]段记载的方法来制备，得连翘 提取物。经测定，该连翘提取物中含有57. 3%的连翘总苷。
[0142]制备例5c:连翮提取物的制备
[0143] 将以上制备例5a所得连翘提取物再继续纯化：用5倍量的水溶解，加1%活性炭 脱色，滤过，滤液用正丁醇提取4次（每次正丁醇用量为水相体积的50% )，分取正丁醇提 取液，回收正丁醇，加60%乙醇溶解，5~10°C放置3天，粗滤，超微过滤，取滤液浓缩至稠 膏，60 °C真空干燥，得粉末为连翘提取物。经测定，该连翘提取物中含有71. 2 %的连翘总苷。
[0144]二、制备沣射液实例部分
[0145]在下面制备注射液的实例中，使用的酸碱调节剂，在必要时使用1M盐酸溶液或1M氢氧化钠溶液，并调节注射液最终的pH值至处方规定的值或范围。
[0146]沣射液例1:制备沣射液
[0147] 组分配比：
[0148]
[0149] 以上配料表中，"以制备例la投料"是指以制备例la所得产物熊总胆酸投料，投料 量为6mg;该投料的6mg熊总胆酸所含可用于定量的目标物熊去氧胆酸的量为5mg;其它物 料类似表述时亦具有类似含义。
[0150] 制法：按上述配比称取熊总胆酸、山羊角水解物、黄芩提取物、金银花提取物、连翘 提取物以及丙二醇，加至配液罐中，加水至约全量的80 %，搅拌溶解，用酸碱调节剂调节溶 液pH值至7. 5,加活性炭至药液的0. 5 %，煮沸30分钟，粗滤，三级过滤，滤液加注射用水， 调整总量至全量，必要时用酸碱调节剂再次调pH值为7. 5,超微过滤，用0. 2u微孔滤膜过 滤，灌封（5ml/瓶；下面其它实例在制备中均分装成5ml/瓶，除非另有说明），115°C热压灭 菌30min，得呈注射液的本发明中药组合物。上面灌封成5ml/支是出于本发明后续试验操 作例如进行化学试验或生物学试验时方便，在生产上可以灵活调节每瓶的灌封量，例如每 支通常可以灌封成lml、2ml、5ml、10ml、15ml、20ml、25ml。
[0151] 照本发明所述HPLC含量测定法3进行测定，该注射液具有类似于本发明图1所示 的典型液相色谱图，并且该色谱图与图1所示指纹图谱相比，脯氨酸出峰以后的色谱峰除 外，经计算机模拟相似度软件（在本发明中使用本领域技术人员常规的中药指纹图谱计算 机辅助相似度评价软件（版本2004A))计算，相似度为0.97。
[0152] 照本发明所述HPLC含量测定法4进行测定，该注射液具有类似于本发明图2所示 的典型液相色谱图，具体地是，该注射液照本发明所述HPLC含量测定法4进行测定（检测 波长为280nm)所得指纹图谱与指纹图谱2相比，经计算机模拟相似度软件（在本发明中使 用本领域技术人员常规的中药指纹图谱计算机辅助相似度评价软件（版本2004A))计算， 相似度为0.99。
[0153] 沣射液例2 :制备沣射液
[0154] 组分配比：
[0155]
[0156] 制法:按上述配比称取k总胆酸、山羊角水解物、黄芩提取物^金银花提取物、连翘 提取物，混合均匀，作为制备本发明注射液的活性物质；接着将该活性物质以及处方量的丙 二醇，加至配液罐中，参照注射液例1的方法进行后续的制备工序，得注射液。
[0157] 沣射液例3:制备沣射液
[0158] 组分配比：
[0159]
[0160] 制法：照注射液例1的方法制备，得注射液。
[0161] 沣射液例4 :制备沣射液
[0162] 组分配比：
[0163]
[0164]
[0165] 制法：照注射液例1的方法制备，得注射液。
[0166] 沣射液例5 :制备沣射液
[0167] 组分配比：
[0168]
[0169] 制法：照注射液例1的方法制备，得注射液。
[0170] 沣射液例6 :制备沣射液
[0171] 组分配比：
[0172]
[0173] 制法：照注射液例1的方法制备，得注射液。
[0174] 沣射液例7 :制备沣射液
[0175] 组分配比：
[0176]
[0177] 制法：照注射液例1的方法制备，得注射液。
[0178] 沣射液例8 :制备沣射液
[0179] 组分配比：
[0180]
[0181] 制法：照注射液例1的方法制备，得注射液。
[0182]沣射液例9:制备沣射液
[0183] 组分配比：
[0184]
[0185] 制法：照注射液例1的方法制备，得注射液。
[0186]三、沣射液的质量检杳
[0187] 1、异常毒件、讨敏反应、溶血与凝聚试验、热原、无菌检杳
[0188] 以上注射液例1至注射液例9制备得到的9批注射液，经测定，它们的异常毒性、 过敏反应、溶血与凝聚试验、热原、无菌检查均符合药典对于注射液的一般规定。
[0189]2、检测本发_沣射液中某些化学成分的含量
[0190] 本发明的注射液其每1ml中通常包含：熊去氧胆酸l-10mg，总氨基酸0. 5-7mg，黄 芩苷2-12mg，总有机酸0.l-3mg，连翘总苷0. 25-10mg;特别是每lml中通常包含：熊去氧 胆酸2_9mg，总氨基酸l_6mg，黄苳苷3-10mg，总有机酸0· 15-2.Omg，连翘总苷0· 5_9mg;特 别是每lml中通常包含：熊去氧胆酸2. 5-8mg，总氨基酸1. 2-5mg，黄苳苷4-9mg，总有机酸 0· 2-1. 8mg，连翅总苷l_8mg。
[0191] 可使用本发明上文提及的HPLC法测定注射液中的熊去氧胆酸、总氨基酸、黄芩 苷、总有机酸、连翘总苷的含量。经测定，结果显示，此五个参数测定结果均与相应注射液的 投料结果吻合，结果均在相应注射液相应目标物理论投料浓度的98~102%范围内。
[0192]3、不溶件微粒检杳
[0193] 不溶性微粒检查：照2010年版中华人民共和国药典一部附录IXR不溶性微粒检 查法中的第一法（光阻法）（简称为"光阻法"）进行。以上注射液例1至注射液例9制备 得到的9批注射液经检查，结果以每lml中含10μm及10μm以上的微粒数表示，结果显示 这9批注射液每lml中含10μm及10μm以上的微粒数均小于8个，完全符合药典最严格 的标准规定。另外还经检测，发现这9批注射液中含25μm及25μm以上的微粒均未检测 至1J[药典规定：每lml中含10μm及10μm以上的微粒不得过25粒，含25μm及25μm以 上的微粒不得过3粒]。下面的稳定性试验中以每lml中含10μm及10μm以上的微粒数 来评价。
[0194]四、沣射液的稳宙件考察
[0195] 稳定性考察方法：在避光条件下将注射液置于40°C恒温箱中放置6个月，对于每 一批次的注射液，测定其在此高温处置前（即0月）以及经此高温处置后（即6月）的相关 性质，例如熊去氧胆酸、总氨基酸、黄芩苷、总有机酸、连翘总苷的含量，不溶性微粒检查等， 比较并评价该批注射液试样在经此高温处置后的相关性质的变化情况。
[0196] 对于熊去氧胆酸、总氨基酸、黄芩苷、总有机酸、或连翘总苷的含量变化，可用含量 变化百分数（％)来评价，例如对于熊去氧胆酸，其含量变化百分数（％)计算式如下：
[0197] 熊去氧胆酸含量变化百分数（％)=
[0198] [ (6月熊去氧胆酸含量一0月熊去氧胆酸含量）+0月熊去氧胆酸含量]X100%
[0199] 其它物质的含量变化百分数亦可类似计算。该参数越接近于0则注射液中该成分 越稳定，否则呈现不稳定的现象。
[0200] 对于不溶性微粒的变化情况，可以用不溶性微粒变化倍数来评价，即评价每lml 中含10μm及10μm以上的微粒数的变化情况，该不溶性微粒变化倍数计算式如下：
[0201] 不溶性微粒变化倍数=6月不溶性微粒数+ 0月不溶性微粒数
[0202] 上式表示对于某批注射液，其在经高温处置6月后每lml注射液中含10μπι及 10μm以上的微粒数除以0月时每lml注射液中含10μm及10μm以上的微粒数。该参数 不溶性微粒变化倍数越接近于1或者低于1则注射液中以不溶性微粒数表征的稳定性越稳 定，否则呈现不稳定的现象。
[0203] 注射液例1至注射液例9制备得到的9批注射液经6个月高温处置，6月时的不溶 性微粒变化倍数和含量变化百分数（％)的检测结果见表1。
[0204]表1:
[0205]
[0206] 从以上结果可见，本发明注射液不但在物理稳定性方面，而且在化学稳定性方面 均显不有良好的稳定性。
[0207] 补充试验1:分别参照注射液例1至注射液例9的配方和方法，不同的是将其中丙 二醇替换为乙醇，得到9批注射液，分别标记为Coll至C〇19 ;照上述表1所得结果的方法 测定这些注射液的性能，结果显示：
[0208] 这9批注射液6月时不溶性微粒变化倍数均〈2. 0,显示这些注射液在以不溶性微 粒表征的物理稳定性方面是令人满意的；6月时总氨基酸、总有机酸、连翘总苷的含量变化 百分数均小于8%，显示这些注射液在以总氨基酸、总有机酸、连翘总苷表征的化学稳定性 方面是令人满意的；6月时，熊去氧胆酸含量变化百分数均在63~127%范围内，黄芩苷含 量变化百分数均在56~148%范围内，显示这些注射液在以熊去氧胆酸、黄芩苷表征的化 学稳定性方面是明显不可取的。可见，在维持熊去氧胆酸、黄芩苷化学稳定性方面，乙醇的 效果远不及本发明使用丙二醇的效果。
[0209] 补充试验2:分别参照注射液例1至注射液例9的配方和方法，不同的是将其中 1，3-丙二醇替换为甘油，得到9批注射液，分别标记为C〇21至C〇29 ;照上述表1所得结果 的方法测定这些注射液的性能，结果显示：6月时不溶性微粒变化倍数均〈1. 8 ;6月时总氨 基酸、总有机酸、连翘总苷的含量变化百分数均小于9% ;6月时熊去氧胆酸含量变化百分数 均在73~133%范围内，黄芩苷含量变化百分数均在62~141 %范围内。
[0210] 补充试验3 :分别参照注射液例1至注射液例9的配方和方法，不同的是将其中丙 二醇替换为甘油，得到9批注射液，分别标记为C〇31至C〇39 ;照上述表1所得结果的方法 测定这些注射液的性能，结果显示：6月时不溶性微粒变化倍数均〈2. 1 ;6月时总氨基酸、总 有机酸、连翘总苷的含量变化百分数均小于13% ;6月时熊去氧胆酸含量变化百分数均在 78~193%范围内，黄芩苷含量变化百分数均在67~174%范围内。
[0211] 补充试验4 :分别参照注射液例1至注射液例9的配方和方法，不同的是将其中丙 二醇用量均改为〇,得到9批注射液，分别标记为C〇41至C〇49 ;照上述表1所得结果的方 法测定这些注射液的性能，结果显示：6月时不溶性微粒变化倍数均〈1. 6 ;6月时总氨基酸、 总有机酸、连翘总苷的含量变化百分数均小于5% ;6月时熊去氧胆酸含量变化百分数均在 54~157%范围内，黄芩苷含量变化百分数均在61~144%范围内。
[0212] 补充试验5 :分别参照注射液例1至注射液例9的配方和方法，不同的是将其中丙 二醇用量均改为25mg，得到9批注射液，分别标记为C〇51至C〇59 ;照上述表1所得结果的 方法测定这些注射液的性能，结果显示：6月时不溶性微粒变化倍数均〈1. 9 ;6月时总氨基 酸、总有机酸、连翘总苷的含量变化百分数均小于7% ;6月时熊去氧胆酸含量变化百分数均 在62~184%范围内，黄芩苷含量变化百分数均在57~166%范围内。
[0213]补充试验6:分别参照注射液例1至注射液例9的配方和方法，不同的是将其中丙 二醇用量均改为55mg，得到9批注射液，分别标记为C〇61至C〇69 ;照上述表1所得结果的 方法测定这些注射液的性能，结果显示：6月时不溶性微粒变化倍数均〈2. 0 ;6月时总氨基 酸、总有机酸、连翘总苷的含量变化百分数均小于8% ;6月时熊去氧胆酸含量变化百分数均 在65~193%范围内，黄芩苷含量变化百分数均在55~173%范围内。
[0214]补充试验7:分别参照注射液例1至注射液例9的配方和方法，不同的是将其中丙 二醇用量均改为85mg，得到9批注射液，分别标记为C〇71至C〇79 ;照上述表1所得结果的 方法测定这些注射液的性能，结果显示：6月时不溶性微粒变化倍数均〈1. 8 ;6月时总氨基 酸、总有机酸、连翘总苷、熊去氧胆酸和黄芩苷含量的含量变化百分数均小于6%。
[0215]补充试验8:分别参照注射液例1至注射液例9的配方和方法，不同的是将其中丙 二醇用量均改为130mg，得到9批注射液，分别标记为C〇81至C〇89;照上述表1所得结果的 方法测定这些注射液的性能，结果显示：6月时不溶性微粒变化倍数均〈1. 9 ;6月时总氨基 酸、总有机酸、连翘总苷、熊去氧胆酸和黄芩苷含量的含量变化百分数均小于7%。
[0216]补充试验9:分别参照注射液例1至注射液例9的配方和方法，不同的是将其中丙 二醇用量均改为175mg，得到9批注射液，分别标记为C〇91至C〇99;照上述表1所得结果的 方法测定这些注射液的性能，结果显示：6月时不溶性微粒变化倍数均〈2. 2 ;6月时总氨基 酸、总有机酸、连翘总苷、熊去氧胆酸和黄芩苷含量的含量变化百分数均小于5%。
[0217]补充试验10:分别参照注射液例1至注射液例9的配方和方法，不同的是将其中 丙二醇用量均改为225mg，得到9批注射液，分别标记为ColOl至C〇109;照上述表1所得结 果的方法测定这些注射液的性能，结果显示：6月时总氨基酸、总有机酸、连翘总苷、熊去氧 胆酸和黄芩苷含量的含量变化百分数均小于5 % ;6月时