘草酸的磷脂/胆盐复合胶束的制备方法， 包括下述步骤(1)将磷脂加至有机溶剂制成标准液，在氮气下吹干大部分溶剂，再放入真空干燥箱常温过夜以除去微量的有机溶剂，制成脂膜；(2)将胆盐溶于pH= 6. 5的磷酸盐缓冲液中，制成所需浓度的胆盐溶液；(3)将脂膜与胆盐溶液在45°C水浴中超声混合45min，即得空白磷脂/胆盐胶束溶液；(4)将甘草酸粉末加入到磷脂/胆盐空白胶束中，充氮密封，置恒温磁力搅拌器上，均勻搅拌Mh，得载药胶束，即甘草酸的磷脂/胆盐复合胶束。
9.根据权利要求8所述的甘草酸的磷脂/胆盐复合胶束的制备方法，其特征在于所述步骤(1)中的有机溶剂选自石油醚、氯仿、乙醚、乙醇或脂肪油中的一种或几种的以任意比例混合的溶剂，标准液的质量浓度为30 70mmol/L ；所述步骤( 中的MBS液的质量浓度为 5 20mmol/L。
10.根据权利要求8或9所述的甘草酸的磷脂/胆盐复合胶束的制备方法，其特征在于所述步骤(1)的有机溶剂为石油醚、氯仿、乙醚、乙醇。
全文摘要
本发明甘草酸的磷脂/胆盐复合胶束及其制备方法和制剂，属于中药制剂及其制备方法技术领域。所述复合胶束包括甘草酸、磷脂和胆盐，将磷脂制成脂膜，胆盐制成胆盐溶液后，将两者混合，再将甘草酸粉末加到磷脂/胆盐空白胶束中获得；其中复合胶束中磷脂与胆盐的摩尔比为1∶0.2～2，甘草酸与磷脂的重量比为1∶0.2～10。本发明药物不仅能对甘草酸增溶，还能增加其对小肠壁的粘附和透过作用，从而显著提高甘草酸的生物利用度；制备方法简便、重现性好，适合工业化生产的优点；本发明的制备方法具有改变甘草酸理化性质，从而促进甘草酸的吸收，提高甘草酸的生物利用度，进而增加疗效，减少不良反应的优点。
文档编号A61K47/12GK102266347SQ201110158580
公开日2011年12月7日 申请日期2011年6月14日 优先权日2011年6月14日
发明者付珊珊, 吕俊兰, 李仙义, 袁海龙, 靳士晓, 韩晋 申请人:中国人民解放军第三○二医院