，具体的分 子量范围在1000-200000道尔顿。
[0022] 所述岩藻聚糖硫酸酯和低分子量岩藻聚糖硫酸酯分别在浓度为50ug/ml以上可 以显著增加骨骼肌细胞胰岛素刺激的葡萄糖转运，激活AMPK-ACC信号通路；并明显抑制肝 细胞的葡萄糖异生途径和增加糖原合成水平，上调IRS-2/PI3K信号途径，具有有效的增加 胰岛素敏感性、改善胰岛素抵抗的作用。
【附图说明】
[0023] 图1是岩藻聚糖硫酸酯和低分子量岩藻聚糖硫酸酯的细胞毒性测定实验结果。
【具体实施方式】
[0024] 下面结合附图和【具体实施方式】对本发明的技术方案作进一步详细的说明。
[0025] 实施例1
[0026] 本发明所述岩藻聚糖硫酸酯的制备方法包括以下步骤：
[0027] (1)将褐藻粉末置于甲醇、丙酮或质量比为80%的乙醇等有机溶剂中，80°C下每 次浸泡3h，重复3次，以浸泡脱脂，；
[0028] 所述褐藻取自墨角藻、泡叶藻、马尾藻、裙带菜、羊栖菜、鼠尾藻、海黍子、昆布或海 带中的一种或几种，其中优选墨角藻。
[0029] (2)在80°C下水提取，再经质量比为80%乙醇沉淀，然后40°C干燥获得粗褐藻多 糖硫酸酯；
[0030] (3)然后在CaCl2或者MgCl2存在下用质量比为20%乙醇沉淀去除水溶性褐藻胶；
[0031] (4)再经透析、浓缩，用质量比为80%乙醇沉淀，然后在40°C下干燥后得到纯化的 岩藻聚糖硫酸酯。制得的所述岩藻聚糖硫酸酯分子量为200kD-2000kD (包括两端值）。
[0032] (5)将获得的所述岩藻聚糖硫酸酯通过合适的方式（降解方式包括但不限于酸降 解法、碱降解法、酶降解法、物理降解法、微波降解法、自由基氧化降解法等）降解制得低分 子量岩藻聚糖硫酸酯，其分子量较未降解的岩藻聚糖硫酸酯分子量低，降解后的低分子量 岩藻聚糖硫酸酯具体的分子量范围在1000-200000道尔顿（不包括上限值）。
[0033] 实施例2岩藻聚糖硫酸酯（FS)和低分子量岩藻聚糖硫酸酯（LFS)的细胞毒检测。
[0034] 本发明采用经典的代谢综合症细胞模型，通过实验评价所述岩藻聚糖硫酸酯在改 善胰岛素抵抗、抗代谢综合症中的作用。实验结果如图1所示，岩藻聚糖硫酸酯（FS)和低 分子量岩藻聚糖硫酸酯（LFS)在0-400yg/mL范围内对细胞是无明显毒性的，当浓度达到 500yg/mL及以上时，方表现出一定的细胞毒性。而本发明的实验浓度最高为100yg/mL， 因此不会对细胞产生任何毒性。
[0035] 实施例3岩藻聚糖硫酸酯（FS)和低分子量岩藻聚糖硫酸酯（LFS)抑制肝细胞糖 异生途径、增加糖原合成、改善胰岛素抵抗的作用。
[0036] 利用人肝细胞株H印G2接触高糖和含胰岛素培养基建立的细胞模型，评价了 FS和 LFS对肝细胞糖异生途径的抑制效果。阳性药物选择二甲双胍。
[0037] 实验结果如表1所示，FS和LFS可显著抑制肝细胞的糖异生水平，增加糖原合成 量；表2中Western blot结果也显不，如表2所不FS和LFS可显著的上调胰岛素信号转导 通路中IRS-2、Akt、GSK-3的磷酸化，抑制G6Pase的表达。证明FS和LFS通过特异性激活 IRS-2/PI3K信号通路而发挥改善胰岛素抵抗的作用。这表明，FS和LFS与目前临床常用药 物二甲双胍相比，具有更好的激活IRS-2/PI3K、抑制糖异生、增加糖原合成、改善肝脏胰岛 素抵抗的作用。
[0038] 表I :FS和LFS对!fepG2细胞模型糖输出量和糖原含量的影响
[0039]
【主权项】
1. 岩藻聚糖硫酸酯及低分子量岩藻聚糖硫酸酯在制备抗代谢综合症的药物和保健品 中的应用。
2. 根据权利要求1所述的岩藻聚糖硫酸酯及低分子量岩藻聚糖硫酸酯在制备抗代谢 综合症的药物和保健品中的应用，其特征在于所述岩藻聚糖硫酸酯及低分子量岩藻聚糖硫 酸酯的制备方法为： (1) 将褐藻粉末用有机溶剂浸泡脱脂； (2) 然后经水提取，乙醇沉淀，干燥获得粗褐藻多糖硫酸酯； (3) 再去除粗褐藻多糖硫酸酯中的水溶性褐藻胶； (4) 经透析、浓缩后，再经乙醇沉淀，干燥后得到纯化的所述岩藻聚糖硫酸酯； (5 )将所述岩藻聚糖硫酸酯降解制得低分子量岩藻聚糖硫酸酯。
3. 根据权利要求2所述的岩藻聚糖硫酸酯及低分子量岩藻聚糖硫酸酯在制备抗代谢 综合症的药物和保健品中的应用，其特征在于：所述岩藻聚糖硫酸酯200kD-2000kD，所述 低分子量岩藻聚糖硫酸酯的分子量为1000-200000道尔顿。
4. 根据权利要求2所述的岩藻聚糖硫酸酯及低分子量岩藻聚糖硫酸酯在制备抗代谢 综合症的药物和保健品中的应用，其特征在于：所述褐藻为墨角藻、泡叶藻、马尾藻、裙带 菜、羊栖菜、鼠尾藻、海黍子、昆布或海带中的一种或几种。
5. 根据权利要求4所述的岩藻聚糖硫酸酯及低分子量岩藻聚糖硫酸酯在制备抗代谢 综合症的药物和保健品中的应用，其特征在于：所述褐藻为墨角藻。
6. 根据权利要求2所述的岩藻聚糖硫酸酯及低分子量岩藻聚糖硫酸酯在制备抗代谢 综合症的药物和保健品中的应用，其特征在于：所述步骤（1)中有机溶剂为甲醇、乙醇或丙 酮中的一种或几种，浸泡脱脂在80°C下进行。
7. 根据权利要求2所述的岩藻聚糖硫酸酯及低分子量岩藻聚糖硫酸酯在制备抗代谢 综合症的药物和保健品中的应用，其特征在于：所述步骤（2)中在80°C下水提取，再经质量 比为80%的乙醇沉淀，然后40°C下干燥获得粗褐藻多糖硫酸酯。
8. 根据权利要求2所述的岩藻聚糖硫酸酯及低分子量岩藻聚糖硫酸酯在制备抗代谢 综合症的药物和保健品中的应用，其特征在于：所述步骤（3)中在CaCl 2或者MgCl 2存在的 条件下，添加质量比为20%乙醇以沉淀去除水溶性褐藻胶。
9. 根据权利要求1或2所述的岩藻聚糖硫酸酯及低分子量岩藻聚糖硫酸酯在制备抗代 谢综合症的药物和保健品中的应用，其特征在于：所述岩藻聚糖硫酸酯和/或低分子量岩 藻聚糖硫酸酯在浓度为50ug/ml以上显著增加骨骼肌细胞胰岛素刺激的葡萄糖转运，激活 AMPK-ACC信号通路。
10. 根据权利要求1或2所述的岩藻聚糖硫酸酯及低分子量岩藻聚糖硫酸酯在制备抗 代谢综合症的药物和保健品中的应用，其特征在于：所述岩藻聚糖硫酸酯和/或低分子量 岩藻聚糖硫酸酯在浓度为50ug/ml以上明显抑制肝细胞的葡萄糖异生途径和增加糖原合 成水平，上调IRS-2/PI3K信号途径，有效增加胰岛素敏感性、改善胰岛素抵抗。
【专利摘要】本发明提供了岩藻聚糖硫酸酯及低分子量岩藻聚糖硫酸酯在制备抗代谢综合症的药物和保健品中的应用，所述岩藻聚糖硫酸酯可以较好地改善胰岛素信号通路，抑制糖异生、增加糖元合成，以及促进骨骼肌葡萄糖吸收，有效改善胰岛素抵抗。岩藻聚糖硫酸酯可以作为一种天然保健品或者药物用于胰岛素抵抗及代谢综合症的预防和治疗。岩藻聚糖硫酸酯来源于海洋海藻，具有资源丰富，易于产业化，且安全高等优点，在代谢综合症的防治方面具有广阔的市场和应用前景。本发明将为海洋海藻的高值化利用提供借鉴意义和启示。
【IPC分类】A61P3-00, A61K31-737, A23L1-30
【公开号】CN104586878
【申请号】CN201510019056
【发明人】管华诗, 郝杰杰, 敦云楼, 周晓琳, 于广利, 夏萱
【申请人】青岛海洋生物医药研究院股份有限公司
【公开日】2015年5月6日
【申请日】2015年1月14日