脂质体溶液按1:1的体积比混匀，置于摇床20°C，10rmp，孵育2h，即得磁性尼莫地平脂质体。
[0025]应用透射电子显微镜对磁性尼莫地平脂质体进行形貌表征，如图1所示，磁性尼莫地平脂质体的直径为100?200nm左右，形貌规则，并且可观察到脂质体表面有黑色磁性粒子。
[0026]实施例2
[0027]取2mg尼莫地平、50mg大豆卵磷脂和1mg胆固醇磁力搅拌溶解于4mL无水乙醇中，即得脂质乙醇溶液。将脂质乙醇溶液逐滴滴入45°C的1mL水化介质磷酸缓冲液(0.1Μ，ρΗ6.5，)中，滴加过程中磁力搅拌器缓慢搅拌，搅拌1.5h去除无水乙醇，得到尼莫地平纳米脂质体溶液，4°C保存备用；
[0028]将FeSO4.7H20和FeCl3.6H20按摩尔比为1: 2的比例溶于超纯水中。加入0.1 1g聚乙二醇-2000，50°C水浴超声下滴加lmol/L NaOH溶液，直至溶液pH为11。将溶液置于80°C水浴熟化15min，磁分离，水和乙醇交替洗涤至溶液中无Cl—，将溶液50mT真空，-103°C冷冻干燥48h，得到0.8g固态聚乙二醇-2000修饰的Fe304纳米粒子。
[0029]将2mgFe3O4纳米粒子溶于ImL超纯水中超声分散，再与上述尼莫地平纳米脂质体溶液按I: 2的体积比混匀，置于摇床25°C，IlOrmp，孵育3h，即得磁性尼莫地平脂质体。
[0030]应用EDAX能谱仪对磁性尼莫地平脂质体进行表征，如图2所示，能谱中出现C、0、P、Cu、Fe元素对应的峰，其中C元素为碳膜中的元素，此外脂质体中也存在一些C元素，0、P元素为脂质体中的元素，Cu元素为碳膜中的元素，Fe元素的存在则说明Fe3O4纳米粒子已经成功结合到了脂质体表面。
[0031]例3
[0032]取2mg尼莫地平、60mg大豆卵磷脂和16mg胆固醇磁力搅拌溶解于4mL无水乙醇中，即得脂质乙醇溶液。将脂质乙醇溶液逐滴滴入50°C的12mL水化介质磷酸缓冲液(0.1M，pH
6.5，)中，滴加过程中磁力搅拌器缓慢搅拌，搅拌2h去除无水乙醇，得到尼莫地平纳米脂质体溶液，4°C保存备用；
[0033]将FeSO4.7H20和FeCl3.6H20按摩尔比为1: 2的比例溶于超纯水中。加入0.15g聚乙二醇-2000，50°C水浴超声下滴加lmol/L NaOH溶液，直至溶液pH为12。将溶液置于80°C水浴熟化15min，磁分离，水和乙醇交替洗涤至溶液中无Cl—，将溶液50mT真空，-103°C冷冻干燥48h，得到0.81g固态聚乙二醇-2000修饰的Fe3O4纳米粒子。
[0034]将3mgFe3(k纳米粒子溶于ImL超纯水中超声分散，再与上述尼莫地平纳米脂质体溶液按I: 3的体积比混匀，置于摇床30°C，120rmp，孵育4h，即得磁性尼莫地平脂质体。
[0035]为了检测制备的磁性尼莫地平脂质体穿越血脑屏障到达脑组织的能力，将SD大鼠分为两组:尼莫地平原药组和磁性尼莫地平脂质体组。均在头部固定一磁铁，3h后取出脑组织，高效液相色谱分析测定脑组织中药物含量。如图3所示，磁性尼莫地平脂质体到达脑组织中药物含量高于尼莫地平原药组2倍(*P〈0.05)。因此，磁性尼莫地平脂质体可明显提高药物穿越血脑屏障的能力，并携带药物到达脑组织。
【主权项】
1.一种Fe304磁性尼莫地平脂质体，其特征在于:它是一种由聚乙二醇修饰的Fe304纳米粒子结合到载药脂质体表面，直径为100?200nm左右，形貌规则，并在脂质体表面有黑色磁性粒子，具有磁靶向且易通过血脑屏障的磁性尼莫地平脂质体。2.权利要求1的Fe304磁性尼莫地平脂质体的制备方法，其特征在于: (1)将尼莫地平、大豆卵磷脂和胆固醇按质量比1:20?30:2?8比例磁力搅拌溶于无水乙醇中，得到脂质乙醇溶液；按每毫升无水乙醇中加入上述三种混合物的量为11.5?.19.5mg； (2)按脂质乙醇溶液与水化介质磷酸缓冲液的体积比为1:2?3，将步骤(1)获得的脂质乙醇溶液逐滴滴入40?50°C的水化介质磷酸缓冲液中，滴加过程中磁力搅拌器缓慢搅拌，得到脂质体悬液;所述水化介质磷酸缓冲液的浓度为0.1Μ、ρΗ值为6.5; (3)将步骤(2)的脂质体悬液旋蒸或搅拌1?2小时，去除无水乙醇，得到尼莫地平纳米脂质体溶液，4°C保存备用； (4)将FeS04.7H20和FeCl3.6H20按摩尔比为1: 2的比例溶于超纯水中，加入聚乙二醇-.2000，加入量为能形成Fe304的质量为10?20%，50°C水浴超声下滴加lmol/L NaOH溶液，直至溶液pH为11?12，将溶液置于80°C水浴熟化15min，磁分离，水和乙醇交替洗涤至溶液中无C1—，将溶液50mT真空，-103°C冷冻干燥48h，即得固态聚乙二醇-2000修饰的Fe304纳米粒子； (5)将1?3mgFe304纳米粒子溶于lmL超纯水中超声分散，再将该溶液与步骤(3)中脂质体溶液按1: 1?3的体积比混勾，置于摇床20?30°C，100?120rmp，孵育2?4h，即得磁性尼莫地平脂质体。
【专利摘要】一种Fe3O4磁性尼莫地平脂质体，是由聚乙二醇修饰的Fe3O4纳米粒子结合到载药脂质体表面，直径为100～200nm左右，形貌规则，并在脂质体表面有黑色磁性粒子，形成具有磁靶向且易通过血脑屏障的纳米脂质体。上述磁性脂质体的制备方法主要是：将尼莫地平、大豆卵磷脂和胆固醇溶于乙醇中，再加入水化介质磷酸缓冲液中，旋蒸或搅拌除去无水乙醇，得到尼莫地平纳米脂质体；FeSO4·7H2O和FeCl3·6H2O按1:2的摩尔比溶于超纯水中，加入聚乙二醇-2000，共沉淀法制备聚乙二醇-2000修饰的Fe3O4纳米粒子；将脂质体溶液与Fe3O4水溶液按一定比例混合，孵育得到Fe3O4磁性尼莫地平脂质体。本发明操作简单，反应易控制，重复性高，产率高。
【IPC分类】A61K9/127, A61K31/4422, A61K47/34, A61P25/16, A61K47/02
【公开号】CN105434355
【申请号】CN201510899780
【发明人】高大威, 籍冰朔, 王美丽, 李磊, 邢珊珊
【申请人】燕山大学
【公开日】2016年3月30日
【申请日】2015年12月9日