一种抗弓形虫组方药物及其筛选方法_3

文档序号:9280817阅读:来源:国知局
[0079] 实施例6药物治疗方案试验二
[0080] (1)试验分组:实验小鼠随机分为12组,包括10个药物组、感染不治疗组(阳性 对照组)、空白对照组,每组32只小鼠。试验观察期为30天。
[0081] (2)感染剂量:PYS株速殖子I X IO3个/只小鼠。
[0082] (3)试验药物及给药方法见表10 :
[0083] 表10试验二的药物分组及给药方法
[0085] 实施例7试验二各组小鼠存活时间及保护率比较
[0086] 从小鼠感染开始观察各组小鼠存活情况,并记录死亡情况,小鼠存活30天以上的 存活时间以30天计。试验二各组小鼠的平均存活时间与保护率见表11。
[0087] 表11试验二小鼠平均存活时间与保护率
[0090] 注:同列差异用a、b、c表示,数字右上角所标字母相同表示差异不显著,不同表示 差异显著(P〈〇. 05),同行不作比较。
[0088]
[0089]
[0091] 在试验二中,阳性对照组小鼠于感染后第9天全部死亡,平均存活时间为8. 17 天。药物组七的小鼠平均存活时间为27. 9天,与阳性对照组及空白对照组均差异显著 (p〈0. 05);保护率达90%,与阳性对照组保护率差异显著(p〈0. 05)。其余9个药物组的小 鼠保护率均达到100%,药物保护小鼠存活作用显著。
[0092] 实施例8试验二各组小鼠腹水虫体计数比较
[0093] 小鼠感染后第3天、5天、7天、10天、17天、24天、30天各组随机剖杀小鼠3只,抽 取剖杀小鼠的腹水,腹水用白细胞计数板计数,腹水虫体计数数据分析结果见表12、表13。
[0094] 表12试验二小鼠腹水虫体计数数据分析
[0095]
[0096]
[0097] 注:同列差异用a、b、c表示,数字右上角所标字母相同表示差异不显著,不同表示 差异显著(P〈〇. 05),同行不作比较。
[0098] 表13试验二小鼠腹水虫体计数数据分析
[0099]
[0100] 注:同列差异用a、b、c、d表示,数字右上角所标字母相同表示差异不显著,不同表 示差异显著(P〈〇. 05),同行不作比较。
[0101] 从表12、表13可知,阳性对照组随感染时间的增加,腹水虫体数量增多。各药物组 的腹水虫体数量与阳性对照组差异显著(P〈〇. 05)。药物组六、组七、组八、组九、组十在感 染后第17天的腹水虫体数量比前5个组方药物组高;到感染后24天镜检未见到弓形虫虫 体。在感染后第7天,多数组的腹水虫体数量处于高峰时,组方药物组三、组四、组五的腹水 虫体数量比其它感染组少,说明抗弓形虫的作用比其它组迅速。组方药物组四与组五比较, 组五在除感染后第7天以外,其腹水虫体数量均比药物组四少。
[0102] 实施例9试验二特异PCR检测结果
[0103] 取感染后第3天、5天、7天、10天、17天、24天、30天的各组小鼠血液、肝脏、肺脏、 心脏、脾脏及第30天的脑组织样品进行PCR检测。检测结果见表14~表16。
[0104] 表14各组感染后第3天、第5天PCR检测结果
[0106] 注:" + "表示PCR检测结果阳性;"一"表示PCR检测结果阴性。
[0107] 表15各组感染后第10天、17天PCR检测结果
[0108]
[0109] 注:" + "表示PCR检测结果阳性;"一"表示PCR检测结果阴性
[0110] 表16各组感染后第24天、30天PCR检测结果
[0111]
[0112] 注:" + "表示PCR检测结果阳性;"一"表示PCR检测结果阴性
[0113] 从表14~表16中可知,各组在感染后第7天PCR能扩增出弓形虫特异条带的样 品最多(结果见附图5~附图8),其中腹水虫体数量较少的组二、组四、组五的各样品中 PCR未扩增到特异条带;到试验结束时,药物组八、组九的脑组织PCR能扩增出弓形虫特异 条带,组一、组二、组八、组九有部分样品PCR能扩增到特异条带。
[0114] 实施例10试验二小鼠脾指数
[0115] 试验二各组小鼠的脾指数见表17、表18。
[0116] 表17试验二小鼠脾指数数据分析
[0119] 注:同列差异用a、b、c、d表示,数字右上角所标字母相同表示差异不显著,不同表 示差异显著(P〈〇. 05),同行不作比较。
[0120] 表18试验二小鼠脾指数数据分析
[0122] 注:同列差异用a、b、c、d表示,数字右上角所标字母相同表示差异不显著,不同表 示差异显著(P〈〇. 05),同行不作比较。
[0123] 从表17、表18可知,各药物组在不同天数均有出现过与空白对照差异显著,说明 感染弓形虫的小鼠即使用药,机体的免疫水平均有发生变化;到感染后第17天除药物组 一、组三与空白对照组差异显著外,其余各组与空白对照组无显著差异;到试验结束时,各 药物组小鼠的脾指数与空白对照组无显著差异。
[0124] 实施例11试验二小鼠胸腺指数
[0125] 胸腺指数与脾指数计算方法相似,为小鼠的胸腺重量与体重的比值。各药物组的 胸腺指数见表19、表20。
[0126] 表19试验二小鼠胸腺指数数据分析
[0129] 注:同列差异用a、b、c表示,数字右上角所标字母相同表示差异不显著,不同表示 差异显著(P〈〇. 05),同行不作比较。
[0130] 表20试验二小鼠胸腺指数数据分析
[0131]

[0132] ^主:同列差异用a、b、c、d表示,数字右上角所标字母相同表示差异不显著,不同表 示差异显著(P〈〇. 05),同行不作比较。
[0133] 从表19、表20可知,小鼠从感染后第3天到第5天,除个别药物组外,多数药物组 的小鼠胸腺指数与阳性对照组及空白对照组差异显著(P < 0. 05);到感染后第7天,除药 物组五外,各药物组的的小鼠胸腺指数与阳性对照组及空白对照组无显著差异差异;到试 验结束时,各药物组小鼠的胸腺指数与空白对照组无显著差异。
[0134] 试验二主要考察了组方药物抗弓形虫感染的效果。药物组一至组五均为组方药物 组,综合以上几个指标结果显示:5个组方药物均能有效治疗小鼠实验弓形虫病,对小鼠的 保护率均达到100%;组方药物组三(磺胺间甲氧嘧啶+乙胺嘧啶+TMP)与组五(复方磺胺 甲噁唑+乙酰螺旋霉素)具有相对较好的抗弓形虫效果。因此,本研究选取药物组三(磺 胺间甲氧嘧啶+乙胺嘧啶+TMP)及组五(复方磺胺甲噁唑+乙酰螺旋霉素)两个组方药物 用于下一步人工感染猪弓形虫病的治疗。
[0135] 实施例12小鼠和猪弓形虫病动物模型建立
[0136] 将液氮保种的PYS株速殖子在小鼠体内连续复苏三代,腹腔接种SPF昆明小鼠,接 种72h后,颈椎脱白法处死小鼠,适量生理盐水冲洗腹腔,取出洗涤液,适当稀释后用白细 胞计数板计数。小鼠感染弓形虫以腹腔注射IX IO3个速殖子/只,腹水以生理盐水稀释成 5 X IO3个速殖子/mL,每只小鼠接种0. 2mL,注射前混匀。猪感染弓形虫以腹腔注射I X 10 7个速殖子/头,腹水以生理盐水稀释成2 X IO6个速殖子/mL,每头猪感染5mL,注射前混匀。 速殖子在体外的时间不超过2h。
[0137] 实施例13药物治疗试验方案
[0138] (1)小鼠实验弓形虫病的治疗方案
[0139] 试验分组:实验小鼠随机分为4组,包括2个药物组、感染不治疗组(阳性对照 组)、空白对照组,每组22只小鼠。试验观察期为20天。
[0140] 感染剂量:PYS株速殖子I X IO3个/只小鼠。
[0141] 试验药物及给药方法见表21 :
[0142] 表21小鼠模型的治疗药物及给药方法
[0143]
[0144] (2)人工感染猪弓形虫病的治疗方案
[0145] 试验分组:将实验猪随机分为4组,其中2个药物组、感染不治疗组(阳性对照 组)各3头,空白对照组2头。试验观察期为20天。
[0146] 感染剂量:PYS株速殖子I X IO7个/头。
[0147] 试验药物及给药方法见表22。
[0148] 表22猪弓形虫病的治疗药物及给药方法
[0150] 实施例14小鼠模型弓形虫病治疗的试验结果
[0151] ⑴小鼠存活时间及保护率的比较
[0152] 试验观察期为20天,各组小鼠平均存活时间与保护率见表23。
[0153] 表23小鼠平均存活时间与保护率
[0154]
[0155] 注:同列差异用a、b表示,数字右上角所标字母相同表示差异不显著,不同表示差 异显著(
当前第3页1 2 3 4 
网友询问留言 已有0条留言
  • 还没有人留言评论。精彩留言会获得点赞!
1