嗪基类异黄酮化合物、药物及其应用的制作方法

专利名称：嗪基类异黄酮化合物、药物及其应用的制作方法
专利说明嗪基类异黄酮化合物、药物及其应用 发明领域 本发明涉及噁嗪基类异黄酮化合物和包含它的组合物。本发明还涉及所述化合物的制备方法及其作为治疗剂，尤其是心保护剂、抗炎药和抗氧化剂，用于治疗或预防动脉粥样硬化、再狭窄及相关疾病和病症的应用。该化合物也可用作化疗药。

背景技术：
已知超过700种天然产生的异黄酮，其中一些的生物学性质具有潜在的治疗价值。然而，虽然对异黄酮及其衍生物进行的大量研究也累积了了解，但尚未实现对治疗应用的异黄酮化合物及其活性的全面认识。而且，仍然需要新的、改善的、或者至少可选的活性剂，用于治疗、预防、改善、防御和/或防止各种疾病和病症。
因此，需要新一代化合物，其具有对动物，尤其是人类健康和幸福重要的生理学特性，并且需要发现利用这些特性治疗、改善和预防疾病的新方法。重要的是，非常需要鉴别新的、改善的、更好的和/或可选的用于治疗、改善或预防血管和炎症疾病，尤其是与血管介入有关的再狭窄的药物组合物、试剂和方案。还需要用作心保护剂的化合物以及抑制内皮细胞中粘着分子的表达及相关活性的方法。
还需要能够对抗细胞增殖，包括癌症和相关疾病的化合物。进一步需要能够解决已知药物的一些不良副作用的化疗剂。还需要可被医师用来对抗许多和各种类型的癌症的疗法以及提供新的治疗手段以解决增殖细胞对现有化疗剂和治疗方案耐受性的问题。人们在广泛探索可与其他化学疗法协同起效的药剂。
发明概述 意外地，本发明发现了一类新的式(I)的[6，7-e]-1，3-噁嗪基类异黄酮化合物，其具有重要的治疗活性，包括强效抗炎和抗氧化剂活性。因此，本发明的化合物可用于治疗动脉粥样硬化、再狭窄、动脉粥样化形成、冠心病和相关病症。
因此，根据本发明的一方面，提供了式(I)的噁嗪基类异黄酮化合物及其药学上可接受的盐
式中， R1是烷基、环烷基、芳烷基、烯基、炔基、芳基或烷基芳基， R2、R3和R4独立地是氢、羟基、OR9、OC(O)R9、OSi(R10)3、烷基、烷基、环烷基、芳基、芳烷基、巯基、烷硫基、硝基、氰基或卤素， R5是氢、烷基、环烷基、芳基、芳烷基、硝基、氰基或卤素， R6是氢、烷基、环烷基、芳基、芳烷基、硝基、氰基或卤素， R7是氢、烷基、环烷基、芳基或芳烷基， R8是氢、烷基、环烷基、芳基、芳烷基、硝基、氰基或卤素， R9是烷基、芳基或芳烷基， R10独立地是烷基或芳基， X是O、NR12(其中R12是烷基、芳基或芳烷基)、或S，优选O，和 划线

表示单键或双键， 其中烃取代基可任选地被烷基、卤素、酰氧基、羟基、卤素、烷氧基、甲硅烷氧基、硝基和氰基中的一个或多个所取代。
根据本发明的其他方面和实施方式，提供了噁嗪基类异黄酮化合物，包括下文所定义的子式(I-I)和(I-II)的化合物。
根据本发明的另一方面，提供了式(I)的化合物的制备方法，
式中， R1是烷基、环烷基、芳烷基、烯基、炔基、芳基或烷基芳基， R2、R3和R4独立地是氢、羟基、OR9、OC(O)R9、OSi(R10)3、烷基、烷基、环烷基、芳基、芳烷基、巯基、烷硫基、硝基、氰基或卤素， R5是氢、烷基、环烷基、芳基、芳烷基、硝基、氰基或卤素， R6是氢、烷基、环烷基、芳基、芳烷基、硝基、氰基或卤素， R7是氢、烷基、环烷基、芳基或芳烷基， R8是氢、烷基、环烷基、芳基、芳烷基、硝基、氰基或卤素， R9是烷基、芳基或芳烷基， R10独立地是烷基或芳基， X是O、NR12(其中R12是烷基、芳基或芳烷基)、或S，优选O，和 划线

表示单键或双键， 其中烃取代基可任选地被烷基、卤素、酰氧基、羟基、卤素、烷氧基、甲硅烷氧基、硝基和氰基中的一个或多个所取代， 所述方法包括使式(II)的类异黄酮化合物与甲醛和伯胺R1-NH2反应形成式(I)的化合物
式(II)中，R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8和X如上定义，划线

表示单键或双键， 式R1-NH2中，R1是可任选取代的烷基、环烷基、芳烷基、烯基、炔基、芳基或烷基芳基。
根据本发明的另一方面，提供了治疗、预防或改善疾病或病症的方法，该方法包括给予对象任选地与载体和/或赋形剂结合的一种或多种式(I)的化合物或其药学上可接受的盐或衍生物。
根据本发明的另一方面，提供了一种或多种式(I)的化合物或其药学上可接受的盐或衍生物在制备用于治疗疾病或病症的药物中的应用。
根据本发明的另一方面，提供了用于治疗、预防或改善疾病或病症的药剂，所述药剂包含一种或多种式(I)的化合物或其药学上可接受的盐或衍生物。
根据本发明的另一方面，提供了一种药物组合物，其包含一种或多种式(I)的化合物或其药学上可接受的盐或衍生物以及一种或多种药用载体、赋形剂、助剂和/或稀释剂。
根据本发明的另一方面，提供了用于递送活性剂的可植入的医疗器械，其中所述器械包含任选地与一种或多种其他活性剂结合的本发明噁嗪基化合物。在一个实施方式中，可植入的医疗器械是药物洗脱支架。
结合附图，通过以下说明书和权利要求书，可以明显看出本发明的这些和其他方面。
附图简要说明

图1a和1b描绘了化合物(1)和(2)对用LPS刺激的人单核细胞中TNFα合成的影响。
图2描绘了10μM测试化合物与LPS-刺激的RAW 264.7鼠巨噬细胞培育时，测试化合物相对于仅用运载体处理对细胞存活率的影响。
图3描绘了测试化合物相对于仅用运载体处理，对RAW 264.7鼠巨噬细胞中LPS-诱导的PGE2合成造成的平均变化。
图4描绘了测试化合物相对于仅用运载体处理，对RAW 264.7鼠巨噬细胞中LPS-诱导的TXB2合成造成的平均变化。
图5描绘了测试化合物相对于仅用运载体处理，对RAW 264.7鼠巨噬细胞中LPS-诱导的TNFα合成造成的平均变化。
图6描绘了测试化合物相对于仅用运载体处理，对RAW 264.7鼠巨噬细胞中LPS-诱导的NO合成造成的平均变化。
图7a、7b和7c描绘了相对于VCAM-1、ICAM-1和E-选择蛋白，化合物(1)和(2)对粘着分子mRNA表达的影响。
图8描绘了与10μM测试化合物培育后对HUVSMC增殖的影响。
图9a和9b分别描绘了化合物(1)和(2)对去甲肾上腺素收缩力的影响。
图10描绘了与10μM测试化合物培育对T细胞增殖和细胞因子产生的影响。
图11描绘了与10μM测试化合物培育对B细胞增殖和细胞因子产生的影响。
图12描绘了与10μM测试化合物培育对未受刺激的淋巴细胞增殖的影响。
图13a、13b、13c和13d描绘了在浓度1μM时检查测试化合物的PPARγ活性。数据来自四次单独试验。Rosi＝罗格列酮0.1μM。
图14比较了测试化合物对大鼠A7r5主动脉平滑肌细胞中胱冬酶-3/7活性的影响。
图15a、15b和15c比较了测试化合物对HUVSMC增殖的影响。
图16a和16b比较了测试化合物对A7r5大鼠主动脉平滑肌细胞增殖的影响。
图17a和17b比较了测试化合物对来自大鼠主动脉培养基的A10平滑肌细胞增殖的影响。
图18a、18b和18c分别比较了测试化合物对VCAM-1、ICAM-1和E-选择蛋白的表达的影响。
图19比较了30μM的测试化合物对TNFa刺激的THP-1单核细胞/巨噬细胞中NFκB-启动子活性的影响。
图20比较了测试化合物对TNFa刺激的THP-1单核细胞/巨噬细胞中NFκB-启动子活性的影响。
图21比较了测试化合物作为自由基清除剂对2，2-二苯基-1-苦基苯肼(2，2-diphenyl-1-picrylhidrazyl，DPPH)的活性。
发明详述 本发明发现，式(I)类型的1，3-噁嗪基类异黄酮化合物具有意外且意想不到的生物学和药学特性。
本发明噁嗪基类异黄酮化合物也可用作抗氧化剂、抗炎药、心保护剂，用于治疗包括再狭窄在内的血管疾病。
本文所用术语″狭窄″取其最广泛涵义，表示体内通路或孔道(例如具体是血管或动脉)的直径变窄或收缩，通常导致血流减少以及伴随的血管阻塞问题。通常，狭窄是脂质和其他血衍生物集中蓄积和沉淀以及包括血管平滑肌细胞(VSMC)在内的新内膜增殖导致的结果。
术语″再狭窄″或继发性狭窄取其最广泛涵义，表示典型地在血管介入、损伤或外科手术(包括气囊血管成形术)之后狭窄的复发。狭窄和再狭窄可在全身血管中发生，尤其具有医疗重要性的是在冠状动脉中狭窄会威胁生命，并且常常是致命的。
现在清楚的是在血管球囊损伤和支架植入后炎症过程对再狭窄的贡献作用(Schiele 2005)。对急性血管壁的炎症反应导致单核细胞浸润，加重了新内膜生长(Schober和Weber 2005)。
现在认为，涉及核因子κB(NFκB)的氧化敏感性调节途径在一些动脉粥样硬化相关基因的转录中起重要作用。接触超氧离子可激活NFκB调节复合物，启动编码某些白细胞粘着分子、化学引诱物细胞因子和可能影响胞外基质代谢的酶的基因的转录。实验性动脉损伤激活NFκB，增加这些基因的表达(Libby和Ganz 1997)。抑制NFκB可限制内皮活化，诱导粥样硬化病变中VSMC凋亡，以及在血管成形术后形成新内膜(Weber和Erl 2000)。
动脉粥样硬化是主要针对血脂障碍和其他风险因子的慢性炎症反应的具体例子。保留的脂蛋白的氧化可以是炎症细胞浸润产生ROS或浸润的巨噬细胞产生的脂肪氧化酶所导致的(Getz 2005)。认为氧化的脂蛋白可诱发促进动脉粥样化形成的许多细胞功能的改变。氧化的低密度脂蛋白(OxLDL)具有促炎作用，可导致内皮功能障碍且易于在动脉壁内蓄积(Rosenson 2004)。
血管成形术或支架植入后早期还发生氧化应激(Tardif等，2002)。动物研究已提供了氧化剂响应动脉损伤而释放的证据，血管成形术后粥样硬化病变中留下的主要细胞类型巨噬细胞和VSMC可增加ROS并诱导内皮功能障碍和巨噬细胞活化，导致刺激基质重塑和平滑肌细胞增殖的细胞因子和生长因子的释放(Libby和Ganz 1997)。抗氧化剂普罗布考对于降低支架植入后的再狭窄以及临床试验中颈动脉粥样硬化的加剧具有强效活性(Tardif2005)。
因此，化合物的抗氧化活性有利于其减轻动脉粥样硬化和再狭窄的能力。本发明化合物的强效抗氧化活性使其适合用作自由基清除剂和LDL氧化的抑制剂。
早期动脉粥样硬化涉及循环的炎症细胞及其经内皮迁移的作用。该过程主要是由细胞粘着分子介导的，这种粘着分子在血管内皮和响应一些炎症刺激物的白细胞上表达。选择蛋白(P、E和L)参与血管壁上白细胞的旋转和束缚。细胞间粘着分子(ICAM)和血管细胞粘着分子(VCAM-1)，以及一些整联蛋白可诱导炎症细胞在血管表面的牢固粘附。VCAM-1表达限于损伤和损伤-易感染区域，而ICAM-1表达更广泛且延伸入未涉及的主动脉和损伤保护区域。
粘着分子表达增加在再狭窄中起到部分作用。在46位进行选择性经皮穿腔冠状血管成形术(PCTA)患者的前瞻性研究中，与没有再狭窄的患者相比，6个月随访出现冠状动脉再狭窄的患者在其循环的单核细胞表面上粘着分子显著增加(Navarro-Lopez等，2003)。还意外地发现，本发明化合物能够阻断响应已知能够激活动脉粥样硬化、再狭窄、细胞粘附分子表达所介导的炎症反应和其他疾病的许多信号而诱导的内皮细胞表面粘着分子，尤其是E-选择蛋白和VCAM-1的表达(Navarro-Lopez等，2003)。该结果表明，此化合物适用于治疗或预防再狭窄、冠心病、咽峡炎和其他血管和心血管病、以及粘着分子E-选择蛋白和VCAM-1所介导的炎症疾病。用于抑制细胞粘着分子表达的化合物的具体分子机制尚未完全了解。
VSMC增殖是动脉粥样硬化过程中的重要步骤，也是支架植入期间发生的血管损伤的响应组分(McNamara等，1996；Rivard和Andres 2000)。因此，能够抑制VSMC增殖的试剂可能具有对抗致动脉粥样化的特性。还发现，本发明的化合物能够抑制人VSMC的细胞增殖。该活性表明化合物防止粥样硬化病变的发生和发展的潜力，提供了潜在的血管保护效果。
内皮响应生理刺激物，通过产生松弛和收缩因子来调节VSMC的收缩性。内皮功能障碍表现为内皮依赖性血管舒张(EDV)的病损以及促凝血/促炎内皮活性，因此EDV的评估是测试内皮功能的常规参数(Patti等，2005)。内皮功能障碍与冠状支架植入后再狭窄风险较高有关(Patti等，2005)，可能是因为没能维持不粘连的管腔表面(Nabel 1991)。与BMS植入相比，DES植入似乎对局部EDV产生不良影响，可能导致与涂覆的支架有关的长期问题(Hofma等，2006；Fuke等，2007)。
本发明化合物还具有强效血管调节能力。因此，该化合物能够拮抗收缩活性，拮抗直接血管舒张和保护免受氧化低密度脂蛋白所导致的内皮损伤。其活性似乎还具有独特的作用机制。因此，该化合物还具有用作心保护治疗剂的潜力，包括治疗、改善或预防血管介入后的再狭窄。
免疫系统是动脉粥样硬化炎症的重要组分(Hansson和Libby 2006)。T-和B-淋巴细胞都能调节动脉粥样化形成的进程，主要分别通过分泌细胞因子和产生免疫球蛋白(Vanderlaan和Reardon 2005)。动脉粥样硬化斑块可包含许多T细胞，其中主要是CD4+细胞，虽然也检测到较少数量的CD8+细胞(Getz2005；Hansson和Libby 2006)。CD4+细胞可分为几个亚组，包括Th1细胞和Th2细胞，Th1细胞主要分泌促炎细胞因子如INFγ，Th2细胞可抗炎且不产生INFγ。细胞和细胞因子的参与模式提示，动脉粥样硬化病变中绝大多数是Th1。INFγ似乎具有促进动脉粥样化的作用-INFγ-/-小鼠和注入重组INFγ的高胆固醇血症(hyperchlolesterolaemic)小鼠中都发生粥样硬化病变增加(Getz2005)。IFNγ激活巨噬细胞(斑块中最主要的细胞类型)，从而增加NO、促炎细胞因子以及促血栓形成和血管活性介导物的产生。
T细胞也产生TNFα，另一种能够激活NFκB途径，从而导致ROS产生的促炎细胞因子(Hansson等，2002)。TNFα也具有显著的代谢作用，包括抑制脂蛋白脂肪酶，导致富含甘油三酯的脂蛋白在血中蓄积。临床研究中脂蛋白和TNFα增加与心脏病有关(Hansson和Libby 2006)。
实验中发现B细胞具有动脉保护作用，因为遗传或通过脾切除术清除它们可增加动脉粥样硬化的发生率，这种作用可能是因为α-OxLDL抗体的产生(Vanderlaan和Reardon 2005)。B细胞可也直接通过分泌细胞因子来调节免疫应答。在某些情况下，B细胞能一次产生多种限于T细胞的细胞因子，包括IL-6、IFN-γ和TNFα。T细胞位于实际斑块内；B细胞几乎不存在但常见于邻近的外膜中。
对于原发性动脉粥样硬化，支架植入后的再狭窄也与炎症和免疫活性有关。炎症细胞(单核细胞和巨噬细胞)和T细胞浸润再狭窄病变(Navarro-Lopez等，2003)。在对上述选择的PCTA患者的前瞻性研究中，与基线图相比，6个月随访中发生冠状动脉再狭窄的患者中循环的细胞毒T-淋巴细胞显著增加，达到比未发生再狭窄的患者更高的水平(Navarro-Lopez等，2003)。
IL-6是与急性期反应有关的促炎细胞因子。IL-6水平也与独立于传统风险因子的亚临床动脉粥样硬化病变有关，IL-6对ICAM-1分泌的影响也可能在这种联系中起作用(Amar等，2006)。冠状动脉阻塞/支架周围区域取样中IL-6水平的升高也与经皮冠状动脉介入(PCI)和PCTA后再狭窄有关(Hojo等，2000；Funayama等，2006)。并且，再狭窄患者循环的IL-6和TNFα水平升高(Navarro-Lopez等，2003)。
也可给予噁嗪基类异黄酮化合物来治疗外科手术或血管成形术不能治疗的小血管疾病，或者外科手术不合适的其他血管疾病，用于在血管再生治疗之前和之后稳定患者。活性化合物也可在血管介入，例如冠状动脉或血管成形术之前和之后立即给予，用来减轻或消除目前导致临床显著性再狭窄的异常增殖和炎症反应。而且，化合物也可用于治疗心脏移植排斥以及人造血管植入和移植手术。
本发明方法代表了治疗血管疾病和病症的显著进步，因为它们超出了简单设计用于抑制疾病进程的公知疗法。本文提供的实验数据意外地表明，在各种哺乳动物模型中血管介入或血管成形术后的再狭窄得到抑制或者至少显著减轻。因此，适当使用时，本发明方法显示了异黄酮化合物及其衍生物在医疗上解决再狭窄的潜力，可能通过防止新病损发生和导致已有病症稳定或消退来治愈动脉粥样硬化。
式(I)的化合物对正常细胞的毒性可接受，并具有良好的生物利用度。本发明化合物具有显著优于、相当于现有癌症疗法的抗癌活性，或者至少是现有癌症疗法有用的替代方式。
式(I)的化合物对广泛类型的人和动物来源的癌细胞具有细胞生长抑制和细胞毒作用。癌细胞是指显示出恶性特征并可通过不受调节的生长和行为与非癌细胞区分开、且除非成功治愈通常最终威胁生命的细胞。
发现能对式(I)的化合物起反应的癌细胞是上皮来源(例如，前列腺、卵巢、子宫颈、乳腺、胆囊、胰腺、结肠直肠、肾脏和非小细胞肺癌细胞)，间充质来源(例如，黑色素瘤、间皮瘤和肉瘤癌细胞)和神经来源(例如，神经胶质瘤癌细胞)。发现一组相关化合物对癌细胞显示如此强的细胞毒性，但对非癌细胞(例如，源自人包皮的角质形成细胞)毒性低是极不寻常且令人吃惊的。这种癌细胞选择性极不寻常且出乎意料。
式(I)的化合物的优点是对标准抗癌药物敏感性差的熟知癌细胞显示有细胞毒性。发现对例如黑色素瘤、结肠腺癌以及卵巢癌、乳腺癌和肺癌等癌症具有如此强的活性极不寻常且出乎意料。
因此，本发明还提供了式(I)的化合物通过降低肿瘤的生长速率或减小所述肿瘤大小来治疗癌症患者的应用，所述治疗可单用所述化合物，和/或彼此联用，和/或与其它抗癌药联用，和/或与放疗联用。
单用或在上述联合治疗中使用本发明化合物可降低标准抗癌症治疗时患者常常发生的不良副作用。利用本发明化合物可能意味着在这种治疗中可利用较低剂量，对于癌症患者这代表了重要进步。
上述特性提供了显著的临床优势。
在本发明优选的实施方式中，提供了式(I-I)的噁嗪基类异黄酮化合物及其药学上可接受的盐
式中， R1是烷基、环烷基、芳烷基、烯基、炔基、芳基或烷基芳基， R2、R3和R4独立地是氢、羟基、OR9、OC(O)R9、OSi(R10)3、烷基、烷基、环烷基、芳基、芳烷基、巯基、烷硫基、硝基、氰基或卤素， R5是氢、烷基、环烷基、芳基、芳烷基、硝基、氰基或卤素， R6是氢、烷基、环烷基、芳基、芳烷基、硝基、氰基或卤素， R7是氢、烷基、环烷基、芳基或芳烷基， R8是氢、烷基、环烷基、芳基、芳烷基、硝基、氰基或卤素， R9是烷基、芳基或芳烷基， R10独立地是烷基或芳基，和 划线

表示单键或双键， 其中烃取代基可任选地被烷基、卤素、酰氧基、羟基、卤素、烷氧基、甲硅烷氧基、硝基和氰基中的一个或多个所取代。
更优选地，提供了式(I-II)的化合物及其药学上可接受的盐
式中， R1是烷基、芳烷基、芳基或烷基芳基， R3和R4独立地是氢、羟基、OR9、OC(O)R9、OSi(R10)3、烷基、烷基、芳烷基、硝基、氰基或卤素， R5是氢、烷基或卤素， R6是氢或烷基， R7是氢、烷基或芳基， R8是氢、烷基或卤素， R9是烷基或芳烷基， R10独立地是烷基， 划线

表示单键或双键， 其中烃取代基可任选地被烷基、卤素、酰氧基、羟基、卤素、烷氧基、甲硅烷氧基、硝基和氰基中的一个或多个所取代； 更优选地， R1烷基、苯基烷基、苯基、萘基烷基、萘基或烷基苯基， R3和R4独立地是氢、羟基、OR9、OC(O)R9、烷基、硝基、氰基或卤素，R3和R4中至少一个不是氢， R5是氢、烷基或卤素， R6是氢或烷基， R7是氢或苯基， R8是氢、烷基或卤素， R9是烷基，和 划线

表示单键或双键， 其中烃取代基可任选地被烷基、卤素、酰氧基、羟基、卤素、烷氧基、硝基和氰基中的一个或多个所取代； 甚至更优选地， R1是任选地被烷基、卤素、羟基、乙酰氧基、甲氧基、乙氧基、硝基或氰基取代的甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、苯甲基、1-苯乙基、苯基，萘基甲基、萘基或烷基苯基， R3和R4独立地是氢、羟基和甲氧基，R3和R4中至少一个不是氢， R5是氢、甲基或卤素， R6是氢、甲基或乙基、 R7是氢或任选地被烷基、卤素、羟基、甲氧基、硝基或氰基取代的苯基， R8是氢、甲基或卤素， 划线

表示单键或双键； 更优选地， R1是任选地被甲基、卤素、羟基、甲氧基、硝基或氰基取代的甲基、乙基、丙基、苯甲基、1-苯乙基、苯基、萘基甲基或甲基苯基， R3和R4独立地是氢、羟基和甲氧基，R3和R4中至少一个不是氢， R5是氢， R6是氢， R7是氢或被甲氧基任选取代的苯基， R8是氢， 划线

表示单键或双键。
在优选实施方式中，卤素是氯或溴。
在另一优选的实施方式中，R1是苄基(苯甲基)。
在另一优选的实施方式中，R1是1-苯乙基。
在另一优选的实施方式中，R1是烷基或烷氧基烷基，更优选地甲基、丙基或3-甲氧基丙基。
在另一优选的实施方式中，R1是被硝基、烷基、烷氧基，优选甲氧基，或卤素，优选氯取代的苯基或苄基。
在另一优选的实施方式中，R1是萘基甲基。
在另一优选的实施方式中，R3是羟基。
在另一优选的实施方式中，R4是羟基。
在另一优选的实施方式中，R3和R4是甲氧基。
在另一优选的实施方式中，R8是烷基，更优选甲基。
在另一优选的实施方式中，R8是卤素，更优选溴。
在另一优选的实施方式中，划线

代表双键。
在另一优选的实施方式中，划线

代表单键。
尤其优选的式(I)的化合物是化合物(1)-(32)或其药学上可接受的盐 4-(3-苄基-2，3，4，8-四氢色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪-7-基)酚(1) 4-(3-(1-苯乙基)-2，3，4，8-四氢色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪-7-基)酚(2) 4-(3-丙基-2，3，4，8-四氢色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪-7-基)酚(3) 4-(3-甲基-2，3，4，8-四氢色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪-7-基)酚(4) 7-(3，4-二甲氧基苯基)-3-丙基-2，3，4，8-四氢色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪(5) 4-(3-(4-甲氧基苄基)-2，3，4，8-四氢色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪-7-基)酚(6) 4-(3-苯基-2，3，4，8-四氢色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪-7-基)酚(7) 4，4′-(色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪-3，7(2H，4H，8H)-二基)二酚(8) 7-(3，4-二甲氧基苯基)-3-(4-甲氧基苄基)-2，3，4，8-四氢色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪(9) 3-(3-苄基-2，3，4，8-四氢色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪-7-基)酚(10) 3-(3-苯基-2，3，4，8-四氢色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪-7-基)酚(11) 7-(3，4-二甲氧基苯基)-3-苯基-2，3，4，8-四氢色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪(12) 3-苄基-7-(3，4-二甲氧基苯基)-10-甲基-2，3，4，8-四氢色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪(13) 7-(3，4-二甲氧基苯基)-10-甲基-3-丙基-2，3，4，8-四氢色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪(14) 4-(3-(4-氯苄基)-2，3，4，8-四氢色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪-7-基)酚(15) 4-(3-(3-甲氧基丙基)-2，3，4，8-四氢色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪-7-基)酚(16) 3-(3-(3-甲氧基丙基)-2，3，4，8-四氢色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪-7-基)酚(17) 4-(3-对甲苯基-2，3，4，8-四氢色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪-7-基)酚(18) 7-(3，4-二甲氧基苯基)-10-甲基-3-对甲苯基-2，3，4，8-四氢色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪(19) 3-(3-对甲苯基-2，3，4，8-四氢色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪-7-基)酚(20) 4-(7-(3-羟基苯基)色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪-3(2H，4H，8H)-基)苄腈(21) 4-(3-间甲苯基-2，3，4，8-四氢色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪-7-基)酚(22) 4-(3-(3-硝基苯基)-2，3，4，8-四氢色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪-7-基)酚(23) 4-(3-(4-氯苄基)-6-(4-甲氧基苯基)-2，3，4，8-四氢色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪-7-基)酚(24) 4-(10-溴-3-丙基-2，3，4，8-四氢色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪-7-基)酚(25) 3，4′-(10-甲基-色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪-3，7(2H，4H，8H)-二基)二酚(26) 4-(8-乙基-3-丙基-2，3，4，8-四氢色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪-7-基)酚(27) 4-(3-(4-叔丁基苯基)-2，3，4，8-四氢色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪-7-基)酚(28) 4-(3-(4-叔丁基苄基)-2，3，4，8-四氢色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪-7-基)酚(29) 4-(3-(萘-1-基-甲基)-2，3，4，8-四氢色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪-7-基)酚(30) 4-(3-(3，4-二甲基苯基)-2，3，4，8-四氢色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪-7-基)酚(31) 4-(3-(4-甲氧基苯基)-2，3，4，8-四氢色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪-7-基)酚(32)。
本发明尤其优选的用作抗氧化剂和自由基清除剂的化合物是化合物(1)、(2)、(3)、(8)、(16)和(17)。
本发明尤其优选的用作VSMC抑制剂的化合物是化合物(1)、(7)、(8)、(17)、(18)、(19)和(20)。
本发明尤其优选的用作抗癌剂的化合物是化合物(1)、(2)、(6)、(16)和(17)。
本发明尤其优选的用作PPARγ激动剂的化合物的化合物(1)、(2)、(6)、(7)、(18)、(20)、(22)、(23)、(27)和(29)。
本发明式(I)的化合物可具有手性中心。本发明包括所有对映异构体和非对映异构体以及它们任意比例的混合物。本发明也扩展至分离的对映异构体或对映异构体对。分离对映异构体和非对映异构体的方法是本领域技术人员所熟知的。
术语“异黄酮”或“类异黄酮化合物”在文中应作广义理解，包括异黄酮、异黄烯(isoflavene)、异黄烷(isoflavan)、异黄烷酮(isoflavanone)、异黄烷醇(isoflavanol)等，并不指向其具体涵义。
术语“烷基”应包括1-6个碳原子的直链或支链烷基，如甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基等。更优选所述烷基具有1-4个碳原子，特别是甲基、乙基、丙基或异丙基。
环烷基包括具有3-6个碳原子的环状烷基，如环丙基、环丁基、环戊基和环己基。
烷基、烯基或炔基或环烷基可任选地被烷基、卤素、酰氧基、羟基、卤素、烷氧基、甲硅烷氧基、硝基和氰基中的一个或多个所取代。
术语“芳基”应包括苯基、苄基、联苯基和萘基，可任选地被烷基、卤素、酰氧基、羟基、卤素、烷氧基、甲硅烷氧基、硝基和氰基中的一个或多个所取代。
术语“卤素”应包括氟、氯、溴和碘，优选氟和氯。例如，提及“卤代烷基”时包括一卤代、二卤代与最多至全卤代的烷基。优选的全卤代烷基是三氟甲基和五氟乙基。
术语“甲硅烷氧基”通常表示全烷基甲硅烷氧基，如三甲基甲硅烷氧基或叔丁基二甲基甲硅烷氧基。
本发明化合物包括所有的盐，例如酸加成盐、阴离子盐和两性离子盐，特别包括本领域技术人员已知的药学上可接受的盐。术语“药学上可接受的盐”指带电荷并能与药学制剂联合给予(例如作为盐的抗衡阳离子或抗衡阴离子)的有机或无机部分。本领域技术人员已知药学上可接受的阳离子，其包括但不限于钠、钾、钙、锌和季胺。本领域技术人员已知药学上可接受的阴离子，其包括但不限于氯离子、乙酸根、甲苯磺酸根、柠檬酸根、碳酸氢根和碳酸根。
药学上可接受的盐包括从以下酸形成的盐乙酸、抗坏血酸、天冬氨酸、苯甲酸、苯磺酸、柠檬酸、肉桂酸、乙磺酸、延胡索酸、谷氨酸、戊二酸、葡糖酸、氢氯酸、氢溴酸、乳酸、马来酸、苹果酸、甲磺酸、萘甲酸、羟基萘甲酸、萘磺酸、萘二磺酸、萘丙烯酸、油酸、草酸、草酰乙酸、磷酸、丙酮酸、对甲苯磺酸、酒石酸、三氟乙酸、三苯乙酸、丙三羧酸、水杨酸、硫酸、氨基磺酸、磺胺酸和琥珀酸。
术语“药学上可接受的衍生物”或“前药”指给予接受者后能直接或间接提供母体化合物或代谢物，或本身具有活性的活性化合物衍生物，包括例如磷酸衍生物和磺酸衍生物。因此，衍生物包括溶剂化物、药学上的活性酯、前药等。也包括在生理条件下可分离离去基团的衍生物，所述离去基团是可在体内分离而提供本发明化合物或它们的活性部分。离去基团可包括酰基、磷酸酯(基团)、硫酸酯(基团)、磺酸酯(基团)，优选单、二和全酰氧基取代的化合物，其中一个或多个侧链羟基受酰基，优选乙酰基的保护。本发明的酰氧基取代化合物通常容易切断为相应的羟基取代化合物。
为帮助合成本发明的化合物及其起始材料，适当时也可采用精通本领域的技术人员已知的化学官能团的保护、去保护、合成子和其它技术。
本发明的化合物和衍生物上官能团的保护可由本领域已经熟知的方法进行，例如T.W.Greene，Protective Groups in Organic Synthesis(有机合成保护基)，John Wiley & Sons，纽约，1981中描述的方法。
羟基保护基团包括但不限于羧酸酯，例如乙酸酯；芳酯，例如苯甲酸酯；缩醛/缩酮，例如丙酮化合物和亚苄基；醚，例如邻-苄基和对-甲氧基苄基醚；四氢吡喃醚和甲硅烷基醚，例如叔丁基二甲基甲硅烷基醚。
可通过，例如酸或碱催化的水解或还原，如氢化来除去保护基团。甲硅烷基醚可能需要氟化氢或氟化四丁铵来断裂。
医疗化学领域的技术人员应明白，式(I)的化合物可转化为其他式(I)的化合物，例如当式(I)的化合物具有一个或多个羟基取代基时，可用卤化剂处理醇而使这些羟基取代基中的一个或多个转化为卤素取代基如溴、氯或碘。卤化剂包括化合物如NBS、氢溴酸、氯气等。在诸如卤化等过程期间可能需要使用保护基来保护分子中的其他官能团。
用卤化剂处理不易使酚类羟基转化为相应的卤素化合物。然而，所需的卤素化合物例如可通过以下方法制备在HCl的存在下，在低温条件如0℃时，用NaNO2处理合适的芳胺起始材料，以形成相应的叠氮盐。然后用CuCl、CuBr、KI或HBF4处理，使叠氮化合物转化为所需的卤素化合物。
制备式(I)化合物的一般方法包括用甲醛和伯胺R1-NH2处理下式(II)的化合物以形成式(I)的化合物，
R1-NH2中R1是任选取代的烷基、环烷基、芳烷基、烯基、炔基、芳基或烷基芳基， 式(II)中R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8和X如上定义，划线

表示单键或双键，优选双键。
这些条件通常称为曼尼西反应，还涉及闭环以在类异黄酮A-环上形成1，3-噁嗪环。也可采用本领域已知的类似方法和变化形式来进行噁嗪合成，如Shigemasa等，Tetrahedron Letters，42(2001)7273-7275所述。
如果划线

代表双键，则采用氢和催化剂的标准氢化方法来制备相应的噁嗪异黄烷化合物，其中

代表单键。还原剂是本领域技术人员所熟知的，可包括氢化物来源如硼氢化物和碱金属硼氢化物，但在可采用合适地催化剂如碳载钯的催化氢化中包括氢气。其他合适的氢化物来源包括三乙酰氧基硼氢化钠、四丁基三乙酰氧基硼氢化铵和氰基硼氢化钠。优选地，如果存在双键则通过碳载钯上的氢化被还原。
式(III)的异黄酮化合物可通过本领域技术人员容易明白的许多来源衍生得到。例如，黄豆苷元(4′，7-二羟基异黄酮)和类似物容易得到或者可通过下文方案1所述的通用方法合成得到，如公开的国际申请WO 98/08503和WO01/17986及其中引用的参考文献所述，其内容被纳入本文作为参考。典型的合成过程如方案1所示
方案1 各种3-苯基取代的异黄酮可通过改变苯基乙酸衍生基团上的取代模式，或者用本领域已知的保护基团和合成子进行化学修饰而获得。
类似地，5-和/或8-取代的异黄酮可通过改变间苯二酚基团上的取代模式而获得。
式(II)的异黄-3-烯和异黄烷化合物可通过下文方案2所示的通用合成方法获得，如公开的国际申请WO 00/49009和WO 01/17986及其中引用的参考文献所述，其内容被纳入本文作为参考。典型的合成如方案2所示
方案2 例如首先将存在的酚部分保护成酰氧基或甲硅烷氧基时，氢化和脱水反应通常进行得更好。产物易于脱保护而形成相应的羟基取代的化合物。
4-取代的类异黄酮化合物例如可根据下文方案3所示的通用合成方法，通过异黄烷-4-酮化合物如保护的4′，7-二甲硅烷氧基二氢黄豆苷元上的格里亚反应(Grignard reaction)获得，如公开的国际申请WO 2006/032086及其中引用的参考文献所述，其内容被纳入本文作为参考。典型的合成如方案3所示
方案3 2-取代的类异黄酮化合物例如可从适当保护的异黄-3-烯化合物获得。用三苯甲基六氟磷酸酯处理后进行亲核加成而形成相应的异黄鎓盐(isoflavyliumsalt)中间体。亲核物质可包括三甲基甲硅烷基(TMS)衍生物、三丁基锡((Bu)3Sn)衍生物、醇、胺等。通用合成过程如方案4所示
方案4 本文所用的术语“治疗”、“预防”或“防止”、“改善”等可认为是其最广的范围。具体地说，术语“治疗”不一定意味着治疗某动物直至康复。因此，“治疗”包括缓解某具体病症的症状或严重性或防止或降低患某具体病症的风险。
根据本发明进行治疗性处理所需的一种或多种式(I)的化合物的量将取决于多种因素，其中包括具体应用、所用具体化合物的性质、要治疗的病症、给药模式以及患者状态。
可以常规实施的方式和用量给予式(I)的化合物。参见，例如Goodman和Gilman，The Pharmacological Basis of Therapeutics(治疗学的药理学基础)，第七版，(1985)。所用的具体剂量取决于所治疗的病症、对象的状态、给药途径和上述其它熟知的因素。总之，每位患者的日剂量可以是0.1mg-5g；通常是0.5mg-1g；优选50mg-200mg。根据需要治疗或缓解的病症的严重性，给药频率可以是在一周到几个月到几年的时间中每天一次或两天一次给予单剂量，至每天给予两次或三次。
还应理解，对于任何特定对象，应根据个体需要和给予或监督组合物给药过程的人员的专业判断随时间调节具体的剂量方案。
活性化合物相对短时间的治疗可用于引起癌症稳定或缩小或消退。较长时间的治疗可用于防止高风险患者中癌症的发生。
一般通过混合本发明化合物(为方便起见下文称为“活性化合物”)与本领域熟知的一种或多种药学上或兽医学上可接受的载体和/或赋形剂来制备用于治疗本文所述治疗性适应症的药物组合物。
当然，就与制剂中的任何其它成分相容而言，载体必须是可接受的，并且必须对对象无害。载体或赋形剂可以是固体或液体，或(同时是)二者，优选与化合物配制为单位剂量，例如片剂，可含有最多达100重量％的活性化合物，优选0.5-59重量％的活性化合物。
可将一种或多种活性化合物掺入通过任何熟知的药学技术制备的本发明制剂中，所述技术一般由混合诸组分(任选包含一种或多种辅助成分)构成。药物组合物中活性化合物的优选浓度将取决于药物的吸收、分布、失活和排泄速率以及本领域技术人员已知的其他因素。
本发明制剂包括适合于口服、直肠、经眼、含服(例如，舌下)、胃肠外(例如，皮下、肌肉内、真皮内或静脉内)、透皮给药(包括经鼻、口、阴道或直肠粘膜给药)以及作为吸入剂的那些制剂，虽然在任何给定的情况中最合适的途径取决于所治疗疾病的性质和严重性以及所用具体活性化合物的性质。
适合于口服给药的制剂可以离散单位存在，例如各含有预定含量活性化合物的胶囊、囊剂、糖锭或片剂；粉末或粒剂；水性或非水性液体配制的溶液或悬浮液；水包油或油包水乳剂。可采用任何合适的药学方法制备这种制剂，所述方法包括混合活性化合物与合适的载体(可含有一种或多种上述辅助成分)的步骤。
一般，可通过均匀且紧密混合活性化合物与液体或细分级的固体载体(或二者)，然后(如果需要)使得到的混合物成形，例如形成单位剂量来制备本发明制剂。例如，可通过压制或模塑含有活性化合物与(任选)一种或多种其它成分的粉末或颗粒来制成片剂。
可利用合适的机器压制自由流动的化合物，例如任选与粘合剂、润滑剂、惰性稀释剂和/或表面活性/分散剂混合的粉末或颗粒制备压制片。可利用合适的机器模塑用惰性液体粘合剂润湿的粉末状化合物来制成模塑片剂。
适合于含服(舌下)给药的制剂包括含有用调味基(通常是蔗糖和阿拉伯胶或黄蓍胶)配制的活性化合物的糖锭；和含有惰性基(例如明胶和甘油或蔗糖和阿拉伯胶)配制的化合物的软锭剂。
适用于眼内给药的制剂包括含有活性化合物和眼科学上可接受的载体或稀释剂的液体、凝胶和乳膏。
适合于胃肠外给药的本发明组合物可方便地含有活性化合物的无菌水性制品，所述制品宜与所需受者的血液等渗。这些制品优选静脉内给予，但也可通过皮下、肌肉内或真皮内注射给予。不难通过混合所述化合物与水或甘氨酸缓冲液并使得到的溶液无菌并且与血液等渗来制备这种制品。本发明的可注射制品通常含有0.1％-60％w/v的活性化合物，并可以0.1毫升/分钟/千克的速率给予。
输注制剂例如采用盐水作为载体以及增溶剂如环糊精或其衍生物进行制备。合适的环糊精包括α-环糊精、β-环糊精、γ-环糊精、二甲基-β-环糊精、2-羟乙基-β-环糊精、2-羟丙基-环糊精、3-羟丙基-β-环糊精和三甲基-β-环糊精。更优选环糊精是羟丙基-β-环糊精。合适的环糊精衍生物包括

环糊精的磺基丁基醚衍生物及其类似物，如US 5,134,127所述。
适用于直肠给药的制剂优选以单位剂量栓剂形式存在。适合于阴道给药的制剂优选以单位剂量阴道栓剂形式存在。可通过混合活性化合物与一种或多种常规固体载体，例如可可脂，然后使得到的混合物成形来制备这些制剂。
适合于局部给予皮肤的制剂或组合物宜采取软膏、乳膏、洗剂、糊剂、凝胶、喷剂、气溶胶或油的形式。可用的载体包括凡士林(Vasoline)、羊毛脂、聚乙二醇、醇类或其两种或更多种的组合。活性化合物的浓度通常是0.1％-5％w/w，更具体地说是0.5％-2％w/w。这种组合物的实例包括化妆品护肤乳膏。
适合于透皮给药的制剂可以离散的贴剂存在，所述贴剂适应于长期与受者表皮紧密接触。对于所述活性化合物，这种贴剂含有的活性化合物宜是例如，0.1M-0.2M浓度的任选缓冲的水溶液。例如参见Brown，L.等，(1998)。
适合于透皮给药的制剂也可通过离子电渗递送(参见，例如Panchagnula R等，2000)，其通常采取活性化合物的任选缓冲水溶液形式。合适的制剂包含柠檬酸或Bis/Tris缓冲液(pH 6)或乙醇/水并含有0.1M-0.2M活性成分。
适合于吸入的制剂可作为溶液、悬浮液或乳液形式的喷剂组合物递送。吸入喷剂组合物还可含有药学上可接受的推进剂，例如二氧化碳或氧化亚氮或含氢碳氟化合物如1，1，1，2-四氟乙烷、1，1，1，2，3，3，3-七氟正丙烷或其混合物。
本发明的化合物可以是食品的形式，例如，可以添加入、混合入、涂布于、组合或以其它方式加入食品中。术语食品采用其可能的最广泛涵义，包括液体制剂，例如包括奶制品在内的饮料；和其他食品，例如健康条(healthbar)、点心等。含有本发明化合物的食品制剂可根据标准实施方法容易地制备。
可将这些治疗方法、应用和组合物给予人或其它动物，包括哺乳动物，例如陪伴和家养动物(如狗和猫)、家畜(如，牛、绵羊、猪和山羊)、鸟类(如鸡、火鸡、鸭)、海洋动物，包括水产业中的动物(例如鱼、甲壳类和贝类)等。
活性化合物或其药学上可接受的衍生物、前药或盐也可与不影响所需作用的其它活性物质，或与能增加所需作用的物质，例如抗生素、抗真菌剂、抗炎药或抗病毒化合物共同给予。所述活性药物可包含两种或多种异黄酮或其衍生物与协同混合物的组合。活性化合物也可与降脂药，例如普罗布考和烟酸；血小板凝集抑制剂，如阿司匹林；抗血栓药物，例如酮苄香豆素；钙通道阻断剂，例如维拉帕米、地尔硫

和硝苯吡啶；血管紧张肽转化酶(ACE)抑制剂，例如卡托普利和依那普利；和β-阻断剂，例如心得胺、特布他林和拉贝洛尔联合给予。这些化合物也可与非类固醇抗炎药，例如布洛芬、吲哚美辛、阿司匹林、非诺洛芬、甲芬那酸、氟芬那酸和舒林酸联合给予。这些化合物也可与皮质类固醇或镇吐药，例如枢复宁

联合给予。
式(I)的化合物似乎特别适合与一种或多种抗癌药如顺铂、去氢柚木醇(dehydroequol)、泰素(紫杉醇)、吉西他滨、多柔比星、拓扑替康和/或喜树碱联用。与只用一种药物相比，这提高了治疗效果，例如以协同作用的形式。具体说，本发明化合物似乎是化学增敏剂，能提高与其共同给予的一种或多种抗癌药的细胞毒性。即使所述抗癌药通过各种不同机制起效似乎也是这样，例如顺铂通过与核DNA相互作用而起效，紫杉醇通过阻断细胞周期中的G2/M期细胞并阻止其形成正常有丝分裂器而起作用，吉西他滨通过掺入细胞DNA中并最终阻止有丝分裂而起效，多柔比星则是一种拓扑异构酶II抑制剂，阻止DNA复制和转录，而拓扑替康是拓扑异构酶I抑制剂。
有趣的是，在一些情况下，对癌细胞细胞毒性的提高并不伴随着对非癌细胞毒性的相应增加。虽然该观察结果对许多癌症的治疗具有重要意义，对于诸如黑色素瘤等癌症的治疗尤其重要，因为这类癌症极难治疗。
联合给药可以是同时或相继进行的。可通过在同时或相似时间在同一单位剂量中或在单独和分开的单位剂量中同时给予化合物。依次给药可视需要以任何顺序进行，给予第二种或后面的活性药物时，特别是需要累积或协同作用时，通常需要第一种或先给予的活性药物正在发挥其生理作用。
本发明还涉及包含联合疗法的包装。
本发明噁嗪基化合物也适合用作可植入医疗器械中采用的活性剂。这些可植入医疗器械被配置成在各种环境下使用，包括血管应用和作为药物洗脱支架。具体说，支架和导管被配置成适合植入患者体腔内，例如血管，例如冠状动脉、胆管、食管、结肠、气管或大支气管、输尿管和尿道的形状。支架尤其适用于治疗动脉粥样硬化狭窄和动脉瘤。
支架通常以收缩状态植入血管或体腔内，位于血管内时可扩张以维持血管开放而允许液体流过血管。支架具有支承结构如金属结构以提供所需的强度，常常具有外表面涂层以提供生物相容性和/或血相容性表面。涂层通常是负载治疗活性剂的聚合物材料，在特定的血管内位置释放而作用于周围的血管或其下游。
药物洗脱支架装置在治疗冠状动脉疾病中具有很大前景，尤其是重新打开或重新恢复因为动脉粥样硬化而狭窄的动脉中的血流。经皮介入期间使用药物洗脱支架后的再狭窄率显著低于裸露的金属支架植入过程和球囊血管成形术。
本领域普通技术人员应理解，本发明中使用的药物洗脱支架实际上可以是任何类型。药物洗脱支架可以至少部分地由医用级金属材料如不锈钢、铂、钛、钽、镍-钛、钴-铬及其合金形成。
支架也可由生物可吸收性材料构成。典型地，这些支架是具有金属样骨架的可完全重吸收的结构，通常采用标准球囊法植入，可负载药物。构成生物可吸收性支架的材料的例子是聚乳酸(PLA)或乳酸-乙醇酸共聚物(PLGA)、前者是一种可生物降解的热塑性脂族聚酯(Ormiston等，2007)，后者是一种可生物降解的生物相容性共聚物。其他例子是用镁制成支架(Erbel等，2007)。
活性剂可通过能提供药物释放平台的任何方式附连于可植入的医疗器械。结合可通过共价键、离子键或通过其他分子间相互作用，包括氢键和范德华力等实现。涂覆方法包括但不限于沉淀、凝聚和结晶。更典型地，活性剂与合适的生物相容性聚合物复合。然后用聚合物-药物复合物来形成控释的医疗器械，整合到预先形成的医疗器械中，或者用于涂覆医疗器械，如本领域技术人员所熟知的那样。涂层可以液体聚合物/溶剂基质的形式施加。液体涂层可通过板式打印(pad printing)、喷墨印刷、辊压、涂漆、喷雾、微量喷雾、浸渍、擦拭、静电沉积、汽相沉积、外延生长、它们的组合、以及实现活性剂控释释放的其他方法施加，这些方法也构成本发明的一部分。
适用于涂覆可植入的医疗器械的聚合物的例子包括乙烯-乙烯醇共聚物(EVAL)、聚(N-乙烯基吡咯烷酮)(PVP)、乙基纤维素、醋酸纤维素、羧甲基纤维素、纤维质、壳多糖、壳聚糖、聚(乙烯醇)、肝素、右旋糖苷、糊精、硫酸右旋糖苷、胶原、明胶、透明质酸、硫酸软骨素、糖胺聚糖、聚[甲基丙烯酸(2-羟乙基)甲基酯]、聚氨酯、聚醚型聚氨酯、聚酯型聚氨酯、聚碳酸酯型聚氨酯、热塑性聚酯、溶剂可溶性尼龙、聚(丙烯酰胺)、聚(丙烯酸)、丙烯酸和丙烯酸酯的共聚物、聚(甲基丙烯酸)、甲基丙烯酸和甲基丙烯酸酯的共聚物以及它们的掺混物。
本领域技术人员应理解，在形成医疗器械涂层中不同的聚合物更适合不同的溶剂。合适的溶剂的例子包括丙酮、乙酸乙酯、氯仿、二氯甲烷、DMAC、DMSO、DMF、THF、甲酰胺、N-甲基-2-吡咯烷酮(NMP)、环丁砜、苄基醇、环己醇、酚、甲酸、间甲酚、对甲酚、三氟乙酸、甘油、乙二醇、丙二醇、乙醇、丙醇以及它们的混合物。活性剂还必须在聚合物/溶剂混合物中适当可溶或可分散，并在涂覆过程期间保留其活性。
采用本领域已知的常规金属-聚合物粘附技术，例如浸渍、喷雾、擦拭和刷涂使聚合物粘附于支架。这些过程后可进行拆网操作(web clearing)(包括吹扫空气或旋涂)和干燥操作(包括蒸发、加热)，使涂层减压以去除溶剂和固化含药聚合物。聚合物涂层的厚度约为1-10微米或更多，可能需要一个以上的涂层，包括底涂层和保护性涂层。
活性剂载量通常占用于制备药物-聚合物层的制剂总质量的约0.1-10质量％。药物可包括能够对患者产生治疗或预防效果的其他物质，或者用于提高药物递送、用作防腐剂、稳定剂等的其他物质。
本发明噁嗪基化合物尤其适合用作可植入医疗器械的活性剂。活性剂产生对抗一种或多种病症的治疗效果，包括炎症、再狭窄如血管再狭窄、动脉粥样硬化、增生及其他疾病和病症。噁嗪基化合物可单独使用或者与其他活性剂组合。其他活性剂可选自抗血小板药、抗凝剂、抗血纤蛋白、抗炎剂、抗凝血酶、免疫抑制剂、抗增殖剂等。
适用于共同施加到支架上的治疗药物包括但不限于抗增殖剂如紫杉醇和雷帕霉素，抗凝血酶，免疫抑制剂如西罗莫司，抗脂质剂，抗炎药，抗肿瘤药，抗血小板药，血管新生剂，抗血管新生剂，维生素，抗有丝分裂物质，金属蛋白酶抑制剂，NO供体，雌二醇，抗硬化剂和血管活性物质，内皮生长因子，雌激素，β-阻滞剂，AZ阻滞剂，激素，他汀类药物，胰岛素生长因子，抗氧化剂，膜稳定剂，钙拮抗剂，类视黄醇(retenoid)，比伐卢定，苯氧二醇(phenoxodiol)，依托泊甙，噻氯匹定，迪普莱达莫和曲匹地尔，单独使用或与本文所述的任何治疗剂联用。治疗剂也包括肽，脂蛋白，多肽，编码多肽的多核苷酸，脂质，蛋白质药物，蛋白质偶联药物，酶，寡核苷酸及其衍生物，核酶，其他遗传物质，细胞，反义物质，寡核苷酸，单克隆抗体，血小板，朊病毒，病毒，细菌和真核细胞如内皮细胞，干细胞，ACE抑制剂，单核细胞/巨噬细胞或血管平滑肌细胞，这些仅仅是一些例子。治疗剂也可以是前药，给予宿主后代谢形成所需的药物。此外，也可将治疗剂预先配制成微胶囊、微球、微泡、脂质体、新核蛋白体(niosome)、乳剂、分散体等，然后掺入治疗层中。治疗剂也可以是放射性同位素，或是通过一些其他能量形式如光或超声能量，或者通过系统性给予的其他循环分子激活的试剂。治疗剂可实现多重功能，包括调节血管新生、再狭窄、细胞增殖、血栓形成、血小板聚集、凝血和血管舒张。抗炎药包括非甾体抗炎药(NSAID)，如芳基乙酸衍生物，如双氯芬酸；芳基丙酸衍生物，如萘普生；和水杨酸衍生物，如阿司匹林和二氟尼柳。抗炎药还包括糖皮质激素(类固醇)，如地塞米松、泼尼松龙和曲安西龙。抗炎药可与抗增殖剂联用以减轻组织对抗增殖剂的反应。
本文所述的一些药剂可与保持其活性的添加剂联合使用。例如，可使用添加剂如表面活性剂、蚁酸、抗氧化剂和去污剂以尽可能减小蛋白质药物的变性和聚集。可使用阴离子、阳离子或非离子去污剂。非离子型添加剂的例子包括但不限于糖，包括山梨糖醇、蔗糖、海藻糖；右旋糖苷类，包括右旋糖苷、羧甲基(CM)右旋糖苷、二乙基氨基乙基(DEAE)右旋糖苷；糖衍生物，包括D-葡萄糖胺酸和D-葡萄糖二乙基缩硫醛；合成聚醚，包括聚乙二醇(PEO)和聚乙烯吡咯烷酮(PVP)；羧酸，包括D-乳酸、乙醇酸和丙酸；具有疏水界面亲和力的去污剂，包括正十二烷基-β-D-麦芽糖苷、正辛基-β-D-葡萄糖苷、PEO-脂肪酸酯(例如，硬脂酸酯(卖泽59)或油酸酯)、PEO-去水山梨糖醇脂肪酸酯(例如吐温80、PEO-20去水山梨糖醇单油酸酯)、去水山梨糖醇脂肪酸酯(例如司盘60、去水山梨糖醇单硬脂酸酯)、PEO-甘油基-脂肪酸酯；甘油基脂肪酸酯(例如甘油基单硬脂酸酯)、PEO-烃-醚(例如，PEO-10油酰醚；曲通X-100；和芦布若尔。离子型去污剂的例子包括但不限于脂肪酸盐，包括硬脂酸钙、硬脂酸镁和硬脂酸锌；磷脂，包括卵磷脂和磷脂酰胆碱；CM-PEG；胆酸；十二烷基硫酸钠(SDS)；多库酯(AOT)；和牛胆酸。
本发明药物洗脱支架和导管可以在血管系统的各个部位中使用，包括神经血管、颈动脉、冠状血管、肾脏血管、主动脉、髂血管、股动脉或其他外周血管系统。支架可将活性剂递送至植入部位或该部位的下游。
药物洗脱支架可具有独立形成的多层，这样可赋予各层单独的化学组成和药动学性质。每层可包含一种或多种试剂，各层之间的比例相同或不同。可利用各层之间试剂浓度的变化来实现所需的递送分布图。例如，可实现约24小时的药物释放减少。在另一个例子中，可实现突释后持续约1周的恒定释放。其他例子可以在持续时间范围内，例如几天到几个月的时间内递送试剂。可实现从几小时到几个月的时间内基本上恒定的释放速率。各层可以是固体、多孔或填充有其他药物或赋形剂等。
不希望受理论限制，认为本发明的化合物可调节动物细胞内的多种信号转导过程，这些信号转导过程参与许多对于所有动物细胞的存活和功能而言至关重要的功能。因此，这些化合物在动物包括人类中具有广泛且重要的健康益处，尤其是具有预防和治疗重要和常见人类疾病、紊乱和功能的潜能，具有基本上未曾料到的益处。
以下非限制性实施例及附图进一步阐述了本发明。
实施例 1.0合成 为一致起见，整篇说明书中对2，3，4，8-四氢色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪基本结构采用以下编号系统。

实施例14-(3-苄基-2，3，4，8-四氢色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪-7-基)酚
将4′，7-二羟基异黄-3-烯(0.47g，1.97mmol)溶解于乙醇(约40ml)中并加热至80-90℃。将苄胺(0.44ml，3.5mmol)和37％甲醛(0.35ml，12.7mmol)的乙醇(约20ml)溶液加入脱气牛尿酚(dehydroequol)溶液中。将该反应混合物回流约7小时，冷却至室温后真空浓缩体积。将混合物置于冰箱中结晶。抽吸收集黄色固体，滤液蒸发至干，得到第二批标题化合物(组合的产率为0.17g，23％)。
1H NMR(400MHz，d6-DMSO).

7.3(7H，m)，6.75(2H，d，7Hz)，6.71(1H，s)，6.70(1H，s)6.22(1H，s)，5.0(2H，s)，4.80(2H，s)3.80(2H，s)，3.77(2H，s)。
实施例24-(3-(1-苯乙基)-2，3，4，8-四氢色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪-7-基)酚
将4′，7-二羟基异黄-3-烯(0.45g，1.87mmol)溶解于乙醇(约40ml)并加热至80-90℃。将甲基苄胺(0.44ml，4.03mmol)和37％甲醛(0.35ml，12.7mmol)的乙醇(约20ml)的溶液加入脱气牛尿酚溶液中。将该反应混合物回流约7小时，冷却至室温后真空浓缩体积。将混合物置于冰箱中结晶。抽吸收集黄色固体，滤液蒸发至干，得到第二批的标题化合物(组合的产率为0.17g，23％)。
1H NMR(400MHz，d6-DMSO).

7.4(7H，m)，6.75(2H，d，7Hz)，6.65(1H，s)，6.63(1H，s)6.22(1H，s)，5.0(2H，s)，4.99(1H，d，6Hz)，4.81(1H，d，6Hz)，4.01(1H，d，8Hz)，3.95(1H，q，7Hz)，3.55(1H，d，8Hz)，1.44(3H，d，7Hz)。
实施例34-(3-丙基-2，3，4，8-四氢色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪-7-基)酚
将4′，7-二羟基异黄-3-烯(503mg，2.09mmol)溶解于乙醇(20ml)。加入丙胺(0.25ml，3.04mmol)，再加入甲醛溶液(2ml，0.03mol，37重量％)。将该反应在室温下搅拌1天。收集白色沉淀，产生标题化合物(362mg，53％)。
1H NMR(400MHz，d6-DMSO).

0.89(3H，t，J＝7.2Hz，CH3)，1.55(2H，m，CH2CH3)，2.66(2H，t，J＝7.2Hz，NCH2CH2)，3.88(2H，s，NCH2Ar)，4.80(2H，s，NCH2O)，5.04(2H，s，H8)，6.16(1H，s，H10)，6.71(1H，bs，H6)，6.72(1H，s，H5)，6.85(2H，d，J＝8.8Hz，H3′，H5′)，7.35(2H，d，J＝8.8Hz，H2′，H6′)。
实施例44-(3-甲基-2，3，4，8-四氢色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪-7-基)酚
将4′，7-二羟基异黄-3-烯(507mg，2.11mmol)溶解于乙醇(20ml)。加入甲胺溶液(0.6ml，4.82mmol，33重量％的乙醇溶液)，再加入甲醛溶液(2ml，0.03mol，37重量％)。将该反应在室温下搅拌1天。收集白色沉淀，产生标题化合物(490mg，79％)。
1H NMR(400MHz，d6-DMSO).

2.44(3H，s，CH3)，3.78(2H，s，NCH2Ar)，4.70(2H，s，NCH2O)，4.99(2H，s，H8)，6.18(1H，s，H10)，6.74(4H，m，H4，H5，H3′，H5′)，7.31(2H，d，J＝8.8Hz，H2′，H6′)，9.58(1H，bs，OH)。
实施例57-(3，4-二甲氧基苯基)-3-丙基-2，3，4，8-四氢色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪
将7-羟基-3′，4′-二甲氧基异黄-3-烯(99mg，3.48mmol)溶解于乙醇(10ml)。加入丙胺(0.1ml，4.25mmol)，再加入甲醛溶液(0.4ml，5.37mmol，37重量％)。将该反应在室温下搅拌8天。收集沉淀，产生标题化合物(6mg，1％)。
1H NMR(400MHz，d6-丙酮).

0.89(3H，t，J＝7.4Hz，CH3)，1.53(2H，m，CH2CH3)，2.66(2H，t，J＝7.4Hz，NCH2CH2)，3.81(3H，s，OCH3)，3.85(3H，s，OCH3)，3.89(2H，s，NCH2Ar)，4.81(2H，s，NCH2O)，5.06(2H，s，H8)，6.17(1H，s，H10)，6.74(1H，s，H6)，6.79(1H，s，H5)，6.95(1H，d，J＝8.4Hz，H5′)，7.00(1H，dd，J＝2.4Hz，8.4Hz，H6′)，7.13(1H，d，J＝2.4Hz，H2′) 实施例64-(3-(4-甲氧基苄基)-2，3，4，8-四氢色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪-7-基)酚
将4′，7-二羟基异黄-3-烯(501mg，2.09mmol)溶解于乙醇(15ml)。加入4-甲氧基苄胺(0.35ml，2.68mmol)，再加入甲醛溶液(2ml，0.03mol，37重量％)。将该反应在室温下搅拌1天。收集白色沉淀，产生标题化合物(555mg，66％)。
1H NMR(400MHz，d6-丙酮).

2.78(3H，s，OCH3)，3.82(2H，s，NCH2Ar)，3.84(2H，s，NCH2Ar)，4.83(2H，s，NCH2O)，5.06(2H，s，H8)，6.22(1H，s，H10)，6.71(2H，bs，H4，H5)，6.85(2H，d，J＝8.8Hz，H3′，H5′)，6.89(2H，d，J＝8.8Hz，ArH)，7.25(2H，d，J＝8.8Hz，ArH)，7.35(2H，d，J＝8.8Hz，H2′，H6′)，8.59(1H，bs，OH) 实施例74-(3-苯基-2，3，4，8-四氢色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪-7-基)酚
将4′，7-二羟基异黄-3-烯(501mg，2.09mmol)溶解于乙醇(15ml)。加入苯胺(0.25ml，2.74mmol)，再加入甲醛溶液(2ml，0.03mol，37重量％)。将该反应在室温下搅拌3天。收集白色沉淀，产生标题化合物(53mg，7％)。
1H NMR(400MHz，d6-丙酮).

4.60(2H，s，NCH2Ar)，5.04(2H，s，H8)，5.40(2H，s，NCH2O)，6.19(1H，s，H10)，6.72(1H，s，H6)，6.85(3H，m，H5，H3′，H5′)，7.14(2H，m，ArH)，7.22(3H，m，ArH)，7.35(2H，d，J＝8.8Hz，H2′，H6′)，8.49(1H，s，OH)。
实施例84，4′-(色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪-3，7(2H，4H，8H)-二基)二酚
将4′，7-二羟基异黄-3-烯(509mg，2.12mmol)和4-氨基酚(307mg，2.81mmol)溶解于乙醇(15ml)。加入甲醛溶液(2ml，0.03mol，37重量％)，并将该反应在室温下搅拌3天。收集所得沉淀，产生标题化合物(178mg，79％)。
1H NMR(400MHz，d6-丙酮).

4.46(2H，s，NCH2Ar)，5.03(2H，s，H8)，5.27(2H，s，NCH2O)，6.18(1H，s，H10)，6.70(3H，m，H4，ArH)，6.80(1H，s，H5)，6.85(2H，d，J＝8.8Hz，H3′，H5′)，6.99(2H，d，J＝8.8Hz，ArH)，7.35(2H，d，J＝8.8Hz，H2′，H6′)，7.91(1H，bs，OH)，8.46(1H，bs，OH)。
实施例97-(3，4-二甲氧基苯基)-3-(4-甲氧基苄基)-2，3，4，8-四氢-色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪
将7-羟基-3′，4′-二甲氧基异黄-3-烯(152mg，0.53mmol)溶解于乙醇(2ml)。加入4-甲氧基苄胺(0.1ml，0.77mmol)，再加入甲醛溶液(0.6ml，8.06mmol，37重量％)。将该反应在室温下搅拌2天。收集所得沉淀，产生标题化合物(102mg，43％)。
1H NMR(400MHz，d6-丙酮).

3.80(15H，m，NCH2Ar，NCH2Ar，OCH3，OCH3，OCH3)，4.83(2H，s，NCH2O)，5.08(2H，s，H8)，6.23(1H，s，H10)，6.71(1H，s，H6)，6.79(1H，s，ArH)，6.89(2H，d，J＝8.4Hz，ArH)，6.94(1H，d，J＝8.4Hz，ArH)，7.00(1H，d，J＝8.4Hz，ArH)，7.14(1H，s，ArH)，7.25(2H，d，J＝8.4Hz，ArH)。
实施例103-(3-苄基-2，3，4，8-四氢色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪-7-基)酚
将3′，7-二羟基异黄-3-烯(100mg，0.42mmol)溶解于乙醇(4ml)。加入苄胺(0.14ml，1.28mmol)，再加入甲醛溶液(0.42ml，5.59mmol，37重量％)。将该反应在室温下搅拌1天。将反应混合物倒入水(50ml)中，然后用乙酸乙酯(3x30ml)萃取，还原合并的有机层。采用100％二氯甲烷对固体进行快速色谱分析。合并组分6-12，还原后得到标题化合物。
1H NMR(400MHz，d6-丙酮).

3.85(2H，s，NCH2Ar)，3.89(2H，s，NCH2Ph)，4.85(2H，s，NCH2O)，5.06(2H，s，H8)，6.25(1H，s，H10)，6.72(1H，s，ArH)，6.80(1H，m，H6)，6.95(2H，m，ArH)，7.19(1H，t，J＝8.0Hz，H5′)，7.34(5H，m，ArH)。
实施例113-(3-苯基-2，3，4，8-四氢色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪-7-基)酚
将3′，7-二羟基异黄-3-烯(175mg，0.73mmol)溶解于乙醇(1ml)。加入苯胺(0.08ml，0.88mmol)，再加入甲醛溶液(0.6ml，8.06mmol，37重量％)。将该反应在室温下搅拌3天。收集所得沉淀，产生标题化合物(160mg，61％)。
1H NMR(400MHz，d6-丙酮).

4.61(2H，s，NCH2Ar)，5.04(2H，s，H8)，5.42(2H，s，NCH2O)，6.20(1H，s，H10)，6.78(1H，m，ArH)，6.82(1H，s，H6)，6.89(1H，s，H5)，6.95(1H，m，ArH)，7.05(2H，m，ArH)，7.18(5H，m，ArH)。
实施例127-(3，4-二甲氧基苯基)-3-苯基-2，3，4，8-四氢色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪
将7-羟基-3′，4′-二甲氧基异黄-3-烯(148mg，0.52mmol)溶解于乙醇(2ml)。加入苯胺(0.6ml，0.66mmol)，再加入甲醛溶液(0.6ml，8.06mmol，37重量％)。将该反应在室温下搅拌3天。收集沉淀，产生标题化合物(11mg，5％)。
1H NMR(400MHz，d6-丙酮).

3.81(3H，s，OCH3)，3.85(3H，s，OCH3)，4.61(2H，s，NCH2Ar)，5.06(2H，s，H8)，5.41(2H，s，NCH2O)，6.19(1H，s，H10)，6.80(1H，s，H6)，6.86(1H，s，ArH)，6.94(1H，d，J＝8.0Hz，ArH)，7.00(1H，dd，J＝2.2Hz，8.2Hz，H6′)，7.14(3H，m，ArH)，7.21(3H，m，ArH)。
实施例133-苄基-7-(3，4-二甲氧基苯基)-10-甲基-2，3，4，8-四氢-色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪
将7-羟基-3′，4′-二甲氧基-8-甲基异黄-3-烯(155mg，0.52mmol)溶解于乙醇(2.5ml)。加入苄胺(0.07ml，0.23mmol)，再加入甲醛溶液(0.6ml，8.06mmol，37重量％)。将该反应在室温下搅拌2天。收集沉淀，产生标题化合物(33mg，15％)。
1H NMR(400MHz，d6-丙酮).

2.02(3H，s，CH3Ar)，3.82(3H，s，OCH3)，3.86(5H，s，OCH3，CH2Ph)，3.89(2H，s，NCH2Ar)，4.91(2H，s，NCH2O)，5.11(2H，s，H8)，6.58(1H，s，H6)，6.79(1H，s，ArH)，6.95(1H，d，J＝8.4Hz，ArH)，7.01(1H，dd，J＝2.0Hz，8.4Hz，H6′)，7.15(1H，d，J＝2.0Hz，ArH)，7.30(5H，m，ArH)。
实施例147-(3，4-二甲氧基苯基)-10-甲基-3-丙基-2，3，4，8-四氢-色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪
将7-羟基-3′，4′-二甲氧基-8-甲基异黄-3-烯(159mg，0.53mmol)溶解于乙醇(2.5ml)。加入丙胺(0.05ml，0.61mmol)，再加入甲醛溶液(0.6ml，8.06mmol，37重量％)。将该反应在室温下搅拌2天。收集沉淀，产生标题化合物(7mg，3％)。
1H NMR(400MHz，d6-丙酮).

0.90(3H，t，J＝7.4Hz，CH3)，1.54(2H，m，CH2)，1.98(3H，s，CH3Ar)，2.66(2H，t，J＝7.4Hz，NCH2)，3.82(3H，s，OCH3)，3.86(3H，s，OCH3)，3.89(2H，s，NCH2Ar)，4.86(2H，s，NCH2O)，5.09(2H，s，H8)，6.61(1H，s，H6)，6.78(1H，s，H5)，6.96(1H，s，ArH)，7.00(1H，dd，J＝2.4Hz，8.4Hz，H6′)，7.14(1H，d，J＝1.6Hz，ArH)。
实施例154-(3-(4-氯苄基)-2，3，4，8-四氢色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪-7-基)酚
将4′，7-二羟基异黄-3-烯(506mg，2.11mmol)溶解于乙醇(8ml)。加入4-氯苄胺(0.33ml，2.70mmol)，再加入甲醛溶液(2ml，0.03mol，37重量％)。将该反应在室温下搅拌4天。收集白色沉淀，产生标题化合物(748mg，88％)。
1H NMR(400MHz，d6-丙酮).

3.86(2H，s，CH2Ph)，3.90(2H，s，NCH2Ar)，4.86(2H，s，NCH2O)，5.06(2H，s，H8)，6.23(1H，s，H10)，6.72(2H，bs，H4，H5)，6.85(2H，d，J＝8.8Hz，H3′，H5′)，7.37(m，6H，H2′，H6′，H2″，H3″，H5″，H6″)。
实施例164-(3-(3-甲氧基丙基)-2，3，4，8-四氢色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪-7-基)酚
将4′，7-二羟基异黄-3-烯(509mg，2.12mmol)溶解于乙醇(8ml)。加入3-甲氧基丙胺(0.28ml，2.74mmol)，再加入甲醛溶液(2ml，0.03mol，37重量％)。将该反应在室温下搅拌4天。收集沉淀，产生标题化合物(657mg，88％)。
1H NMR(400MHz，d6-丙酮).

1.76(2H，m，CH2)，2.77(2H，t，J＝7.4Hz，NCH2)，3.24(3H，s，OCH3)，3.39(2H，t，J＝6.4Hz，OCH2)，3.89(2H，s，NCH2Ar)，4.81(2H，s，NCH2O)，5.04(2H，s，H8)，6.17(1H，s，H10)，6.72(1H，s，H6)，6.74(1H，s，H5)，6.86(2H，d，J＝8.8Hz，H3′，H5′)，7.35(2H，d，J＝8.8Hz，H2′，H6′)。
实施例173-(3-(3-甲氧基丙基)-2，3，4，8-四氢色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪-7-基)酚
将3′，7-二羟基异黄-3-烯(198mg，0.82mmol)溶解于乙醇(3ml)。加入3-甲氧基丙胺(0.11ml，1.08mmol)，再加入甲醛溶液(0.6ml，8.06mmol，37重量％)。将该反应在室温下搅拌4天。收集所得沉淀，产生标题化合物(69mg，24％)。
1H NMR(400MHz，d6-丙酮).

1.76(2H，m，CH2)，2.77(2H，t，J＝7.6Hz，NCH2)，3.24(3H，s，OCH3)，3.39(2H，t，J＝6.4Hz，OCH2)，3.91(2H，s，NCH2Ar)，4.82(2H，s，NCH2O)，5.05(2H，s，H8)，6.18(1H，s，H10)，6.79(3H，m，ArH)，6.94(2H，m，ArH)，7.18(1H，t，J＝8Hz，ArH)。
实施例184-(3-对甲苯基-2，3，4，8-四氢色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪-7-基)酚
将4′，7-二羟基异黄-3-烯(499mg，2.08mmol)和对甲苯胺(290mg，2.71mmol)溶解于乙醇(8ml)。加入甲醛溶液(2ml，0.03mol，37重量％)，将该反应在室温下搅拌2天。收集所得沉淀，产生标题化合物(167mg，22％)。
1H NMR(400MHz，d6-DMSO).

2.16(3H，s，CH3)，4.50(2H，s，NCH2Ar)，4.98(2H，s，H8)，5.36(2H，s，NCH2O)，6.15(1H，s，H10)，6.72(1H，s，ArH)，6.75(2H，d，J＝8.8Hz，ArH)，6.83(1H，s，ArH)，7.00(4H，d，J＝3.6Hz，ArH)，7.3 1(2H，d，J＝8.8Hz，ArH)。
实施例197-(3，4-二甲氧基苯基)-10-甲基-3-对甲苯基-2，3，4，8-四氢色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪
将7-羟基-3′，4′-二甲氧基-8-甲基异黄-3-烯(173mg，0.58mmol)和对甲苯胺(167mg，1.56mmol)溶解于乙醇(2ml)。加入甲醛溶液(0.6ml，8.06mmol，37重量％)，将该反应在室温下搅拌2天。收集所得沉淀，产生标题化合物(36mg，14％)。
1H NMR(400MHz，d6-DMSO).

1.90(3H，s，CH3Ar)，2.16(3H，s，CH3ArN)，3.74(3H，s，OCH3)，3.79(3H，s，OCH3)，4.50(2H，s，NCH2Ar)，5.04(2H，s，H8)，5.41(2H，s，NCH2O)，6.74(1H，s，H6)，6.84(2H，m，ArH)，6.92(2H，d，J＝8.8Hz，ArH)，6.97(1H，d，J＝2Hz，ArH)，7.00(2H，d，J＝2.4Hz，ArH)，7.10(1H，d，J＝2Hz，ArH)。
实施例203-(3-对甲苯基-2，3，4，8-四氢色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪-7-基)酚
将3′，7-二羟基异黄-3-烯(196mg，0.82mmol)和对甲苯胺(130mg，1.21mmol)溶解于乙醇(1ml)。加入甲醛溶液(0.6ml，8.06mmol，37重量％)，将反应液在室温下搅拌2天。收集所得沉淀，产生标题化合物(99mg，30％)。
1H NMR(400MHz，d6-DMSO).

2.16(3H，s，CH3)，4.51(2H，s，NCH2Ar)，4.99(2H，s，H8)，5.37(2H，s，NCH2O)，6.17(1H，s，H10)，6.69(1H，dd，J＝1.4Hz，8.2Hz，H6′)，6.83(2H，bs，H4，ArH)，6.90(1H，s，ArH)，6.99(5H，m，ArH)，7.16(1H，t，J＝8Hz，H5′)。
实施例214-(7-(3-羟基苯基)色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪-3(2H，4H，8H)-基)苄腈
将3′，7-二羟基异黄-3-烯(196mg，0.82mmol)和4-氨基苄腈(120mg，1.02mmol)溶解于乙醇(1ml)。加入甲醛溶液(0.6ml，8.06mmol，37重量％)，将该反应在室温下搅拌2天。收集所得沉淀，产生标题化合物(23mg，7％)。
1H NMR(400MHz，d6-DMSO).

4.67(2H，s，NCH2Ar)，5.00(2H，s，H8)，5.51(2H，s，NCH2O)，6.24(1H，s，H10)，6.70(1H，dd，J＝2.0Hz，8.4Hz，ArH)，6.84(1H，m，ArH)，6.85(1H，bs，H6)，6.91(1H，d，J＝7.6Hz，ArH)，7.16(1H，t，J＝8Hz，H5′)，7.25(2H，d，J＝8.8Hz，ArH)，7.65(2H，d，J＝9.2Hz，ArH)，9.47(1H，bs，OH)。
实施例224-(3-间甲苯基-2，3，4，8-四氢色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪-7-基)酚
将4′，7-二羟基异黄-3-烯(522mg，2.17mmol)溶解于乙醇(8ml)。加入间甲苯胺(0.3ml，2.77mmol)和甲醛溶液(2ml，0.03mol，37重量％)，将该反应在室温下搅拌3天。收集所得沉淀，产生标题化合物(386mg，48％)。
1H NMR(400MHz，d6-DMSO).

2.22(3H，s，CH3)，4.54(2H，s，NCH2Ar)，4.98(2H，s，H8)，5.38(2H，s，NCH2O)，6.17(1H，s，H10)，6.65(1H，d，J＝7.6Hz，ArH)，6.73(1H，bs，H6)，6.75(2H，d，J＝8.8Hz，H3′，H5′)，6.85(1H，s，ArH)，6.88(1H，dd，J＝2.0Hz，8.0Hz，ArH)，6.93(1H，bs，ArH)，7.08(1H，t，J＝7.6Hz，H5″)，7.31(2H，d，J＝8.8Hz，H2′，H6′)，9.60(1H，bs，OH)。
实施例234-(3-(3-硝基苯基)-2，3，4，8-四氢色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪-7-基)酚
将4′，7-二羟基异黄-3-烯(527mg，2.19mmol)和3-硝基苯胺(333mg，2.41mmol)溶解于乙醇(8ml)。加入甲醛溶液(2ml，0.03mol，37重量％)，将该反应在室温下搅拌3天。收集所得沉淀，产生标题化合物(35mg，4％)。
1H NMR(400MHz，d6-DMSO).

4.68(2H，s，NCH2Ar)，4.99(2H，s，H8)，5.51(2H，s，NCH2O)，6.22(1H，s，H10)，6.75(3H，m，H4，H3′，H5′)，6.90(1H，s，H5)，7.32(2H，d，J＝8.8Hz，H2′，H6′)，7.51(1H，t，J＝8.0Hz，H5″)，7.60(1H，dd，J＝2.0Hz，8.0Hz，ArH)，7.67(1H，dd，J＝1.4Hz，7.8Hz，ArH)，7.87(1H，t，J＝2.2Hz，ArH)，9.61(1H，bs，OH)。
实施例244-(3-(4-氯苄基)-6-(4-甲氧基苯基)-2，3，4，8-四氢-色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪-7-基)酚
将4′，7-二羟基-4-(4-甲氧基苯基)异黄-3-烯(205mg，0.59mmol)溶解于乙醇(1ml)。加入4-氯苄胺(0.09ml，0.74mmol)，再加入甲醛溶液(0.6ml，8.06mmol，37重量％)。将该反应在室温下搅拌3天。收集所得沉淀，产生标题化合物(90mg，30％)。
1H NMR(400MHz，d6-苯).

3.29(3H，s，OCH3)，3.47(2H，s，CH2Ph)，3.62(2H，s，NCH2Ar)，4.56(2H，s，NCH2O)，5.06(2H，s，H8)，6.37(2H，d，J＝8.4Hz，ArH)，6.72(1H，s，H10)，6.77(2H，d，J＝8.8Hz，ArH)，6.85(2H，d，J＝8.4Hz，ArH)，6.96(2H，d，J＝8.8Hz，ArH)，7.02(1H，s，H5)，7.15(4H，dd，J＝2.2Hz，8.6Hz.，ArH)。
实施例254-(10-溴-3-丙基-2，3，4，8-四氢色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪-7-基)酚
将8-溴-4′，7-二羟基异黄-3-烯(198mg，0.62mmol)溶解于EtOH(1ml)。加入丙胺(0.1ml，1.22mmol)和甲醛溶液(0.3ml，4.03mmol，37重量％)，将该反应在室温下搅拌24小时。收集沉淀，得到标题化合物。
1H NMR(400MHz，d6-DMSO).

0.84(3H，t，J＝7.3Hz，CH3)，1.48(2H，m，CH22CH3)，2.57(2H，t，J＝7.3Hz，NCH2CH2)，3.88(2H，s，NCH2Ar)，4.92(2H，s，NCH2O)，5.13(2H，s，H8)，6.74(1H，s，H6)，6.77(2H，d，J＝8.8Hz，H3′，H5′)，6.78(1H，s，H5)，7.34(2H，d，J＝8.8Hz，H2′，H6′)，9.62(1H，bs，OH)。
实施例263，4′-(10-甲基-色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪-3，7(2H，4H，8H)-二基)二酚
将3′，7-二羟基-8-甲基异黄-3-烯(204mg，0.802mmol)和4-氨基酚(103mg，0.944mmol)溶解于EtOH(1ml)，加入甲醛溶液(0.3ml，4.03mmol，37重量％)。将该反应在室温下搅拌3天后，未产生沉淀。将反应混合物倒入快速搅拌的蒸馏水(10ml)中，收集所得沉淀，产生标题化合物(143mg)。
1H NMR(400MHz，d6-DMSO).

1.91(3H，s，CH3)，4.41(2H，s，NCH2Ar)，5.02(2H，s，H8)，5.31(2H，s，NCH2O)，6.53-7.19(10H，m，Ar，H5，H6)，8.93(1H，bs，OH)，9.45(1H，bs，OH)。
实施例274-(8-乙基-3-丙基-2，3，4，8-四氢色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪-7-基)酚
将4′，7-二羟基-2-乙基异黄-3-烯(390mg，1.45mmol)溶解于乙醇(20ml)。加入丙胺(0.16ml，1.95mmol)，再加入甲醛溶液(4ml，0.054mol，37重量％)。在室温下搅拌该反应混合物16小时。抽吸收集黄色沉淀，产生标题化合物(217mg，43％)。
1H NMR(400MHz，d6-DMSO)

9.56(1H，br s，OH)，7.35(2H，d，J＝8.7Hz，H-2′，6′)，6.76-6.73(3H，m，H-3′，5′，H5)，6.67(1H，s，H6)，6.18(1H，s，H10)，5.15(1H，dd，J＝3.0Hz，9.5Hz，H8)，4.81-4.76(2H，m，NCH2O)，3.31(2H，s，NCH2Ar)，1.65-1.38(6H，m，CH2CH2CH3，CH2CH3)，0.91(3H，t，J＝7.3Hz，CH2CH3)，0.84(3H，t，J＝7.3Hz，CH2CH2CH3)。
实施例284-(3-(4-叔丁基苯基)-2，3，4，8-四氢色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪-7-基)酚
将4′，7-二羟基异黄-3-烯(500mg，2.08mmol)溶解于无水乙醇(10mL)。加入4-叔丁基苯胺(311mg，2.08mmol)，再加入甲醛溶液(6mL，0.04mol，37重量％)。将反应液在室温下搅拌1天。收集白色沉淀，产生标题化合物(134mg，15％)。
1H NMR(400MHz，d6-DMSO).

1.22(9H，s，CH3，CH3，CH3)，4.53(2H，s，CH2Ar)，5.00(2H，s，H8)，5.39(2H，s NCH2O)，6.18(1H，s，H10)，6.78(2H，d，J＝8.6Hz，ArH)，6.86(1H，s，H6)，7.04(2H，d J＝8.7Hz，ArH)，7.24(2H，d，J＝8.7Hz，ArH)，7.33(2H，d，J＝8.6Hz，ArH)，9.63(1H，s，OH)。
实施例294-(3-(4-叔丁基苄基)-2，3，4，8-四氢色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪-7-基)酚
将4′，7-二羟基异黄-3-烯(500mg，2.08mmol)溶解于无水乙醇(10mL)。加入4-叔丁基苄胺(340mg，2.08mmol)，再加入甲醛(6mL，0.09mmol，37重量％)。将该反应在室温下搅拌1天。收集白色沉淀，产生标题化合物(407mg，43％)。
1H NMR(400MHz，d6-DMSO).δ1.28(9H，s，CH3，CH3，CH3)，3.80(4H，s，CH2Ar，NCH2Ar)，4.84(2H，s，NCH2O)，5.03(2H，s，H8)，6.24(1H，s，H10)6.73(1H，s，ArH)，6.76(1H，s，H6)，6.78(2H，d，J＝8.7，ArH)，7.24(2H，d，J＝8.1，ArH)，7.33(2H，d，J＝8.7，ArH)，7.36(2H，d，J＝8.2，ArH)，9.63(1H，s，OH)。
实施例304-(3-(萘-1-基-甲基)-2，3，4，8-四氢色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪-7-基)酚
将4′，7-二羟基异黄-3-烯(500mg，2.08mmol)溶解于无水乙醇(10mL)。加入1-萘-甲胺(327mg，2.08mmol)，再加入甲醛(6mL，0.09mmol，37重量％)。将该反应在室温下搅拌1天。收集白色沉淀，产生标题化合物(337mg，38％)。
1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ3.87(2H，s，CH2Ar)，4.27(2H，s，NCH2Ar)，4.90(2H，s，NCH2O)，5.05(2H，s，H8)，6.30(1H，s，H10)，6.76(1H，s，ArH)，6.78(1H，s，H6)，7.39(1H，d，J＝6.8，ArH)，7.47(1H，dd，J＝7.6，7.6，ArH)，7.54(2H，m，ArH)，7.89(1H，d，J＝8.1，ArH)，7.94(1H，m，ArH)，8.22(1H，m，ArH)，9.64(1H，s，OH)。
实施例314-(3-(3，4-二甲基苯基)-2，3，4，8-四氢色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪-7-基)酚
将4′，7-二羟基异黄-3-烯(500mg，2.08mmol)溶解于无水乙醇(10mL)。加入3，4-二甲基苯胺(293mg，2.08mmol)，再加入甲醛(6mL，0.09mmol，37重量％)。将该反应在室温下搅拌1天。收集淡粉色沉淀，产生标题化合物(166mg，21％)。
1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ2.10(3H，s，CH3)，2.1 5(3H，s，CH3)，4.52(2H，s，NCH2Ar)，5.00(2H，s，H8)，5.37(2H，s，NCH2O)，6.18(1H，s，H10)，6.78(1H，s，H6)，6.81(1H，dd，J＝8.2，2.4，ArH)，6.85(1H，s，ArH)，6.93(1H，d，J＝2.0，ArH)，6.97(1H，d，J＝8.2ArH)，7.33(1H，d，J＝8.6)，9.63(1H，s，OH)。
实施例324-(3-(4-甲氧基苯基)-2，3，4，8-四氢色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪-7-基)酚
将4′，7-二羟基异黄-3-烯(500mg，2.08mmol)溶解于无水乙醇(10mL)。加入4-甲氧基苯胺(271mg，2.08mmol)，再加入甲醛(6mL，0.09mmol，37重量％)。将该反应在室温下搅拌1天。收集粉色沉淀，产生标题化合物(71mg，9％)。
1H NMR(400MHz，d6-DMSO)

3.67(3H，s，OCH3)，4.48(2H，s，NCH2Ar)，5.01(2H，s，H8)，5.33(2H，s，NCH2O)，6.18(1H，s，H10)，6.75(1H，s，H6)，6.78(2H，d，J＝8.6，ArH)，6.81(2H，d，J＝9.0，ArH)，6.85(1H，s，ArH)，7.05(2H，d，J＝9.0，ArH)，7.33(2H，d，J＝8.6，ArH)，9.63(1H，s，OH)。
在上述通用方法中，可用合适的取代基、或其合成子或衍生物任选地取代或保护该结构。化合物可以盐、乙酸盐、苄基或甲硅烷氧基衍生物的形式存在，如有经验的合成化学人员所能确定的那样，一般地如上所述。可通过本领域已知的标准方法容易地使羟基烷基化(MeI/碱)、酰基化(Ac2O/Py)或甲硅烷基化(Cl-SiR3/碱)和脱保护。
2.0抗炎活性 2.1对人单核细胞中类花生酸合成的影响 方法 将U937细胞解冻并以每毫升2x105个细胞的密度重新悬浮在RPMI和10％FCS中。细胞在5％CO2、37℃中进行培养并在生长培养基中扩增至至少总共6.4x107个细胞。然后将细胞重新悬浮在新鲜培养液中，以每毫升2x105个细胞的密度用5μM视黄酸(RA)再培养3天(72小时)。在无血清RPMI中将RA处理的细胞洗涤2次，并以每毫升5x106个细胞的密度重新悬浮在无血清培养液中。将细胞分成等份收集到特氟隆试管中，每管1毫升。如上所述制备0.1mM、1mM和10mM的各种测试化合物的工作母液。对每一种工作稀释度的每一种测试化合物来说，1ml细胞中加入10μl以实现各种测试化合物的终浓度为0(仅DMSO)、1、10和100μM。细胞一式三份与各种浓度的测试化合物在37℃培育15分钟。15分钟预培育之后，每1毫升细胞中加入5μl 100mM的钙离子载体A23187溶液(以实现0.5μM A23187)。37℃继续再培育30分钟。培育后，2000rpm离心10分钟收集上清液，-20℃储存直到备用。
结果 下表1和2表明，测试化合物(1)和(2)对RA刺激的U937细胞的PGE2合成和TXA2合成的影响。显示100μM时，化合物(2)能够抑制PGE2合成，两种化合物(1)和(2)都能抑制TXA2合成。
表1测试化合物对RA-刺激的U937细胞PGE2合成的影响
a相对于对照(零剂量)显著不同 表2测试化合物对RA刺激的U937细胞TXA2合成的影响
a相对于对照(零剂量)显著不同 2.2对人单核细胞中TNFα合成的影响 方法 通过单核细胞的淋巴细胞分离剂梯度分离，然后是逆流离心扬析，从血沉棕黄层分离人外周血单核细胞(Demasi等，2000)。将测试化合物溶解于DMSO中，加入新鲜单核细胞以实现0、10和100μM的浓度。30分钟后，加入LPS以实现终浓度200ng/mL。1小时后，去除上清液，根据过去所述的ELISA方法测定TNFα(Demasi等，2003)。采用ANOVA、然后是Newman-Keuls多重比较检验来检查不同剂量和对照值之间的差异。
结果 显示化合物(1)和(2)能够减少用LPS刺激的人单核细胞中TNFα的合成(参见图1a和1b)。
2.3鼠巨噬细胞系RAW 264.7中的抗炎作用 方法 将小鼠巨噬细胞系RAW 264.7在补充有胎牛血清(FCS)、2mM谷胺酰胺和50U/ml青霉素/链霉素的DMEM中进行培养。细胞用测试化合物(在0.025％DMSO中)或仅仅运载体进行处理，1小时后加入50ng/ml LPS。培育24小时后，收集培养液，用ELISA(凯门化学公司(Cayman Chemical))测定PGE2或TXB2，并用ELISA(贝尔康迪克森公司(Becton Dickinson))测定TNFα。
亚硝酸盐浓度是NO产生的定量指标，通过革氏反应(Griess Reaction)确定。简言之，将100μL革氏试剂加入各个50μL上清液中，一式两份。测定550nm处的吸光度(美国加利福尼亚州分子装置公司(Molecular Devices)，SpectraMax 250微板分光光度计)，根据亚硝酸钠的标准曲线确定亚硝酸盐的浓度。根据下式计算亚硝酸盐抑制百分数 [100-(样品的亚硝酸盐浓度/运载体对照LPS细胞的亚硝酸盐浓度)X100]。
结果 以浓度10μM测定测试化合物。由图2可知，一些化合物具有一定程度的毒性，可能影响其对各种分析物的抑制的量。因此，为了评价测试化合物对各种分析物的影响，采用以下公式考虑细胞存活率 测试化合物的实际影响＝测定影响-(对细胞存活率的影响×测定影响) 测定相对于仅用运载体处理，化合物对RAW 264.7鼠巨噬细胞的影响。LPS诱导的PGE2合成的平均变化如图3所示，其中化合物(2)、(9)、(14)、(12)、(23)和(24)显示最大抑制。LPS-诱导的TXB2合成的平均变化如图4所示，其中化合物(2)、(8)、(9)、(14)、(23)和(24)显示最大抑制。LPS诱导的TNFα合成的平均变化如图5所示，其中化合物(1)、(4)、(6)、(17)和(22)显示最大抑制。LPS-诱导的NO合成的平均变化如图6所示，其中化合物(3)、(4)、(7)、(14)、(19)、(22)、(23)和(24)显示最大抑制。
2.4对转染的人巨噬细胞系THP-1中NFκB产生的影响 方法 该试验采用遗传修饰的THP-1细胞系和

β-内酰胺酶技术(英杰公司(Invitrogen Corp))。人THP-1单核细胞/巨噬细胞包含在NFkB响应元件控制下的稳定转染的β-内酰胺酶报道基因。它们响应TNF-a的刺激，导致NFkB信号传导途径的激活。用TNF-a和测试材料共同培养细胞能够定量确定测试材料抑制TNFa刺激的β-内酰胺酶产生的能力。炎症指数计算为β-内酰胺酶产量与β-内酰胺酶底物的比值。
简言之，在RPMI 1640培养液(70μl)的存在下，将遗传修饰的THP-1细胞接种到96-孔培养板(50x103个细胞/孔)中。各孔中加入TNFα(10μl)，得到终浓度7.5ng/ml。加入经透析的牛血清(10μl)。然后加入溶解在DMSO(10μL)中的化合物(每种化合物5个孔)。每块板包含无细胞对照孔(4个孔)，无血清对照孔(4个孔)和两个血清对照孔。将板在37℃培育5小时以产生NFkB刺激的β-内酰胺酶。然后将LiveBLAzerTM FRET B/G底物(CCF4-AM)加入试验中。CCF4-AM是由英杰公司开发的基于福斯特

共振能量转移(FRET)的β-内酰胺酶底物。一旦CCFA-AM进入细胞，则由内源性酯酶转化为带负电的CCF4。在409nm处激发该底物导致香豆素和荧光素部分间发生有效的FRET，在530nm处产生可检测的绿色荧光。β-内酰胺酶的存在引起CCF4裂解并导致FRET损失，在460nm处产生可检测的强烈蓝色荧光信号。因此，测定β-内酰胺酶(NFkB-启动子活性的标记物)的活性，以产物底物比表示(蓝色/绿色荧光比率460nm/530nm)。炎症指数的确定中，板内CV为2.1％，板间CV为8.9％。
结果 本试验检查了化合物(1)和(2)。发现，30μM是比较测试化合物NFkB-抑制活性的最佳浓度。在50μM和100μM，化合物能降低细胞存活率，如表3所示。给出与30μM的测试化合物培育后的数据。
表3测试化合物相对于仅用运载体处理 对THP-1细胞中NFκB启动子活性造成的平均变化 3.0抗氧化活性 认为氧化的脂蛋白能够激发细胞功能的许多改变而促进动脉粥样化形成。氧化的低密度脂蛋白(LDL)具有促炎作用，可导致内皮功能障碍，容易在动脉壁内蓄积(Rosenson 2004)。动物研究提供了氧化剂响应动脉损伤而释放的证据，巨噬细胞和平滑肌细胞这两种在血管成形术后粥样硬化病变中主要存在的细胞类型都能产生活性氧物质(Libby和Ganz 1997)。因此，化合物抑制LDL氧化的能力有利于其减轻整体动脉粥样硬化的能力。在许多试验中化合物(1)和(2)具有强效抗氧化活性。
3.1对自由基清除的影响 方法 采用稳定的自由基化合物2，2-二苯基-1-苦基苯肼(DPPH)评价测试化合物的抗氧化(自由基俘获)活性。用乙醇制备浓度为0.1mM的DPPH母液，临用前混合10分钟。浓度100μM的测试化合物与DPPH反应20分钟后，在517nm处测定吸光度。最初的筛选在100μM进行。将517nm处吸光度的变化与反应试剂空白(仅DPPH和乙醇)进行比较。发现化合物在100μM具有显著的自由基清除活性(Δ吸光度＞0.3)并制得剂量反应曲线。测定IC50值，其表示导致吸光度变化0.6的测试化合物的浓度(吸光度单位1.2表示DPPH自由基完全清除)。
结果 表4测试化合物的自由基清除能力-EC50(μM) 3.2对抑制低密度脂蛋白(LDL)氧化的影响 方法 静脉穿刺采血，离心分离血浆。然后通过4-步氯化钠密度梯度和4℃、200,000g离心20小时，从血浆分离LDL。收集的LDL的纯化包括通过凝胶过滤PD10柱以去除过量的盐和EDTA，避光储存于4℃以防止自发氧化并在分离后2周内使用。用标准酶方法测定LDL胆固醇含量，采用BSA为标准品由Lowry方法确定蛋白质浓度。
每次实验当天，将2mL等份的LDL通过第二PD10柱并用chelex处理的PBS(100mM)稀释，得到标准蛋白质浓度0.1mg/mL，即每次反应的终浓度。加入新鲜制备的Cu2+溶液启动氧化反应，使得CuSO4的终浓度为5μM。对于抑制研究，在室温下用终浓度0.1、1.0、10和100μM的5种化合物预先处理LDL 2分钟，然后加入铜溶液，再在37℃孵育。测定3小时时间内每30分钟取出的等份试样的脂质过氧化物的形成，从而确定脂蛋白氧化程度。采用标准过氧化氢曲线(5-200μM)，通过亚铁氧化-二甲酚橙(FOX)试验在各个时间点测定过氧化物。在不同日期进行的至少两次独立的实验中测定化合物(1)和(2)。
还在不同日期一式两份地检查测试化合物与Cu2+的非特异性结合。制备测试化合物在DMSO中的母液，浓度5mM。将测试化合物在磷酸盐缓冲液(10mM，pH 7.2，chelex处理)中稀释至25μM后，测定200到800nm之间的紫外/可见吸收光谱。扫描200-800nm处第二重叠的吸收谱确定化合物与铜(II)的相互作用，其中将25μM CuSO4溶液加入新鲜25μM测试化合物溶液中，混合20秒。
结果 LDL氧化迟滞期约为60分钟，在120-180分钟实现最大氧化。随着浓度从0.01增加至10μM，测试化合物抑制LDL氧化的能力增加。计算50％氧化得到抑制时的浓度EC50，化合物(1)为0.61μM，化合物(2)为0.63M。
测试化合物与Cu2+的摩尔比1∶1时吸收带没有显著位移。与只有化合物相比，每种化合物与Cu2+的吸收带有非常小而一致的增加。由这些结果可以得出结论，测试化合物不与Cu2+相互作用。这也表明，LDL氧化抑制的潜在机制很可能不是因为测试化合物与Cu2+离子的直接相互作用。
表5没有测试化合物存在时，脂质过氧化物形成时程的原始数据 表6化合物(1)存在下，脂质过氧化物形成时程的原始数据 表7化合物(2)存在下，脂质过氧化物形成时程的原始数据 3.3对过氧化氢自由基诱导的血红细胞(RBC)裂解的影响 方法 将新鲜收集的肝素化静脉血(10ml，在冰上)等分到1.8ml无菌埃彭道夫管中，4℃、2600rpm离心10分钟。去除血浆和血沉棕黄层(约900ml)，浓集的血红细胞(RBC)通过加入900ml无菌冰冷的PBS进行洗涤。该洗涤过程重复两次。加入900ml冰冷的无菌PBS重新悬浮浓集的RBC(称为RBC母液)。将RBC母液储存在4℃最多3天。将200ml的RBC母液稀释到10ml冰冷的无菌PBS中并在每孔中加入50ml，每天新鲜制备所有RBC的工作悬液。
根据以下方法每次实验新鲜制备AAPH的母液。将AAPH(1.22gm)溶解在7.5ml PBS中产生600mM的4×母液，然后在各孔中加入50ml等份试样(终浓度150mM)以启动裂解实验。将测试化合物的母液(40mM，在100％DMSO中)在无菌PBS中稀释至每孔终浓度100、30和10mM。各个实验中包括适当的对照。将所有化合物稀释液调节至每孔中DMSO的终浓度为0.25％。过氧化氢诱导的RBC裂解试验在96-平底孔微量滴定板中进行，每孔总体积200ml。温和涡旋的同时用Tecan微量滴定板读数仪在690nm(37℃)处监测RBC悬液的浊度。试验一式四份进行，5小时内每5分钟获取读数。以吸光度(4次读数的平均值)与时间作图，构建RBC的裂解曲线。取最高吸光度读数(无裂解)和最低吸光度读数(最大裂解)计算半数裂解的时间。这两个读数之和除以2得到半数裂解吸光度。采用单回归分析来计算发生半数裂解吸光度时的时间。
结果 该试验检测了化合物(1)和(2)。发现这两种化合物均具有抗氧化活性，能够延迟AAPH-诱导的血红细胞半数裂解的时间。
表8与10μM测试化合物培育后达到半数裂解所需的时间(分钟)。
4.0抗致动脉粥样硬化活性 4.1对动脉细胞粘着分子表达的影响 方法 通过用ELISA方法测定细胞粘着分子的表面表达评价化合物对TNFα刺激的内皮细胞活化的抑制。将在生长培养液(细胞应用有限公司(CellApplications Inc.)中的人动脉内皮细胞(HAEC)以10,000个细胞/孔的密度接种到96-孔板中。将板在37℃、湿润培养箱中培养过夜以使细胞生长汇合。在实验当天早晨，在每孔中加入用100μl培养液配制的TNFα(10μl，2ng/ml)。将化合物在含DMSO的培养液(2.5％DMSO)中稀释至化合物浓度100和300μM。将化合物加入各孔中，使得终浓度为10和30μM。在零浓度对照孔中加入仅含DMSO的培养液。一式四份测定所有样品(每次处理4个孔)。
与化合物培育之后，去除培养液，用抗E-选择蛋白、ICAM或VCAM的非特异性IgG或特异性鼠抗体(BD生物科学公司(BD Biosciences)-0.1μg在含10％加热灭活的人血清的100μL缓冲盐水中)探测细胞。加入绵羊抗小鼠抗体/辣根过氧化物酶偶联物检测粘着分子的表达。板静置30分钟，然后洗涤细胞单层，加入绵羊抗小鼠抗体/辣根过氧化物酶偶联物(1∶500稀释于100μL含10％加热灭活的人血清和0.05％吐温20的HBSS中)，静置30分钟。再一次洗涤后，各孔加入150μL ABTS底物(KP实验室(Kirkegaard and PerryLaboratories))，使其显影15分钟。用ELISA读板仪(Titertek Multiscan，弗洛实验室(Flow Laboratories))在405nm处测定光密度。
结果 该试验检测了化合物(1)和(2)。在100μM，测试化合物显著影响HAEC存活率。对于一些化合物，30μM时HAEC存活率小于80％。因而发现，该试验中10μM是比较化合物活性的最适合浓度。
两种化合物都能显著抑制TNFα-诱导的VCAM、ICAM-1和E-选择蛋白的表达(见图7)。
4.2对血管平滑肌细胞增殖的影响 方法 检测了测试化合物对人脐静脉平滑肌细胞(HUVSMC)的影响。将细胞以每孔1.6×103个细胞的低接种率接种到96孔板中，使其生长贴附24小时。然后用不含FCS的培养液洗涤两次，在不含FCS的培养液中培养20小时，对它们进行血清饥饿。在不含FCS的培养液中制备20μM的类似物，加入板中，培育1小时。因此类似物终浓度为10μM。然后加入培养液+20％FCS刺激细胞，至FCS终浓度为10％。培养细胞直到对照细胞(即含FCS而不含化合物的细胞)正好汇合(5天)。进行MTT试验，用以下公式计算类似物处理的细胞与对照细胞间的吸光度差异 试验/对照*100-100。
结果 测试化合物对HUVSMC增殖的影响表明，10μM的化合物(1)、(2)、(7)、(8)、(17)、(18)、(19)和(20)能显著抑制FCS诱导的增殖(参见图8)。
5.0在鼠耳炎症中的抗炎活性 检测化合物抑制外用一些炎症原(inflammogen)-花生四烯酸(AA)和4-β-佛波基12-肉豆蔻酸酯13-乙酸酯(PMA)导致的小鼠耳朵肿胀的能力。
类花生酸的直接前体AA导致的炎症反应是因为经环加氧酶(COX)和脂肪氧合酶(LOX)途径形成了AA代谢物(Young等，1984)。AA诱导PGE2和LTC4合成的早期(10-15分钟)增加，先于耳朵厚度的增加(Opas等，1985；Chang等，1986)。
PMA诱导的炎症包括蛋白激酶C(PKC)的活化，蛋白激酶C(PKC)是在许多信号诱导过程中起关键作用的磷脂依赖性蛋白酶(Silvan等，1996；Bermejo等，1998)。换言之，PMA是PKC活化剂(Kuchera等，1993)。PKC介导磷脂酶A2的活化，导致游离AA的释放以及随后合成白三烯(LT)和前列腺素(PG)。炎症主要是由PGE2介导的，因为PMA-处理的小鼠的耳朵中PGE2水平升高而不是LTB4和LTC4(Ashendel和Boutwell 1979；Bermejo等，1998；Alexandre-Moreira等，1999)。
方法 对5-6只重15-21克的雌性BALB/c小鼠(ARC，WA，澳大利亚)的小组腹膜内注射(i/p)用聚乙二醇(PEG)400∶磷酸盐缓冲盐水(PBS)1∶1或乙醇∶丙二醇∶PBS 4∶9∶7递送的25mg/kg的测试化合物，30分钟后或者立即对耳朵施加炎症源。用异氟烷麻醉小鼠，用弹簧测微计测量双耳的基线厚度。每只小鼠总共接受20μL施用于每侧耳廓的内外表面的AA的乙醇溶液(50mg/ml或200mg/ml)或PMA的乙醇或丙酮溶液(0.2mg/ml)(即每侧耳朵0.5mg或2mg AA或2μg PMA)。施用AA后1小时和施用PMA后5小时再次麻醉小鼠，重新测量耳朵。
计算每只耳朵在施用炎症原之前和之后耳朵肿胀的差异，取每只小鼠两侧耳朵的平均值。一次实验测定多种化合物时采用Dunnett多重比较检验，或者仅测定一种化合物时采用双尾未配对t检验，用普通ANOVA计算每个测试组的平均肿胀与仅给予运载体的组之间的差异(Prism 4，图象处理软件(Graphpad Software))。
数据作为肿胀平均抑制百分数以图形方式呈现，计算如下 [1-[(测试组的耳朵厚度平均变化％/对照组耳朵厚度的平均变化％)x100]]。
结果 下表9和10给出了测试化合物处理抑制AA和PMA诱导的耳朵肿胀的相对量。
表9施用AA导致的耳朵厚度的变化
表10施用PMA导致的耳朵厚度的变化
6.0大鼠主动脉环试验中的血管舒张活性 用大鼠主动脉环试验离体检查测试化合物的血管舒张能力。在测试浴中加入去甲肾上腺素导致环收缩，如果测试化合物能够抑制血管收缩(即拮抗去甲肾上腺素的作用)，提示该化合物具有血管舒张活性。
方法 用80％CO2和20％O2处死雄性SD(Sprague-Dawley)大鼠(250±50g)。切下胸主动脉并快速安放到器官浴中(Chin-Dusting等，2001)。用递送浓度1μg/ml的测试化合物或无测试化合物获得去甲肾上腺素(0.1nM-10mM)的全浓度收缩曲线。在来自五只不同大鼠的5个不同的环中重复进行实验。在任何一只大鼠的任一环上仅测定在任何一种浓度下的一种化合物。根据数据拟合S形剂量效应曲线并计算logEC50(Prism 4，图象处理软件(GraphPadSoftware))。用双尾配对t检验计算存在或不存在测试化合物时这些值之间的差异。分别检测β-雌二醇和仅运载体的作用作为阳性和阴性对照。
结果 该试验检测了化合物(1)和(2)。与仅运载体相比，化合物(1)(p＝0.0252)和化合物(2)(p＝0.0115)都能显著抑制主动脉环对去甲肾上腺素的收缩响应(logEC50)(参见图9)。这些数据表明，化合物(1)和(2)除具有心保护作用之外，还具有心血管活性。
7.0免疫调节活性 方法 颈脱位法处理约六周龄的雄性Skh-1HR1(无毛)小鼠。由脾脏制备单细胞悬液，红细胞溶解在缓冲液(0.14M NH4Cl，17mM Tris，pH 7.2)中。剩余的脾细胞在补充有10％(v∶v)FBS，200mM L-谷胺酰胺，青霉素/链霉素和50mM 2-巯基乙醇的RPMI-1640(吉布科(Gibco))中进行培养。将脾细胞加入含伴刀豆球蛋白A(ConA，西格玛-奥德里奇公司(Sigma-Aldrich)-0.4微克/孔)、LPS(西格玛-奥德里奇公司-1微克/孔)或无促细胞分裂剂，以及10μM测试化合物的DMSO溶液的四复孔中。在37℃、5％CO2的空气中培养3天后对样品进行分析。甲基噻唑四唑盐(MTT)可被活细胞生物还原为可溶于DMSO的有色甲

产物。因此，甲

产物的量与培养物中活细胞的数量成正比，可用分光光度计在570nm处测定。将MTT加入各孔中，再培育4小时，然后用0.04N HCl的异丙醇溶液显色。培养物上清液收集后储存在-80℃，通过ELISA(BD生物科学公司(BD Biosciences))分析IFN-γ(Th-1细胞因子)，对于单独的T细胞，分析IL-6(Th-2细胞因子)。
结果 在四只单独的小鼠中检测了化合物(1)和(2)。这两种化合物对T细胞和B细胞都具有显著的免疫抑制作用。这种作用通过上清液中INF-γ和IL-6合成的同步减少而得到进一步证实。这种免疫抑制作用在一定程度上是因为测试化合物的直接细胞毒性，因为在没有促有丝分裂刺激存在下，活细胞数量减少约50％。图10、11和12显示了来自一只小鼠的数据。
8.0过氧化物酶体增殖子-激活的受体活性 过氧化物酶体增殖子激活的受体(PPAR)是转录因子，是核激素受体超家族的成员。配体导致的PPARγ的活化能够调节特定基因，作用是抑制响应例如LPS和细胞因子刺激的各种炎症介质(例如NO、TNFα、IL-1、IL-2、IL-6和COX-2)的产生。PPARγ的活化具有抗炎作用(Oates等，2002)，似乎能够通过限制内皮功能障碍、削弱动脉粥样化形成和防止再狭窄而产生血管保护作用，同时且有利地调节脂肪因子(adipokine)表达和脂质代谢(Verma和Szmitko 2006)。累积的证据表明，PPAR激动剂通过直接影响血管壁和间接影响系统性炎症和胰岛素敏感性而具有强大的抗动脉粥样硬化性质。PPAR激动剂也可用于治疗代谢综合征、血脂障碍、胰岛素耐性和糖尿病(Meerarani等，2006)。
方法 用与GAL4蛋白的DNA结合结构域融合的PPARγ配体结合域(GAL4-PPARγ融合蛋白)稳定转染人HEK293细胞，与PPARγ配体孵育时产生β-内酰胺酶。将转染的人肾胚细胞(英杰公司(Invitrogen Inc.)，加利福尼亚州卡尔斯巴德)接种到96-孔板的基质胶上，使其生长贴附过夜。第二天，以各种浓度向细胞中加入仅运载体(DMSO)或1、5和10μM的测试化合物，培养16-18小时。然后，在细胞上加载基于FRET的荧光底物以评价β-内酰胺酶活性。细胞避光保护并在室温下培养2小时。以激发波长409nm、发射波长460nm和530nm，在荧光读板仪上读取各板。结果以减去背景(无细胞对照孔)后这两种波长的比例表示。因此，通过测定由荧光产物与底物比评价的β-内酰胺酶活性确定PPARγ活性。
结果 通过与仅培养液的对照相比β-内酰胺酶活性增加来确定PPARγ活化。化合物(1)、(2)、(6)、(7)、(18)、(20)、(22)、(23)、(27)和(29)发生这种现象，提示这些化合物具有PPARγ激动活性。数据在图13中给出。
表明本发明化合物是PPARγ激动剂。就是说，它们具有代谢综合征、胰岛素耐性、糖尿病、血脂障碍及相关活性。
9.0细胞毒性 9.1抗癌活性 方法 人胰腺癌细胞系HPAC(CRL-2119)在含HEPES(15mM)、胰岛素(0.002mg/ml)、转铁蛋白(0.005mg/ml)、氢化可的松、(40ng/ml)、表皮生长因子(10ng/ml)的DMEM(西格玛公司)和Ham′s F12(西格玛公司)(1∶1)培养液中进行常规培养。乳腺癌细胞系MDA-MB-468在Leibovitz′s L-15培养液中进行培养。黑色素瘤细胞系MM200由Peter Hersey(纽卡斯尔大学)赠送并在DMEM培养液中进行培养。大细胞肺癌细胞系NCI-H460在额外补充有4.5g/L葡萄糖并用10mM HEPES缓冲的RPMI 1640培养液中进行培养。结肠腺癌细胞系HT-29在McCoy′s 5a培养液中培养。所有培养液补充有10％FCS(CSL、澳大利亚)、青霉素(100U/ml)、链霉素(100mg/ml)、L-谷胺酰胺(2mM)和碳酸氢钠(1.2g/L)并在37℃、5％CO2湿润气氛中进行培养。除非特别指出，所有细胞系均购自ATCC(美国马里兰)。
测定每种细胞系的IC50值。将细胞以生长动力学试验所确定的适当的细胞密度接种到96-孔板中，存在或不存在测试化合物的情况下培养5天。加入20μl 3-4，5二甲基噻唑-2，5-二苯基溴化四唑鎓(MTT，2.5mg/ml的PBS溶液，西格玛)，根据生产商的说明在37℃培育3-4小时后，评价细胞增殖。由x轴上的对数剂量与y轴上的对照增殖百分比的半对数图计算IC50值。
结果 化合物(1)和化合物(2)对测试的所有癌细胞系均具有活性(IC50约5-20μM)。虽然没有针对所有癌细胞系进行测定，化合物(6)、(15)、(17)、(24)对CP70、HPAC或MM200细胞系具有活性。化合物(16)和(17)对测试的各种细胞系的活性最强(约1-5μM)。测试时，化合物(9)对癌细胞也显示出适度毒性。化合物(3)选择性地对MM200黑色素瘤细胞系具有毒性。
表11测试化合物对各种不同癌症适应症的代表性细胞系的活性

9.2对正常细胞的毒性 方法 新生包皮成纤维细胞(NFF)由Peter Parsons博士(昆士兰医学研究机构(Queensland Institute of Medical Research))赠送。兔肾(RK-13)细胞由MillerWhalley(麦克夸利大学(Macquarie University))提供。两种细胞系在补充有10％FCS(CSL、Australia)、青霉素(100U/ml)、链霉素(100mg/ml)、L-谷胺酰胺(2mM)和碳酸氢钠(1.2g/L)的RPMI中培养，在37℃、5％CO2润湿气氛中培养。如上所述确定IC50值。
结果 化合物对选择的正常非转化细胞具有低至中度的毒性。化合物(1)对正常成纤维细胞系具有一定毒性(约15μM)而化合物(2)对NFF和RK-13细胞(IC50＞30μM)的毒性要低得多。
表12测试化合物对正常非转化细胞的活性
10.0药物洗脱支架 方法 以下述方式将化合物(1)加载到扩张尺寸为约3mmx17mm的药物递送支架中。支架位于心轴上，将快速降解的屏障层沉积到支架开口中。该屏障层为腔面上形成的低分子量PLGA以在填充期间密封支架开口的腔面。本文所述的各层以逐滴方式沉积，利用合适的有机溶剂如DMSO、NMP或DMAc以液体形式递送。然后将多个化合物(1)和低分子量PLGA基质的层沉积到开口中以形成缓解缺血损伤的药物嵌体。化合物(1)和聚合物基质以一定方式组合和沉积而实现所需的药物递送概况。快速降解的聚合物——低分子量PLGA的保护层沉积在活性剂层上，在储存、运输和递送到植入部位期间保护活性剂。选择保护层的降解速率，使活性剂在植入后能够相对快速地递送。支架上的总剂量约为10-600微克，也可以是更加合适的剂量。本领域技术人员将能够根据所用的活性剂和所需的治疗效果来确定其他合适的剂量。
在类似的方法中，用噁嗪基化合物(2)、(3)、(7)、(8)、(16)、(17)、(18)、(19)和(20)形成药物洗脱支架。
在另一种方法中，用化合物(1)和西罗莫司形成多层药物洗脱支架。在另一方法中，用化合物(1)和紫杉醇形成多层药物洗脱支架。在又一方法中，用化合物(1)和脱氢牛尿酚形成多层药物洗脱支架。
用阿姆斯特朗人隐静脉模型离体观察这些支架的释放概况。将涂覆的支架递送到静脉内，由球囊导管扩张，并沐浴在培养基中。通过培养基的分析观察活性剂随时间的浸析，以确定特定支架和聚合物/药物基质涂层的释放概况。
11.0比较例 在对类异黄酮化合物染料木黄酮和3′，7-二羟基-异黄-3-烯(37-DHE)的一系列研究中评价本发明噁嗪基类异黄酮化合物的生物学活性。
11.1对血管平滑肌细胞凋亡的影响 凋亡(程序性细胞死亡)在血管组织的健康和疾病中起关键作用。这是一种在正常生理学条件下发生的细胞死亡模式，其中细胞是其自身死亡的主动参与者(“细胞自杀”)。凋亡的特征在于胞质收缩、核凝聚和DNA片段化(Jacobson等，1997)。现在显然，VSMC生长和死亡的调节变化之间的平衡是血管完整性和损伤形成的主要决定因素(Wang等，1999)。因此，诱导VSMC凋亡是治疗新内膜增殖疾病，包括支架再狭窄的重要治疗方案。
方法 激活胱冬酶级联反应是凋亡途径中的整合事件。胱冬酶-3是重要的“执行性”胱冬酶之一，它启动许多蛋白质的切割而导致细胞有序降解。检测胱冬酶-3活化常用作凋亡的阳性标记物。采用均质发光胱冬酶-3/7试验，即胱冬酶-GloTM 3/7试验(Promega Corp.)极敏感地衡量胱冬酶激活。VSMC与不同浓度的测试化合物(0[仅运载体]、10、50和100μM)培育。该试验采用含有可被胱冬酶-3和-7识别的DEVD序列的前发光底物。胱冬酶-GloTM 3/7反应试剂产生与胱冬酶-3/7活性的量成正比的发光。发光在四个数量级的胱冬酶浓度以及广泛的细胞密度范围内是线性的。
结果 在A7r5大鼠主动脉SMC细胞系中，化合物(1)一致地诱导凋亡，如胱冬酶-3/7活性的诱导所证明的那样。该试验中化合物37-DHE没有活性。数据如图14所示。
这些试验中没有检测染料木黄酮，文献中也没有报道说染料木黄酮诱导的血管平滑肌细胞凋亡可能是其来源。
11.2人脐静脉平滑肌细胞 方法 检测测试化合物对人脐静脉平滑肌细胞(HUVSMC)的影响。将来自男性新生儿的细胞、组织外植体(HRI-第2代)以每孔1x103个细胞的密度接种到96孔板中，使其生长贴附24小时。然后洗涤两次并在无胎牛血清(FCS)的培养液中培养24-48小时以对其进行血清饥饿。在不含FCS的培养液中制备测试化合物，加入各板中培育1小时。加入含FCS的培养液以实现终浓度10％，培育各板4-5天直到对照细胞正好汇合。
结果 在抑制HUVSMC的增殖方面，化合物(1)比37-DHE或染料木黄酮(其具有类似活性)更有效。三次不同试验中化合物(1)的平均IC50为15μM。数据如图15所示。
11.3大鼠主动脉平滑肌细胞系 检测了测试化合物对大鼠主动脉平滑肌细胞系(A7r5)和来自大鼠主动脉培养基的另一种细胞系(A10)的影响。方法和HUVSMC相同，只是用化合物处理细胞三天。
结果 化合物(1)和37-DHE能有效抑制增殖，化合物(1)作用更强。A7r5细胞中IC50分别为23μM和45μM，A10细胞中分别为11μM和31μM。未检测染料木黄酮。数据如图16和17所示。
11.4对动脉细胞中粘着分子表达的影响 再狭窄涉及征集循环中炎症细胞及其经内皮迁移。该过程主要由血管内皮上以及循环白细胞上响应各种炎症刺激时表达的细胞粘着分子所介导。选择蛋白(P、E和L)参与血管壁上白细胞的旋转和束缚。细胞内粘着分子(ICAM)和血管细胞粘着分子(VCAM-1)，以及一些整联蛋白诱导炎症细胞牢固粘附在血管表面上。VCAM-1表达限于损伤和有损伤倾向的区域，而ICAM-1表达较广泛，可延伸至未涉及的主动脉和损伤保护区域。
粘着分子表达的增加在再狭窄中起一定作用。在46位经历选择性经皮穿腔冠状血管成形术(PCTA)患者的前瞻性研究中，与没有再狭窄的患者相比，6个月随访出现冠状动脉再狭窄的患者在其循环的单核细胞表面上粘着分子显著增加(Navarro-Lopez等，2003)。
方法 将生长培养基(细胞应用有限公司(Cell Applications Inc,))中的人动脉内皮细胞(HAEC)以每孔10,000个细胞的密度接种到96孔板中。将板在37℃培育过夜以实现汇合。各孔中加入用100μl培养液配制的TNFα(10μl，2ng/ml)，然后加入10和30μM的化合物。所有样品一式四份进行测定(每次处理4个孔)。
与化合物培育4小时后，去除培养液，用抗VCAM、ICAM或E-选择蛋白的非特异性IgG或特异性鼠抗体(BD生物科学公司(BD Biosciences))探测细胞。板静置30分钟，然后洗涤细胞单层，加入绵羊抗小鼠抗体/辣根过氧化物酶偶联物(1∶500稀释于100μL含10％加热灭活的人血清和0.05％吐温20的HBSS中)，静置30分钟。再一次洗涤后，各孔加入150μL ABTS底物(KP实验室(Kirkegaard and Perry Laboratories))，使其显影15分钟。用ELISA读板仪(Titertek Multiscan，弗洛实验室(Flow Laboratories))在405nm处测定光密度。
结果 在100μM，测试化合物能显著影响HAEC存活率。对于一些化合物，30μM时HAEC存活率不到80％。因而发现，10μM是该试验中比较化合物活性的最适浓度。
化合物(1)显著抑制VCAM表达，以及E-选择蛋白表达，抑制率超过50％。其对ICAM表达的影响为抑制10-50％。37-DHE的影响不明显，类似于染料木黄酮。数据如图18所示。
11.5对NFκB产生的影响 方法 根据上述实施例2.4所述试验方法进行该比较研究。
结果 发现30μM是比较测试化合物的NFkB-抑制活性的最适浓度。在50μM和100μM，化合物降低细胞存活率。
化合物(1)、37-DHE和染料木黄酮都能抑制NFκB。化合物(1)比37-DHE或染料木黄酮的效力强得多。还在一次试验中比较了10μM和30μM的化合物(1)与染料木黄酮。数据如图19和20所示。
11.6对自由基清除的影响 采用稳定的自由基化合物2，2-二苯基-1-苦基苯肼(DPPH)评价测试化合物的抗氧化(自由基俘获)活性。制备DPPH的母液，浓度0.1mM的乙醇溶液，使用前混合10分钟。初步筛选包括使浓度100μM的测试化合物与DPPH反应20分钟后，在517nm处测定吸光度。将吸光度的变化与反应试剂空白(仅DPPH和乙醇)进行比较。发现37-DHE和化合物(1)在100μM具有自由基清除活性(Δ吸光度＞0.3)并制得剂量反应曲线，而染料木黄酮没有这种作用。测定IC50值，表示导致吸光度变化0.6的测试化合物的浓度(吸光度单位1.2表示DPPH自由基完全清除)。
该试验中染料木黄酮无抗氧化活性，没有测试比100μM更低的浓度。然而，化合物(1)以及37-DHE和化合物(1)均具有强效自由基清除能力(见表13)。
表13测试化合物的自由基清除能力-EC50(μM)
11.7对过氧化氢自由基诱导的血红细胞(RBC)裂解的影响 方法 根据上述实施例3.3所述的试验方法进行该比较研究。
结果 化合物(1)和37-DHE，以及染料木黄酮均具有抗氧化活性，能够延迟AAPH-诱导的血红细胞半数裂解所需的时间。化合物(1)的自由基清除活性最高，因为其能够较大程度上延迟达到半数裂解吸光度所需的时间(见表14)。
表14用10μM测试化合物孵育后达到半数裂解所需的时间(分钟)
参考某些优选的实施方式描述了本发明，以使读者能够实施本发明而无需过多的实验。然而，本领域普通技术人员容易明白，可在一定程度上改变或改进许多组分和参数而不背离本发明的范围。而且，提供标题、题目等是为了便于读者理解内容，而不应理解为限制本发明的范围。
本文引用的所有申请、专利和出版物的全部内容都纳入本文作为参考。
在本说明书和所附的权利要求中，除非文中另有说明，词语“包含”及其变化形式如“包括”或“含有”将被理解为是指包含所述整数或步骤或者一组整数或步骤，但不排除任何其它整数或步骤或者一组整数或步骤。
本领域技术人员应知道，除了专门描述的那些，本文所述发明不难作出改变和改进。应知道本发明包括所有这些改变和改进。本发明也包括说明书中个别或共同提及或指出的所有步骤、特征、组合物和化合物，以及任两个或多个所述步骤或特征的任意和所有组合。
本说明书中的参考文献不是，也不应理解为承认或以任何形式提示现有技术构成所从事领域的公知知识。
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根据PCT条约第19条进行修改的声明
删除原权利要求书第7页的权利要求，用新的第7页的权利要求代替。具体是修改各权利要求间的引用关系，一式两份，一份标示出修改的位置和内容。
1.一种式(I)的噁嗪基类异黄酮化合物，和其药学上可接受的盐
式中，
R1是烷基、环烷基、芳烷基、烯基、炔基、芳基或烷基芳基，
R2、R3和R4独立地是氢、羟基、OR9、OC(O)R9、OSi(R10)3、烷基、烷基、环烷基、芳基、芳烷基、巯基、烷硫基、硝基、氰基或卤素，
R5是氢、烷基、环烷基、芳基、芳烷基、硝基、氰基或卤素，
R6是氢、烷基、环烷基、芳基、芳烷基、硝基、氰基或卤素，
R7是氢、烷基、环烷基、芳基或芳烷基，
R8是氢、烷基、环烷基、芳基、芳烷基、硝基、氰基或卤素，
R9是烷基、芳基或芳烷基，
R10独立地是烷基或芳基，
X是O、NR12或S，优选O，其中R12是烷基、芳基或芳烷基，和
划线
表示单键或双键，
其中烃取代基可任选地被烷基、卤素、酰氧基、羟基、卤素、烷氧基、甲硅烷氧基、硝基和氰基中的一个或多个所取代。
2.如权利要求1所述的式(I-I)的噁嗪基类异黄酮化合物，和其药学上可接受的盐
式中
R1是烷基、环烷基、芳烷基、烯基、炔基、芳基或烷基芳基，
R2、R3和R4独立地是氢、羟基、OR9、OC(O)R9、OSi(R10)3、烷基、烷基、环烷基、芳基、芳烷基、巯基、烷硫基、硝基、氰基或卤素，
R5是氢、烷基、环烷基、芳基、芳烷基、硝基、氰基或卤素，
R6是氢、烷基、环烷基、芳基、芳烷基、硝基、氰基或卤素，
R7是氢、烷基、环烷基、芳基或芳烷基，
R8是氢、烷基、环烷基、芳基、芳烷基、硝基、氰基或卤素，
R9是烷基、芳基或芳烷基，
R10独立地是烷基或芳基，和
划线
表示单键或双键，
其中烃取代基可任选地被烷基、卤素、酰氧基、羟基、卤素、烷氧基、甲硅烷氧基、硝基和氰基中的一个或多个所取代。
3.一种如权利要求2所述的式(I-II)的噁嗪基类异黄酮化合物，和其药学上可接受的盐
式中，
R1是烷基、芳烷基、芳基或烷基芳基，
R3和R4独立地是氢、羟基、OR9、OC(O)R9、OSi(R10)3、烷基、烷基、芳烷基、硝基、氰基或卤素，
R5是氢、烷基或卤素，
R6是氢或烷基，
R7是氢、烷基或芳基，
R8是氢，烷基或卤素，
R9是烷基或芳烷基，
R10独立地是烷基，和
划线
表示单键或双键，
其中烃取代基可任选地被烷基、卤素、酰氧基、羟基、卤素、烷氧基、甲硅烷氧基、硝基和氰基中的一个或多个所取代。
4.如权利要求3所述的噁嗪基类异黄酮化合物，其特征在于，
R1是烷基、苯基烷基、苯基、萘基烷基、萘基或烷基苯基，
R3和R4独立地是氢、羟基、OR9、OC(O)R9、烷基、硝基、氰基或卤素，其中R3和R4中至少一个不是氢，
R7是氢或苯基，
R9是烷基，和
其中烃取代基可任选地被烷基、卤素、酰氧基、羟基、卤素、烷氧基、硝基和氰基中的一个或多个所取代。
5.如权利要求4所述的噁嗪基类异黄酮化合物，其特征在于，
R1是任选被烷基、卤素、羟基、乙酰氧基、甲氧基、乙氧基、硝基或氰基取代的甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、苯甲基、1-苯乙基、苯基、萘基甲基、萘基或烷基苯基，
R3和R4独立地是氢、羟基和甲氧基，其中R3和R4中至少一个不是氢，
R5是氢、甲基或卤素，
R6是氢、甲基或乙基、
R7是氢或任选地被烷基、卤素、羟基、甲氧基、硝基或氰基取代的苯基，和
R8是氢、甲基或卤素。
6.如权利要求5所述的噁嗪基类异黄酮化合物，其特征在于，
R1是任选地被甲基、卤素、羟基、甲氧基、硝基或氰基取代的甲基、乙基、丙基、苯甲基、1-苯乙基、苯基、萘基甲基或甲基苯基，
R5是氢，
R6是氢，
R7是氢或任选地被甲氧基取代的苯基，和
R8是氢。
7.如权利要求1-6中任一项所述的噁嗪基类异黄酮化合物，其特征在于，R1是苯基、苯甲基、1-苯乙基、萘-1-基、萘-1-基甲基、4-甲氧基苯甲基、4-羟基苯基、4-氯苯甲基、4-甲基苯基、4-氰基苯基、3-甲基苯基、3-硝基苯基、4-叔丁基苯基、4-叔丁基苯甲基、3，4-二甲基苯基、4-甲氧基苯基或4-甲氧基苯甲基。
8.如权利要求1-6中任一项所述的噁嗪基类异黄酮化合物，其特征在于，R1是甲基、丙基或3-甲氧基丙基。
9.如权利要求1-8中任一项所述的噁嗪基类异黄酮化合物，其特征在于，R3或R4是羟基。
10.如权利要求1-8中任一项所述的噁嗪基类异黄酮化合物，其特征在于，R3和R4是甲氧基或羟基。
11.如权利要求1-10中任一项所述的噁嗪基类异黄酮化合物，其特征在于，R7是氢或4-甲氧基苯基。
12.如权利要求1-11中任一项所述的噁嗪基类异黄酮化合物，其特征在于，卤素是氯或溴。
13.如权利要求1-12中任一项所述的噁嗪基类异黄酮化合物，其特征在于，划线
代表双键。
14.如权利要求1所述的噁嗪基类异黄酮化合物，其选自化合物(1)-(32)或它们的药学上可接受的盐
4-(3-苄基-2，3，4，8-四氢色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪-7-基)酚(1)
4-(3-(1-苯乙基)-2，3，4，8-四氢色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪-7-基)酚(2)
4-(3-丙基-2，3，4，8-四氢色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪-7-基)酚(3)
4-(3-甲基-2，3，4，8-四氢色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪-7-基)酚(4)
7-(3，4-二甲氧基苯基)-3-丙基-2，3，4，8-四氢色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪(5)
4-(3-(4-甲氧基苄基)-2，3，4，8-四氢色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪-7-基)酚(6)
4-(3-苯基-2，3，4，8-四氢色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪-7-基)酚(7)
4，4′-(色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪-3，7(2H，4H，8H)-二基)二酚(8)
7-(3，4-二甲氧基苯基)-3-(4-甲氧基苄基)-2，3，4，8-四氢色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪(9)
3-(3-苄基-2，3，4，8-四氢色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪-7-基)酚(10)
3-(3-苯基-2，3，4，8-四氢色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪-7-基)酚(11)
7-(3，4-二甲氧基苯基)-3-苯基-2，3，4，8-四氢色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪(12)
3-苄基-7-(3，4-二甲氧基苯基)-10-甲基-2，3，4，8-四氢色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪(13)
7-(3，4-二甲氧基苯基)-10-甲基-3-丙基-2，3，4，8-四氢色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪(14)
4-(3-(4-氯苄基)-2，3，4，8-四氢色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪-7-基)酚(15)
4-(3-(3-甲氧基丙基)-2，3，4，8-四氢色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪-7-基)酚(16)
3-(3-(3-甲氧基丙基)-2，3，4，8-四氢色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪-7-基)酚(17)
4-(3-对甲苯基-2，3，4，8-四氢色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪-7-基)酚(18)
7-(3，4-二甲氧基苯基)-10-甲基-3-对甲苯基-2，3，4，8-四氢色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪(19)
3-(3-对甲苯基-2，3，4，8-四氢色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪-7-基)酚(20)
4-(7-(3-羟基苯基)色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪-3(2H，4H，8H)-基)苄腈(21)
4-(3-间甲苯基-2，3，4，8-四氢色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪-7-基)酚(22)
4-(3-(3-硝基苯基)-2，3，4，8-四氢色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪-7-基)酚(23)
4-(3-(4-氯苄基)-6-(4-甲氧基苯基)-2，3，4，8-四氢色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪-7-基)酚(24)
4-(10-溴-3-丙基-2，3，4，8-四氢色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪-7-基)酚(25)
3，4′-(10-甲基-色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪-3，7(2H，4H，8H)-二基)二酚(26)
4-(8-乙基-3-丙基-2，3，4，8-四氢色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪-7-基)酚(27)
4-(3-(4-叔丁基苯基)-2，3，4，8-四氢色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪-7-基)酚(28)
4-(3-(4-叔丁基苄基)-2，3，4，8-四氢色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪-7-基)酚(29)
4-(3-(萘-1-基-甲基)-2，3，4，8-四氢色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪-7-基)酚(30)
4-(3-(3，4-二甲基苯基)-2，3，4，8-四氢色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪-7-基)酚(31)
4-(3-(4-甲氧基苯基)-2，3，4，8-四氢色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪-7-基)酚(32)。
15.一种制备式(I)的化合物的方法，
式中，
R1是烷基、环烷基、芳烷基、烯基、炔基、芳基或烷基芳基，
R2、R3和R4独立地是氢、羟基、OR9、OC(O)R9、OSi(R10)3、烷基、烷基、环烷基、芳基、芳烷基、巯基、烷硫基、硝基、氰基或卤素，
R5是氢、烷基、环烷基、芳基、芳烷基、硝基、氰基或卤素，
R6是氢、烷基、环烷基、芳基、芳烷基、硝基、氰基或卤素，
R7是氢、烷基、环烷基、芳基或芳烷基，
R8是氢、烷基、环烷基、芳基、芳烷基、硝基、氰基或卤素，
R9是烷基、芳基或芳烷基，
R10独立地是烷基或芳基，
X是O、NR12或S，其中R12是烷基、芳基或芳烷基，优选O，和
划线
表示单键或双键，
其中烃取代基可任选地被烷基、卤素、酰氧基、羟基、卤素、烷氧基、甲硅烷氧基、硝基和氰基中的一个或多个所取代，
所述方法包括以下步骤使式(II)的类异黄酮化合物与甲醛和伯胺R1-NH2反应形成式(I)化合物
式(II)中，R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8和X如上定义，划线
表示单键或双键，
式R1-NH2中，R1是可任选取代的烷基、环烷基、芳烷基、烯基、炔基、芳基或烷基芳基。
16.一种药物组合物，其包含一种或多种如权利要求1所述的式(I)的化合物以及一种或多种药用载体、赋形剂、助剂和/或稀释剂。
17.一种用于治疗、预防或改善疾病或病症的药剂，所述药剂包含一种或多种如权利要求1所述的式(I)的化合物。
18.如权利要求17所述的药剂，其特征在于，所述药剂是心保护剂、抗炎药、抗氧化剂或化疗药。
19.一种治疗、预防或改善疾病或病症的方法，所述方法包括给予对象任选地与载体和/或赋形剂结合的一种或多种如权利要求1所述的式(I)的化合物。
20.一种或多种如权利要求1所述的式(I)的化合物在制造用于治疗疾病或病症的药物中的应用。
21.一种用于递送活性剂的可植入医疗器械，所述器械包含任选地与一种或多种其他活性剂结合的一种或多种如权利要求1所述的式(I)的化合物。
22.如权利要求21所述的可植入医疗器械，其特征在于，所述器械是支架。
权利要求
1.一种式(I)的噁嗪基类异黄酮化合物，和其药学上可接受的盐
式中，
R1是烷基、环烷基、芳烷基、烯基、炔基、芳基或烷基芳基，
R2、R3和R4独立地是氢、羟基、OR9、OC(O)R9、OSi(R10)3、烷基、烷基、环烷基、芳基、芳烷基、巯基、烷硫基、硝基、氰基或卤素，
R5是氢、烷基、环烷基、芳基、芳烷基、硝基、氰基或卤素，
R6是氢、烷基、环烷基、芳基、芳烷基、硝基、氰基或卤素，
R7是氢、烷基、环烷基、芳基或芳烷基，
R8是氢、烷基、环烷基、芳基、芳烷基、硝基、氰基或卤素，
R9是烷基、芳基或芳烷基，
R10独立地是烷基或芳基，
X是O、NR12或S，优选O，其中R12是烷基、芳基或芳烷基，和
划线
表示单键或双键，
其中烃取代基可任选地被烷基、卤素、酰氧基、羟基、卤素、烷氧基、甲硅烷氧基、硝基和氰基中的一个或多个所取代。
2.如权利要求1所述的式(I-I)的噁嗪基类异黄酮化合物，和其药学上可接受的盐
式中
R1是烷基、环烷基、芳烷基、烯基、炔基、芳基或烷基芳基，
R2、R3和R4独立地是氢、羟基、OR9、OC(O)R9、OSi(R10)3、烷基、烷基、环烷基、芳基、芳烷基、巯基、烷硫基、硝基、氰基或卤素，
R5是氢、烷基、环烷基、芳基、芳烷基、硝基、氰基或卤素，
R6是氢、烷基、环烷基、芳基、芳烷基、硝基、氰基或卤素，
R7是氢、烷基、环烷基、芳基或芳烷基，
R8是氢、烷基、环烷基、芳基、芳烷基、硝基、氰基或卤素，
R9是烷基、芳基或芳烷基，
R10独立地是烷基或芳基，和
划线
表示单键或双键，
其中烃取代基可任选地被烷基、卤素、酰氧基、羟基、卤素、烷氧基、甲硅烷氧基、硝基和氰基中的一个或多个所取代。
3.一种如权利要求2所述的式(I-II)的噁嗪基类异黄酮化合物，和其药学上可接受的盐
式中，
R1是烷基、芳烷基、芳基或烷基芳基，
R3和R4独立地是氢、羟基、OR9、OC(O)R9、OSi(R10)3、烷基、烷基、芳烷基、硝基、氰基或卤素，
R5是氢、烷基或卤素，
R6是氢或烷基，
R7是氢、烷基或芳基，
R8是氢，烷基或卤素，
R9是烷基或芳烷基，
R10独立地是烷基，和
划线
表示单键或双键，
其中烃取代基可任选地被烷基、卤素、酰氧基、羟基、卤素、烷氧基、甲硅烷氧基、硝基和氰基中的一个或多个所取代。
4.如权利要求3所述的噁嗪基类异黄酮化合物，其特征在于，
R1是烷基、苯基烷基、苯基、萘基烷基、萘基或烷基苯基，
R3和R4独立地是氢、羟基、OR9、OC(O)R9、烷基、硝基、氰基或卤素，其中R3和R4中至少一个不是氢，
R7是氢或苯基，
R9是烷基，和
其中烃取代基可任选地被烷基、卤素、酰氧基、羟基、卤素、烷氧基、硝基和氰基中的一个或多个所取代。
5.如权利要求4所述的噁嗪基类异黄酮化合物，其特征在于，
R1是任选被烷基、卤素、羟基、乙酰氧基、甲氧基、乙氧基、硝基或氰基取代的甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、苯甲基、1-苯乙基、苯基、萘基甲基、萘基或烷基苯基，
R3和R4独立地是氢、羟基和甲氧基，其中R3和R4中至少一个不是氢，
R5是氢、甲基或卤素，
R6是氢、甲基或乙基、
R7是氢或任选地被烷基、卤素、羟基、甲氧基、硝基或氰基取代的苯基，和
R8是氢、甲基或卤素。
6.如权利要求5所述的噁嗪基类异黄酮化合物，其特征在于，
R1是任选地被甲基、卤素、羟基、甲氧基、硝基或氰基取代的甲基、乙基、丙基、苯甲基、1-苯乙基、苯基、萘基甲基或甲基苯基，
R5是氢，
R6是氢，
R7是氢或任选地被甲氧基取代的苯基，和
R8是氢。
7.如权利要求1-6中任一项所述的噁嗪基类异黄酮化合物，其特征在于，R1是苯基、苯甲基、1-苯乙基、萘-1-基、萘-1-基甲基、4-甲氧基苯甲基、4-羟基苯基、4-氯苯甲基、4-甲基苯基、4-氰基苯基、3-甲基苯基、3-硝基苯基、4-叔丁基苯基、4-叔丁基苯甲基、3，4-二甲基苯基、4-甲氧基苯基或4-甲氧基苯甲基。
8.如权利要求1-6中任一项所述的噁嗪基类异黄酮化合物，其特征在于，R1是甲基、丙基或3-甲氧基丙基。
9.如权利要求1-8中任一项所述的噁嗪基类异黄酮化合物，其特征在于，R3或R4是羟基。
10.如权利要求1-8中任一项所述的噁嗪基类异黄酮化合物，其特征在于，R3和R4是甲氧基或羟基。
11.如权利要求1-10中任一项所述的噁嗪基类异黄酮化合物，其特征在于，R7是氢或4-甲氧基苯基。
12.如权利要求1-11中任一项所述的噁嗪基类异黄酮化合物，其特征在于，卤素是氯或溴。
13.如权利要求1-12中任一项所述的噁嗪基类异黄酮化合物，其特征在于，划线
代表双键。
14.如权利要求1所述的噁嗪基类异黄酮化合物，其选自化合物(1)-(32)或它们的药学上可接受的盐
4-(3-苄基-2，3，4，8-四氢色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪-7-基)酚(1)
4-(3-(1-苯乙基)-2，3，4，8-四氢色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪-7-基)酚(2)
4-(3-丙基-2，3，4，8-四氢色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪-7-基)酚(3)
4-(3-甲基-2，3，4，8-四氢色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪-7-基)酚(4)
7-(3，4-二甲氧基苯基)-3-丙基-2，3，4，8-四氢色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪(5)
4-(3-(4-甲氧基苄基)-2，3，4，8-四氢色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪-7-基)酚(6)
4-(3-苯基-2，3，4，8-四氢色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪-7-基)酚(7)
4，4′-(色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪-3，7(2H，4H，8H)-二基)二酚(8)
7-(3，4-二甲氧基苯基)-3-(4-甲氧基苄基)-2，3，4，8-四氢色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪(9)
3-(3-苄基-2，3，4，8-四氢色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪-7-基)酚(10)
3-(3-苯基-2，3，4，8-四氢色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪-7-基)酚(11)
7-(3，4-二甲氧基苯基)-3-苯基-2，3，4，8-四氢色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪(12)
3-苄基-7-(3，4-二甲氧基苯基)-10-甲基-2，3，4，8-四氢色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪(13)
7-(3，4-二甲氧基苯基)-10-甲基-3-丙基-2，3，4，8-四氢色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪(14)
4-(3-(4-氯苄基)-2，3，4，8-四氢色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪-7-基)酚(15)
4-(3-(3-甲氧基丙基)-2，3，4，8-四氢色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪-7-基)酚(16)
3-(3-(3-甲氧基丙基)-2，3，4，8-四氢色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪-7-基)酚(17)
4-(3-对甲苯基-2，3，4，8-四氢色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪-7-基)酚(18)
7-(3，4-二甲氧基苯基)-10-甲基-3-对甲苯基-2，3，4，8-四氢色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪(19)
3-(3-对甲苯基-2，3，4，8-四氢色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪-7-基)酚(20)
4-(7-(3-羟基苯基)色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪-3(2H，4H，8H)-基)苄腈(21)
4-(3-间甲苯基-2，3，4，8-四氢色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪-7-基)酚(22)
4-(3-(3-硝基苯基)-2，3，4，8-四氢色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪-7-基)酚(23)
4-(3-(4-氯苄基)-6-(4-甲氧基苯基)-2，3，4，8-四氢色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪-7-基)酚(24)
4-(10-溴-3-丙基-2，3，4，8-四氢色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪-7-基)酚(25)
3，4′-(10-甲基-色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪-3，7(2H，4H，8H)-二基)二酚(26)
4-(8-乙基-3-丙基-2，3，4，8-四氢色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪-7-基)酚(27)
4-(3-(4-叔丁基苯基)-2，3，4，8-四氢色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪-7-基)酚(28)
4-(3-(4-叔丁基苄基)-2，3，4，8-四氢色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪-7-基)酚(29)
4-(3-(萘-1-基-甲基)-2，3，4，8-四氢色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪-7-基)酚(30)
4-(3-(3，4-二甲基苯基)-2，3，4，8-四氢色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪-7-基)酚(31)
4-(3-(4-甲氧基苯基)-2，3，4，8-四氢色烯并[6，7-e][1，3]噁嗪-7-基)酚(32)。
15.一种制备式(I)的化合物的方法，
式中，
R1是烷基、环烷基、芳烷基、烯基、炔基、芳基或烷基芳基，
R2、R3和R4独立地是氢、羟基、OR9、OC(O)R9、OSi(R10)3、烷基、烷基、环烷基、芳基、芳烷基、巯基、烷硫基、硝基、氰基或卤素，
R5是氢、烷基、环烷基、芳基、芳烷基、硝基、氰基或卤素，
R6是氢、烷基、环烷基、芳基、芳烷基、硝基、氰基或卤素，
R7是氢、烷基、环烷基、芳基或芳烷基，
R8是氢、烷基、环烷基、芳基、芳烷基、硝基、氰基或卤素，
R9是烷基、芳基或芳烷基，
R10独立地是烷基或芳基，
X是O、NR12或S，其中R12是烷基、芳基或芳烷基，优选O，和
划线
表示单键或双键，
其中烃取代基可任选地被烷基、卤素、酰氧基、羟基、卤素、烷氧基、甲硅烷氧基、硝基和氰基中的一个或多个所取代，
所述方法包括以下步骤使式(II)的类异黄酮化合物与甲醛和伯胺R1-NH2反应形成式(I)化合物
式(II)中，R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8和X如上定义，划线
表示单键或双键，
式R1-NH2中，R1是可任选取代的烷基、环烷基、芳烷基、烯基、炔基、芳基或烷基芳基。
16.一种药物组合物，其包含一种或多种如权利要求1所述的式(I)的化合物以及一种或多种药用载体、赋形剂、助剂和/或稀释剂。
17.一种用于治疗、预防或改善疾病或病症的药剂，所述药剂包含一种或多种如权利要求1所述的式(I)的化合物。
18.如权利要求17所述的药剂，其特征在于，所述药剂是心保护剂、抗炎药、抗氧化剂或化疗药。
18.一种治疗、预防或改善疾病或病症的方法，所述方法包括给予对象任选地与载体和/或赋形剂结合的一种或多种如权利要求1所述的式(I)的化合物。
19.一种或多种如权利要求1所述的式(I)的化合物在制造用于治疗疾病或病症的药物中的应用。
20.一种用于递送活性剂的可植入医疗器械，所述器械包含任选地与一种或多种其他活性剂结合的一种或多种如权利要求1所述的式(I)的化合物。
21.如权利要求20所述的可植入医疗器械，其特征在于，所述器械是支架。
全文摘要
本发明提供了噁嗪基类异黄酮化合物及包含它的组合物，其制备方法及其作为治疗剂，具体是心保护剂、抗炎药、抗氧化剂和化疗药的应用。
文档编号C07D498/00GK101652373SQ200880006738
公开日2010年2月17日 申请日期2008年2月29日 优先权日2007年3月2日
发明者A·希顿, N·库马, C·沃克尔 申请人:诺沃根研究控股有限公司