从裂壶藻中分离纯化dha的生产工艺的制作方法
【专利摘要】本发明公开了一种从裂壶藻中分离纯化DHA的生产工艺，包括裂壶藻预处理，尿素包合法分离饱和脂肪酸和低不饱和脂肪酸，银离子络合法分离DHA的步骤。制备出的DHA纯度高达90%以上，成本较低，供应稳定，适合大批量工业化生产。
【专利说明】从裂壶藻中分离纯化DHA的生产工艺
[0001]
【技术领域】
[0002]本发明属于DHA生产【技术领域】，具体涉及从裂壶藻中分离纯化DHA的生产工艺。
[0003]
【背景技术】
[0004]二十二碳六烯酸(DHA)是一种具有重要生理意义和经济价值的多不饱和脂肪酸。它不仅是婴幼儿大脑、视觉正常发育的必需物质，而且还具有延缓老年人大脑和视觉功能衰退和降低血脂、抑制血栓生成、抗自身免疫反应、抑制肿瘤等功效。因此，DHA己广泛用于生产婴幼儿食品、保健食品和辅助治疗剂等产品，其制备和加工方法也日受关注。目前DHA的主要制备方法是从深海鱼油中提取。由于鱼油资源有限、成份复杂，这种制备方法存在供应不稳定、产量有限、成本较高等问题，限制了 DHA的进一步应用。更不利的是，由于海洋环境污染的恶化，这种方法的安全性受到了越来越多的质疑。
[0005]
【发明内容】
[0006]为了克服现有【技术领域】存在的上述缺陷，本发明的目的在于，提供一种从裂壶藻中分离纯化DHA的生产工艺，解决现有技术由于鱼油资源有限、成份复杂，从深海鱼油中提取DHA这种制备方法存在供应不稳定、产量有限、成本较高等问题。
[0007]本发明提供的从裂壶藻中分离纯化DHA的生产工艺，包括以下步骤:
一、裂壶藻预处理，高温喷雾干燥法，调整发酵液中生物量为20%左右，处理温度120°C，用喷雾干燥器，喷雾快速脱水，干燥，藻壁快速收缩开裂，得到破壁裂壶藻；在破壁裂壶藻中加入是其质量2倍石油醚搅拌30min，用碟式离心机连续离心，去除固形物，石油醚置蒸馏器50°C，蒸馏回收石油醚，剩余物为裂壶藻油脂；
二、尿素包合法分离饱和脂肪酸和低不饱和脂肪酸，将尿素加入无水甲醇中，加热至50°C，搅拌成尿素乙醇饱和溶液；将裂壶藻油脂1份和甲醇3份相互混合，同时加入固体重量为油脂重量1%的NAOH搅拌加热，温度在50-70°C间，回流20min，得到裂壶藻脂肪酸甲酯及甘油和未反应的藻油甘油甲酯，冷却后，水洗其甘油；将脂肪酸甲酯加入其2倍量尿素甲醇溶液,搅拌加热50°C，反应30min，冷却至0°C，包合数小时，形成尿素包合体,液相部分为高度不饱和脂肪酸；用碟式离心机，固液分离，收集液相部分，固相脲包物回收油脂；液相部分用70°C进行蒸馏，回收甲醇，保留多不饱和脂肪酸甲酯；多不饱和脂肪酸甲酯经冷水洗出残余尿素，静止，分层，弃除水相，油相为含有高比值的DHA ;
三、银离子络合法分离DHA，多不饱和脂肪酸甲酯溶解于丙酮中成丙酮溶液，硝酸银溶于蒸馏水中，浓度为20%，成硝酸银溶液，硝酸银溶液和丙酮溶液等量相混，在0°C状态，搅拌30min，继续静止2小时，成DHA硝酸银络合物水溶液，油水分离；用正己烷从DHA硝酸银络合物水溶液中提取DHA，抽提3次，合并正己烷，蒸馏，加温至69°C，挥发回收正己烷，最后产物为DHA。
[0008]本发明提供的从裂壶藻中分离纯化DHA的生产工艺，其有益效果在于，制备出的DHA纯度高达90%以上，成本较低，供应稳定，适合大批量工业化生产。
[0009]
【具体实施方式】
[0010]下面结合一个实施例，对本发明提供的从裂壶藻中分离纯化DHA的生产工艺进行详细的说明。
[0011]
实施例
[0012]本实施例的从裂壶藻中分离纯化DHA的生产工艺，包括以下步骤:
一、裂壶藻预处理，高温喷雾干燥法，调整发酵液中生物量为20%左右，处理温度120°C，用喷雾干燥器，喷雾快速脱水，干燥，藻壁快速收缩开裂，得到破壁裂壶藻；在破壁裂壶藻中加入是其质量2倍石油醚搅拌30min，用碟式离心机连续离心，去除固形物，石油醚置蒸馏器50°C，蒸馏回收石油醚，剩余物为裂壶藻油脂；
二、尿素包合法分离饱和脂肪酸和低不饱和脂肪酸，将尿素加入无水甲醇中，加热至50°C，搅拌成尿素乙醇饱和溶液；将裂壶藻油脂1份和甲醇3份相互混合，同时加入固体重量为油脂重量1%的NAOH搅拌加热，温度在50-70°C间，回流20min，得到裂壶藻脂肪酸甲酯及甘油和未反应的藻油甘油甲酯，冷却后，水洗其甘油；将脂肪酸甲酯加入其2倍量尿素甲醇溶液,搅拌加热50°C，反应30min，冷却至0°C，包合数小时，形成尿素包合体,液相部分为高度不饱和脂肪酸；用碟式离 心机，固液分离，收集液相部分，固相脲包物回收油脂；液相部分用70°C进行蒸馏，回收甲醇，保留多不饱和脂肪酸甲酯；多不饱和脂肪酸甲酯经冷水洗出残余尿素，静止，分层，弃除水相，油相为含有高比值的DHA ;
三、银离子络合法分离DHA，多不饱和脂肪酸甲酯溶解于丙酮中成丙酮溶液，硝酸银溶于蒸馏水中，浓度为20%，成硝酸银溶液，硝酸银溶液和丙酮溶液等量相混，在0°C状态，搅拌30min，继续静止2小时，成DHA 硝酸银络合物水溶液，油水分离；用正己烷从DHA硝酸银络合物水溶液中提取DHA，抽提3次，合并正己烷，蒸馏，加温至69°C，挥发回收正己烷，最后产物为DHA，纯度为95%。
【权利要求】
1.一种从裂壶藻中分离纯化DHA的生产工艺，其特征在于:包括以下步骤: 一、裂壶藻预处理，高温喷雾干燥法，调整发酵液中生物量为20%左右，处理温度120°C，用喷雾干燥器，喷雾快速脱水，干燥，藻壁快速收缩开裂，得到破壁裂壶藻；在破壁裂壶藻中加入是其质量2倍石油醚搅拌30min，用碟式离心机连续离心，去除固形物，石油醚置蒸馏器50°C，蒸馏回收石油醚，剩余物为裂壶藻油脂； 二、尿素包合法分离饱和脂肪酸和低不饱和脂肪酸，将尿素加入无水甲醇中，加热至50°C，搅拌成尿素乙醇饱和溶液；将裂壶藻油脂1份和甲醇3份相互混合，同时加入固体重量为油脂重量1%的NAOH搅拌加热，温度在50-70°C间，回流20min，得到裂壶藻脂肪酸甲酯及甘油和未反应的藻油甘油甲酯，冷却后，水洗其甘油；将脂肪酸甲酯加入其2倍量尿素甲醇溶液,搅拌加热50°C，反应30min，冷却至0°C，包合数小时，形成尿素包合体,液相部分为高度不饱和脂肪酸；用碟式离心机，固液分离，收集液相部分，固相脲包物回收油脂；液相部分用70°C进行蒸馏，回收甲醇，保留多不饱和脂肪酸甲酯；多不饱和脂肪酸甲酯经冷水洗出残余尿素，静止，分层，弃除水相，油相为含有高比值的DHA ; 三、银离子络合法分离DHA，多不饱和脂肪酸甲酯溶解于丙酮中成丙酮溶液，硝酸银溶于蒸馏水中，浓度为20%，成硝酸银溶液，硝酸银溶液和丙酮溶液等量相混，在O °C状态，搅拌30min，继续静止2小时，成DHA硝酸银络合物水溶液，油水分离；用正己烷从DHA硝酸银络合物水溶液中提取DHA，抽提3次，合并正己烷，蒸馏，加温至69°C，挥发回收正己烷，最后产物为DHA。`
【文档编号】C07C51/42GK103880648SQ201210561609
【公开日】2014年6月25日 申请日期:2012年12月22日 优先权日:2012年12月22日
【发明者】张述智, 夏伟, 朱绍辉, 张 浩, 王晓丽, 徐权汗, 李之详, 许团辉 申请人:青岛中仁药业有限公司