专利名称：：具有抗真菌活性的哌嗪并[2,1-a]异喹啉类化合物或其盐类的制作方法
技术领域：
：本发明涉及医药
技术领域：
，是关于一类哌嗪并[2，1-a]异喹啉类化合物具有抗真菌活性的特定化学结构
背景技术：
：真菌感染随之临床上长期使用广谱抗生素、导管插管及肿瘤放化疗，造成人体正常菌群共生关系的破坏，目前已严重威胁人类生命健康。随着药物耐药性以及毒副作用的日益严重，使得目前临床对抗真菌药的需求不断增大。寻找高效、广谱和安全的抗真菌药物是一个十分紧迫的问题。羊毛甾醇14a去甲基化酶(CYP51)是真菌细胞膜生物合成过程中的一个关键酶。氮唑类抗真菌药物是目前临床治疗真菌感染的唯一一类CYP51抑制剂，也是应用最广的抗真菌药物。然而，氮唑类药物存在耐药性和肝毒性二大类问题，使其临床应用受到发展很大的限制。因此，发明人基于酶结构研究活性腔中关键氨基残基，采用计算机辅助分子设计技术，设计全新的结合模式、新的作用机制的一类全新结构类型的非氮唑类抑制剂。这为抗真菌药物提供新的结构类型，也为高效抗真菌药物的合理设计提供基础，更为抗真菌药物的发展提供一个新的方向和新的研究路径。
发明内容发明人根据对CYP51靶酶活性腔的结合位点性质分析，结合先导化合物的结构，通过计算机辅助分子设计技术，避开能与氮唑类药物结合的血红素辅基Fe原子，以活性腔中氨基酸功能残基为药物结合点，设计了一类新结构类型的N-取代-2，3，4，6，7，11b-六氢-lH-哌嗪并[2，l-a]异喹啉类抗真菌抑制剂或药学上可接受的盐类。本发明的新型抗真菌抑制剂的结构通式为<formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula>式中R1表示H、OH、CH30、N02或者F;R2表示H、0H、CH30、N02或者F;R3表示H、OH、CH30、N02或者F;R4表示H、OH、CH30、N02或者F;Rs表示为H、CrC2。的直链或支链烷基、CrC2。的直链或支链烯基、苄基或芳环上取代苄基Re为=0、HHX表示HC1、HBr。本发明已合成并被证实具有抗真菌活性的部分哌嗪并[2，1-a]异喹啉类化合物或其盐类的化学结构见表l。表l化合物结构<formula>formulaseeoriginaldocumentpage6</formula><table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>本发明化合物制备方法如下1、合成路线<formula>formulaseeoriginaldocumentpage13</formula>2、具体操作过程为1.各种苯环取代的2-苯乙胺(I)与氯乙酰氯反应生成苯环取代的N-氯乙酰基-2-苯乙胺(II);2.各种苯环取代的N-氯乙酰基-2-苯乙胺(II)在甲苯条件下与氨基乙醛縮二甲醇反应生成苯环取代的2-(2，2-二甲氧乙氨基)-N-苯乙基乙酰胺(III);3.各种苯环取代的2-(2，2-二甲氧乙氨基)-N-苯乙基乙酰胺(III)在二氯甲烷溶剂中，浓H^04条件下反应生成苯环取代的2，3，6，7-四氢-lH-哌嗪并[2，l_a]异喹啉-4(llbH)-酮(IV);4.各种苯环取代的2，3，6，7_四氢_1H_哌嗪并[2，l_a]异喹啉_4(llbH)-酮(IV)在1^C03条件下与氯代烃反应生成各种苯环取代的N取代的酮(V);5.各种苯环取代的N取代的酮(V)用四氢铝锂还原得到各种苯环取代的N取代的2，3，4，6，7，llb-六氢-lH-哌嗪并[2，l_a]异喹啉(VI)具体实施例方式—.化合物的合成实施例1:关键中间体苯环取代的2，3，6，7-四氢-lH-哌嗪并[2，l_a]异喹啉-4(llbH)-酮(IV)的制备1.各种苯环取代的N-氯乙酰基-2-苯乙胺(II)冰浴0-5t:下，将各种苯环取代的2-苯乙胺60.5g和碳酸氢钠53g投入500ml二氯甲烷中，缓慢滴加氯乙酰氯48ml，滴完后转移到室温1(TC下反应2小时。反应完全，冰浴ot:下，将反应混合物倒入水中，分离有机层用2M盐酸洗2次，饱和食盐水洗2次。减压蒸干溶剂，得固体用甲醇及水重结晶，得各种苯环取代的N-氯乙酰基-2-苯乙胺80g2.各种苯环取代的2-(2，2-二甲氧乙氨基)-N-苯乙基乙酰胺(III)取N-氯乙酰基-2-苯乙胺6.4g溶于30ml甲苯，投入氨基乙醛縮二醇3.6ml及三乙胺5ml，11(TC回流2小时。反应完全后，停止反应，冷却过滤。减压蒸干溶剂，加入30ml二氯甲烷，水洗3次，分离有机层，用无水硫酸钠干燥。过滤蒸干得粗品5.4g，加入30ml乙酸乙酯，_301:下通入氯化氢气体，搅拌得大量固体，过滤烘干，得2-(2，2-二甲氧乙氨基)-N-苯乙基乙酰胺盐酸盐。3.各种苯环取代的3，6，7-四氢-lH-哌嗪并[2，l_a]异喹啉_4(llbH)_酮(IV)取2_(2，2-二甲氧乙氨基)-N-苯乙基乙酰胺盐酸盐20g，溶于二氯甲烷280ml，冰浴0-5t:下，滴加浓硫酸37.5ml，滴完后转移到室温反应过夜。反应完全后，将反应混合物倒入冰水，用冷的20X氢氧化钠溶液碱化至pH约为12。用二氯甲烷提取三次，无水硫酸钠干燥，减压蒸干，放置，得2，3，6，7-四氢-lH-哌嗪并[2，l-a]异喹啉-4(llbH)-酮约15g。实施例2:目标化合物2-正丁基-2，3，6，7_四氢_1H_哌嗪并[2，l_a]异喹啉-4(llbH)_酮(表1中化合物1)在丙酮溶液中，加入K2CO30.82g、HIO.lg，将2，3，6，7_四氢_1H_哌嗪并[2，l-a]异喹啉-4(llbH)-酮lg及溴代正丁烷1.3ml投入其中，7(TC回流8小时。停止但应减压蒸干，加15ml水，水层用E^0提取3次，合并乙醚层用lMHC13ml，放置大量固体出现，过滤得粗品。用乙醇/乙醚重结晶，得目标化合物1.4g。用实施例2的制备方法可制备下列化合物(1)将2，3，6，7-四氢-lH-哌嗪并[2，l_a]异喹啉_4(llbH)_酮分别与溴代正辛烷、溴代正壬烷、溴代正十二烷、对氟溴苄、2，4-二氯溴苄、对甲基溴苄、3-溴丙烯反应可分别合成表1中化合物2、3、4、28、29、30、37。(2)将2，3，6，7_四氢_9，10-二甲氧基_1H_哌嗪并[2，l_a]异喹啉-4(llbH)-酮分别与溴代正丁烷、溴代正辛烷、溴代正壬烷、溴代正十二烷、对氟溴苄、2，4-二氯溴苄、3-溴丙烯反应可分别合成表l中化合物5、6、7、8、31、32、38。(3)将2，3，6，7-四氢-10-氟-lH-哌嗪并[2，l_a]异喹啉_4(llbH)_酮分别与溴代正丁烷、溴代正辛烷、溴代正壬烷、溴代正十二烷、对氟溴苄、2，4-二氯溴苄反应可分别合成表1中化合物9、10、11、12、33、34。实施例3:目标化合物2-正丁基-2，3，4，6，7，1lb_六氢_1H_哌嗪并[2，l-a]异喹啉(表1中化合物13)将lg化合物1加到20ml无水四氢呋喃中，冰浴条件下，分批量加入LiAlH40.6g，反应3h。冰水淬灭，过滤，有机层减压蒸干，力niMHCl得粗品，甲醇/乙醚重结晶，的目标化合物0.8g。用实施例3的制备方法可制备下列化合物由化合物13可分别制备化合物1315。由化合物58可分别制备1619。有化合物912可分别制备2023。由化合物3334可分别制备3536。实施例4:目标化合物2-丁基-2，3，4，6，7，11b-六氢-9，10-羟基-lH-哌嗪并[2，l-a]异喹啉(表1中化合物24)取40%的氢溴酸10ml加到lg化合物5中，加热回流4h。减压蒸干，甲醇/乙醚重结晶，的目标化合物0.9g。用实施例4的制备方法可制备下列化合物由化合物68可分别制备化合物2527。二、抑菌试验1、实验菌株本实验采用6种常见的深部及浅表致病真菌为测试菌。它们分别是白念珠菌、新生隐球菌、热带念珠菌、红色毛癣菌、石膏状小孢子菌、薰烟曲霉菌(由上海长征医院真菌库提供)。2、菌液制备球菌在YEPD液体培养基35t:培养16h，活化两次，用血细胞计数板计数，以RPMI1640培养液调整菌液浓度至1X1035X103个/ml;丝状菌接种至SDA斜面，35°C，培养一周，活化两次，使菌株覆盖SDA斜面，加适量RPMI1640培养液，用吸管吹打菌落，使真菌孢子游离于RPMI1640培养液中，然后经四层无菌纱布过滤。培养液经血细胞计数板计数后，加RPMI1640培养液调整孢子浓度至1X1035X103个/ml。3、药液制备受试药物分别用DMSO配成6.4gL_l。4、培养及检测念珠菌属真菌培养24小时测定结果。用酶标分析仪于630nm测各孔OD值。与阳性对照孔比，以OD值下降80X以上的最低浓度孔中的药物浓度为MICs。(抗真菌活性见表3)表3化合物抗真菌活性(MIC8。，mgL—0<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>CN<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>由此可见，本发明化合物具有抗真菌活性，本发明N-取代-2，3，4，6，7，llb-六氢-1H-哌嗪并[2，l-a]异喹啉类化合物是一类全新结构的具有抗真菌活性的化合物，这为深入研究和开发新的抗真菌药物开辟了新的途径和方向。权利要求具有抗真菌活性的N-取代-2，3，4，6，7，11b-六氢-1H-哌嗪并[2，1-a]异喹啉类化合物或其药学上可接受的加成盐，结构通式如下式中R1表示H、OH、CH3O、NO2或者F；R2表示H、OH、CH3O、NO2或者F；R3表示H、OH、CH3O、NO2或者F；R4表示H、OH、CH3O、NO2或者F；R5表示为H、C1-C20的直链或支链烷基、C1-C20的直链或支链烯基、苄基或芳环上取代苄基R6为＝O、HHX表示HCl、HBr。2.按权利要求1所述的化合物或其加成盐，其特征在于各R基团作如下搭配(1)RiR3为H，R4为OH、OCH3、N02、NH2或F;R5表示C4C20的直链或支链烷基、C4C2。的直链或支链烯基、苄基或芳环上取代苄基；Re表示H、=0;(2)RpR2、R4为H，R3为OH、OCH3、N02、NH2或F;R5表示C4C20的直链或支链烷基、C4C2。的直链或支链烯基、苄基或芳环上取代苄基；Re表示H、=0;(3)RpR3、R4为H，R2为OH、OCH3、N02、NH2或F;R5表示C4C20的直链或支链烷基、C4C2。的直链或支链烯基、苄基或芳环上取代苄基；Re表示H、=0;(4)R2、R3、R4为H，R丄为OH、OCH3、N02、NH2或F;R5表示C4C20的直链或支链烷基、C4C2。的直链或支链烯基、苄基或芳环上取代苄基；Re表示H、=0;(5)RpR2为H，R3、R4为0H、0CH3、N02、NH2或F;R5表示C4C20的直链或支链烷基、C4C2。的直链或支链烯基、苄基或芳环上取代苄基；Re表示H、=0;(6)RpR3为H，R2、R4为0H、0CH3、N02、NH2或F;R5表示C4C20的直链或支链烷基、C4C2。的直链或支链烯基、苄基或芳环上取代苄基；Re表示H、=0;(7)RpR4为H，R2、R3为0H、0CH3、N02、NH2或F;R5表示C4C20的直链或支链烷基、C4C2。的直链或支链烯基、苄基或芳环上取代苄基；Re表示H、=0;(8)R2、R3为H，R4为0H、0CH3、N02、NH2或F;R5表示C4C20的直链或支链烷基、C4C2。的直链或支链烯基、苄基或芳环上取代苄基；Re表示H、=0;(9)R2、R4为H，R3为0H、0CH3、N02、NH2或F;R5表示C4C20的直链或支链烷基、C4C2。的直链或支链烯基、苄基或芳环上取代苄基；Re表示H、=0;(10)R3、R4为H，R2为0H、0CH3、N02、NH2或F;R5表示C4C20的直链或支链烷基、C4C2。的直链或支链烯基、苄基或芳环上取代苄基；Re表示H、=0;(11)R丄为H，R2、R3、R4为0H、0CH3、N02、NH2或F;R5表示C4C20的直链或支链烷基、C4C2。的直链或支链烯基、苄基或芳环上取代苄基；Re表示H、=0;(12)R2为H，R3、R4为OH、OCH3、N02、NH2或F;R5表示C4C20的直链或支链烷基、C4C2。的直链或支链烯基、苄基或芳环上取代苄基；Re表示H、=0;(13)R3为H，R2、R4为OH、OCH3、N02、NH2或F;R5表示C4C20的直链或支链烷基、C4C2。的直链或支链烯基、苄基或芳环上取代苄基；Re表示H、=0;(14)R4为H，R2、R3为0H、0CH3、N02、NH2或F;R5表示C4C20的直链或支链烷基、C4C2。的直链或支链烯基、苄基或芳环上取代苄基；Re表示H、=0;(15)R2、R3、R4为0H、0CH3、N02、NH2或F;R5表示C4C20的直链或支链烷基、QC2。的直链或支链烯基、苄基或芳环上取代苄基，Re表示H、=0;3.按按权利要求1所述的化合物或其加成盐，其特征在于各R基团作如下搭配<table>tableseeoriginaldocumentpage3</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage4</column></row><table>4.权利要求1所述的化合物或其加成盐在制备抗真菌药物中的应用。全文摘要本发明涉及医药
技术领域：
，是一类具有抗真菌活性的化合物。该类化合物的结构通式为式中R1表示H、OH、CH3O、NO2或者F；R2表示H、OH、CH3O、NO2或者F；R3表示H、OH、CH3O、NO2或者F；R4表示H、OH、CH3O、NO2或者F；R5表示为H、C1-C20的直链或支链烷基、C1-C20的直链或支链烯基、苄基或芳环上取代苄基R6为＝O、HHX表示HCl、HBr。本发明化合物化学性质稳定，能抑制真菌细胞的生长，可以用来制备抗真菌药物。文档编号C07D471/04GK101691367SQ20091019482公开日2010年4月7日申请日期2009年8月31日优先权日2009年8月31日发明者吕加国,周有骏,唐辉,朱驹,栗亚男,郑灿辉申请人:中国人民解放军第二军医大学