用前蛋白转化酶枯草溶菌素9(pcsk9)抑制剂降低残余胆固醇及其他脂蛋白组分含量的方法
【专利说明】用前蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9)抑制剂降低残余胆固醇 及其他脂蛋白组分含量的方法 发明领域
[0001] 本发明涉及与脂蛋白水平升高相关的疾病和病症的治疗领域。更具体而言，本发 明涉及施用PCSK9抑制剂以降低患者血清中残余胆固醇及其他脂蛋白亚组分的水平。
[0002] 发明背景
[0003] 残余胆固醇(亦称为残余脂蛋白）是一类仅包含非HDL和非LDL的胆固醇。残余胆固 醇是VLDL脂肪分解的产物，并包括VLDL 3和中等密度脂蛋白（IDL，形成LDL的直接前体）。已 确定血清残余胆固醇水平是冠状动脉疾病的预测风险因素。除残余胆固醇外，还有几种低 密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)亚组分可能与心血管健康相关。尤其是，LDLC是由各种不同密度 和脂化状态的LDL颗粒组成的。治疗性降低血清残余胆固醇和其他脂蛋白亚组分水平可以 成为治疗或降低心血管疾病风险的一种方法。
[0004] PCSK9是一种前蛋白转化酶，属于分泌性枯草杆菌酶家族的蛋白酶K亚族。为降低 血清总胆固醇、LDL胆固醇和血清甘油三酯而使用PCSK9抑制剂(抗PCSK9抗体)的做法，在美 国第8，062，640号、第8，357，371号专利以及第2013/0064834号美国专利申请公开书中均有 所说明。
[0005] 发明概述
[0006] 本发明提供了一些降低患者血清中各种脂蛋白及脂蛋白组分的方法。所述患者可 以是患有高胆固醇血症或具有罹患高胆固醇血症风险的患者，或是患有心血管疾病或具有 罹患心血管疾病风险的患者。
[0007] 本发明之方法包括选择血清中某一特定脂蛋白或脂蛋白组分水平升高的患者，并 给该患者施用一种含有前蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9)抑制剂的药物组合物。依照本发 明的某些方面，根据患者血清中升高的残余胆固醇水平来选择患者。依照本发明的某些其 他方面，根据其血清中升高的极低密度脂蛋白胆固醇水平（例如，升高的血清VLDL-C、 VLDL1-C、VLDL2-C、VLDL1+2_C、VLDL 3-C等）来选择患者。依照本发明的另一些方面，根据其血 清中升高的中等密度脂蛋白胆固醇（IDL-C)水平来选择患者。依照本发明的某些其他方面， 根据其血清中升高的一种或多种低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)亚组分的水平(例如，升高的 血清LDL 1-C、LDL2-C、LDL3-C、LDL4-C、LDL 3M-C等)来选择患者。依照本发明的某些方面，将血 清中升高的Lp (a)水平作为附加标准或替换标准来选择患者。
[0008] 也可根据患者显示此类疾病和病症的其他风险因素来选择患者，其中脂蛋白水平 的下降将是有益的或有助于降低风险。例如，高胆固醇血症(例如heFH、非FH等)患者可以是 用本发明之治疗方法治疗的合适人选。
[0009] 可依照本发明之方法施用的PCSK9抑制剂包括例如抗PCSK9抗体或其抗原结合片 段。可用于实施本发明之方法的具体示范性抗PCSK9抗体，包括如美国第8,062,640号专利 所述和/或本文所公开的任何抗体或抗原结合片段。
[0010] 所述PCSK9抑制剂可以皮下或静脉注射的方式施予受试者。此外，所述PCSK9抑制 剂可施予在治疗性干预时正在接受他汀类药物治疗的患者。
[0011] 在审阅随后的详细说明过程中，本发明之其他实施例将变得明显。
[0012] 附图简要说明
[0013] 图1显示未接受他汀类药物背景治疗的健康受试者在单剂皮下注射mAb316P 150mg之后，mAb316P、游离(非结合)PCSK9及LDL-C水平之间的动态关系。
[0014] 图2显示接受mAb316P 50、100或150mg皮下注射加阿托伐他汀、或mAb316P 150mg 皮下注射仅加膳食干预的HeHl和非患者的游离mAb316P的平均浓度。虚线表示游离PCSK9 的量化极限（〇.〇312mg/dL)。
[0015] 图3显示相对于平均总11^&316?浓度(11^/北），患者(!^?!1和非?!1合并 ;11 = 21，于研 究第1、29及43天接受mAb316P 150mg皮下注射）的LDL-C自基线的平均百分比变化。各点表 示采样时间;h表示小时;d表示天。如箭头所示，该滞后曲线以顺时针方向随时间移动，显示 了mAb316P浓度与LDL-C变化之间的时间关系。
[0016] 图4显示接受阿托伐他汀或仅接受膳食干预(无他汀类药物）的非患者的平均基 线游离PCSK9水平。
[0017]图5显示接受mAb316P 150mg皮下注射或安慰剂土阿托伐他汀的患者的LDL-C疗效 曲线。
[0018] 图6显不在接受mAb316P 50mg、IOOmg或 150mg(每2周一次）、200mg或300mg(每4周 一次)注射或安慰剂之后同时接受他汀类药物治疗的高胆固醇血症患者，LDL-C自基线随时 间的平均百分比变化。三角形符号（A )对应于以最后观察值结转(LOCF)平均值。
[0019] 图7-9显示在三项不同的临床研究（A、B和C，如本文表1所概括）中，在安慰剂和 mAb316P150mg(每2周一次）治疗之前和之后，VLDL和血清残余脂蛋白亚组分以及甘油三酯 中的平均(SD)胆固醇水平。图7描绘研究A的结果，图8描绘研究B的结果，图9描绘研究C的结 果。
[0020] 图10-12显示在三项不同的临床研究(A、B和C，如本文表1所概括）中，在安慰剂和 mAb316P150mg(每2周一次)治疗之前和之后，LDL亚组分中的平均（SD)胆固醇水平。图10描 绘研究A的结果，图11描绘研究B的结果，图12描绘研究C的结果。
[0021] 图13组A和B分别显示apo CII和apo CIII对于研究A中使用的所有剂量的剂量响 应变化(在本文表1中概括）。
[0022] 详细说明
[0023]在说明本发明之前先要声明，应该理解，本发明并不局限于所说明之具体方法和 实验条件，因为这些方法和条件是可以改变的。还应理解，本文所用的术语仅出于说明具体 实施例之目的，并非意在限制本发明，因为本发明之范围仅受所附权利要求书的限制。 [0024]除非另有定义，本文所用的所有技术和科学术语均将具有与本发明所属领域中普 通技术人员通常理解的相同含义。本文中所用的术语"大约"，当用于列出的某一具体数值 时，意为该数值可在与所列数值相差不超过1 %之范围内变化。例如，本文中所用的表述"大 约100"包括99和101以及这两者之间的所有数值(例如99.1、99.2、99.3、99.4等）。
[0025] 尽管与本文所述之方法和材料类似或相当的任何方法和材料都可用于本发明之 实施，但现在说明的是较佳的方法和材料。本文所提及的所有出版物均通过引用而以其整 体纳入本文。
[0026] 降低残余胆固醇及其他脂蛋白组分的方法
[0027]本发明提供了一些降低患者血清中残余胆固醇及其他脂蛋白组分的方法。本发明 之方法包括选择显示出一种或多种残余胆固醇（亦称为"残余脂蛋白胆固醇"、"残余脂蛋 白"或RLP-C)、极低密度脂蛋白胆固醇(VLDL-C)、中等密度脂蛋白胆固醇（IDL-C)、甘油三酯 (TG)和/或Lp(a)血清水平升高的患者。在某些实施例中，本发明之方法包括选择显示出 VLDL1、VLDL2、VLDL1+2、VLDL3、LDL 1、LDL2、LDL3、LDL4、LDL3+4 及 / 或其他组合之血清水平升高的 患者。本发明之方法进一步包括给患者施用含有PCSK9抑制剂的药物组合物。
[0028]本文所用的表述"残余胆固醇"、"残余脂蛋白"、"RLP"等等，意为空腹状态下由 VLDL和IDL组成的富含甘油三酯的脂蛋白中胆固醇含量，以及非空腹状态下这两种脂蛋白 再加乳糜微粒残粒中胆固醇的含量。残余胆固醇可按如下公式计算：总胆固醇减去HDL-C， 再减去LDL-C(也就是非[HDL-C+LDL-C])。残余胆固醇包括VLDL 3和IDL。
[0029] 其他脂蛋白组分包括，例如LDL1-CX "大而悬浮"LDL)、LDL2-C、LDL3-C及LDLfCX "小 而致密"LDL)。上述脂蛋白的血清水平可以标准的脂蛋白精细分离技术如垂直自动分析 (vertical auto profile，VAP)、离子迀移率等检测方法来确定。
[0030] 在本发明的情况下，"血清脂蛋白水平升高"（例如，血清残余胆固醇水平升高、血 清VLDL-C水平升高、血清VLDLi-C水平升高、血清VLDL 2-C水平升高、血清VLDLi+2-C水平升高、 血清VLDL3-C水平升高、血清IDL-C水平升高、血清LDLi-C水平升高、血清LDL 2-C水平升高、血 清LDL3-C水平升高、血清LDL4-C水平升高、血清LDL 3M-C水平升高等)意为相应的血清脂蛋白 水平高于约8mg/dL。在某些实施例中，如果在患者血清中测得的特定脂蛋白水平高于约 9mg/dL、10mg/dL、Ilmg/dL、12mg/dL、13mg/dL、14mg/dL、15mg/dL、16mg/dL、17mg/dL、18mg/ dL、19mg/dL、20mg/dL、25mg/dL、30mg/dL、35mg/dL、40mg/dL、45mg/dL、50mg/dL，则该患者就 被认为是血清脂蛋白水平升高。血清脂蛋白水平可在患者膳后测量。在某些实施例中，脂蛋 白水平是在禁食一段时间后测量的（例如在禁食6小时、8小时、10小时、12小时或更长时间 以后）。任何临床可接受的诊断方法都可以用于在本发明的情况下测量患者的血清脂蛋白。
[0031] 依照本发明，血清中残余胆固醇或其他脂蛋白亚组分（例如，VLDL-C、VLDL1-C、 VLDL2-C、VLDLi+2-C、VLDL3-C、IDL-C、IDLi-C、IDL2-C、IDLi +2-C、LDLi-C、LDL2-C、LDL2a-C、 LDL2b_C、LDLl+2a_C、LDL3_C、LDL3a _C、LDL3b_C、LDL4_C、LDL4a_C、LDL4b _C、LDL4c_C、LDL4a+4b+4c+3b_ c、ldl3+4-c等)水平的下降，意为患者在接受本发明之药物组合物之后，血清脂蛋白/脂蛋白 亚组分水平自基线下降约5%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、 60%、65%、70%、75 %、80%或以上。当提及某一特定脂蛋白或脂蛋白亚组分时，本文所用 的术语"基线水平"意为在接受本发明之药物组合物之前，在受试者血清中测得的脂蛋白/ 脂蛋白亚组分水平。本发明之药物组合物给药所导致的血清中脂蛋白/脂蛋白亚组分水平 的下降，可于包括使用一剂或多剂含PCSK9抑制剂的药物组合物之治疗方案启动之后1天、2 天、3天、4天、5天、6天、1周、2周、4周、6周、8周、10周、12周、14周、16周、18周、20周、22周或更 长时间达到和/或观察到，其实施例在本文其他部分公开。
[0032] 例如，本发明包括一些降低患者血清残余胆固醇水平的方法，通过选择血清残余 胆固醇水平升高的患者，并给该患者施用一种含PCSK9抑制剂的药物组合物，使得患者在接 受该药物组合物之后，血清残余胆固醇水平自基线下降至少约35%至约45%。
[0033] 本发明还包括一些降低患者血清VLDL-C水平的方法，通过选择血清VLDL-C水平升 高的患者，并给该患者施用一种含PCSK9抑制剂的药物组合物，使得患者在接受该药物组合 物之后，VLDL-C水平自基线下降至少约20%至约28%。
[0034] 本发明还包括一些降低患者血清VLDL1+2-C水平的方法，通过选择血清VLDL 1+2-C水 平升高的患者，并给该患者施用一种含PCSK9抑制剂的药物组合物，使得患者在接受该药物 组合物之后，￥〇^1+2-(：水平自基线下降至少约20%至约32%。
[0035] 本发明还包括一些降低患者血清VLDL3-C水平的方法，通过选择血清VLDL 3-C水平 升高的患者，并给该患者施用一种含PCSK9抑制剂的药物组合物，使得患者在接受该药物组 合物之后，VLDL3-C水平自基线下降至少约20 %至约27 %。
[0036] 本发明还包括一些降低患者血清IDL-C水平的方法，其中通过选择血清IDL-C水平 升高的患者，并给该患者施用一种含PCSK9抑制剂的药物组合物，使得患者在接受该药物组 合物之后，IDL-C水平自基线下降至少约50%至约56%。
[0037] 本发明还包括一些降低患者血清LDL1-C水平的方法，通过选择血清LDL 1-C水平升 高的患者，并给该患者施用一种含PCSK9抑制剂的药物组合物，使得患者在接受该药物组合 物之后，LDL1-C水平自基线下降至少约65%至约78%。
[0038] 本发明还包括一些降低患者血清LDL2-C水平的方法，通过选择血清LDL 2-C水平升 高的患者，并给该患者施用一种含PCSK9抑制剂的药物组合物，使得患者在接受该药物组合 物之后，LDL2-C水平自基线下降至少约75 %至约85 %。
[0039] 本发明还包括一些降低患者血清LDL3M-C水平的方法，通过选择血清LDL 3M-C水平 升高的患者，并给该患者施用一种含PCSK9抑制剂的药物组合物，使得患者在接受该药物组 合物之后，LDL3M-C水平自基线下降至少约45%至约70%。
[0040] 本发明还包括通过选择高胆固醇血症患者，并给该患者施用一种含PCSK9抑制剂 的药物组合物，降低患者血清中载脂蛋白（apo)CII和/或CIII水平的方法。依照某些实施 例，患者患有非家族性高胆固醇血症(非FH);在某些其他实施例中，患者患有杂合子家族性 高胆固醇血症(he-FH)。依照本发明这一方面的某些实施例，在施用该药物组合物之后，患 者apo CII水平自基线下降至少约9%至约30%，患者apo CIII水平下降至少约20%至约 25% 〇
[0041] 本发明还包括一些降低患者血清Lp(a)水平的方法，其中通过选择血清Lp(a)水平 升高的患者，并给该患者施用一种含PCSK9抑制剂的药物组合物，使得患者在接受该药物组 合物之后，血清Lp(a)水平自基线下降至少约10 %至约40 % (例如约25 %、约30 %或约 35%)〇
[0042] 本发明还包括通过选择高胆固醇血症患者和/或血清脂蛋白颗粒浓度高的患者， 并给该患者施用一种含PCSK9抑制剂的药物组合物，降低患者脂蛋白颗粒浓度的方法。除了 其他用途以外，依照本发明这一方面的方法可用于降低低密度脂蛋白颗粒(LDL-P)、中等密 度脂蛋白颗粒（IDL-P)以及极低密度脂蛋白颗粒(VLDL-P)的浓度，包括降低例如小VLDL-P (直径为29至4