环孢菌素乳液的制作方法
【专利说明】
[0001] 本申请是申请号为201180028018. 7、发明名称为"环孢菌素乳液"的申请的分案申 请，该母案申请是2011年9月30日提交的PCT申请PCT/EP2011/067117进入中国国家阶 段的申请。
技术领域
[0002] 本发明涉及一种新的环孢菌素组合物，其呈具有一定含量的中链甘油三酯 的乳液形式。该乳液是水包油型乳液，与市售产品Sandimmune K.生物等效，但与 Sandimmune?湘比具有改善的耐受特性。
【背景技术】
[0003] 环孢菌素是在器官和组织移植中广泛使用的免疫抑制剂。环孢菌素在水中的溶解 性差，而用于输注的市售产品Siaudimmune?:被配制成含 5〇mg/mi环孢菌素和聚乙氧基 化菌麻油（polyoxylated castor oil, Cremophor EL?)在乙醇中的浓缩物，并且在施用 之前必须用氯化钠等渗溶液或5%葡萄糖溶液稀释。但是，静脉内施用含Cremophor 的环孢菌素组合物与超敏反应相关，引起从轻度皮肤反应到过敏反应和心脏衰竭的响应。 因此，需要不含CremophorK的环孢菌素组合物以及即用型组合物。
[0004] Cremophor EL是BASF Crop为其聚乙氧基化菌麻油版本注册的商标。它是 通过使35摩尔环氧乙烷与每摩尔蓖麻油反应而制备的。所得产物是混合物（CAS号为 61791-12-6):主要组分是其中蓖麻油甘油三酯的羟基被环氧乙烷乙氧基化从而形成聚 乙二醇醚的材料。次要组分是蓖麻油酸的聚乙二醇醚、聚乙二醇和甘油的聚乙二醇醚。 Cremophor EL是合成的非离子型表面活性剂。其效用来自其在水性系统中稳定非极性材料 的乳液的能力。
[0005] 许多Cremophor产品可得自BASF (Cremophor RH 40 (聚乙氧基化 (polyoxyl)-40-氢化菌麻油）、Cremophor EL (polyocyl-35 菌麻油）、Cremophor ELP (超 纯级EL)，其全部为聚乙氧基化菌麻油级；Cremophor A 6(聚乙二醇（macrogol)-6-十六/ 十八烧基醇（cetostearyl)醚）和Cremophor A 25(聚乙二醇-25-十六/十八烧基醚）， 它们为聚乙二醇十六/十八烷基醚级。据我们所知，目前只有Cremophor EL?与超敏反应 相关。但是，可能来自聚乙氧基化蓖麻油系列的全部Cremophor?产品在施用于对象时 具有相同的不良作用。
【发明内容】
[0006] 尤其在EP-B-0570829中描述了用于肠胃外施用的环孢菌素的即用型组合物。但 是，有必要进一步开发这样的组合物，以获得与Sandimmune?产品生物等效的组合物并 确保适当的贮存期限。
[0007] 进一步开发针对确保能够具有充分的稳定性和贮存期限二者的制剂以满足商业 制药业务的市场和分配的要求，同时是生物等效的，并且使用有益于治疗靶标（如线粒体 代谢）且无毒的成分。
[0008] 在临床实践中，这也意味着我们能够更好地达到例如Sandimmune?的目标，并 从而确保在临床实践中可以避免Cremophor?:和乙醇的不良作用，以及避免不得不用皮 质类固醇和/或抗组胺剂进行术前用药，以防万一这样的预处理或多重-药剂法是禁忌的。
[0009] 本发明提供了一种用于肠胃外施用（特别是静脉内施用）的不含Cremophor的环 孢菌素组合物。
[0010] 本发明的组合物包含：
[0011] 环孢菌素
[0012] 天然油（长链甘油三酯）（例如，豆油）
[0013] 磷脂酰胆碱（例如，蛋黄卵磷脂）
[0014] 甘油
[0015] 游离脂肪酸的可药用碱盐（例如，油酸钠）
[0016] 中链甘油三酯-油（例如，椰子油和/或棕榈油）
[0017] 任选地，用于调节pH的盐酸和氢氧化钠
[0018] 水。
[0019] 本发明的组合物具有等渗范围内的重量摩尔渗透压浓度（osmolality)，即摩尔渗 透压浓度（osmolarity)为约280mosm/l至约305mosm/l，优选为约295-300mosm/l，这对应 于血浆的值，即等渗值。为了确保良好的生物相容性，使用具有等渗的摩尔渗透压浓度的含 环孢菌素组合物是重要的。当这样的组合物被用于例如治疗中风时，许多已知环孢菌素乳 液是高渗性的以实现良好地穿过血脑屏障的渗透。但是，本发明的环孢菌素乳液还可用于 其它重要的治疗领域，如与心脏再灌注损伤和免疫抑制相关的，其中高渗组合物的使用可 导致特定代谢物、物质、血组分等不希望地进入脑，这可进而导致毒性或不利作用，而这些 全部都是不希望有的。
[0020] 常常交替使用术语摩尔渗透压浓度、重量摩尔渗透压浓度和涨度。具体定义参见 Remington; s Pharmaceutical Sciences,第 18 版，Mack Publishing Company 1990,页 码1481-1498,其通过引用并入本文。
[0021] 本发明的组合物还可用于治疗创伤性脑损伤，由于其中由脑损伤本身引起的破 口，所以组合物跨过血-脑屏障，因此不需要高渗组合物来破坏血-脑屏障。在这样的迹象 下，与高渗组合物相比高度地优选等渗组合物。
[0022] 环孢菌素
[0023] 环孢菌素可以是任意治疗活性的环孢菌素或类似物以及环孢菌素的衍生物。环孢 菌素可具有免疫抑制特性或非免疫抑制特性（NICAM)，或者其可具有任意其它已知或未知 的作用（例如，用于治疗心血管疾病如心肌梗塞、再灌注或者神经退行性疾病、脑损伤、缺 血、外伤等的心脏保护或神经保护。）已知环孢菌素对线粒体具有保护作用。优选适合用于 免疫抑制中的环孢菌素。环孢菌素可以是天然的或合成的环孢菌素。如下文所示，存在若 干个手性碳原子。因此，术语"环孢菌素"涵盖具有治疗活性的任意的这些形式-单独的或 者任何组合形式的。
[0024] 在实施例中，使用了下述环孢菌素：
[0025] INN :环抱素（Ciclosporin)
[0026] 化学名称：
[0027] a)环[[(2S，3R，4R，6E) -3-羟基-4-甲基-2-(甲基氨基）-辛-6-烯酰基]-L-2-氨 基丁酰基-N-甲基甘氨酰基-N-甲基-L-亮氨酰基-L缬氨酰基-N-甲基-L-亮氨酰 基-L-丙氨酰基-D-丙氨酰基-N-甲基-L-亮氨酰基-N甲基-L-亮氨酰基-N-甲基-L-缬 氨酰基]
[0028] b)环[[伍)-(25,31?，410-3-羟基-4-甲基-2-(甲基氨基）-6-辛烯酰基]-1^-2-氨 基丁酰基-N-甲基甘氨酰基-N-甲基-L-亮氨酰基-L缬氨酰基-N-甲基-L-亮氨酰 基-L-丙氨酰基-D-丙氨酰基-N-甲基-L-亮氨酰基-N甲基-L-亮氨酰基-N-甲基-L-缬 氨酰基]
[0029] c) [R- [R *，R * - (E)]]-环（L-丙氨酰基-D-丙氨酰基-N-甲基-L-亮氨酰基-N 甲基-L-亮氨酰基-N-甲基-L-缬氨酰基-3-羟基-N，4-二甲基-L-2-氨基-6-辛烯酰 基-L- α -氨基丁酰基-N-甲基甘氨酰基-N-甲基-L亮氨酰基-L-缬氨酰基-N-甲基-L-亮 氨酰基）
[0030] 其它名称：环孢素（DCI)
[0031] 环孢素（DCI-E)
[0032] 纲要名称：环孢素（Ph. Eur.)
[0033] 环孢菌素（USP)
[0034] CAS 号：59865-13-3
[0035] 结构式（参见图1)
[0036] 分子式：C62HmNn012
[0037] 相对分子质量（Mr) : 1202. 61
[0038] 手性：环孢素是具有若干个手性碳原子的天然源分子。
[0039] 一般特性：
[0040] 物理形式：白色或几乎白色粉末
[0041] 溶解性：可溶于丙酮、乙醇、甲醇、醚、氯仿和二氯甲烷；微溶于饱和烃；几乎不溶 于水。
[0042] 比旋光度：-185°至-I93。（甲醇）
[0043] 磷脂酰胆碱
[0044] 蛋黄卵磷脂和/或大豆卵磷脂（特别是蛋黄卵磷脂）优选作为磷脂酰胆碱（特别 是3-sn-磷脂酰胆碱或氢化3-sn-磷脂酰胆碱）的供体。3-sn-磷脂酰胆碱和/或部分氢 化3-sn-磷脂酰胆碱和/或氢化3-sn-磷脂酰胆碱的含量大于60%的卵磷脂最为合适。
[0045] 可药用的脂肪酸的盐
[0046] 可以添加具有6至26个碳原子的游离脂肪酸的碱盐以调节pH值或者促进乳化和 均化过程。尤其优选棕榈酸、棕榈油酸、硬脂酸、油酸、亚麻油酸和亚麻酸的钠盐和钾盐。在 一个优选实施方案中，使用了油酸钠。
[0047] 等渗调节物质
[0048] 如从本文的实施例所见的，使用了甘油来将组合物的摩尔渗透压浓度调节至等 渗。但其它物质如山梨糖醇、木糖醇、氯化钠、葡萄糖也可证明是合适的。
[0049] 天然油（长链甘油三酯）
[0050] 可以使用豆油或红花油或其组合作为天然油。在一个优选实施方案中，使用了豆 油。
[0051] MCT-油（中链甘油三酯）
[0052] 如从下文可见，为了获得乳液的期望稳定性（特别是考虑到乳液的物理稳定性）， 似乎MCT-油的存在是重要的。环孢菌素在MCT-油中具有非常好的溶解性，因此MCT-油有 助于避免储存过程中环孢菌素的不期望的沉淀。
[0053] 此外，似乎MCT-油对脑有有益作用，例如，有这样的迹象：它可有益于治疗阿尔茨 海默氏病和其中稳定性保护和线粒体功能的支持是重要/需要的其它病症。在机体的几乎 所有细胞中，存在线粒体，且其产生能量。线粒体萎陷可与多种急性损伤如心肌梗塞和创伤 性脑损伤以及慢性疾病如肌萎缩性侧索硬化症、多发性硬化以及其它神经障碍有关。在心 肌梗塞中，阻塞动脉的再灌注能够引起再灌注损伤和额外伤害及心肌无力，以及死亡率增 力口。心肌组织中的线粒体保护可缓解心脏病发作的长期影响。
[0054] 合适的MCT-油是椰子油、棕榈油或者它们的组合。
[0055] 水
[0056] 所使用的水必须具有适合于肠胃外产品的质量，如注射用水（药典标准）。
[0057] 制备方法
[0058] 制备本发明的组合物的合适方法示于本文的图2和实施例中。
[0059] 本发明的组合物的实例
[0060] 在本文所提到的所有组合物中，将摩尔渗透压浓度调节至约285mosm/l至约 305mosm/l、优选调节至约295mosm/l至约300mosm/l的等渗值。
[0061] 更优选地，本发明的组合物包含：
[0062] 浓度范围为lg/Ι至15g/l的环孢菌素；
[0063] 浓度范围为5g/l至25g/l的磷脂酰胆碱（例如，蛋黄卵磷脂）；
[0064] 浓度范围为0· lg/Ι至lg/Ι的游离脂肪酸的可药用碱盐（例如，油酸钠）；
[0065] 任选地，量为足以使组合物的最终pH值达到约6至约8. 8的pH调节剂，例如IM 氢氧化钠；
[0066] 浓度范围为10g/l至50g/l的甘油；
[0067] 浓度范围为50g/l至150g/l的天然油（长链甘油三酯）（例如，豆油）；
[0068] 浓度范围为50g/l至150g/l的中链甘油三酯-油；以及
[0069] 至多1升的水。
[0070] 在一些特定实施方案中，本发明的组合物包含：
[0071] 浓度范围为lg/Ι至15g/l的环孢菌素；
[0072] 浓度范围为5g/l至25g/l的蛋黄卵磷脂；
[0073] 浓度范围为0· lg/Ι至lg/Ι的游离脂肪酸的可药用碱盐（例如，油酸钠）；
[0074] 任选地，量为足以使组合物的最终pH值达到约8至约8. 8的pH调节剂，例如IM 氢氧化钠；
[0075] 浓度范围为10g/l至50g/l的甘油；
[0076] 浓度范围为50g/l至150g/l的天然油（长链甘油三酯）（例如，豆油）；
[0077] 浓度范围为50g/l至150g/l的中链甘油三酯-油；以及
[0078] 至多1升的水。
[0079] 浓度范围为lg/Ι至15g/l的环孢菌素；
[0080] 浓度