3小时）3. 09%，易吸湿。 阳101] 实施例4 阳102] 1、500克紫背天葵用粉碎机粉碎，过40目筛。加入10升蒸馈水，煮沸提取1. 5小 时，重复提取2次，合并提取液，得16. 8升紫背天葵提取液。 阳103] 2、经测定，提取液中多糖含量为1. 19克/升，提取得率为4. 0%。
[0104] 3、紫背天葵提取液，于0.lMPa，60°C条件下减压浓缩，得浓缩液1. 6升。 阳1化]4、向浓缩液中加入8. 53升95%乙醇，使乙醇浓度达到80%，静置24小时后，布氏 漏斗抽滤，得粗多糖沉淀1。 阳106]5、上述多糖沉淀1用1. 2升蒸馈水溶解，再加入6. 4升95%乙醇，使乙醇浓度达到 80 %，静置24小时后，布氏漏斗抽滤，得多糖沉淀2。 阳107]6、上述多糖沉淀2用1升蒸馈水溶解沉淀，加入5. 33升95%乙醇，使乙醇浓度达 到80%，静置24小时后，布氏漏斗抽滤，得粗多糖沉淀3。 阳10引 7、上述多糖沉淀3用500毫升60°C热水溶解，冷却至室溫后。用蠕动累使粗多糖 溶液3毫升/分钟的流速通过D101大孔树脂层析柱（层析柱内径3. 6cm，柱床高度100cm)， 用2. 5升蒸馈水W5毫升/分钟流速洗脱，收集洗脱液。
[0109] 8、上述洗脱液，0.IMPa，60°C浓缩至0. 5升浓缩洗脱液。
[0110] 9、向上述浓缩洗脱液加入2. 67升95%乙醇，至乙醇浓度为80%，静置过夜，抽滤， 沉淀再溶于0. 5升蒸馈水，加95%乙醇重复上述步骤后，抽滤得多糖沉淀4。 阳111] 10、上述多糖沉淀4依次用100毫升丙酬、无水乙醇各洗2次，50°C真空干燥，得白 色紫背天葵多糖提取物19. 15克。
[0112] 11、上述紫背天葵多糖提取物经检测，多糖含量88. 71%，干燥失水率（105°C，3小 时）为2. 88%。纯化过程中多糖回收率为84. 97%。 阳11引实施例5
[0114] 1、500克紫背天葵用粉碎机粉碎，过80目筛。加入8升蒸馈水，煮沸提取2小时， 重复提取2次，合并提取液，得13. 5升紫背天葵提取液。
[0115] 2、经测定，提取液中多糖含量为1. 38克/升，提取得率为3. 73%。
[0116] 3、紫背天葵提取液，于0.lMPa，60°C条件下减压浓缩，得浓缩液1. 2升。
[0117]4、向浓缩液中加入6. 4升95 %乙醇，使乙醇浓度达到80 %，静置24小时后，布氏 漏斗抽滤，得粗多糖沉淀1。
[0118] 5、上述多糖沉淀1用1升蒸馈水溶解沉淀，加入5. 33升95%乙醇，使乙醇浓度达 到80%，静置24小时后，布氏漏斗抽滤，得粗多糖沉淀2。 阳119] 6、上述多糖沉淀2用500毫升60°C热水溶解，冷却至室溫后。用蠕动累使粗多糖 溶液3毫升/分钟的流速通过D101大孔树脂层析柱（层析柱内径3. 6cm，柱床高度100cm)， 用4升蒸馈水W5毫升/分钟流速洗脱，收集洗脱液。
[0120] 7、上述洗脱液，于0.lMPa，60°C条件下浓缩至0.5升浓缩洗脱液。 阳12U 8、向上述浓缩洗脱液加入2. 67升95%乙醇，至乙醇浓度为80%，静置过夜，抽滤， 得多糖沉淀3。 阳122] 9、上述多糖沉淀3依次用100毫升丙酬、无水乙醇各洗2次，1~5Pa，30°C真空干 燥，得白色紫背天葵多糖提取物18. 84克。 阳123] 10、上述紫背天葵多糖提取物经检测，多糖含量85. 42%，干燥失水率（105°C，3小 时）为2. 63%。纯化过程中多糖回收率为86. 38%。 阳124] 实施例6
[01巧]1、160克紫背天葵用粉碎机粉碎后过60目筛，加入3. 2升蒸馈水，浸泡6小时后， 煮沸提取1. 5小时，重复提取3次，合并得到8. 4升紫背天葵提取液。 阳1%] 2、经测定，提取液中多糖含量为0. 82克/升，提取得率为4. 31 %。 阳127] 3、紫背天葵提取液，于0.lMPa，60°C条件下减压浓缩，得浓缩液0. 8升。 阳12引 4、向浓缩液中加入4. 26升95 %乙醇，使乙醇浓度达到80 %，静置24小时后，布氏 漏斗抽滤，得粗多糖沉淀1。
[0129] 5、上述多糖沉淀1用0.8升蒸馈水溶解沉淀，加入4. 26升95%乙醇，使乙醇浓度 达到80%，静置24小时后，布氏漏斗抽滤，得粗多糖沉淀2。
[0130] 5、上述多糖沉淀2用0.5升蒸馈水溶解沉淀，加入2. 67升95%乙醇，使乙醇浓度 达到80%，静置24小时后，布氏漏斗抽滤，得粗多糖沉淀3。 阳131] 6、上述多糖沉淀3用400毫升60°C热水溶解，冷却至室溫后。用蠕动累使粗多糖 溶液3毫升/分钟的流速通过D101大孔树脂层析柱（层析柱内径3. 6cm，柱床高度100cm)， 用2. 4升蒸馈水W5毫升/分钟流速洗脱，收集洗脱液。
[0132] 7、上述洗脱液，于0.IMPa，60°C条件下浓缩至0. 2升浓缩洗脱液。
[013引 8、向上述浓缩洗脱液加入1. 07升95%乙醇，至乙醇浓度为80%，静置过夜，抽滤， 得多糖沉淀4。
[0134] 9、上述多糖沉淀4依次用50毫升丙酬、无水乙醇各洗2次，1~5Pa，42°C真空干 燥，得白色紫背天葵多糖提取物6. 58克。
[0135] 10、上述紫背天葵多糖提取物经检测，多糖含量88. 53%，干燥失水率（105°C，3小 时）为2. 76%。纯化过程中多糖回收率为84. 57%。 阳136] 实施例7
[0137] 胸腺肤-紫背天葵多糖提取物制成肠溶胶囊剂，采用3#胶囊填装，每粒胶囊填充 200毫克。
[0138] 每粒胶囊中，胸腺肤干粉和紫背天葵多糖提取物干粉按一定比例填充，总量控制 在100毫克，考察了甘露糖和淀粉比例对充填粉流动性（休止角）的影响，结果见表1。
[0139] 休止角（a)的测定方法：将漏斗固定于水平放置的绘图纸上，漏斗出口与绘图纸 距离为H，将充填粉倒入漏斗，直到漏斗出口与圆锥尖端接触，量取圆锥体底部直径（2R)与 圆锥体的高，计算休止角：
[0140] a=arctg化/时，其中R为底盘半径。 阳141] 表1甘露糖和淀粉含量对充填粉休止角的影响 阳 142]
阳143] 注：制药可接受粉体休止角应小于40° .
[0144] 从制剂角度讲，休止角要求小于40°，流动性才符合要求。根据表1可知，处方3-7 的流动性较好，适合于胶囊填充。甘露糖价格较高，从节约成本角度考虑，可选择4, 5两个 处方。
[0145] 采用处方4中的甘露醇和淀粉比例，改变胸腺肤和紫背天葵多糖的比例，获得处 方6、7,充填粉休止角仍复合制剂要求。 阳146] 实施例8--动物实验 阳147] 1、实验方案
[0148] 健康雄性SPF级ICR小鼠96只，体重20 +2g，按体重平均分为8组，每组12只。 实验组设置和给药方案见表2。药30天后，进行小鼠腹腔巨隧细胞吞隧鸡红细胞试验。
[0149] 表2药效协同实验给药方案 阳1加]
阳151]注：空白对照组给予等量生理盐水。 阳152] 2、数据分析及协同增效作用判定 阳153] 实验数据采用SPSS19. 0进行单因素方差分析，P< 0. 05表示差异显著。
[0154] 实验结束后，对各组巨隧细胞吞隧能力、T淋己细胞转化率和NK细胞活性进行Q检 验，分析胸腺肤和紫背天葵多糖的协同作用。判定方法如下： 阳155]Q=E多化多糖/巧多化巧多糖-E多化XE多糖）............E为药效指标观测值 阳156] 0. 5<Q<0. 85,括抗作用；Q<0. 5,明显括抗 阳157] 0. 85<Q<1. 15单纯相加
[0158] 1. 15<Q<20,协同增强；Q> 20,显著增强。 阳159] 3、实验结果
[0160] 各组腹腔巨隧细胞吞隧能力见表2。多糖高剂量组和胸腺肤组的巨隧细胞吞隧能 力显著高于对照组（P< 0. 05)，证明二者具有免疫增强活性。多糖组的免疫增强活性随多 糖用量的增加而升高，高剂量组显著高于低剂量组（P< 0. 05)。各多糖-多肤联合应用组 的巨隧细胞吞隧能力均显著高于相应的多糖剂量组。 阳161] 根据Q检验结果，多糖中剂量-多肤组和多糖高剂量-多肤组的Q值分别为1. 25 和1. 21，表明20mg/kg剂量的胸腺肤提取物与紫背天葵多糖（40-80mg/kg)联合用药时，有 明显的免疫增强活性。 阳16