汉防己甲素在制备药物中的用图
【技术领域】
[0001] 本发明涉及中药制剂领域，特别涉及汉防己甲素在制备药物中的用途。
【背景技术】
[0002] 慢性周围血管闭塞性疾病如下肢动脉硬化闭塞症、血栓闭塞性脉管炎、糖尿病足 等患者逐年增多。当病情加重而无法采用血流重建（bypass)、血管成形（angioplasty) 等方法治疗时患者往往面临截肢的危险。近年来治疗性血管新生（therapeutic neovascularization)的兴起，提供了治疗此类疾病的新思路。血管内皮生长因子 (vascularendothelialgrowthfactor，VEGF)作为特异性血管生长因子，可在体内诱导 血管新生，在治疗性血管新生中起着重要作用。
[0003] 汉防己甲素（tetrandrine，Tet)，其结构式为：
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[0005] 该化合物的分子式为C38H42O6N2，无色针状结晶，分子质量622,几乎不溶于水、石油 醚，溶于乙醚。该化合物为一双苄基异喹啉生物碱，主要存在于防己科多年生木质藤本植物 粉防己（StephaniatetrandraS.Moore)的根中，是一种具有抗炎、解热、止痛的传统中药。
[0006] 目前已知汉防己甲素的药理作用有：⑴具有抗肿瘤作用；（2)具有降血压、抗心 肌缺血和心律失常作用；(4)具有抗矽肺作用；(6)具有抗脂质过氧化作用；（7)防止四氧 嘧啶升高血糖的作用；(8)具有镇痛作用。
【发明内容】
[0007] 发明人意外地发现，汉防己甲素可以上调血管内皮生长因子（VEGF)的表达，并基 于此完成了本发明。
[0008] 本发明公开了汉防己甲素在制备用于治疗或预防慢性周围血管闭塞性疾病的药 物中的用途。
[0009] 本发明公开了汉防己甲素在制备用于治疗或预防下肢动脉硬化闭塞症的药物中 的用途。
[0010] 本发明公开了汉防己甲素在制备用于治疗或预防血栓闭塞性脉管炎的药物中的 用途。
[0011] 本发明公开了汉防己甲素在制备用于治疗或预防糖尿病足疾病的药物中的用途。
[0012] 本发明公开了汉防己甲素在制备用于促进缺血组织周围侧支循环血管形成的药 物中的用途。
[0013] 本发明公开了汉防己甲素在制备用于促进内源性的血管旁路形成的药物中的用 途。
[0014] 本发明公开了汉防己甲素在制备用于改善和恢复缺血组织血流的药物中的用途。
[0015] 本发明公开了汉防己甲素在制备药物中的用途。由于汉防己甲素能够促进VEGF 上调表达，而VEGF能增加血管通透性，促进血管内皮细胞增殖，诱导血管新生，因此，汉防 己甲素具有制备治疗或预防慢性周围血管闭塞性疾病的药物的用途。
【附图说明】
[0016] 为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现 有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本 发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以 根据这些附图获得其他的附图。
[0017] 图1为：汉防己甲素加入量与H9c2细胞VEGFmRNA表达的关系图；
[0018] 图2为：汉防己甲素加入量与H9c2细胞VEGF蛋白表达的关系图；
[0019] 图3A为：汉防己甲素与小鼠后下肢血流关系图；
[0020] 图3B为：激光多普勒灌注成像仪扫描小鼠后下肢血流图；
[0021] 图4A为：汉防己甲素与小鼠毛细血管密度关系图；
[0022] 图4B为：焚光标记小鼠缺血后下肢毛细血管密度图；
[0023] 图5A为：汉防己甲素与小鼠左室射血分数关系图；
[0024] 图5B为：汉防己甲素与小鼠左室短轴缩短率关系图；
[0025] 图6A为：小鼠心肌组织石赌切片Masson's-Trichrome染色图；
[0026] 图6B为：汉防己甲素与小鼠心肌梗死面积关系图。
【具体实施方式】
[0027] 下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完 整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于 本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他 实施例，都属于本发明保护的范围。
[0028] 本发明对已知化合物汉防己甲素发掘了新的医疗用途，开拓了一个新的应用领 域。具体地，由于血管内皮生长因子（VEGF)能增加血管通透性，促进血管内皮细胞增殖，促 进血管形成。汉防己甲素可以通过上调VEGF表达，从而促进缺血组织周围侧支循环血管的 形成或内源性的血管旁路的形成，改善和恢复缺血组织血流，这些作用有利于治疗和预防 慢性周围血管闭塞性疾病。
[0029] 本领域技术人员可以理解的是，汉防己甲素来源丰富，可做成口服剂型、注射剂 型、片剂型等，使用方便，注射剂能作肌肉注射和穴位注射，可作静脉注射。
[0030] 进一步需要说明的是，本发明使用的各种术语和短语具有本领域技术人员公知的 一般含义，即便如此，本发明仍然希望在此对这些术语和短语作更详尽的说明和解释，提及 的术语和短语如有与公知含义不一致的，以本发明所表述的含义为准。
[0031] 本发明对试验中所使用到的材料以及试验方法进行一般性和/或具体的描述。虽 然为实现本发明目的所使用的许多材料和操作方法是本领域公知的，但是本发明仍然在此 作尽可能详细描述。本领域技术人员清楚，在下文中，如果未特别说明，本发明所用材料和 操作方法是本领域公知的。
[0032] 下述各实施例中所米用的汉防己甲素购自于Sigma-Aldrich，Cat.No.T2695。当 然本领域技术人员也可以通过其它的途径来获取汉防己甲素，例如，采用现有技术从粉防 己植物中提取，本发明在此不作具体限定。采用其它途径获得的汉防己甲素进行下述各实 施例，只要给药量拆算成等当量即可。
[0033]H9c2 细胞为H9c2 (2-1)ATCCKNumber:CRL-1446?。
[0034]LectinI源自Vectorlaboratories，Cat.No.L-IlOO0
[0035]SU5416 源自Sigma-Aldrich，Cat.No.S8442 ;SU5416 是血管内皮细胞生长因子受 体2 (VEGFR2)选择性阻断剂。目前已经公认，VEGF对内皮细胞的增殖、分化作用是由VEGFR2 介导的。
[0036] AAV-solubleFlt是腺相关病毒表达的可溶性VEGF受体1，由美国西北大学芬伯 格心血管研宄所覃刚健教授惠赠。AAV-solubleFlt是本领域技术人员公知的VEGF的阻断 剂。
[0037]Masson's-Trichrome源自Solarbio,Cat.No.G1340。
[0038] 实施例一汉防己甲素对H9c2细胞VEGF的mRNA表达的影响
[0039]H9c2细胞以含10 %胎牛血清（FBS)的DMEM完全培养基常规培养，显微镜下镜 检80 %的FBS融合时，用0. 25 %胰酶消化，以每孔5XIO5个细胞接种于6孔板中，每孔接 种体积相同，并置于37°C，5%CO2培养箱中培养4