专利名称：含环孢菌素的软胶囊组合物的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种含有稳定的微滴乳状浓缩液的软胶囊组合物，这种浓缩物更稳定，适于制备含有环孢菌素的软胶囊。更具体地说，本发明涉及一种微滴乳状浓缩液，它含有环孢菌素作为活性成份，二甲基1，4∶3，6-二脱水山梨醇作为辅助表面活性剂，选自脂肪酸和一级醇酯化所形成的化合物、中等链长的脂肪酸三酸甘油酯和单酸甘油酯的一种组份、或者两种或多种所形成的混合物作为油性组份，以及一种HLB值(亲水-亲油平衡)为10至17的表面活性剂诸如NIKKOL HCO-50或者TWEEN20，这种浓缩物适宜于配制成软胶囊，还涉及含有所说的微滴乳状浓缩液的软胶囊组合物。
环孢菌素是一种特别的、含有11个氨基酸的大分子(分子量1202.64)环状多肽化合物，它具有广谱有用的药理活性，特别是免疫抑制活性和抗炎活性。这样，环孢菌素已被用于活体固有免疫应答的抑制，后者是由器官移植而引起的，例如，心脏、肺、肝脏、肾脏、胰腺、骨髓、皮肤和角膜等，特别是外来组织和器官的移植。此外，环孢菌素可用于抑制血液疾病诸如贫血症，各种自体免疫疾病诸如全身红斑狼疮，自发性吸收障碍综合症等，以及炎性疾病诸如关节炎、类风湿疾病等。环孢菌素也可用来治疗原虫疾病诸如疟疾，血吸虫病等，进一步，近来它还部分地用于化疗中环孢菌素是高度亲脂而憎水的，它25℃在水中的溶解度为每升水可溶16至23毫克。另一方面，由于它的高度亲脂性，环孢菌素可很好地溶于有机溶剂诸如甲醇、乙醇、丙酮、乙醚、氯仿等溶剂中。具有上述性质的环孢菌素的低的水溶解度，使得在口服环孢菌素时只有较低的生物利用率，并且可能因每个患者的条件而受到很大影响。按此，它很难保持有效的治疗浓度。还有，环孢菌素会出现明显的副作用诸如肾毒性。所以，由于它的低的水溶性，环孢菌素很难配制成供口服的制剂。于是，广泛进行了许多研究来寻找适宜于环孢菌素有效口服的制剂，它应能提供适宜的均一剂量以及合适的生物利用率。
在先有技术中，适宜于微溶于水的环孢菌素口服的制剂一般是通过把环孢菌素与表面活性剂、油以及辅助表面活性剂结合在一起配制成微滴乳状液的形式。
利用这种结合的一个典型方法出现在1983年6月14日发布的美国专利NO.4,388,307中，这一专利公开了一种用乙醇作为辅助表面活性剂的环孢菌素的液体制剂。按照这个美国专利说明书所公开的方法，环孢菌素是和一种载体结合在一起来形成这种液体制剂的，载体中含有乙醇作为辅助表面活性剂，橄榄油作为植物油组份，一种天然植物油三酸甘油酯和聚亚烷基二醇的酯交换反应产物作为表面活性剂。但是，这样得到的液体制备是以经过稀释的水溶液来给药的。这就使它很难适应该制剂的给药方法并提供均一的口服剂量。
为了减少在口服前稀释这种环孢菌素液体组合物到水中的不便，已将液体组合物以微滴乳状浓缩液的形式配制成软胶囊制剂，它现在已成为商品，注册商标为SamdimmumR。在这种制剂中，由于环孢菌素在溶解度方面的需要，环孢菌素软胶囊含有大量乙醇作为辅助表面活性剂。但是，因为即使在通常温度下，具有低沸点的乙醇也能渗透过胶囊的明胶薄膜而挥发，结果乙醇的含量将不断降低，使储存期间软胶囊中的构成比率也不断改变。降低的乙醇含量会导致环孢菌素结晶折出从而使环孢菌素的生物利用率出现明显差别。这样就难于决定能提供合适的治疗效果所需的环孢菌素的剂量。
为防止在储存和分发期间乙醇从软胶囊制剂中挥发，可把软胶囊制剂包在一种特别的包装材料中，诸如一种铝薄膜泡膜包装物。然而，这种特别的包装不能完全保持被包装的胶囊具有均一的组成。通过实验已经证实，虽然环孢菌素软胶囊可被包装在铝薄膜包装物中，但一周后乙醇的含量仍从最初的10.8％降低到7.9％。这将导致环孢菌素在生物利用率方面很大的差别并可能使价格增加。
为解决上述伴随着使用乙醇作为辅助表面活性剂而带来的缺点，提出了用一种不是乙醇的组份来作为辅助表面活性剂的方法。例如，英国公开专利说明书NO.2,228,198(1990年2月16日)公开了一种增加环孢菌素制剂稳定性和生物利用率的方法，其中含有饱和脂肪酸的植物油三酸甘油酯诸如辛酸/癸酸三酸甘油酯[注册商标MIGLYOL 812]或亚油酸单酸甘油酯[注册商标MYVEROL18-92]作为油组份，以及一种HLB(亲水—亲油平衡)值为10或更高的表面活性剂，特别是蓖麻油和环氧乙烷的反应产物[注册商标CREMOPHOR RH40]。此外，韩国公开专利说明书NO.90—4348(1990年4月12日)公开了一种含有非乙醇组分作为辅助表面活性剂的微滴乳状浓缩液形式的药物组合物，这种非乙醇组份是选自药学上可接受的低分子量一氧基或多氧基烷二醇的C1-5烷基醚或四氢呋喃基二醚或部分醚化物，例如，二乙二醇单乙醚[注册商标TRANSCUTOL]或四氢呋喃甲醇聚乙二醇[注册商标GLYCO-FUROL]和1，2-丙二醇；一种中等链长的脂肪酸三酸甘油酯，特别是辛酸/癸酸三酸甘油酯[注册商标MIGLYOL812]作为油性组份；以及蓖麻油和环氧乙烷的反应产物[注册商标CREMOPHORRH40]作为表面活性剂。这样的软胶囊配方比起原有的商品环孢菌素制剂在生物利用率方面有了某种程度的增加。然而，上述非乙醇辅助表面活性剂是二醇类，在它们的结构中含有-OH基因。现在已经肯定含有-OH基团的二醇类在软胶囊的配方中引起了一些问题，因为它的强吸收性质足以吸收大气中湿气，也因为它对于软胶囊的明胶薄膜是高度渗透性的。
在这样的条件下，本发明人研究了一些添加剂，包括各种溶剂，以努力寻找一种辅助表面活性剂，它能够提供适宜于把环孢菌素配制成软胶囊制剂的微滴乳状浓缩液。结果，为此目的已经找到一些药学上可接受的溶剂，即二甲基1，43，6-二脱水山梨醇[注册商标Arlasolve RDMI，可由ICI Specislity Chemicals公司购得]作为合适的溶剂。这样，含有二甲基1，4∶3，6-二脱水山梨醇作为辅助表面活性剂的环孢菌素制剂是别的未决专利申请的主题[1994年6月20日申请的韩国专利申请NO,94—13945]。在这个专利申请中，本发明人公开了一种含有与一种载体结合的环孢菌素的微滴乳状浓缩液，载体中含有二甲基1，4∶3，6-二脱水山梨醇作为辅助表面活性剂，精炼的鱼油作为油性组份，以及一种适合于配制成口服软胶囊的表面活性剂，和含有这样的微滴乳状浓缩液的软胶囊组合物。因为在这一配方中用作辅助表面活性剂的二甲基1，4∶3，6-二脱水山梨醇具有很高的沸点，234℃，所以即使在为制造软胶囊所必需的那种高温下也不会挥发。此外，二甲基1，4∶3，6-二脱水山梨醇不含任何羟基，-OH，因此它的吸湿性很低，也不会渗透明胶薄膜，但能很好地溶解环孢菌素。精炼过的鱼油由于它含有高度不饱和的脂肪酸诸如EPA(二十碳五烯酸)和DHA(二十二碳六烯酸)，从而很理想地适合于吸收环孢菌素。这样，含有这种微滴乳状浓缩液的软明胶胶囊组合物在口服时仍能使环孢菌素在血液中的浓度水平与先有技术中含乙醇的软胶囊制剂差不多，并且经长时期储存后能够稳定地保持不变。这样，在环孢菌素软胶囊制剂的领域该发明提供了有意义的改进。
然而，近来已有要求来发展一种在储存期间具有稳定性，而且进一步在个别制品之间的生物利用率和它的可变因素都基本上没有差别的环孢菌素制剂。为这一目的开发出来的一种这样的制剂已在韩国公开专利申请NO,93—113中被公开。可是，由于这一制剂是用乙醇作为辅助表面活性剂，它具有某些先有技术中含乙醇制剂的缺点，比如储存稳定性差、乙醇含量改变引起环孢菌素沉淀并且降低了环孢菌素的生物利用率等。
按此，本发明人研究了不同的表面活性剂和油性组份的多种组合，以求找到一种环孢菌素制剂，它即是稳定的，也能提供从它们的药物动力学观点来看比先有技术中的环孢菌素制剂具有更高的生物利用率和个别制品在血液中药物水平方面更小的差别。结果，我们已经确定包含下面所说组份的一些环孢菌素组合物能够满足上述要求，从而完成了本发明。
因此，本发明的一个目的是提供一种含有环孢菌素的微滴乳状浓缩液，它用二甲基1，4∶3，6-二脱水山梨醇作为辅助表面活性剂，并且含有下面将要具体说明的一种油性组份和表面活性剂，它适合于配制成供口服的软胶囊。
本发明的另一个目的是提供一种适合于配制成软胶囊的微滴乳状浓缩液，它含有环孢菌素作为活性成份，二甲基1，4∶3，6-二脱水山梨醇作为辅助表面活性剂，选自脂肪酸和一级醇酯化所形成的化合物、中等链长的脂肪酸三酸甘油酯和单酸甘油酯的一种组份、或者两种或多种所组份形成的混合物作为油性组份，和HLB(亲水-亲油平衡)值为10至17的表面活性剂。
进一步，本发明的另一个目的是提供一种按照本发明的软明胶胶囊组合物，它有高度的储存稳定性，在长时间储存后组成几乎没有变化，并且生物利用率提高。
以上概述了本发明的一些比较重要的目的。这些目的应被理解为仅仅是本发明的某些较重要的特征和应用的说明。通过在本专利公开范围内以不同的方式使用公开说明或修饰本发明可能会得到许多其它的好处。按此，通过参考本发明的公开说明和附图，可能除了在权利要求中确定的本发明的范围以外，还会认识到别的目的并有更透彻的理解。
为了彻底理解本发明的性质和目的，应当连系所附的图来参看下面详尽的描述，在图中
图1是显示按照本发明制成的环孢菌素软胶囊的生物利用度(-○-)与商品SANDIMMUNR软胶囊(-●-)生物利用率的比较；图2是显示由商品SANDIMMUNR形成的乳状液的颗粒大小分布图。
图3是显示按照本发明的实例1—2配成的组合物所形成的乳状液的颗粒大小分布图。
一方面，本发明是有关于一种微滴乳状浓缩液，它含有环孢菌素作为活性成份，二甲基1，4∶3，6-二脱水山梨醇作为辅助表面活性剂，还含有下面将具体说明的油性组份和表面活性剂，它适宜于配制成供口服的软胶囊。
更具体地说，本发明是有关于一种适合于配制成软胶囊的微滴乳状浓缩液，它含有环孢菌素作为活性成份，二甲基1，4∶3，6-二脱水山梨醇作为辅助表面活性剂，选自脂肪酸和一级醇酯化所形成的化合物、中等链长的脂肪酸三酸甘油酯和单酸甘油酯的一种组份、或者两种或多种组份所形成的混合物作为油性组份，HLB值(亲水—亲油平衡)为10至17的表面活性剂。
在按照本发明的微滴乳状浓缩液中用作活性成份的环孢菌素，是一种具有如上所述的有用免疫抑制活性和抗炎活性的环状多肽化合物。虽然环孢菌素A、B、C、D、G等都可用作本发明中的环孢菌素组份，但环孢菌素A是最优选的，因为它的临床效果和药理性质在本领域中已被很好地确认。
作为本发明的微滴乳状浓缩液中的第二个主要组份的辅助表面活性剂，使用了二甲基1，4∶3，6-二脱水山梨醇[注册商标AR-LASOLVERDMI，ICI Speciality Chemicals]，它是不挥发的，不会渗透穿过软胶囊的明胶薄膜，具有低的吸湿性，并且是一种对环孢菌素有很高溶解度的溶剂。
在本发明中，在微滴乳状浓缩液中使用二甲1，4∶3，6-二脱水山梨醇作为辅助表面活性剂提供了一些优点。这包括，当把微滴乳状浓缩液配制成软胶囊时，在储存期间的稳定性得到改进，使在其中所包含的组份的含量基本上保持均一，从而保证了比基于乙醇的组合物在更长的时期内组合物含量的均一性。
在本发明的微滴乳状浓缩液中，二甲基1，4∶3，6-二脱水山梨醇的用量基于每份环孢菌素的重量计算，优选值按重量计是1至5份，更优选的是按重量计3至4份，最优选的是按重量计3.6份。
用于按照本发明的微滴乳状浓缩液中的第三个组份是一种油。作为本发明的油性组份，可使用选自酯肪酸和一级醇酯化所形成的化合物、中等链长的脂肪酸三酸甘油酯和单酸甘油酯的一种组份、或者两种或多种组份所形成的混合物。可用于本发明的脂肪酸与一级醇酯化所形成的化合物，可包括具有8至20个碳原子的酯肪酸与具有2至3个碳原子的一级醇所形成的酯类化合物，例如肉豆蔻酸异丙脂、软脂酸异丙脂、亚油酸乙脂、油酸乙酯等，最好是用亚油酸与乙醇酯化所形成的酯化化合物[注册商标NIKKOL VF—E，日本NiKKo化学有限公司产品]。此外，作为中等链长的脂肪酸三酸甘油酯可用含有8至10个碳原子的饱和脂肪酸的三酸甘油酯，最好是用辛酸/癸酸三酸甘油酯[注册商标MIGLYOL812]，它是饱和脂肪酸的一种植物油三酸甘油脂。在本发明中用作油性组份的优选使用的脂肪酸单酸甘油酯包括含有18至20个碳原子的脂肪酸的单酸甘油酯，特别是油酸的单酸甘油酯[注册商标MONOMULS90—018，Hemkel]。
在本发明中，虽然可以简单地使用上面示例的油性组份中的一种组份，但最好还是选用由其中的至少两种、特别是两三种脂肪酸酯类化合物所形成的混合物来作为油性组份。在按照本发明的微滴乳状浓缩液中，每份重量的环孢菌素需用的油性组份的比率按重量计为1至5份，最好是按重量计1.5至3份。尤其优选的比率是1份重量环孢菌素用2.6份重量的油性组份。当在按照本发明的组合物中使用上述油性组份的混合物时，脂肪酸与一级醇的酯化合物中等链长的脂肪酸三酸甘油酯脂肪酸单酸甘油酯的混合比率按重量计应在1∶0.1—1.0∶0—1.0范围内，优选值是1∶0.12—0.50∶0—0.50范围内，特别优选的值为1∶0.25∶0.375。此外，在这种油类混合物中脂肪酸的构成比率，即辛酸∶癸酸∶软脂酸∶油酸∶亚油酸∶蓖麻酸，最好是在3—7∶3—7∶5—8∶15—25∶40—50∶3—10范围内。
用于按照本发明的微滴乳状浓缩液中的第四种必要组份是一种表面活性剂。用于本发明的合适的表面活性剂包括任何一种药学上可接受的、HLB值(亲水—亲油平衡)为10至17的表面活性剂，它能够稳定地乳化包括含环孢菌素的油性组份的组合物的亲油部分和包括水中的辅助表面活性剂的亲水部分，从而形成稳定的微滴乳状液。优选的用于按照本发明中的表面活性剂的实例包括氢化植物油的聚氧乙烯产物、聚氧乙烯—脱水山梨醇-脂肪酸脂等，例如NIKKOL HCO-50、NIKKOL HCO-40、NIKKOL HCO-60、TWEEN20、TWEEN21、TWEEN 40、TWEEN60、TWEEN80、TWEEN81等。尤其是聚氧乙烯(50)氢化蓖麻油，它已经商品化，注册商标为NIKKOL HCO-50(NIKKO化学有限公司产品)，其酸值低于1，皂化值约为48—56，羟基值约为45—55，PH值(5％)为4.5—7.0；以及一种聚氧乙烯(20)脱水山梨醇单月桂酸酯，它也已商品化，其注册商标为TWEEN20(ICI化学公司)。
表面活性剂可以只单独使用上述表面活性剂当中的任何一种，但最好是结合使用上述表面活性剂中的两种或多种表面活性剂。在按照本发明的微滴乳状浓缩液中，每份按重量计的环孢菌素所使用的表面活性剂的比率按重要计应为3至6份，优选的比率是按重量计4至6份，特别优选的值是按重量计5.5份。此外，当在本发明的微滴乳状浓缩液中使用两种表面活性剂的混合物时，例如用聚氧乙烯(50)氢化蓖麻油和聚氧乙烯(20)脱水山梨醇单月桂酸酯的混合物时，用聚氧乙烯(50)氢化蓖麻油∶聚氧乙烯(20)脱水山梨醇单月桂酸酯的构成比率应在1∶0.5—2的范围内，更好是在1∶0.7—1.5范围内，最好是在1∶1.0范围内。
在按照本发明的微滴乳状浓缩液中，4种必要组份存在的比率按重量计的优选值为，环孢菌素∶辅助表面活性剂∶油性组份∶表面活性剂＝1∶1—5∶1—5∶3—6，更优选的比率为环孢菌素∶辅助表面活性剂∶油性组份∶表面活性剂＝1∶3—4∶1.5—3∶4—6。最优选的含有环孢菌素、二甲基1，4∶3，6-二脱水山梨醇、油性组份和表面活性剂的按照本发明的微滴乳状浓缩液中所用4种组份的比率按重量计为1∶3.6∶2.6∶5.5。除这些组份以外，在下面的实例中说明的组合物中还会叙述按照本发明的更进一步优选的组成。
为供口服，按照本发明的具有上述组成的微滴乳状浓缩液可被配制成软胶囊的形式。在配制软胶囊时，如果需要，除上述微滴乳状浓缩液以外，胶囊制剂还可进一步含有通常用于制备软胶囊的药学上可接受的辅佐剂、赋形剂和添加剂。这类添加剂包括，例如卵磷酯、粘度调节剂、香料(例如薄荷油等)、抗氧剂(例如生育酚等)、防腐剂(例如对羟基苯甲酸等)、着色剂、甘油、山梨醇、明胶等。
按照本发明的软胶囊制剂可按通常制备软胶囊的方法来制备。例如，首先温和加热到大约60℃使环孢菌素溶解于二甲基1，4∶3.6-二脱水山梨醇中，然后往得到的混合物中加入油性组份和表面活性剂，再把整个混合物均匀地混合。得到的微滴乳状浓缩液在有或没有上述通常用于制备软胶囊的药学上可接受的添加剂存在的条件下，被引入制备软胶囊的机器中以制得所需的合适的环孢菌素软胶囊。
本发明可用下面的实例作更具体的说明。但是，应该了解，本发明不会以任何方式被这些实例所限制。
实例11-1.组分含量(毫克/胶囊)环孢菌素 25二甲基1，4∶3，(ArlasolveRDMI)906-二脱水山梨醇TWEEN 20 42NIKKOL HCO-50 68NIKKOL VF-E 40MIGLYOL 812 10MONOMULS 90-01815总计290mg1-2 组分 含量(毫克/胶囊)环孢菌素 25二甲基-1，4∶3，(ArlasolveRDMI) 906-二脱水山梨醇TWEEN 20 70NIKKOL HCO-50 68NIKKOL VF-E 40MIGLYOL 812 10MONOMULS 90-018 15总计318mg1-3. 组分 含量(毫克/胶囊)环孢菌素 25二甲基-1，4:3，(ArlasolveRDMI) 906-脱水山梨醇TWEEN 20 42NIKKOL HCO-50 68NIKKOL VF-E 40MIGLYOL 812 10总计275mg1-4. 组分 含量(毫克/胶囊)环孢菌素 25二甲基-1，4∶3，(ArlasolveRDMI) 906-二脱水山梨醇TWEEN 20 42NIKKOL HC0-50 68NIKKOL VF-E 40总计265mg1-5. 组分 含量(毫克/胶囊)环孢菌素 25二甲基1，4:3，(ArlasolveRDMI) 906-二脱水山梨醇NIKKOL HCO-50 68NIKKOL VF-E 40
总计223mg实例22-1.组分 含量(毫克/胶囊)环孢菌素25二甲基1，4∶3，(ArlasolveRDMI)256-二脱水山梨醇TWEEN 2042NIKKOL HCO-50 68NIKKOL VF-E 40MIGLYOL 812 10MONOMULS 90-018 15总计225mg2-2. 组分 含量(毫克/胶囊)环孢菌素 25二甲基1，4∶3(ArlasolveRDMI)506-二脱水山梨醇TWEEN 20 42NIKKOL HCO-50 68NIKKOL VF-E 40MIGLYOL 812 10Monomuls 90-018 15总计250mg2-3. 组分含量(毫克/胶囊)环孢菌素 25二甲基1，4∶3，(ArlasplveRDMI) 1006-二脱水山梨醇TWEEN 20 42NIKKOL HCO-50 68NIKKOL VF-E 40MIGLYOL 812 10MONOMULS 90-018 15总计300mg2-4. 组分 含量(毫克/胶囊)环孢菌素25二甲基1，4∶3，(ArlasolveRDMI)1206-二脱水山梨醇TWEEN 20 42NIKKOL HCO-5068NIKKOL VF-E 40MIGLYOL 812 10MONOMULS 90-018 15总计320mg实例33-1.组分 含量(毫克/胶囊)环孢菌素 25二甲基1，4:3，(ArlasolveRDMI) 906-二脱水山梨醇TWEEN 20 40NIKKOL HCO-5040NIKKOL VF-E 40MIGLYOL 812 10MONOMULS 90-018 15总计260mmg3-2.组分 含量(毫克/胶囊)环孢菌素 25二甲基1，4∶3，(ArlasolveRDMI) 906-二脱水山梨醇TWEEN 20 30NIKKOL HC0-5060NIKKOL VF-E 40MIGLYOL 812 10MONOMULS 90-018 15总计270mmg3-3.组分 含量(毫克/胶囊)环孢菌素 25二甲基1，4∶3，(ArlasolveRDMI) 906-二脱水山梨醇TWEEN 20 40NIKKOL HCO-50 80NIKKOL VF-E 40MIGLYOL 812 10MONOMULS 90-018 15总计300mg实例44-1. 组分 含量(毫克/胶囊)环孢菌素25二甲基1，4∶3， (ArlasolveRDMI) 906-二脱水山梨醇TWEEN 2042NIKKOL HCO-50 68NIKKOL VF-E 30MIGLYOL 812 5MONOMULS 90-018 5总计265mg4-2. 组分 含量(毫克/胶囊)环孢菌素 25二甲基1，4∶3，(ArlasolveRDMI) 906-二脱水山梨醇TWEEN 20 42NIKKOL HCO-50 68NIKKOL VF-E40MIGLYOL 81210MONOMULS 90-01810总计285mg4-3. 组分 含量(毫克/胶囊)环孢菌素25二甲基1，4∶3，(ArlasolveRDMI)906-二脱水山梨醇TWEEN 2042NIKKOL HCO-50 68NIKKOL VF-E 40MIGLYOL 812 10MONOMULS 90-018 20总计295mg4-4. 组分 含量(毫克/胶囊)环孢菌素25二甲基1，4∶3，6-二(ArlasolveRDMI)90脱水山梨醇TWEEN 2042NIKKOL HCO-50 68NIKKOL VF-E 40MIGLYOL 812 20MONOMULS 90-018 10总计295mg实例55-1. 组份 含量(毫克/胶囊)环包菌素25二甲基1，4∶3，6-二(ArlasolveRDMI)90脱水山梨醇TWEEN 4042NIKKOL HCO-50 68NIKKOL VF-E 40MIGLYOL 812 10MONOMULS 90-018 15总计290mg5-2. 组分 含量(毫克/胶囊)环孢菌素25三甲基1，4∶3，6-二(ArlasolveRDMI)50脱水山梨醇TWEEN 60 42NIKKOL HCO-50 68NIKKOL VF-E 40MIGLYOL 812 10MONOMULS 90-018 15总计250mg5-3. 组份含量(毫克/胶囊)环孢菌素 25二甲基1，4∶3，6-二(ArlasolveRDMI)120脱水山梨醇TWEEN 80 42NIKKOL HCO-5068NIKKOL VF-E 40MIGLYOL 812 10MONOMULS 90-018 15总计320mg5-4. 组份 含量(毫克/胶囊)环孢菌素 25二甲基1，4∶3，6-二(ArlasolveRDMI) 50脱水山梨醇TWEEN 81 80NIKKOL HC0-50 68NIKKOL VF-E 40MIGLYOL 812 10MONOMULS 90-018 15总计288mg实例66-1. 组份 含量(毫克/胶囊)环孢菌素25二甲基1，4∶3，6-二(ArlasolVeRDMI)90脱水山梨醇TWEEN 2O42NIKKOL HCO-40 68NIKKOL VF-E 40MIGLYOL 812 10MONOMULS 90-018 15总计290mg6-2. 组份 含量(毫克/胶囊)环孢菌素25二甲基1，4∶3，6-二(ArlasolveRDMI)90脱水山梨醇TWEEN 4042NIKKOL HCO-60 68NIKKOL VF-E 40MIGLYOL 812 10MONOMULS 90-018 15总计290mg实例77-1. 组份 含量(毫克/胶囊)环孢菌素 25二甲基1，4∶3，6-二(ArlasolveRDMI) 90脱水山梨醇TWEEN 20 42NIKKOL HC0-5068Isopropyl myristate 40MIGLYOL 812 10MONOMULS 90-018 15总计290mg7-2. 组份 含量(毫克/胶囊)环孢菌素 25二甲基1，4∶3，6-二(ArlasolveRDMI) 90脱水山梨醇TWEEN 40 42NIKKOL HCO-5068Isopropyl myristate 40MIGLYOL 812 10MONOMULS 90-018 15总计290mg7-3. 组份含量(毫克/胶囊)环孢菌素 25二甲基1，4∶3，6-二(ArlasolveRDMI) 90脱水山梨醇TWEEN 40 42NIKKOL HCO-5068Ethyl oleate 40MIGLYOL 812 10MONOMULS 90-018 15总计290mg
上述实例1至实例7的组合物可通过下述方法来制备，即把环孢菌素溶解在作为辅助表面活性剂的二甲基l，4∶3，6-二脱水山梨醇中，然后把得到的溶液与其余组份均匀地混合，再把这样制得的微滴乳状浓缩液按照通常的方法放进制备软胶囊的机器中以制备所需的软胶囊。
实例8把按照本发明实例1—1用二甲基1，4∶3，6-二脱水山梨醇辅助表面活性剂制得的微滴乳状液作为试验制剂，把含有乙醇、SANDIMMUNRCapsule的商品产物作为对照制剂来比较它们的生物利用率，从而评估新的含二甲基1，4∶3，6-二脱水山梨醇的制剂对于环孢菌素的生物利用率的影响以及两种产品间的差别。
在这一实验中，试验用制剂和对照用制剂的给药剂量都是按每公斤兔子体重300毫克环孢菌素来用药的。
在同样条件下，在铁丝笼中用通常的兔用固体饲料组合物同样地把兔子喂养4天或更长时间。在服用口服制剂时，兔子在钢制的约束笼中被禁固48小时，其间可让兔子自由地饮水。把列文管表面涂布凡士林以减少磨擦以后，用直径5毫米的列文管经食管插入30厘米深。每批试验用制剂和对照用制剂都用50毫升水乳化，然后引入连接在列文管上的注射器中。兔子的耳静脉用二甲苯扩张，然后在试验前以及用药后的0.5，1，1.5，2，3，4，6，10和24小时，借助经肝素处理过的一次性注射器从每只兔子的耳静脉取血样。往1毫升这样取得的血样中加入0.5毫升饱和氯化钠水溶液和2毫升乙醚，然后把混合物摇振5分钟，用每分钟500转离心10分钟以分离出上清液(醚层)。收集l毫升上清液并在活化硅胶Sep—pakR(Waters)中展开。展开的Sep—pak用5毫升正己烷洗涤后，用2毫升甲醇洗脱。洗脱液在氮气中减压蒸发至干。残余物用HPIC(高效液相色谱)分析[HPLC条件用μ—BondapakRCl8柱(Waters)，流动相为CH3CN∶MeOH∶H2O＝55∶15∶30，检测波长210nm，流速1.0毫升/分，柱温70℃，灵敏度0.01Aufs，注入体积100μl]。
实验结果用图1和下面的表1来说明。
表1本发明制剂和商品制剂(SANDIMMUNR)的生物利用率
注AUC＝血浓度曲线下的面积Cmax＝环孢菌素的最大血浓度M±S.D.＝平均值±标准偏差CV ＝标准偏差对平均值的比率p(B/A) ＝试验制品的平均值对于对照制品平均值的比率如上表中可看到的那样，试验制剂比起对照制剂显示出增加的AUC和Cmax值，它们各自高出大约4倍多和大约7倍多。按此，可以认定试验制剂比起对照制剂在生物利用率方面有显著的提高。此外，本发明的试验制剂还表现出在个体试验样品间的差别(CV％)比对照制剂减少了，AUC值降低大约2倍多，Cmax值降低大约1.5倍。
按此，可以肯定，在口服本发明的软胶囊组合物时，环孢菌素的生物利用率比先有技术的含有乙醇的SANDIMMUNRCapsule的商品高大约4倍，并且还降低了个体样品间环孢菌素生物利用率的差别，与此同时，在长时期储存期间能稳定地保持不变。这样，可以明显看出按照本发明的微滴乳状浓缩液在环孢菌素软胶囊制剂方面提供了明显的改进。
实例9在室温条件下的整个储存期间，对按照本发明实例1—1、以二甲基1，4∶3，6-二脱水山梨醇(ArlasolveRDMI)作为辅助表面活性剂制备的软胶囊，和用含有乙醇作为辅助表面活性剂的商品、SANDIMMUNR软胶囊的膜渗透性质进行了检验，然后比较了两种制剂的储存稳定性。每种软胶囊制剂中辅助表面活性剂的含量用气相色谱进行分析。
实验结果列在下面的表2中。
表2储存期间软胶囊中辅助表面活性剂含量的变化 注每种辅助表面活性剂用的气相色谱条件1)二甲基l，4∶3，6-二脱水山梨醇-色谱柱Ultra2型(交联的2％苯基甲基硅氧烷的固定相，25米×0.32毫米，厚度0.52微米)柱温230℃(等温)检测器FID(温度270℃)注射温度275℃载气He(分配比率80∶1)注射体积5微升内标辛醇2)乙醇-色谱柱HP—20M(Carbowax 20M)(25米×0.32毫米，膜厚0.3微米)柱温30℃(等温)
检测器FID(温度200℃)注射温度150℃载气He(分配比率80∶1)注射体积5微升内标乙醚如上面表2中所描述的结果所示，按照本发明用二甲基1，4∶3，6-二脱水山梨醇作辅助表面活性剂时，它的含量即使经过10天以后仍然不变，而先有技术中用乙醇作辅助表面活性剂时，其含量在10后已降至初始含量的27.8％。按此，可以容易认定按照本发明以二甲基1，4∶3，6-二脱水山梨醇作为辅助表面活性剂的环孢菌素软胶囊中，因为二甲基1，4∶3，6-二脱水山梨醇在储存期间不能挥发，因而组成可稳定地保持，活性成份环孢菌素在稳定的溶液中得以维持，从而使它的生物利用率能一直保持很高。
实例10为测定用水稀释实例1—2中用二甲基1，4∶3，6-二脱水山梨醇(ArlasolveRDMI)作为辅助表面活性剂制得的本发明的环孢菌素软胶囊组合物以及商品SANDIMMUNR所形成的微滴乳状液的颗粒大小分布，可将由它们制得的微滴乳状液用颗粒大小分析器来进行分析(参见Terence Allen博士所著“颗粒大小测量”(Particle sizeMeasurement)一书第3版，Chapman and Hall，London，NewYork)。实验结果表示在图2(SANDIMMUNR)和图3(按实例1—2制得的本发明组合物)中。
如图2和图3所示，实例1—2制剂的平均乳化颗粒大小为大约0.1微米，而商品SANDIMMUNR软胶囊的平均颗粒大小是3.3微米。这样，可以看出本发明的组合物能够形成具有比商品SANDIMMUNR分散得更小的乳化颗粒的微滴乳状液。这一结果与实例8一致，它证实本发明的组合物能提供明显增加的生物利用率，并且降低了个体试样之间生物利用率的差别。按此，可明显看出本发明的组合物从乳化状态的角度来看比通常的商品有了明显的改进。
虽然本发明以相当程度的详尽性在它的经优选实例中进行了描述，但本领域中熟练的技术人员应能理解，本发明这些经优选形式的公开说明只是借助实例来说明，而构成、组合和各部份的安排方面可以采用许多细节上的变化而不偏离本发明的精神和范围。
权利要求
1.一种环孢菌素软胶囊组合物，包括环孢菌素作为活性成份，二甲基1，4∶3，6-二脱水山梨醇作为辅助表面活性剂，选自酯肪酸和一级醇酯化所形成的化合物、中等链长的脂肪酸三酸甘油酯和单酸甘油酯的一种组份、或者两种或多种组份的混合物作为油性组份，以及一种HLB(亲水—亲油平衡)值为10至17的表面活性剂。
2.权利要求1的环孢菌素软胶囊组合物，其中所说的环孢菌素是环孢菌素A。
3.权利要求1的环孢菌素软胶囊组合物，其中所说的由脂肪酸和一级醇形成的酯化化合物是具有8至20个碳原子的脂肪酸和具有2至3个碳原子的醇所形成的酯化化合物。
4.权利要求3的环孢菌素软胶囊组合物，其中所说的由脂肪酸和一级醇形成的酯化化合物是肉豆蔻酸异丙酯，软脂酸异丙酯，亚油酸乙酯或油酸乙酯。
5.权利要求4的环孢菌素软胶囊组合物，其中所说的由脂肪酸一级醇形成的酯化化合物是亚油酸乙酯。
6.权利要求1的环孢菌素软胶囊组合物，其中所说的中等链长的脂肪酸三酸甘油酯是辛酸/癸酸三酸甘油酯。
7.权利要求1的环孢菌素软胶囊组合物，其中所说的脂肪酸单酸甘油酯是油酸的单酸甘油酯。
8.权利要求1的环孢菌素软胶囊组合物，其中所说的油性组份是由选自脂肪酸和一级醇酯化形成的化合物、中等链长的脂肪酸三酸甘油酯和脂肪酸单酸甘油脂的两种或多种组份所形成的混合物。
9.权利要求8的环孢菌素软胶囊组合物，其中脂肪酸和一级醇酯化形成的化合物、中等链长的脂肪酸三酸甘油酯和脂肪酸单酸甘油脂的构成比率基于重量计为1∶0.12—0.5∶0—0.5。
10.权利要9的环孢菌素软胶囊组合物，其中脂肪酸和一级醇的酯化化合物、中等链长脂肪酸三酸甘油酯和脂肪酸单酸甘油脂的构成比率基于重量计为1∶0.25∶0.375。
11.权利要求8中的环孢菌素软胶囊组合物，其中总脂肪酸的构成比率为，辛酸∶癸酸∶软脂酸∶油酸∶亚油酸∶蓖麻酸＝3—7∶3—7∶5—8∶15—25∶40—50∶3—10。
12.权利要求1的环孢菌素软胶囊组合物，其中所说的表面活性剂是氢化植物油的聚氧乙烯产物或者聚氧乙烯—脱水山梨醇—脂肪酸酯。
13.权利要求12的环孢菌素软胶囊组合物，其中所说表面活性剂是一种混合的表面活性剂，它由混合比率为1∶0.5—2的NIKKOL HCO—50和TWEEN20组成。
14.权利要求13的环孢菌素软胶囊组合物，其中所说的表面活性剂是一种混合的表面活性剂，它由混合比率为1∶1.0的NIKKOL HCO—50和TWEEN20组成。
15.权利要求1中的环孢菌素软胶囊组合物，其中所说的环孢菌素、所说的二甲基1，4∶3，6-二脱水山梨醇、所说的油性组份、和所说的表面活性剂存在的比率为1∶1—5∶1—5∶3—6。
16.权利要求15中的环孢菌素软胶囊组合物，其中所说的环孢菌素、所说的二甲基1，4∶3，6-二脱水山梨醇、所说的油性组份和所说的表面活性剂存在的比率为1∶3—4∶1.5—3∶4—6。
17.权利要求16中的环孢菌素软胶囊组合物，其中所说的环孢菌素、所说的二甲基1，4∶3，6-二脱水山梨醇、所说的油性组份和所说的表面活性剂存在比率为1∶3.6∶2.6∶5.5。
18.权利要求1中的环孢菌素软胶囊组合物，它进一步还包含药学上可接受的添加剂。
全文摘要
本发明是有关一种微滴乳状浓缩液，它含有环孢菌素作为活性成份，二甲基1，4∶3，6-二脱水山梨醇作为辅助表面活性剂，选自脂肪酸和一级醇酯化所形成的化合物、中等链长的脂肪酸三酸甘油酯和单酸甘油酯的一种组分、或者两种或多种组分的混合物作为油性组分，以及一种HLB为值10至17的表面活性剂，诸如NIKKOL HCO-50或者Tween20，它适宜于配制成软胶囊。这种胶囊的生物利用度提高而个体样品间差异减小。
文档编号A61K38/00GK1128671SQ9511855
公开日1996年8月14日 申请日期1995年10月30日 优先权日1994年11月9日
发明者禹钟守 申请人:韩美药品工业株式会社