式加入到所述注射液中，熊 胆粉、山羊角、黄芩、金银花、连翘五种提取物的总和可以称为本发明的活性物质；或者山羊 角、黄芩、金银花、连翘四种提取物以及熊去氧胆酸的总和可以称为本发明的活性物质。鉴 于各种提取物中的可用于定量的目标物可通过本发明上述各种HPLC方法测定，例如山羊 角提取物中的总氨基酸的量可以通过HPLC法测定得到，连翘提取物中的连翘总苷可以通 过HPLC法测定。因此在配制本发明注射液时，可以根据上文所述注射液中关于熊去氧胆 酸、总氨基酸、黄芩苷、总有机酸、连翘总苷五种（类）物质的重量比例关系，以及各种提取 物中这五种（类）物质的含量，向所述注射液中添加包含该五种（类）物质的提取物（即 熊总胆酸、山羊角水解物、黄芩提取物、金银花提取物、连翘提取物），对于熊总胆酸可以直 接以熊去氧胆酸的形式添加。
[0098] 另外，在配制本发明注射液时，可以先将熊总胆酸（或者直接以熊去氧胆酸添 加）、山羊角水解物、黄芩提取物、金银花提取物、连翘提取物五者按比例混合，形成一种在 本发明中可称为活性物质的物料，接着再将该物料与本发明所述丙二醇、注射用水和任选 的其它药用辅料混合，得到本发明的注射液，这种配制方式的过程中临时性地形成了一种 称之为"活性物质"的中间物料。
[0099] 或者，在配制本发明注射液时，可以直接将熊总胆酸（或者直接以熊去氧胆酸添 加）、山羊角水解物、黄芩提取物、金银花提取物、连翘提取物五者以及本发明所述丙二醇、 注射用水和任选的其它药用辅料混合按比例混合均匀，直接得到可作为本发明注射液的物 料，这种配制方式不会单独形成仅由五种活性物组配的物料，即不会单独形成如上所述的 "活性物质"。
[0100] 鉴于如本发明上文所述的，本发明注射液包括活性物质、丙二醇、注射用水和任选 的其它药用辅料。因此，在本发明中，术语"活性物质"，是指具有特定比例的熊总胆酸（或 者直接以熊去氧胆酸添加）、山羊角水解物、黄芩提取物、金银花提取物、连翘提取物五种组 分总和，该"活性物质"可以是如上所述在制备过程中具体形成了的中间物料，也可以是未 具体形成而是已经将构成它的五种组分直接与药用辅料混合。即，术语"活性物质"，是指具 有特定比例的熊总胆酸（或者直接以熊去氧胆酸添加）、山羊角水解物、黄芩提取物、金银 花提取物、连翘提取物五种组分的总称。
[0101] 在本发明注射液中，含有特定量的丙二醇。特别是，本发明注射液其每1ml中包含 丙二醇的量为50~250mg，例如60~225mg，例如70~200mg，例如80~180mg。丙二醇 在注射液中的含量是可以通过现有技术的方法容易确定的，例如可以照2010年版中国药 典二部1190页所载的品种"丙二醇"的【含量测定】项下的方法测定，即该药典1190页右 栏第12-19行所载的气相色谱法测定。在本发明下面的具体实验中，均采用该GC法测定本 发明得到的注射液中的丙二醇含量，结果显示该含量与制备过程中丙二醇的理论投料量接 近，均在理论投料量的99~101 %的范围内。
[0102] 此外，本发明中药组合物特别是以注射液的形式提供本发明组合物具有清热、化 痰、解毒的功效，在临床上可用于风温肺热病痰热阻肺证，症见：发热、咳嗽、咯痰不爽、咽喉 肿痛、口渴、舌红、苔黄；肺炎早期、急性支气管炎、慢性支气管炎急性发作以及上呼吸道感 染属上述证候者。
【附图说明】
[0103]图1是本发明注射液的总氨基酸的典型指纹图谱。图中各峰号对应的成分如下： 1、天冬氨酸，2、谷氨酸，3、丝氨酸，4、甘氨酸，5、苏氨酸，6、丙氨酸，7、缬氨酸，8、苯丙氨酸， 9、异亮氨酸，10、亮氨酸，11、脯氨酸。
[0104]图2是本发明注射液的总有机酸的典型指纹图谱。图中各峰号对应的成分如下： 1、新绿原酸，2、连翘酯苷D，3、绿原酸，4、隐绿原酸，5、咖啡酸，6、野黄芩苷，7、3, 4-二咖啡 酸酰奎尼酸，8、3, 5-二咖啡酸酰奎尼酸，9、4, 5-二咖啡酸酰奎尼酸。
【具体实施方式】
[0105] 下面以具体的示例进一步描述本发明。在下面提取物制备例部分，如未另外特别 说明，制备提取物时药材的每批投料量至少lkg并且满足后面试验用试药的需要。在下面 的制备注射液组合物的实例中，如未另外说明，每一批次投料量是至少配制l〇〇〇〇ml注射 液体积的量，但描述配方时均以每lml注射液的量进行描述。下面试验中，当以熊去氧胆酸 直接投料时，熊去氧胆酸是直接从市场上购得并且由国家食品药品监督管理总局批准上市 的药用级的原料药。
[0106] 一、提取物制备例部分
[0107]制备例la:能总阳酸的制备
[0108] 照CN101890048A说明书第[0097]-[0098]段即实施例3的方法得到熊总胆酸，经 测定，其中含83. 3%的熊去氧胆酸以及11. 4%的鹅去氧胆酸（熊/鹅=7. 3 ;下面各例子 中，制得的熊总胆酸中，熊去氧胆酸含量：鹅去氧胆酸含量的比值均在5-16范围内）。
[0109]制备例lb:能总阳酸的制备
[0110] 照CN1947746B说明书第[0024]段实例方法制备熊总胆酸；接着再次重新纯化： 用乙酸乙酯溶解后向其中添加适量水以获取沉淀，真空干燥，得到熊总胆酸，其中含84. 3% 的熊去氧胆酸。
[0111]制备例lc:能总阳酸的制备
[0112] 照CN1110150A说明书第2页21-31行记载的方法来制备熊总胆酸接着再次重新 纯化：用乙酸乙酯溶解后向其中添加适量水以获取沉淀，真空干燥，得到熊总胆酸，其中含 80. 8%的熊去氧胆酸。
[0113]制备例2a:山羊角水解物的制备
[0114] 将山羊角加硫酸（8倍量，4mol/L硫酸）加热回流16小时左右，滤过，沉淀物用4 倍量的水洗涤二次，合并滤液、洗液，用16 %的石灰乳调PH值至6. 0,滤过，滤液浓缩至相对 密度为1. 04~1. 1 (60°C)，加1 %活性炭脱色，滤过，滤液搅拌下缓缓加入乙醇，使含醇量达 70%，冷藏12小时，超微过滤，回收乙醇，放凉，搅拌下加乙醇使含醇量达80%，冷藏12小 时，粗滤，超微过滤，回收乙醇，并浓缩至稠膏，60°C以下真空干燥成粉末，得山羊角水解物。
[0115] 经【HPLC含量测定法3】测定，该山羊角水解物中含有下列的氨基酸：天冬氨酸、谷 氨酸、丝氨酸、甘氨酸、苏氨酸、丙氨酸、缬氨酸、苯丙氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、脯氨酸，并且 这些氨基酸的总量（亦可称为总氨基酸量）占山羊角水解物的84. 5%，该山羊角水解物具 有如同图1所示的指纹图谱。
[0116] 补充试验发现，使用上述山羊角水解物配制含有下列组分的可作为本发明注射液 的水溶液：熊总胆酸（制备例la)6. 5mg，山羊角水解物（制备例2a)4mg，黄芩提取物（制 备例3b) 8. 9mg，金银花提取物（制备例4c) 1. 4mg，连翘提取物（制备例5a) 9. 3mg，丙二醇 l〇〇mg，氢氧化钠/盐酸适量调节使最终溶液的pH值7. 5,水适量加至lml。
[0117] 所得水溶液经【HPLC含量测定法3】测定，具有图1的色谱图，色谱图中含有下列的 氨基酸：天冬氨酸、谷氨酸、丝氨酸、甘氨酸、苏氨酸、丙氨酸、缬氨酸、苯丙氨酸、异亮氨酸、 亮氨酸、脯氨酸，并且所得图谱（脯氨酸出峰以后的色谱峰除外）与上述山羊角水解物的指 纹图谱，经计算机模拟相似度软件计算，相似度不低于0. 90,相似度达0. 95。此结果表明， 其它4种/类组分的加入不会影响混合物中总氨基酸的HPLC指纹特征。
[0118]制备例2b:山羊角水解物的制备
[0119]照CN101084924B(薛东升，2006)说明书[0027]段即实施例3的方法来制备，经 【HPLC含量测定法3】测定，该山羊角水解物中含有下列的氨基酸：天冬氨酸、谷氨酸、丝氨 酸、甘氨酸、苏氨酸、丙氨酸、缬氨酸、苯丙氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、脯氨酸，并且这些氨基酸 的总量（亦可称为总氨基酸量）占山羊角水解物的85. 7%。
[0120] 制备例2c:山羊角水解物的制备
[0121] 照CN1947746B(穆来安，2005)说明书第[0025]段的方法来制备山羊角水解物； 接着再次进行纯化：使该水解物溶解于70%乙醇中，添加活性炭至溶液浓度的0. 5%，搅拌 〇. 5小时，接着在4°C冷藏12小时，粗滤，超微过滤，浓缩除溶剂，直接干燥，得到用于本发明 的山羊角水解物。经【HPLC含量测定法3】测定，该山羊角水解物中含有下列的氨基酸：天 冬氨酸、谷氨酸、丝氨酸、甘氨酸、苏氨酸、丙氨酸、缬氨酸、苯丙氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、脯 氨酸，并且这些氨基酸的总量（亦可称为总氨基酸量）占山羊角水解物的81. 4%。
[0122]制备例3a:黄零提取物的制备
[0123] 照中华人民共和国2010年版一部391页所记载的"黄芩提取物"项下的方法制备 得到黄芩提取物，经测定，其中含85. 2%的黄芩苷。
[0124]制备例3b:黄零提取物的制备
[0125] 照CN1947746B说明书第[0026]段的方法制备得到黄芩提取物；接着溶解于热乙 醚中，过滤，降温以进行重结晶，除去溶剂，干燥，得到可用于本发明注射液的黄芩提取物。 经测定，其中含92. 2%的黄芩苷。
[0126]制备例3c:昔芩提取物的制备
[0127] 照中华人民共和国2010年版一部391页所记载的"黄芩提取物"项下的方法制备 得到提取物，接着溶解于热乙醚中，过滤，降温以进行重结晶，除去溶剂，干燥，得到黄芩提 取物，经测定，其中含91. 8 %的黄芩苷。
[0128]另外，还测定了上述制备例3a至制备例3c制得的黄芩提取物中的野黄芩苷，结果 三个提取物中黄芩苷：野黄芩苷的比值均在50-150范围内，例如制备例3a黄芩提取物中黄 芩苷：野黄芩苷=93 :1。
[0129]制备例4a:金银花提取物的制备
[0130] 取金银花，加水煎煮二次，第一次加12倍量水煎煮1小时，第二次加10倍量水，煎 煮30分钟，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度为1. 20 (70°C)，加20%石灰乳调PH值至 11，搅拌，滤过，沉淀加5倍量乙醇搅拌混悬后，用50%的硫酸调PH值至2. 0,滤过，滤液再 用40%的氢氧化钠调PH值至6. 8,滤过，滤液回收乙醇，浓缩至100ml，用正丁醇提取4次 (6〇1111、6〇1111、4〇1111、4〇1111)，分取正丁醇提取液，回收正丁醇，加水溶解，5~10°(：静置48小 时，粗滤，超微过滤，取滤液浓缩至稠膏；再次用70%乙醇溶解，用0. 5倍体积的正丁醇提取 3次，分取正丁醇提取液，回收正丁醇，加水溶解，5~1(TC静置48小时，粗滤，超微过滤，取 滤液浓缩至稠膏；60°C真空干燥，得用于本发明注射液的金银花提取物干粉。
[0131]该金银花提取物照【HPLC含量测定法4】测定，色谱图中含有下列的有机酸：绿原 酸、新绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸、3, 4-二咖啡酸酰奎尼酸、3, 5-二咖啡酸酰奎尼酸、4, 5-二 咖啡酸酰奎尼酸，并且这些有机酸的总量（亦可称为总有机酸量）占金银花提取物的 87. 3%，该金银花提取物的色谱图中包括图2所述的七种上述有机酸的色谱峰。
[0132] 补充试验发现，使用上述山金银花提取物配制含有下列组分的水溶液：熊总胆酸 (制备例la) 6. 5mg，山羊角水解物（制备例2b) 4mg，黄芩提取物（制备例3b) 8. 9mg，金银花 提取物（制备例4a) 1. 4mg，连翘提取物（制备例5a) 9. 3mg，丙二醇100mg，氢氧化钠/盐酸 适量调节使最终溶液的pH值7. 5,水适量加至lml。
[0133] 所得水溶液经【HPLC含量测定法4】测定，见图2,色谱图中含有下列的有机酸： 绿原酸、新绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸、3, 4-二咖啡酸酰奎尼酸、3, 5-二咖啡酸酰奎尼酸、 4, 5-二咖啡酸酰奎尼酸，并且所得图谱与上述金银花提取物的指纹图谱，经计算机模拟相 似度软件计算，相似度不低于〇. 90,相似度达0. 97。此结果表明，其它4种/类组分的加入 不会影响混合物中总有机酸的HPLC指纹特征。
[0134]制备例4b:金银花提取物的制备
[0135] 照CN1110150A(曹春林，1994)说明书第4页10-17行记载的方法来制备；将所得 提取物再次用70%乙醇溶解，用0. 5倍体积的正丁醇提取3次，分取正丁醇提取液，回收正 丁醇，加水溶解，5~10°C静置48小时，粗滤，超微过滤，取滤液浓缩至稠膏；60°C真空干燥， 得用于本发明注射液的金银花提取物干粉。经测定，有机酸的总量（亦可称为总有机酸量） 占金银花提取物的81. 6%。
[0136]制备例4c:金银花提取物的制备
[0137] 照CN1947746B(穆来安，2005)说明书第[0027]段的方法来制备；将所得提取物 再次用70%乙醇溶解，用0. 5倍体积的正丁醇提取3次，分取正丁醇提取液，回收正丁醇，加 水溶解，5~10°C静置48小时，粗滤，超微过滤，取滤液浓缩至稠膏；60°C真空干燥，得用于 本发明注射液的金银花提取物干粉。经测定，有机酸的总量（亦可称为总有机酸量）占金 银花提取物的88. 4%。
[0138]制备例5a:连翮提取物的制备
[0139] 参考中华人民共和国2010年版一部381页所记载的"连翘提取物"项下的方法制 备，将经喷雾干燥得到的干粉用5倍量的水溶解，加1 %活性炭脱色，滤过，滤液用正丁醇提 取4次（每次正丁醇用量为水相体积的50% )，分取正丁醇提取液，回收正丁醇，加60%乙 醇溶解，5~1(TC放置3~5天，粗滤，超微过滤，取滤液浓缩至稠膏，60°C真空干燥，得粉末 为连翘提取物。经测定，该连翘提取物中含有44. 6%的连翘总苷。
[0140]制备例5b:连翮提取物的制备
[0141] 参照CN101085043B(薛东升，2006)说明书第[0026