不溶性微粒变化倍数均在8. 6~ 21. 4范围内，显示这些具有较高丙二醇含量的注射液在以可见异物检出率表征的物理稳定 性方面是不能令人接受的。
[0218]补充试验11 :分别参照注射液例1至注射液例9的配方和方法，不同的是将其中 丙二醇用量均改为275mg，得到9批注射液，分别标记为Colli至C〇119 ;照上述表1所得结 果的方法测定这些注射液的性能，结果显示：6月时总氨基酸、总有机酸、连翘总苷、熊去氧 胆酸和黄芩苷含量的含量变化百分数均小于7 % ;6月时不溶性微粒变化倍数均在11. 2~ 23. 7范围内。
[0219]补充试验12:参照CN1947746B说明书[0018]至[0029]段所记载的方法，不同的 是在其中[0029]段操作中，使用1，2-丙二醇并控制其用量占最终注射液量的5%、10%、 15%，即使得最终的注射液中丙二醇的浓度为50mg/ml、100mg/ml、150mg/ml，得到三批注射 液分别标记为C〇121至C〇123 ;照上述表1所得结果的方法测定这些注射液的性能，结果显 示：三个试样6月时不溶性微粒变化倍数均在9. 5~17. 5范围内，显示这些注射液具有不 能令人接受的物理稳定性；C〇121批试样6月时总氨基酸、总有机酸、连翘总苷的含量变化 百分数均小于8%，但熊去氧胆酸和黄芩苷的含量变化百分数分别为143%和127% ;C〇122 和C〇123两批试样6月时总氨基酸、总有机酸、连翘总苷、熊去氧胆酸和黄芩苷含量的含量 变化百分数均小于9%。《CN1947746B即D1》
[0220] 以上补充试验1至补充试验12所制备得到的全部注射液，0月时检测不溶性微粒 的结果，每lml中含10μπι及10μπι以上的微粒数均小于13个，含25μm及25μm以上的 微粒数均小于1个，表明这些试样在初始状态下不溶性微粒是符合一般药品标准规定的。
[0221] 根据以上补充试验可见：使用与丙二醇类似的小分子量醇后，无法获得具有良好 化学稳定性的注射液；使用丙二醇的量过低（低于70mg/ml)时，虽然注射液的物理稳定性 是可以让人接受的，但是化学稳定性无法令人接受；使用丙二醇的量过高（高于200mg/ml) 时，虽然注射液的化学稳定性是可以让人接受的，但是物理稳定性无法令人接受。
[0222]七、牛物学试验例部分
[0223]牛物学试验例1 :本发明沣射液的解热作用研究
[0224] 取体重2~3kg健康家兔若干只，实验室温度控制在25°C左右。于试验前3d，每 日测正常肛温2次，选取体温变动不高于0. 3°C的家兔50只，随机分为5组。给药前测定3 次肛温（每30min1次），以体温平均值为基础体温。
[0225] 供试品及分组：本发明上文注射液例1至注射液例3三种注射液及市售品痰热清 注射液（国药准字Z20030054,其是由黄苓、熊胆粉、山羊角、金银花、连翘制成的用于清热、 化痰、解毒的注射液），各供试品剂量均折算成熊去氧胆酸计5mg/kg体重，用适量水溶解/ 混悬后口服灌胃给药；
[0226] 正常对照组（简称为C0NL)同法给等容积生理盐水；
[0227] 各组给药后在动物耳缘静脉注射（iv)内毒素5EU/kg。于内毒素攻击后1、2、3、4、 5h测定家兔肛温。结果见表2,各体温值仅给出均值，SD值均在±0. 2°C以内。
[0228]表 2:
[0229]
[0231] 经统计学检验，在1-5小时各测定时间点，阳性对照组和本发明各组合物组与相 对时间点的阴性对照组相比均具有显著性差异（P〈〇. 05)。由表中结果可见，本发明注射液 与具有解热作用的常用药品均具有良好的解热作用。
[0232]牛物学试验例2 :本发明沣射液的lh咳作用研究
[0233] 参考CN101890048A说明书[0063]至[0066]段所述方法，动物随机分为5组，分 别为制备本发明注射液例1~注射液例3三个给药组（各供试品剂量均折算成熊去氧胆酸 计5mg/kg体重/天，注射给药，每天1次，共5天）、磷酸可待因注射液组、正常对照组。依 法进行试验。众所周知，在该试验模型中，R值大于130%表示有止咳作用，而R值大于150 时则有显著止咳作用。
[0234] 结果，磷酸可待因注射液组R值=179. 3 %，注射液例1~注射液例3三个注射液 的R值均在165~185%范围内，表明本发明注射液具有显著的止咳作用。
【主权项】
1. 一种注射液，其包括活性物质、丙二醇、和注射用水；进一步地，其是用于清热化疲 解毒的中药或中药组合物；进一步地，其中所述活性物质是由W下物料制备得到的：熊胆 粉或熊去氧胆酸、山羊角、黄琴、金银花、连翅。2. 根据权利要求1的注射液，其特征在于： 所述熊胆粉是W熊胆粉经皂化、提纯得到的熊总胆酸的形式加入到所述注射液中的； 例如，所述熊总胆酸中包含熊去氧胆酸；例如，所述熊总胆酸中包含熊去氧胆酸和碟去氧胆 酸；例如，所述中药组合物中熊去氧胆酸的量是碟去氧胆酸的量的5-18倍，优选5-16倍； 所述山羊角是W山羊角经水解、纯化得到的山羊角水解物（本发明亦可称为山羊角提 取物）的形式加入到所述注射液中的；例如，所述山羊角水解物中含有选自下列的氨基酸： 天冬氨酸、谷氨酸、丝氨酸、甘氨酸、苏氨酸、丙氨酸、鄉氨酸、苯丙氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、 脯氨酸，该11种氨基酸称为总氨基酸； 所述黄琴是W黄琴提取物的形式加入到所述注射液中的；例如，所述黄琴提取物中包 含黄琴巧；例如，所述黄琴提取物中还包含野黄琴巧；例如，所述黄琴巧的量是野黄琴巧的 量的20~200倍，优选30-180倍，优选40-160倍，优选50-150倍； 所述金银花是W金银花提取物的形式加入到所述注射液中的；例如，所述金银花提取 物中包含选自下列的有机酸：绿原酸、新绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸、3, 4-二咖啡酸酷奎尼 酸、3, 5-二咖啡酸酷奎尼酸、4, 5-二咖啡酸酷奎尼酸，该屯种有机酸称为总有机酸； 所述连翅是W连翅提取物的形式加入到所述注射液中的；例如，所述连翅提取物中包 含连翅醋巧A和连翅巧；例如，连翅醋巧A和连翅巧二者可称为连翅总巧。3. 根据权利要求1-2的注射液，其特征在于： 其中包含：熊去氧胆酸（直接W熊去氧胆酸形式添加的或者来自熊胆粉）、总氨基酸 (来自山羊角）、黄琴巧（来自黄琴）、总有机酸（来自金银花）、和连翅总巧（来自连翅）； 或者，其每1ml中包含：或者，其每1ml中包含：或者，其每1ml中包含：_或者，其每1ml中包含丙二醇的量为50~250mg，例如60~225mg，例如70~200mg， 例如80~180mg。4. 根据权利要求1-3的注射液，其特征在于： 其中还可W任选地包括其它药用辅料，例如但不限于酸碱调节剂、渗透压调节剂、缓冲 剂、防腐剂等； 其中还包括酸碱调节剂； 其中所述酸碱调节剂选自盐酸、憐酸、硫酸、硝酸、氨氧化钢、氨氧化钟、碳酸钢、碳酸钟 等及其组合； 其中所述酸碱调节剂是盐酸和/或氨氧化钢； 其抑值为6. 5~8. 5,例如其抑值为7. 0~8. 0 ; 其抑值是通过使用酸碱调节剂调节到其规定抑范围的；或者 所述注射液是通过包括W下步骤的方法制备得到的： (i) 提供W下五种物料：熊总胆酸或熊去氧胆酸、山羊角水解物、黄琴提取物、金银花 提取物、连翅提取物，并确定各物料中的目标物的含量； (ii) 根据所述目标物在配方中的比例，分别称取步骤（i)的五种物料； (iii) 将步骤（ii)称取的五种物料与丙二醇和适量注射用水混合溶解，用酸碱调节剂 调节溶液的抑值，用水添加至全量；或者将步骤（ii)称取的五种物料混合，接着再与丙二 醇和适量注射用水混合溶解，用酸碱调节剂调节溶液的抑值，用水添加至全量； (iv) 将步骤（iii)所得药液经无菌过滤，分装到玻璃瓶中，密封，热压灭菌，即得注射 液。5. 根据权利要求1-4的注射液，其特征在于： 其中所述黄琴提取物、熊胆粉提取物W及相关提取物W及所述注射液等物料中，所含 有的化学成分，可照W下HPLC含量测定法1描述的方法进行测定： 【HPLC含量测定法1】（其可用于测定各种物料中的黄琴巧、熊去氧胆酸、碟去氧胆酸的 含量）：照高效液相色谱法（中国药典2010年版一部附录VID)测定； 色谱条件与系统适用性试验十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，W0. 〇5%Ξ氣乙酸 溶液为流动相Α，乙腊为流动相Β，按下表进行梯度洗脱；用蒸发光散射检测器；漂移管溫度 95°C;理论板数按黄琴巧峰计算，应不低于10000 ;对照品溶液的制备：精密称取黄琴巧对照品、熊去氧胆酸对照品和碟去氧胆酸对照品 (运些对照品W及本发明使用的其它对照品均可W容易地从市场购得，例如从中国药品食 品检定研究院购得）适量，加丙二醇和甲醇适量，超声使完全溶解，放冷，加甲醇稀释制成 每1ml含黄琴巧0. 5mg、熊去氧胆酸0. 6mg、碟去氧胆酸0.Img的混合溶液，即得； 供试品溶液的制备：精密量取或称取供试品适量（根据预试验确定其中分别含有与上 述对照品溶液制备过程中的相应成分相当数量级的量），置10ml量瓶中，加甲醇溶解/稀释 至刻度，摇匀，必要时过滤，即得； 测定法：分别精密吸取对照品溶液4μ1、8μ1及供试品溶液5μ1，注入液相色谱仪，测 定，用外标两点法对数方程计算含量，即得，可W算得供试品中黄琴巧、熊去氧胆酸、碟去氧 胆酸的含量；该含量通常可每mg物料中所含黄琴巧的mg数表示，表示其它物质的含量 时具有类同含义； 根据本发明的注射液，其中所述黄琴提取物W及相关提取物W及本发明注射液等物料 中所含有的化学成分特别是野黄琴巧，可照W下HPLC含量测定法2描述的方法进行测定： 【HPLC含量测定法2】（其可用于测定各种物料中的野黄琴巧）：照高效液相色谱法（中 国药典2010年版一部附录VID)测定； 色谱条件与系统适用性试验十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；W乙腊为流动相A，W0. 1 %甲酸溶液为流动相B，按下表中的规定进行梯度洗脱；检测波长为280nm;理论板数 按野黄琴巧峰计算，应不低于3000 ;_对照品溶液的制备：精密称取野黄琴巧对照品适量，加甲醇溶解并制成每1ml含25μg的溶液，摇匀，即得； 供试品溶液的制备：精密量取或称取供试品适量（根据预试验确定其中分别含有与上 述对照品溶液制备过程中的相应成分相当数量级的量），置量瓶中，加水溶解/稀释至刻 度，摇匀，必要时过滤，即得； 测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μ1，注入液相色谱仪，测定，可W算得供试品中野黄琴巧（C21H18012)的含量； 根据本发明的注射液，其中所述山羊角提取物W及相关提取物W及本发明注射液等物 料中所含有的化学成分特别是总氨基酸，可照W下HPLC含量测定法3描述的方法进行测 定： 【HPLC含量测定法3】（其可用于测定各种物料中的单一氨基酸量，特别是可用于测定 总氨基酸值）：照高效液相色谱法（中国药典2010年版一部附录VID)测定； 色谱条件与系统适用性试验：W十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂（Hypersil-ODS色谱 柱，柱长为20cm，内径为4. 6mm，粒径5μm);流动相A:取醋酸钢（Ξ个结晶水）7.OOg，加水 4000ml使溶解，加Ξ乙胺0. 8ml，四氨巧喃24ml，混匀，用2%冰醋酸溶液调节抑值至7. 2 ; 流动相B:取醋酸钢（Ξ个结晶水）10. 88g，加水800ml使溶解，用2%冰醋酸溶液调节抑值 至7. 2,加乙腊1400ml，甲醇1800ml，混匀，按下表进行梯度洗脱；0~37. 5分钟，检测波长 为338nm，37. 5分钟之后，检测波长为262nm;柱溫：35°C;理论板数按丙氨酸峰计算应不低 于 40000 ;对照品溶液的制备：精密称取天冬氨酸、甘氨酸、谷氨酸、丝氨酸、苏氨酸、苯丙氨酸、异 亮氨酸、脯氨酸、丙氨酸、鄉氨酸、亮氨酸对照品适量，置10ml量瓶中，加0.Imol/L盐酸溶液 溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品储备溶液（每1ml各含天冬氨酸、甘氨酸、谷氨酸、丝 氨酸、苏氨酸、异亮氨酸、脯氨酸、丙氨酸、鄉氨酸、亮氨酸Img，苯丙氨酸0.5mg);精密吸取 上述对照品储备溶液2ml，置10ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液（每1ml 各含天冬氨酸、甘氨酸、谷氨酸、丝氨酸、苏氨酸、异亮氨酸、脯氨酸、丙氨酸、鄉氨酸、亮氨酸 0. 2mg，苯丙氨酸 0.Img); 供试品溶液的制备：精密量取或称取供试品适量（根据预试验确定其中分别含有与上 述对照品溶液制备过程中的相应成分相当数量级的量），置量瓶中，加水溶解/稀释至刻 度，摇匀，必要时过滤，即得； 测定法：分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各1μ以注入液相色谱仪，采用1%邻 苯二甲醒（0ΡΑ)溶液与0. 5%-氯甲酸巧甲醋溶液（FM0C)计算机模拟柱前衍生化，测定并 计算上述各氨基酸的量，W及它们的总量（为总氨基酸量）； 在W上"HPLC含量测定法3"中设及到的试液和操作法可照如下方法配制或执行： 0. 4mol/L棚酸缓冲液（pHlO.。：取棚酸，配制成0. 4mol/L的溶液，用40%氨氧化钢溶 液调节抑值至10. 2,即得（本液需冷藏）； 1%邻苯二甲醒（0PA)溶液：称取邻苯二甲醒（0PA)80mg，加棚酸缓冲液（P化0. 2)7ml， 乙腊1ml，琉基丙酸125μ1，混匀，即得（本液需冷藏）； 0.5%-氯甲酸巧甲醋（尸10〇溶液：称取一氯甲酸巧甲醋（尸10〇50111邑，用乙腊适量使 溶解，并稀释至10ml(本液需冷藏）； 柱前衍生化反应：供试品溶液和对照品溶液在抑10. 2的棚酸缓冲液中首先和0PA反 应，再用FM0C进行衍生； 柱前衍生化进样程序（瓶1~5分别为0PA、FM0C、水、棚酸盐缓冲液、水）：从瓶3吸 取ομ1 (水，清洗针头）；从瓶4吸取5μ1 (棚酸盐缓冲液）；从瓶3吸取ομ1 (水，清洗针 头）；从瓶1吸取1μ1 (ΟΡΑ);从瓶3吸取0μ1 ( 7心清洗针头）；吸取样品1μ1 ;从瓶3吸 取0μ1 (水，清洗针头）；"在空气中"混合7μ1，10次；从瓶2吸取1μ1 (FMOC);从瓶3吸 取0μ1 (水，清洗针头）