睡莲花α-糖苷酶抑制活性提取物及其组合物的医药用途和制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明属医药技术领域，具体涉及一种睡莲花α -糖苷酶抑制活性提取物及其组 合物的制备方法以及它在降血糖、减肥、降血脂、治疗糖尿病等方面的医药用途。
【背景技术】
[0002] 睡莲，（拉丁学名：Nymphaea tetragona Georgi)，又称子午莲、水序花，是毛茛目 睡莲科植物。多年生水生草本；根状茎肥厚。叶二型：浮水叶圆形或卵形，基部具弯缺，心 形或箭形，常无出水叶；沉水叶薄膜质，脆弱。花大形、美丽，浮在或高出水面；萼片近离生； 花瓣白色、蓝色、黄色或粉红色，成多轮，有时内轮渐变成雄蕊；药隔有或无附属物；心皮环 状，贴生且半沉没在肉质杯状花托，且在下部与其部分地愈合，上部延伸成花柱，柱头成凹 入柱头盘，胚珠倒生，垂生在子房内壁。浆果海绵质，不规则开裂，在水面下成熟；种子坚硬， 为胶质物包裹，有肉质杯状假种皮，胚小，有少量内胚乳及丰富外胚乳。从东北至云南，西至 新疆皆有分布；朝鲜，日本，印度，苏联，北美也有。生于池沼中。根状茎食用或酿酒，又入 药，能治小儿慢惊风；全草可作绿肥。
[0003] 秦汉时代，先民们就将睡莲作为滋补药用，荷花药用在中国也有2 000年以上的 历史。《本草纲目》中记载说荷花，莲子、莲衣、莲房、莲须、莲子心、荷叶、荷梗、藕节等均可药 用。荷花能活血止血、去湿消风、清心凉血、解热解毒。莲子能养心、益肾、补脾、涩肠。莲须 能清心、益肾、涩精、止血、解暑除烦，生津止渴。荷叶能清暑利湿、升阳止血，减肥瘦身，其中 荷叶成分对于清洗肠胃，减脂排瘀有奇效。藕节能止血、散瘀、解热毒。荷梗能清热解暑、通 气行水、泻火清心 本发明通过大规模、系统地活性筛选，意外地发现维吾尔药睡莲花提取物及其部分化 学组分，具有显著地α -糖苷酶抑制活性，该活性提取物及其组合物有望应用于降血糖、减 肥、降血脂、糖尿病等方面。
【发明内容】
[0004] 本发明所解决的技术问题是提供一种睡莲花提取物。
[0005] 本发明还提供了以睡莲花提取物为主要活性成分的组合物。
[0006] 本发明同时提供了睡莲花提取物及其组合物的制备和应用。
[0007] 本发明是通过如下技术方案实现的： 维吾尔药睡莲花经甲醇超声提取，提取液浓缩后，用硅胶（SiO2)柱分离，上样后的硅胶 柱，用石油醚-丙酮混合溶剂梯度洗脱(石油醚-丙酮，比例见表1 )，各石油醚-丙酮比例混 合溶剂洗脱液，浓缩，干燥后，利用体外筛选体系测试其α -糖苷酶抑制活性，意外地发现 先用石油醚-丙酮混合溶剂(石油醚-丙酮，100:50,体积比）洗脱，继用纯甲醇洗脱得到的 纯甲醇洗脱液经回收有机溶剂，干燥，即为α-糖苷酶抑制活性提取物。而其他比例的洗脱 部位，没有α-糖苷酶抑制活性的作用。特别地，优选为先用石油醚-丙酮混合溶剂(石油 醚-丙酮，100:50,体积比）洗脱15倍柱体积，继用纯甲醇洗脱25倍柱体积，洗脱液干燥后 所得提取物即为本发明α-糖苷酶抑制活性的提取物。α-糖苷酶抑制活性的提取物可以 通过以上方法得到富集，从而与其他杂质类成分分离开。该睡莲花α-糖苷酶抑制活性提 取物从未见文献报道，其薄层谱色谱（TLC)分析表征如图1，TLC分析条件：GF254硅胶板， 展开系统：石油醚：乙酸乙酯：丙酮（6:1:1)显色方法：香草醛-硫酸显色。
[0008] 具体，发现过程如下： 1、睡莲花经甲醇超声提取物的制备 取维吾尔药睡莲花20g，经100 mL甲醇超声提取15 min，提取液浓缩后，得提取物 SN0042A，样品1.4223g，留样：0. 0707g，上样量1.3516g，拌样硅胶1.4 g，空白硅胶10 g，石 油醚-丙酮系统洗脱。
[0009] 2、石油醚-丙酮混合溶剂梯度洗脱方法和结果 取维吾尔药睡莲花20g，经100 mL甲醇超声提取15 min，提取液浓缩后，得提取物 SN0042A，I. 4223g，上柱，甲醇溶解，共用甲醇15 mL。上硅胶柱色谱，拌样硅胶I. 4g，空白硅 胶l〇g，玻璃柱内径2cm，石油醚-丙酮系统梯度洗脱(条件见表1)，柱体积25 mL，每个梯度 洗脱200mL，得到，各个浓度提取洗脱液的洗脱物，回收溶剂，即得，石油醚：丙酮梯度洗脱 提取物，TLC分析结果见图2, TLC分析条件：GF254硅胶板，展开系统：石油醚：乙酸乙酯：丙 酮（6:1:1)显色方法：香草醛-硫酸显色。
[0010] 表 1
【主权项】
1. 一种睡莲花提取物，其特征为睡莲花经溶剂超声提取，提取液浓缩后，用硅胶柱分 离，上样后的硅胶柱，先用体积比为100:50的石油醚-丙酮混合溶剂洗脱，继用纯甲醇洗 脱，用纯甲醇洗脱的洗脱液经回收溶剂，干燥，即为该提取物。
2. 如权利要求1所述睡莲花提取物，其特征为，提取所用溶剂可以为甲醇、石油醚、水、 丙酮、氯仿、乙酸乙酯、甲醇水混合溶剂或乙醇水混合溶剂，最优条件为甲醇或95%乙醇。
3. 如权利要求1所述睡莲花提取物，其特征为睡莲花经溶剂超声提取，提取液浓缩后， 用硅胶柱分离，上样后的硅胶柱，先用石油醚-丙酮混合溶剂(石油醚-丙酮，100:50,体积 比）洗脱，继用纯甲醇洗脱，用纯甲醇洗脱的洗脱液经回收有机溶剂，干燥，即为该提取物。
4. 如权利要求1-3任何一项所述的一种维吾尔药睡莲花提取物，其特征为，用于洗脱 的石油醚-丙酮混合溶剂、甲醇的洗脱体积为2-50倍柱体积。
5. 如权利要求1所述提取物的制备方法，其特征为：睡莲花经溶剂超声提取，提取液浓 缩后，用硅胶柱分离，上样后的硅胶柱，先用石油醚-丙酮混合溶剂(石油醚-丙酮，100:50， 体积比）洗脱2-50倍柱体积，继用纯甲醇洗脱2-50倍柱体积，用纯甲醇洗脱的洗脱液经 回收有机溶剂，干燥，即为该有效部位；以上条件最优为先用石油醚-丙酮混合溶剂(石油 醚-丙酮，100:50,体积比）洗脱15倍柱体积，继用纯甲醇洗脱25倍柱体积。
6. -种药物组合物，其特征在于，包含权利要求1-5任何一项所述的维吾尔药睡莲花 提取物和药学上可接受的载体。
7. -种药物制剂，其特征在于，包含权利要求1-5任何一项所述的睡莲花提取物或权 利要求6所述的药物组合物。
8. 如权利要求7所述的药物制剂，其特征在于，所述的制剂为固体分散体、环糊精包合 物、分散片。
9. 如权利要求1-5任何一项所述提取物或权利要求6所述的组合物或权利要求7所述 的药物制剂在制备〇·-葡萄糖苷酶抑制活性药物中的应用。
10. 如权利要求9所述的应用，其特征在于，所述的葡萄糖苷酶抑制活性，可用于降 血糖、减肥、降血脂、治疗糖尿病等方面的医药用途。
11. 如权利要求1-5任何一项所述的睡莲花提取物，其特征在于，用TLC法检测，其色谱 条件为=GF254硅胶板，展开系统：石油醚：乙酸乙酯：丙酮=6:1:1 ;显色方法：香草醛浓硫 酸显色。
【专利摘要】本发明属医药技术领域，具体涉及一种睡莲花α-糖苷酶抑制活性提取物及其组合物的制备方法以及它在降血糖、减肥、降血脂、治疗糖尿病等方面的医药用途。所述的提取物通过如下方法获得：先用石油醚-丙酮混合溶剂（石油醚-丙酮，100:50，体积比）洗脱，继用纯甲醇洗脱，用纯甲醇洗脱的洗脱液经回收溶剂，干燥，即为该α-糖苷酶抑制活性提取物。
【IPC分类】A61P3-10, A61P3-06, A61K36-62, A61P3-04
【公开号】CN104825547
【申请号】CN201510058747
【发明人】王金辉, 热娜·卡斯木, 黄健, 李国玉, 王雁丽, 王新玲, 马庆东, 张珂, 毛晓峰, 窦雪
【申请人】新疆医科大学
【公开日】2015年8月12日
【申请日】2015年2月4日