重180_20g的Wistar大鼠200只，雌雄各半，大鼠正常喂养1周先喂以高热量饲料 (猪油15 %、蔗糖12 %、蛋黄粉10 %、酪蛋白7 %、胆固醇10 %、胆酸钠0.2 %、碳酸氢钙 0.6 %、石粉0.4 %、鼠维持料44.8 % )，4周后，禁食12h，尾静脉测空腹血糖，称体重。腹腔注 射1%链脉霉素(STZ)80mg/kg，STZ溶于pH4.2,0.1mol/L柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液中，每次药 量在IOmin内用完。空白组大鼠腹腔注射等体积柠檬酸一柠檬酸钠缓冲液，正常饲养，10天 后断尾取血测全血糖，以血糖值水平>10.0 mmol/L者为造模成功，以血糖值水平> 15. Ommol/L者为稳定型。
[0098] 2、分组及给药
[0099]将稳定型造模成功大鼠按照血糖水平随机分为模型对照组，吡格列酮组，中药组 合物低剂量组，中药组合物高剂量组，中药组合物中剂量组共5组，每组8只，各组分别给予 下述治疗药物：
[0100] 模型对照组:灌胃给予等体积生理盐水；
[0101]吡格列酮组:灌胃给予吡格列酮3mg/kg · d;
[0102]中药低剂量组:灌胃给予实施例1制备的生药量为1.2g/kg · d的中药组合物颗粒 剂；
[0103]中药中剂量组:灌胃给予实施例3制备的生药量为3.6g/kg · d的中药组合物丸剂；
[0104] 中药高剂量组:灌胃给予实施例2制备的生药量为7.2g/kg · d的中药组合物散剂；
[0105] 上述给药组每天给药一次，连续10周。采血测定给药前血糖、给药后血糖、尿微量 蛋白以及糖化血红蛋白。
[0106] 3.测定方法
[0107] 1)血糖的测定：
[0108] 将稳定型造模成功大鼠随机分组后，按剂量灌胃给药，连续10周，正常饲养。所有 大鼠分别于给药前和给药后4周内每周取尾静脉血检测空腹血糖(FBG)。将取出的血样放入 蛋白沉淀剂中，室温放置7min后，离心5min(3000r/min)，取上清液，用葡萄糖氧化酶法测全 血糖。
[0109] 2)尿中微量清蛋白的测定：
[0110] 试剂：1 〇 % (v/V)的冰醋酸溶液（pH2.8)、0.303mo I/L甘氨酸-冰醋酸缓冲液 (口!13.0)、溴酚蓝（1.924臟〇1/1)贮存液、溴酚蓝(0.231111111〇1/1)显色剂。
[0111]标本的采集和检测:于第1、3、5、7和10周将大鼠分别放于代谢笼中饲养，收集隔夜 12小时尿，准确记录尿量。取41]11，叠氮钠处理后，离心（200〇1'/1]1；[11)101]1；[11，取上清液置一20 °0冰箱保存待测尿白蛋白，取相应浓度的白蛋白标准液400于对应的杯内，各加200显色剂， 混匀，用紫外分光光度计，于600nm下测定吸光度A。
[0112] 3)糖化血红蛋白的测定：
[0113] 分组、给药同1)，末次给药后禁食12h，乙醚麻醉，眼眶取血，按试剂盒内说明书测 定糖化血红蛋白。
[0114] 4、结果
[0115] 本发明中药组合物糖尿病大鼠血糖、尿微量白蛋白、糖化血红蛋白的影响如表2所 示：
[0116] 表2本发明中药组合物对糖尿病大鼠血糖、尿微量白蛋白、糖化血红蛋白的影响(X 土S，n = 8)
[0118] *与吡格列酮组比较，P<0.05，##与吡格列酮组比较，P<0.01;
[0119] *与模型对照组比较，P<0.05，#与模型对照组比较，P<0.01。
[0120] 上述实验结果表明，在对糖尿病大鼠血糖、尿微量白蛋白、糖化血红蛋白的影响方 面，吡格列酮组和本发明所述的中药组合物各组与模型对照组比较都有显著性差异，本发 明所述的中药组合物各组与模型对照组比较有极显著差异。
[0121] 另外，实验结果还表明，本发明所述的中药组合物各组与吡格列酮组相比，在降低 血糖方面有极显著性差异，但是疗效与给药量没有正相关性；与模型对照组相比，吡格列 酮组给药后的糖化血红蛋白无统计学差异，本发明所述的中药组合物各组的糖化血红蛋白 含量均有显著性差异，其中中药中剂量组具有极显著性差异；中药高剂量组和中药中剂量 组的尿微量蛋白含量具有显著性差异。
[0122] 本发明具有益气养阴，生津清热，降低血糖的功效，服用后，不仅血糖、尿糖得到有 效控制，且糖化血清蛋白有明显下降，对四氧嘧啶造成的胰腺组织损伤有一定的修复作用， 没有毒副作用，为临床治疗糖尿病，缓解糖尿病引起的各种症状提供了一个新选择。
[0123] 上面对本专利的较佳实施方式作了详细说明，但是本专利并不限于上述实施方 式，在本领域的普通技术人员所具备的知识范围内，还可以在不脱离本专利宗旨的前提下 作出各种变化。
【主权项】
1. 一种治疗糖尿病的药物组合物，其特征在于，由以下按照重量份的原料组成:凤凰衣 20-30份、绿萼梅20-30份、薤白15-20份、知母5-10份、鸡内金5-10份、菟丝子3-5份、炙甘草 3-5份、淫羊藿1-3份。2. 根据权利要求1所述的治疗糖尿病的药物组合物，其特征在于，由以下按照重量份的 原料组成:凤凰衣22-28份、绿萼梅22-28份、薤白16-19份、知母7-9份、鸡内金7-9份、菟丝子 3.5-4.5份、炙甘草3.5-4.5份、淫羊藿1.5-2.5份。3. 根据权利要求1-2任一所述的治疗糖尿病的药物组合物，其特征在于，由以下按照重 量份的原料组成:凤凰衣25份、绿萼梅25份、薤白18份、知母8份、鸡内金8份、菟丝子4份、炙 甘草4份、淫羊藿2份。4. 一种如权利要求1-2任一所述的治疗糖尿病的药物组合物的制备方法，其特征在于， 具体步骤如下： (1) 取料:按照重量份称取各原料； (2) 醇提:将各原料取出一半，用药材重量的5-8倍量的浓度为80-90%的乙醇在70-90 °C温度下提取1-4次，每次20-40min，将多次得到的提取液合并，过2mm以下的筛取透过液， 浓缩至含水量< 50%得到醇提取物； (3) 水提:将剩余原料破碎至0.5-1cm的颗粒，再按药材重量的10-20倍加水，加温至95-l〇5°C提取1-4次，文火加热使保持微沸，每次水提40-60min，将多次得到的提取液合并，过 2mm以下筛取透过液，静置6-8h取上清液，将再上清液浓缩干燥至含水量< 50 %得水提取 液； (4) 制备药物组合物:将上述醇提取物和水提取物混合均匀后，添加辅料制备得到药物 组合物。5. 根据权利要求4所述的治疗糖尿病的药物组合物的制备方法，其特征在于，所述步骤 (2)和步骤(3)中进行筛取透过液时，均是过150-250μπι筛。6. 根据权利要求4所述的治疗糖尿病的药物组合物的制备方法，其特征在于，所述药物 组合物的剂型为颗粒剂、散剂、丸剂、胶囊剂或片剂。7. -种如权利要求1-2任一所述的药物组合物在制备治疗糖尿病药物中的应用。
【专利摘要】本发明公开了一种治疗糖尿病的药物组合物及其制备方法和用途，治疗糖尿病的药物组合物由以下按照重量份的原料组成：凤凰衣、绿萼梅、薤白、知母、鸡内金、菟丝子、炙甘草、淫羊藿，治疗糖尿病的药物组合物的制备方法，具体步骤包括取料、醇提、水提和制备药物组合物；所述的药物组合物在制备治疗糖尿病药物中的应用。本发明具有益气养阴，生津清热，降低血糖的功效，服用后，不仅血糖、尿糖得到有效控制，且糖化血清蛋白有明显下降，对四氧嘧啶造成的胰腺组织损伤有一定的修复作用，没有毒副作用，为临床治疗糖尿病，缓解糖尿病引起的各种症状提供了一个新选择。
【IPC分类】A61P3/10, A61K35/57, A61K36/8964
【公开号】CN105434802
【申请号】CN201510916113
【发明人】陈雪琴
【申请人】陈雪琴
【公开日】2016年3月30日
【申请日】2015年12月4日