吸光度为纵坐 标，芦丁对照品量（mg)为横坐标，绘制标准曲线。
[0028] 供试液的制备
[0029] 取总黄酮提取物约0. 2g，精密称定，加甲醇90ml，超声处理使溶解，转移入100ml 量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，得储备液，得供试液。
[0030] 精密量取储备液10ml，置100ml量瓶中，加水至刻度，摇匀，得供试液。
[0031] 精密量取供试液3ml，置25ml量瓶中，按标准曲线制备项的方法，自"加入至 6. 0ml "起，依法测定吸光度，从标准曲线上读出供试液中包含的芦丁的重量（mg)。
[0032] 总黄酮含量的计算
[0033] 按照下式计算总黄酮含量：
[0035] 其中，W为供试品溶液中包含的芦丁的重量（mg);
[0036] W。为称取的裸花紫珠总黄酮提取物的重量（mg)。
[0037] 实施例1
[0038] -、裸花紫珠浸泡及煎煮
[0039] (A)裸花紫珠与水的重量份数比为1 : 11，向裸花紫珠中加入水，常温浸泡1小 时，然后，将两者的混合物加热至10(TC，保温2小时，之后，滤渣取液（滤液1);
[0040] ⑶向工艺步骤㈧滤出的渣中以1 : 9的重量份数比加入水，并将两者混合物加 热至100°C，保温1小时，之后，滤渣取液（滤液2);
[0041] 二、液体浓缩
[0042] 将分别通过所述工艺步骤（A)和（B)制取的液体（滤液1和滤液2)混合在一起 后浓缩，直至其液体相对密度（80°C )约1. 2止，得到稠膏；
[0043] 三、吸附洗脱
[0044] 使稠膏通过经活化处理后的D101大孔吸附树脂柱，使液体中的总黄酮被树脂柱 吸附，并弃去流出液，再按蒸馏水与浓缩后液体的体积之比为约1 : 1的比例取用蒸馏水冲 洗树脂柱，弃去流出液，继按乙醇与浓缩后液体的体积之比为约1 : 1的比例分别用浓度为 50 %、75 %、95 %的乙醇清洗树脂柱，使吸附于其上的总黄酮被完全洗脱止，并收集乙醇洗 脱液，浓缩得到浓缩液；
[0045] 四、制备成品
[0046] 把步骤三得到的滤液进行喷雾干燥即可得到裸花紫珠总黄酮提取物成品，为深棕 红色粉末。
[0047] 将该成品通过高效液相色谱二极管阵列（全波长）（Waters2695高效液相色谱仪 /WaterS2478二极管阵列检测器，美国Waters)扫描进行测量，测试条件如下：
[0048] 进样次数：1 ;
[0049] 通道名称：353. Onm ;
[0050] 进样体积：20. 00 μ 1 ;
[0051] 处理通道注释：PDA 353. Onm ;
[0052] 运行时间：60. 0分钟
[0053] 结果如图1和表1所示。图1A为显示高效液相色谱（353nm)结果的光谱指数图， 图1B为显示紫外光谱扫描指数图的三维图（3D图）。
[0056] 图1和表1结果表明，保留时间约在5分钟、26分钟、28分钟、32分钟、48分钟有 吸收峰；图IB (3D图）表明5个峰在最大吸在259nm和359nm处，均为黄酮类成分的特征吸 收。
[0057] 采用前述裸花紫珠总黄酮提取物中的总黄酮含量测定方法测定总黄酮提取物中 总黄酮含量，结果表明，总黄酮提取物中总黄酮含量为85. 55wt%。
[0058] 重复进行上述裸花紫珠总黄酮提取物成品的制备，并测定总黄酮提取物中总黄酮 含量，结果表明，总黄酮提取物中总黄酮含量为约75wt%~约95wt%。
【主权项】
1. 一种裸花紫珠总黄酮提取物的制备方法，所述方法包括： (1) 、采用水作溶剂在室温浸泡裸花紫珠药材0. 5~1小时，其中裸花紫珠与水的重量 份数比为1:10至1:12,然后煎煮1. 5~4小时后过滤得滤液1 ; (2) 、将步骤（1)的滤渣加入到8至10倍的水中，煎煮0. 5~2小时后过滤得滤液2 ; (3) 、合并滤液1和2后将滤液浓缩成在80°C的液体相对密度为约1. 20的稠膏； (4) 、使稠膏通过经活化处理后的D101大孔吸附树脂柱，再按蒸馏水与稠膏的体积之 比为约0. 8:1至1:0. 8的比例取用蒸馏水冲洗树脂柱，然后按乙醇与稠膏的体积之比为约 0. 8:1至1:0. 8的比例分别用浓度为50体积％、75体积％、95体积％的乙醇清洗树脂柱，收 集乙醇洗脱液并浓缩得到浓缩液； (5) 、将浓缩液喷雾干燥，即得裸花紫珠总黄酮提取物成品。2. 根据权利要求1所述的制备方法，其中，在步骤（1)中，裸花紫珠与水的重量份数比 为约1 : 11。3. 根据权利要求1所述的制备方法，其中，在步骤⑴中，煎煮约2小时。4. 根据权利要求1所述的制备方法，其中，在步骤（2)中，使用约9倍的水。5. 根据权利要求1所述的制备方法，其中，在步骤⑵中，煎煮约1小时。6. 根据权利要求1所述的制备方法，其中，在步骤（4)中，蒸馏水与稠膏的体积之比为 约 1:1。7. 根据权利要求1所述的制备方法，其中，在步骤⑷中，乙醇与稠膏的体积之比为约 1:1。8. 用根据权利要求1-7中任一项所述的方法制得的裸花紫珠总黄酮提取物，其中总黄 酮含量为75wt%~95wt%。9. 根据权利要求8所述的裸花紫珠总黄酮提取物用于制备用于抑菌、止血、镇痛或收 敛的制剂中的用途。10. -种制剂，其包含根据权利要求8所述的裸花紫珠总黄酮提取物。
【专利摘要】本申请涉及一种裸花紫珠总黄酮提取物的制备方法，用该方法制得的裸花紫珠总黄酮提取物，根据本申请的裸花紫珠总黄酮提取物用于制备用于抑菌、止血、镇痛或收敛的制剂中的用途，和包含根据本申请的裸花紫珠总黄酮提取物的制剂。根据本申请的制备方法得到的裸花紫珠总黄酮提取物中总黄酮含量为约75wt％～95wt％。
【IPC分类】A61K36/85, A61P7/04, A61P31/04, A61P29/00
【公开号】CN105287925
【申请号】CN201410272427
【发明人】闫瑞, 陈国彪
【申请人】海南国瑞堂中药制药有限公司
【公开日】2016年2月3日
【申请日】2014年6月18日