clamycin Β)、桦木酸、BFGF抑制剂、比卡鲁胺、比生群、盐酸比生群、双吖丙啶基精胺 (bisaziridinylspermine)、双奈法德、二甲横酉爱双奈法德（bisnafide di mesylate)、 bistratene A、比折来新、博来霉素、硫酸博来霉素、BRC/ABL拮抗剂、breflate、布喹那钠、 溴匹立明、布多替钛、白消安、丁硫氨酸亚巩胺(buthionine sulfoximine)、放线菌素 C、卡 泊三醇、卡弗他丁C(calphostin C)、卡普睾酮、喜树碱衍生物、金丝雀痘IL_2(canarypox IL-2)、卡培他滨、卡醋胺、卡贝替姆、卡铂、甲酰胺-氨基-三唑、羧基酰胺基三唑、carest M3、卡莫司汀、cam 700、软骨衍生的抑制剂（cartilage derived inhibitor)、盐酸卡柔比 星、卡折来新、酪蛋白激酶抑制剂、澳粟精胺、杀菌肽B、西地芬戈、西曲瑞克、苯丁酸氮芥、绿 素类(chlorins)、氯喹喔啉磺酰胺、西卡前列素、西罗霉素、顺铂、顺-Π 卜啉、克拉屈滨、氯米 芬类似物、克霉唑、collismycin A、collismycin Β、考布他汀Α4、考布他汀类似物、 conagenirucrambescidin 816、克立那托、甲磺酸克立那托、念珠藻素8(cryptophycin 8)、 念珠藻素 A衍生物、curacin A、环戊蒽醌（eyeIopentanthraquinones)、环磷酰胺、环钼 (cycloplatam)、cypemycin、阿糖胞苷、阿糖胞苷十八烷基磷酸钠 （cytarabine ocfosfate)、溶细胞因子、磷酸己烷雌酚、达卡巴嗪、达昔单抗、放线菌素 D、盐酸柔红霉素、 地西他滨、脱氢膜海鞘素13((16117(11'0(11(1611111；[1113)、地洛瑞林、右异环磷酰胺、右奥马钼、右雷 佐生、右维拉帕米、地扎呱宁、甲磺酸地扎呱宁、地吖醌、代代宁B、didox、二乙基去甲精胺 (diethy Inorspermine )、二氢-5-氮胞苷、dioxamycin、二苯基螺莫司汀、多西他赛、二十二 烷醇、多拉司琼、去氧氟尿苷、多柔比星、盐酸多柔比星、屈洛昔芬、柠檬酸屈洛昔芬、屈他雄 酮丙酸酯、屈大麻酸、达佐霉素(duazomycin)、duocarmycin SA、依布硒、依考莫司汀、依达 曲沙、依地福新、依决洛单抗、依氟鸟氨酸、盐酸依氟鸟氨酸、榄香烯、依沙芦星 (elsami trucin)、乙啼替氟、恩洛钼、恩普氨酯（enpromate )、依匹哌啶、表柔比星 (epirubicin)、盐酸表柔比星、爱普列特、厄布洛唑、红细胞基因治疗载体体系、盐酸依索比 星、雌莫司汀、雌莫司汀类似物、雌莫司汀磷酸酯钠、雌激素激动剂、雌激素拮抗剂、依他硝 唑、依托泊苷、磷酸依托泊苷、氯苯乙嘧胺、依西美坦、法倔唑、盐酸法倔唑、法扎拉滨、芬维A 胺、非格司亭、非那雄胺、夫拉平度、氟卓斯汀、氟尿苷、fluasterone、氟达拉滨、磷酸氟达拉 滨、盐酸氟代柔红霉素 （fluorodaunorunicin hydrochloride)、氟尿啼啶、 fluorocitabine、福酸美克、福美司坦(formestane)、磷喹酮、福司曲星、福司曲星钠、福莫 司汀、IL替沙林(gadol inium texaphyrin)、硝酸镓、加洛他滨、加尼瑞克、明胶酶抑制剂、吉 西他滨、盐酸吉西他滨、谷胱甘肽抑制剂、hepsu I f am、her egul in、六亚甲基双乙酰胺、羟基 脲、金丝桃素、伊班膦酸、伊达比星、盐酸伊达比星、艾多昔芬、伊决孟酮、异环磷酰胺、伊莫 福新(ilmofosine)、伊洛马司他、咪唑并吖啶酮、咪喹莫特、免疫刺激剂肽、胰岛素样生长因 子-1受体抑制剂、干扰素激动剂、干扰素 α-2Α、干扰素 α-2Β、干扰素 α-Nl、干扰素 α-Ν3、干扰 素 β-ΙΑ、干扰素 γ-ΙΒ、干扰素、白细胞介素、碘苄胍、碘阿霉素、异丙钼、伊立替康、盐酸伊立 替康、伊罗普拉、伊索拉定、伊苯加峻（isobengazole)、isohomohalicondrin Β、伊他司琼、 jasplakinolide、kahalal ide F、lamel Iarin_N triacetate、兰瑞肽、酉昔酉爱兰瑞肽、 leinamycin、来格司亭、硫酸香燕多糖、leptolstatin、来曲挫、白血病抑制因子、白细胞α干 扰素、醋酸亮丙瑞林、亮丙瑞林/雌激素/孕酮、亮丙瑞林、左旋咪唑、利阿唑、盐酸利阿唑、线 性多胺类似物、亲脂二糖肽、亲脂钼化合物、I i SsoCI inamide 7、洛钼、胍乙基磷酸丝氨酸、 洛美曲索、洛美曲索钠、洛莫司汀、氯尼达明、洛索蒽醌、盐酸洛索蒽醌、洛伐他汀、洛索立 宾、勒托替康、lutetium texaphyrin、lysofylline、裂解肽、美坦辛、mannostatin A、马立 马司他、马索罗酚、maspin、基质溶解因子抑制剂、基质金属蛋白酶抑制剂、美登素、盐酸氮 芥、乙酸甲地孕酮、醋酸美仑孕酮、美法仑(melphalan)、美诺立尔、美巴龙(merbarone)、疏 基嘌呤、美替瑞林(meterelin)、蛋氨酸酶、甲氨蝶呤、甲氨蝶呤钠、甲氧氯普胺、氯苯氨啶、 美妥替哌、微藻蛋白激酶C抑制剂、MIF抑制剂、米非司酮、米替福新、米立司亭、错配双链 RNA、米丁度胺、米托卡星(mitomalcin)、丝裂红素、米托洁林、米托胍腙、二溴卫矛醇、米托 马星、丝裂霉素、丝裂霉素类似物、米托萘胺、米托司培、米托坦、mitotoxin成纤维细胞生长 因子-皂草素、米托蒽醌、盐酸米托蒽醌、莫法罗汀、莫拉司亭、单克隆抗体、人绒毛膜促性腺 激素、单磷酰脂质a/分支杆菌细胞壁SK、莫哌达醇、多重抗药性基因抑制剂、基于多重肿瘤 抑制因子1的治疗、芥子抗癌剂、美卡普罗B(mycaperoxide B)、分枝杆菌细胞壁提取物、霉 酸酸(mycophenolic acid)、迈普隆(myriaporone)、正乙酰基地那林、那法瑞林、那瑞替喷 (nagrestip)、纳洛酮/喷他佐辛、napavin、萘砲二醇、那托司亭、奈达钼、奈莫柔比星、奈立 膦酸、中性肽链内切酶、尼鲁米特、n i s amy c i η、一氧化氮调节剂、硝基氧抗氧化剂 (nitroxide antioxidant)、nitrulIyn、诺考达唑、诺加霉素(nogalamycin)、η_取代的苯甲 酰胺、06-苄基鸟噪呤、奥曲肽、奥康斯恩（okicenone)、寡核苷酸、奥那司酮、昂丹司琼、 oracin、口腔细胞因子诱导剂、奥马钼、奥沙特隆、奥沙利钼、oxaunomycin、奥昔舒仑、紫杉 醇、紫杉醇类似物、紫杉醇衍生物、palauamine、棕榈酰基根霉素、帕米膦酸、人参炔三醇、帕 诺米芬、parabactin、帕折普汀、培门冬酶、培得星、培利霉素、戊氮芥、木聚硫钠 (pentosan polysulfate sodium)、喷司他丁、pentrozoIe、硫酸培洛霉素、全氟溴烧、培磷酰胺、紫苏 醇、phenaz inomy c in、乙酸苯酯、磷酸酶抑制剂、溶链菌素、盐酸毛果云香碱、哌泊溴烷、哌泊 舒凡、啦柔比星、啦曲克辛、盐酸啦罗蒽醌、？13061：；[114、？13061：；[1113、纤溶酶原激活物抑制 剂、铂络合物、铂化合物、铂-三胺络合物、普卡霉素、普洛美坦、扑吩姆钠、泊非霉素、泼尼莫 司汀(prednimustine)、盐酸丙卡巴肼、丙基双吖啶酮、前列腺素 J2、前列腺癌抗雄激素、蛋 白酶体抑制剂、基于蛋白质A的免疫调节剂、蛋白质激酶C抑制剂、蛋白质酪氨酸磷酸酶抑制 剂、嘌呤核苷磷酸化酶抑制剂、嘌呤霉素、嘌呤霉素盐酸盐、红紫素、吡唑呋喃菌素、吡唑啉 口丫啶（pyrazoloacridine)、吡咳酰基化血红蛋白聚氧乙稀缀合物（pyridoxylated hemoglobin polyoxyethylene con jugate)、RAF诘抗剂、雷替曲塞、雷莫司琼、RAS法尼基蛋 白质转移酶抑制剂、RAS抑制剂、RAS-GAP抑制剂、脱甲基瑞替普汀、铼RE186依替膦酸盐 (rhenium RE 186etidronate)、根霉素、利波腺苷、核酶、RII维甲酰胺(retinamide)、RNAi、 罗谷亚胺、罗希吐碱、罗莫肽、罗喹美克、rubiginone BI、ruboxyl、沙芬戈、盐酸沙芬戈、 saintopin、sarcnu、sarcophytol A、沙格司亭、SDIl模拟物、司莫司汀、老化衍生的抑制剂 1、正义寡核苷酸、信号转导抑制剂、信号转导调节剂、辛曲秦、单链抗原结合蛋白质、 sizofuran、索布佐生、硼卡钠、苯基乙酸钠、索尔醇(solverol)、生长调节素结合蛋白质、索 纳明、磷乙酰天冬氨酸钠、膦门冬酸、司帕霉素(sparsomycin)、spicamycin D、盐酸螺旋锗、 螺莫司汀、螺铂、脾脏五肽、海绵抑制素 Kspongistatin 1)、角鲨胺、干细胞抑制剂、干细胞 分裂抑制剂、斯提酰胺(stipiamide )、链黑菌素、链佐星、基质分解素抑制剂、sulf inosine、 磺氯苯脲、强效血管活性肠肽拮抗剂、suradista、苏拉明、苦马豆素、合成糖胺聚糖、他利霉 素、他莫司汀、他莫昔芬甲碘化物、牛磺莫司汀、他扎罗汀、替可加兰钠、替加氟、 tel lurapyryl ium、端粒酶抑制剂、替洛蒽醌盐酸盐、替莫泊芬、替莫唑胺、替尼泊苷、替罗昔 隆、睾内酯酮（testolactone)、四氯十氧化物、tetrazomine、thaliblastine、沙利度胺、硫 咪噪呤、噻可拉林（thiocoraline)、硫鸟噪呤、塞替派、血小板生成素、血小板生成素模拟 物、胸腺法新、胸腺生成素受体激动剂、胸腺曲南、甲状腺刺激激素、噻唑羧胺核苷、本紫红 素乙酯锡（tin ethyl etiopurpurin)、替拉扎明、二氯二茂钛、盐酸拓扑替康、topsentin、 托瑞米芬、柠檬酸托瑞米芬、全能干细胞因子、翻译抑制剂、醋酸曲托龙、维甲酸 (tretinoin)、三乙酰基尿苷、曲西立滨、磷酸曲西立滨、三甲曲沙、葡萄糖醛酸三甲曲沙、曲 普瑞林、托烷司琼、盐酸妥布氯唑、妥罗雄脲、酪氨酸激酶抑制剂、酪氨酸磷酸化抑制剂 (tyrphostins)、UBC抑制剂、乌苯美司、尿啼啶氮芥、乌瑞替派、泌尿生殖窦衍生的生长抑制 因子、尿激酶受体诘抗剂、伐普肽、vario I in B、维拉雷琐、藜芦明、verdins、维替泊芬、硫酸 长春碱、硫酸长春新碱、长春地辛、硫酸长春地辛、硫酸长春匹定、硫酸长春甘酯、硫酸长春 罗新、长春瑞滨、酒石酸长春瑞滨、硫酸长春罗定(vinrosidine sulfate)、vinxaltine、硫 酸长春利定、vitaxin、伏氯唑、扎诺特隆、折尼铂、亚苄维C、净司他丁、净司他丁斯酯或盐酸 佐柔比星。在一些实施方案中，该方法可包括给予选自氟尿啼啶、亚叶酸（Ieucovorin)的药 物及其混合物。 实施例
[0088] 实施例1.脂质体铂组合物的制备
[0089] 奥沙利铂脂质体的包封通过溶剂稀释程序进行。将脂质混合物在100-mL玻璃瓶中 称重并溶于叔丁醇(t-BuOH)、乙醇(EtOH)和水的溶液中，并在70°C加热直至澄清。溶液通常 含有I: It-BuOH: EtOH( V: V)或49:49:2t-BuOH: EtOH:水(V: V: V)，但水含量根据所使用的脂 质的具体量进行调整。在70°C将奥沙利铂溶于预热的蔗糖/乙酸盐缓冲液（IOmM乙酸钠， 300mM蔗糖，pH 5.5;无菌过滤）中。需要时使用超声处理。在快速搅拌下将脂质溶液加入到 奥沙利铂溶液中以形成多层囊泡(MLV)。制备实施例概括在表1中。
[0090] 使用加热至70°C的LIPEX?挤出机(Northern Lipid Inc.)将所述MLV通过聚碳酸 酯过滤器。挤出通常使用3x80nm堆叠（stacked)的聚碳酸酯过滤器和漏盘(drain disc)在 SOOmL挤出机中进行。过滤器的数量在必要时根据所挤出的脂质组合物进行调整。每次通过 挤出机后，使用准弹性光散射(QELS)粒度分析仪测定囊泡尺寸和尺寸分布。达到90-120nm 的平均体积直径后停止挤出。挤出后，将脂质体用冷(2-15°C)蔗糖/乙酸盐缓冲液稀释10 倍。将400mL的脂质体用3600mL冷缓冲液稀释。稀释可预防在随后的处理过程中任何未包封 的奥沙利铂沉淀。然后将脂质体通过超滤浓缩至约50mg/mL脂质的浓度。
[0091] 表1.奥沙利铂多层囊泡的制备
[0093]进行渗滤以交换外部缓冲液和浓缩脂质体，以及去除未包封的奥沙利铂和残留的 有机溶剂。渗滤系统包括具有L/S栗头和36-测量管(gauge tubing)的Masterflex栗。通常， 可在筒（cartridge)的入口处使用能够维持IOpsig的懦动栗。渗滤系统还包括500-kDa筒， 其具有每克脂质大约55cm2表面积。例如，两个串联的Spectrum M4-500S-260-01N PS 615cm2筒可为含有20克脂质的制剂的过滤提供足够的表面积。用至少500mL纯净水，然后用 至少200mL的1300mM蔗糖/乙酸盐缓冲液彻底清洗该系统。基于所用的筒的尺寸调整体积。 将浓缩的脂质体(50mg/mL)用10洗涤体积的缓冲液（IOmM乙酸盐，300mM蔗糖pH5.5)进行渗 滤。再次进行超滤以获得大约90mg/mL的脂质浓度。保留部分制剂用于颗粒测量和分析。
[0094] 使用装备有乙酸纤维素膜（例如，0.20μπι MiniSart，表面积=6.2cm2; 0.20μπι Sartorius Sartobran 150,表面积=150cm2)的0.2-μπι注射器式过滤器进行组合物的无菌 过滤。必要时更换过滤器;通常，发现1平方厘米的膜可足以过滤3至IOmL的组合物。必要时， 在无菌过滤前，用无菌缓冲液进行组合物的稀释以获得所需的奥沙利铂浓度(例如，Img/ mL)。使用无菌移液管将无菌去热原的小瓶装满组合物。将小瓶用经高压灭菌处理的丁基瓶 塞和螺纹(cr imped)铝密封圈加盖并在2-8°C储存。
[0095] 上述方法用于制备表2中总结的组合物。
[0096] 表2.脂质体奥沙利铂组合物
[0098] aPEG 分子量= 2000Da。
[0099] 上述方法也用于制备表3中总结的奥沙利铂和顺铂组合物。
[0100] 表3.脂质体铂组合物
[0101]
[0102] aPEG 分子量= 2000Da。
[0103] 实施例2.铂类药物从脂质体中的体外释放
[0104] 在pH 7.1研究实施例1a-Ie(表2)中的奥沙利铂从脂质体中的体外释放。如图1所 不，释放曲线表明，与使用饱和脂质的其他制剂相比，基于POPC的制剂Id具有最尚的释放速 率。其他四种奥沙利铂制剂未观察到显著差异。
[0105] 比较含有顺铂或奥沙利铂(表3)的实施例1f-Ij的铂释放率。在PH5.0和PH7.1测定 体外释放。如表4所示，含有奥沙利铂的基于POPC的制剂（I i和I j)表现出pH依赖的释放速 率，而含有顺铂的其他制剂则并非如此。奥沙利铂制剂也表现出比顺铂制剂更快和更高的 释放。表4中的数据绘制在图2和图3中。
[0106] 将基于POPC的制剂的释放数据合在一起，在48小时时在pH 7.1含有POPC:Chol: DSPE-PEG(55:40:5)的脂质体的奥沙利铂释放速率为约10%，但在pH5.0含有P0PC:Chol: DSPE-PEG(分别为60:35:5和65:30:5)的脂质体的奥沙利铂释放速率为20%和30%。如此处 所示，已发现脂质体的POPC含量和POPC/胆固醇比例，以及奥沙利铂的pH依赖特性有助于增 强奥沙利铂在酸性介质中释放。
[0107] 表4.随时间推移铂类药物从脂质体组合物中的体外释放（％ )。
[0109] 实施例3.脂质体组合物的物理特性
[0110] 测定具有不同脂质含量的脂质体的凝胶-流体相变的相变温度(Tm)，如表5所示。 检测含有55-95%饱和磷脂酰胆碱(DPPC、DSPC或HSPC)、0-40mol%胆固醇和5mol%DSPE-PEG的混合物的不同相变温度。T m值在约41-56°C的范围内，远高于环境温度或生理温度。相 反，基于POPC的制剂没有可检测到的转变峰。POPC的凝胶-液体结晶热转变温度为约-2°C。 已报道POPC和胆固醇的二元混合物的转变温度远低于0°C。
[0111] 表5.脂质体制剂的相变温度
[0113] aPEG 分子量= 2000Da。
[0114] 总体而言，考虑到所选脂质体组合物的铂释放数据和