而所述疫苗不仅适用于这些人群，还可用于更广泛的人群。
[0173] 可在与其它疫苗基本相同的时间（例如在向健康护理专业人员的同一次医疗咨 询或就诊期间），将本发明疫苗给予患者。
[0174] 中间过程
[0175] 本发明还提供了制备水包油乳液的方法，包括微流化第一乳液形成第二乳液，然 后过滤第二乳液。第一乳液具有如上所述的特征。
[0176] 本发明还提供了制备水包油乳液的方法，包括过滤第二乳液，即微流化乳液。微流 化乳液具有如上所述的特征。
[0177] 本发明还提供了制备疫苗的方法，包括组合乳液和抗原，其中乳液具有上述特征。
【具体实施方式】
[0178] 本发明的【具体实施方式】包括：
[0179] ?-种制备含鲨烯的水包油乳液的方法，包括步骤：（i)形成具有第一平均油滴尺 寸的第一乳液；（ii)微流化第一乳液形成具有比第一平均油滴尺寸小的第二平均油滴尺 寸的第二乳液；和（iii)用具亲水膜过滤第二乳液。
[0180] ?一种制备水包油乳液疫苗的方法，包括步骤：（i)形成具有5000nm或以下的第一 平均油滴尺寸的第一乳液；（ii)微流化第一乳液形成具有比第一平均油滴尺寸小的第二 平均油滴尺寸的第二乳液；和（iii)用亲水膜过滤第二乳液。
[0181] ?-种制备水包油乳液疫苗的方法，包括步骤：（i)形成具有第一平均油滴尺寸的 第一乳液；（ii)微流化第一乳液形成具有比第一平均油滴尺寸小的第二平均油滴尺寸的 第二乳液；和（iii)用亲水聚醚砜膜过滤第二乳液。
[0182] ?-种制备含有鲨烯的水包油乳液的方法，包括步骤：（i)用匀浆器形成具有第一 平均油滴尺寸的第一乳液，其中第一乳液是通过使第一乳液组分循环通过匀浆器多次形成 的。
[0183] ?-种制备含鲨烯的水包油乳液的方法，该方法包括步骤（b)微流化具有第一平 均油滴尺寸的第一乳液，形成具有比第一平均油滴尺寸小的第二平均油滴尺寸的第二乳 液，其中第二乳液是通过循环第二乳液组分形成的，所述循环通过将第二乳液组分从第一 乳液容器经第一微流化装置转移到第二乳液容器，然后通过第二微流化装置，其中第一和 第二微流化装置相同。
[0184] ?-种制备水包油乳液的方法，包括：使具有第一平均油滴尺寸的第一乳液通过微 流化装置形成第二平均油滴尺寸小于第一平均油滴尺寸的第二乳液；其中微流化装置包括 交互作用室，其包含多个Z型通道和包含至少一个通道的辅助处理模块；其中辅助处理模 块位于交互作用室下游。
[0185] ?-种制备水包油乳液的方法，包含步骤：使具有第一平均油滴尺寸的第一乳液通 过微流化装置形成具有小于第一平均油滴尺寸的第二平均油滴尺寸的第二乳液；其中微流 化装置包含含多条通道的交互作用室和辅助处理模块。
[0186] ?-种制备水包油乳液的方法，包括步骤：使具有第一平均油滴尺寸的第一乳液通 过微流化装置形成具有小于第一平均油滴尺寸的第二平均油滴尺寸的第二乳液，其中微流 化装置包括交互作用室，其中交互作用室入口处的乳液组分压力在乳液加入微流化床期间 至少85 %的时间内基本恒定。
[0187] ?-种制备水包油乳液的方法，包括步骤：形成具有第一平均油滴尺寸的第一乳 液，其中在惰性气体例如氮气，例如在多至〇. 5巴的压力下形成第一乳液。
[0188] ?-种制备水包油乳液的方法，包含步骤：使具有第一平均油滴尺寸的第一乳液通 过微流化装置形成具有小于第一平均油滴尺寸的第二平均油滴尺寸的第二乳液；其中在惰 性气体例如氮气，例如在多至〇. 5巴的压力下形成第二乳液。
[0189] ?-种制备水包油乳液疫苗的方法，包括步骤：（i)形成具有第一平均油滴尺寸的 第一乳液；（ii)微流化第一乳液形成具有比第一平均油滴尺寸小的第二平均油滴尺寸的 第二乳液；（iii)过滤第二乳液；（iv)将水包油乳液转移入无菌柔性袋中。
[0190] 概述
[0191] 术语"包含"涵盖"包括"以及"由……组成"，例如，"包含"X的组合物可以仅由X 组成或可以包括其它物质，例如X+Y。
[0192] 术语"基本上"不排除"完全"，如"基本上不含"Y的组合物可能完全不含Y。必要 时，术语"基本上"可从本发明定义中省略。
[0193] 与数值X相关的术语"约"是可选的并表示例如x±10%。
[0194] 除非另有说明，包括混合两种或多种组分的步骤的过程不要求任何特定的混合顺 序。因此，组分可以任何顺序混合。有三种组分时，可将两种组分相互合并，然后可将合并 物再与第三种组分混合等。
[0195] 将动物（具体是牛）材料用于培养细胞时，其应获自未患传染性海绵状脑病（TSE) 的来源，具体是未患牛海绵状脑病（BSE)的来源。总之，优选在完全不含动物来源材料的情 况下培养细胞。
[0196] 附图简要说明
[0197] 图1显示了能用于形成第一乳液的匀浆器的具体例子。
[0198] 图2显示了可用于这种匀浆器的转子和定子的细节。
[0199] 图3显示了同步强化泵模式的两种压力分布。
[0200] 图4显示了 Z型通道交互作用室。
[0201] 图5显示了 I型循环，而图6显示了 II型循环。容器标为"C"，匀浆器标为"H"。 显示了流体运动的方向和顺序。在图6中，匀浆器具有两个输入箭头和两个输出箭头，但是 实际上匀浆器只有一个输入通道和一个输出通道。
【具体实施方式】
[0202]
[0203] 实施例1
[0204] 根据本发明制备含鲨烯、聚山梨酯80、去水山梨糖醇三油酸酯和柠檬酸钠缓冲液 的微流化乳液。微流化乳液直到其平均油滴尺寸为165nm或以下，尺寸>1. 2 μ M的油滴数 目为5x l〇7ml或以下。
[0205] 乳液滤过除菌级滤筒（滤器A)，其具有孔径为0. 45 μ M的亲水性不对称多孔聚醚 砜预过滤膜，和孔径为〇. 2 μ M的亲水性不对称多孔聚醚砜终过滤膜。过滤中乳液维持在 40±5°C的温度下。
[0206] 上述过程独立运行4次，测定滤过乳液的特征并示于表1。
[0207]
【主权项】
1. 一种制备含鲨烯的水包油乳液疫苗佐剂的方法，所述方法包括步骤： (i) 形成具有第一平均油滴尺寸的第一乳液； (ii) 微流化第一乳液形成具有比第一平均油滴尺寸小的第二平均油滴尺寸的第二乳 液；和 (iii) 用具有较大孔的第一膜层和较小孔的第二膜层的亲水双层滤膜过滤第二乳液， 从而提供疫苗佐剂。
2. -种制备含鲨烯的水包油乳液疫苗佐剂的方法，所述方法包括步骤： (i) 形成具有5000nm或以下的平均油滴尺寸的第一乳液； (ii) 微流化第一乳液形成具有500nm或以下的平均油滴尺寸的第二乳液；和 (iii) 用亲水膜过滤第二乳液，从而提供疫苗佐剂。
3. 如权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述亲水膜是亲水聚醚砜膜。
4. 一种制备含鲨烯的水包油乳液疫苗佐剂的方法，所述方法包括步骤： (i) 形成具有第一平均油滴尺寸的第一乳液； (ii) 微流化第一乳液形成具有比第一平均油滴尺寸小的第二平均油滴尺寸的第二乳 液；和 (iii) 用亲水聚醚砜膜过滤第二乳液，从而提供疫苗佐剂。
5. 如权利要求1、3或4所述的方法，其特征在于，所述第一平均油滴尺寸是5000nm或 以下。
6. 如前述权利要求中任一项所述的方法，其特征在于，所述第一乳液中尺寸>1. 2ym 的油滴数量为5xlOn/ml或以下。
7. 如前述权利要求中任一项所述的方法，其特征在于，所述第二平均油滴尺寸是 500nm或以下。
8. -种制备含鲨烯的水包油乳液疫苗佐剂的方法，所述方法包括步骤： (i) 形成具有500nm或以下的平均油滴尺寸的含鲨烯乳液； (ii) 用具有较大孔的第一膜层和较小孔的第二膜层的亲水双层滤膜过滤含鲨烯乳液， 从而提供疫苗佐剂。
9. 如前述权利中任一项要求所述的方法，其特征在于，过滤后的平均油滴尺寸小于 220nm。
10. 如前述权利要求中任一项所述的方法，其特征在于，所述第二乳液在过滤前预先滤 过膜。
11. 如权利要求10所述的方法，其特征在于，所述预过滤和过滤步骤用双层滤膜进行。
12. 如权利要求10或11所述的方法，其特征在于，所述预过滤膜是不对称和/或多孔 的。
13. 如前述权利要求中任一项所述的方法，其特征在于，所述滤膜是不对称和/或多孔 的。
14. 如前述权利要求中任一项所述的方法，其特征在于，所述滤膜和任选的预过滤膜包 含聚合支撑材料。
15. 如前述权利要求中任一项所述的方法，其特征在于，（i)所述第一层孔径>0. 3ym， 和/或（ii)所述第二层孔径〈〇. 3ym。
16. -种制备疫苗组合物的方法，其特征在于，所述方法包括如权利要求1-15中任一 项所述制备乳液佐剂，并将乳液佐剂与抗原混合。
17. -种制备疫苗药盒的方法，其特征在于，所述方法包括如权利要求1-15中任一项 所述制备乳液佐剂，并将乳液佐剂作为药盒组分与抗原组分一起包装入药盒。
18. 如权利要求17所述的方法，其特征在于，所述药盒组分在独立的小瓶中。
19. 如权利要求18所述的方法，其特征在于，所述小瓶由硼硅酸盐玻璃制成。
20. 如权利要求16-19中任一项所述的方法，其特征在于，所述乳液佐剂是散装佐剂， 该方法包括从散装佐剂提取单位剂量用于包装成药盒组分。
21. 如权利要求16-20中任一项所述的方法，其特征在于，所述抗原是流感病毒抗原。
22. 如权利要求21所述的方法，其特征在于，所述乳液与抗原的组合形成疫苗组合物， 其中所述疫苗组合物包含每流感病毒株约15yg、约10yg、约7. 5yg、约5yg、约3. 8yg、 约3. 75yg、约L9yg或约L5yg血凝素。
23. 如权利要求21或22所述的方法，其特征在于，所述乳液和抗原组合形成疫苗组合 物，其中所述疫苗组合物包含硫柳汞或2-苯氧基乙醇防腐剂。
24. 具有较大孔的第一膜层和较小孔的第二膜层的亲水双层滤膜在制备水包油乳液疫 苗佐剂中的应用。
25. 如权利要求24所述的应用，其特征在于，所述第一和/或第二膜层包含亲水聚醚 砜。
【专利摘要】一种用于制备水包油乳液的改良方法，涉及三个步骤：(i)制备初始乳液；(ii)微流化初始乳液以减少其液滴尺寸；和(iii)将微流化乳液滤过亲水膜。乳液可用作疫苗佐剂。
【IPC分类】A61K39-145, A61K39-12, A61K9-107, A61K39-39
【公开号】CN104688687
【申请号】CN201510144280
【发明人】G·克劳斯, R·埃斯克斯
【申请人】诺华股份有限公司
【公开日】2015年6月10日
【申请日】2010年12月3日
【公告号】CA2780425A1, CA2780425C, CN102858322A, CN102858322B, EP2343052A1, EP2343052B1, EP2506832A2, EP2506832B1, EP2601933A1, EP2601933B1, US20130129786, WO2011067669A2, WO2011067669A3