420s时加入ATX( IOnM)，通过FLIPR-TERA仪器检测500s，激 发波长510_545nm，发射波长565_625nm的荧光信号，并且根据量效曲线下面积计算上述化 合物对Navl .7通道的半数抑制浓度(IC5q)，结果如表2所示。
[0052]表1.化合物1、化合物2、化合物3、化合物4、化合物5和化合物6的结构式。
[0054]表2.化合物1、化合物2、化合物3、化合物4、化合物5和化合物6对Nav 1.7通道的半 数抑制浓度(IC50)。
[0056] 实施例2
[0057] 本实施例用于说明本发明提供的多氧取代环己烯类化合物在制备预防或治疗神 经性疼痛药物中的应用。
[0058] 大鼠慢性坐骨神经压迫性损伤(chronic constriction injury，CCI)模型
[0059] 1.实验动物
[0060]购自南京市江宁区青龙山动物繁殖场的25只雄性SD大鼠，实验前将大鼠放置在安 静、避强光的环境中饲养一周以适应环境，光照与黑暗时间比为1:1，室温控制在25°C，湿度 55 %，大鼠能够自由进食和饮水。
[0061 ] 2.实验药品
[0062]化合物4 实验室自行制备
[0063] 10%水合氯醛 （批号:20130426,国药集团化学试剂有限公司）
[0064] 0 · 9 %氯化钠溶液 （批号:20023809,开开援生物制药股份W限公司）
[0065] 3.实验器材和设备
[0066]眼科手术器械一套 （南京华璧科学仪器有限公司）
[0067] 4-0铬制肠线 （上海浦东金环医疗用品股份有限公司）
[0068] Von Frey hairs test纤维丝刺激针（上海玉研科学仪器有限公司）
[0069] PL-200型全自动热痛刺激仪 （成都泰盟科技有限公司）
[0070]玻璃分针、消毒纱布、手巾、棉签、微量注射器。
[0071] 4.实验方法
[0072] 4.1随机分组
[0073] 取5只笼子用标记笔依次编号，动物临时编号为第一笼1~5号，第二笼6~10号，依 次至第5笼21~25号，随意抓取大鼠称重，每笼放入5只，并用苦味酸溶液按左前脚1、左后脚 2、右前脚3、右后脚4、无标记为5的次序在大鼠的毛皮上临时记号。运用Excel软件将大鼠体 重按从大到小排序，从统计学教科书中获取随机数字表，对动物进行重新分组。
[0074] 4.2建立模型
[0075] 腹腔注射10%水合氯醛（100mg/kg)。待大鼠麻醉后，选择左后侧肢，常规备皮，消 毒，切开皮肤及皮下组织，钝性分离肌肉和坐骨神经后，以4-0铬制肠线间隔Imm松结扎4道， 至神经外膜稍受压，但不影响神经外膜血运为止，打结时可见小腿肌肉轻微震颤，冲洗后逐 层缝合，假手术组除不结扎坐骨神经外，其余操作相同。
[0076] 4.3测痛阈
[0077] 4.3.1测量机械缩足反射阈值
[0078] 手术后1天开始，间隔1天使用Von Frey检测大鼠的机械缩足反射阈值（Paw withdraw mechanical threshold，PWMT)结果见图4,将大鼠放置于升高的网格状金属网 上，盖以透明的有机玻璃罩。先让大鼠适应15分钟，以一组强度递增的纤维丝对大鼠手术同 侧足底以及对侧足底进行机械刺激，观察大鼠是否出现缩足反应，开始使用小力度刺激大 鼠后趾，若大鼠没有缩足反应，则选择其上的一级力度刺激后趾;若有缩足反应，则选择其 下的一级力度刺激后趾。照此下去，在出现这一次与上一次不同的反应(有缩足反应至无缩 足反应或无缩足反应至有缩足反应)时，继续刺激3次，包括以前的2次，一共5次，即可完成 机械缩足反射阈值测定。若需要使用的力度超过15g或者低于lg，则该侧机械缩足反射阈值 直接记为15g或lg。
[0079] 使用微量注射器于鞘内给予溶剂对照(5体积％DMS0，5体积％吐温80，90体积％生 理盐水），化合物4低剂量(5yg/10yl/只），中剂量（10yg/10yl/只），高剂量(20yg/10yl/只）， 于给药后他、211、411、611、811测量机械缩足反射阈值。结果如表3和图4所示。
[0080]表3.化合物4对坐骨神经缩窄性疼痛机械痛阈敏感化的影响(η = 5)(均数±标准 差）。
[0082] 注:分析结果中*表示P < 0.05，#表示P < 0.01，*#表示P < 0.001与溶剂对照组相 比(使用ANOVA检验）。
[0083] 4.3.2测量热缩足反射潜伏期
[0084] 热缩足反射潜伏期（Paw withdraw thermal latency，PWTL)，结果见图5。手术后1 天开始，间隔1天，在安静的实验室中，保持实验室室内温度稳定于22°c，将有机玻璃箱置于 6mm厚的玻璃板上，将大鼠置于有机玻璃箱内，待大鼠适应15分钟后，用可移动光束照射大 鼠损伤侧足底中部，从光束照射开始到大鼠出现抬腿或舔足的时间为PWTL(单位：S)，自动 切断时间设置为30s，用于防止光束照射过久导致组织损伤，设定光强度刺激为30%，使 PWTL基础值为14s左右，并在实验进展过程中保持一致。每只大鼠测定3次，间隔5分钟，取平 均值。
[0085] 使用微量注射器于鞘内给予对照溶剂(5体积％ DMSO，5体积％吐温80，90体积％生 理盐水），化合物4低剂量(5yg/10yl/只），中剂量（10yg/10yl/只），高剂量(20yg/10yl/只） 后他、211、411、611、811测量热缩足反射潜伏期。结果如表4和图5所示。
[0086] 5.统计学方法统计学处理用GraphPad Prism 5统计软件包进行数据处理，计量资 料以均数土标准差(X土S)表示，组内、组间比较采用双因素方差分析，P<0.05为差异有统 计学意义。
[0087]表4.化合物4对坐骨神经缩窄性疼痛热痛阈敏感化的影响(η = 5)(均数土标准差）
[0089] 注:分析结果中*表示P < 0 · 05，#表示P < 0 · 01，林*表示P < 0 · 001比较溶剂对照组 (使用ANOVA检验）。
[0090] 实施例3
[0091]本实施例用于说明本发明提供的多氧取代环己烯类化合物在制备预防或治疗疼 痛药物中的应用。
[0092]小鼠醋酸扭体实验
[0093] 1.实验动物
[0094] 购自南通大学实验动物中心的25只ICR小鼠，体重18-22g，雌雄各半，实验前将小 鼠放置在安静、避强光的环境中饲养3天以适应环境，光照与黑暗时间比为1:1，室温控制在 25 °C，湿度55 %，小鼠能够自由进食和饮水。
[0095] 2.实验药品
[0096] 阿司匹林 （南京华建化工有限公司）
[0097] 化合物4
[0098] 0.9%氯化钠溶液 （批号:20023809，开开援生物制药股份有限公司）
[0099] 醋酸 （货号：10120311333南京化学试剂有限公司）
[0100] 3.实验器材和设备
[0101]微量注射器 （上海高鸽工贸有限公司）
[0102] 4.实验方法
[0103] 4.1随机分组
[0104] 取5只笼子用标记笔依次编号，动物临时编号为第一笼1~5号，第二笼6~10号，依 次至第5笼21~25号，随意抓取小鼠称重，每笼放入5只，并用苦味酸溶液按左前脚1、左后脚 2、右前脚3、右后脚4、无标记为5的次序在小鼠的毛皮上临时记号。运用Excel软件将小鼠体 重按从大到小排序，从统计学教科书中获取随机数字表，对动物进行重新分组。
[0105] 4.2小鼠醋酸扭体实验
[0106] 给予阿司匹林组(300mg/kg)灌胃