专利名称：一种野菰内酯的制备方法
技术领域：
本发明属于生物技术领域，特别涉及一种野菰内酯的制备方法。
背景技术：
野菰为列当科植物野菰的全株，又叫烟管头草、僧帽花、蛇箭草、烧不死，性味苦、凉，解毒消肿，清热凉血，用于扁桃体炎，咽喉炎，尿路感染，骨髓炎，外用治毒蛇咬伤，疔疮。全株含野菰酸、野菰内酯、β_谷留醇、多烯酸E、芹菜素、β-谷留基葡萄糖式、β-胡萝卜、视黄醇等成分。研究发现野菰内酯有抗肿瘤作用，野菰内酯，CAS号53537-93-2，分子式C11H18O3,分子量 198.26。通过文献检索，未发现野菰内酯制备方法的公开。
发明内容
本发明的目的是解决现有技术的不足和缺陷，提供一种野菰内酯的制备方法。为了实现上述目的，本发明采用以下技术方案:
一种野菰内酯的制备方法，其特征在于:取野菰全草切段，加入5-10倍量50-80%甲醇溶液超声提取2-3次，提取液浓缩后用乙酸乙酯溶液萃取，收集萃取液回收试剂加入大孔树脂吸附，5-10倍柱体积50-70%甲醇溶液洗脱，洗脱液浓缩，浓缩液再用高速逆流色谱仪分离，紫外检测器在线监测，收集流分减压干燥即得。所述的大孔树脂可选:HZ816、HPD-500、ADS-7、AB-8。所述的高速逆流色谱仪分 离条件为:取正己烷、乙酸乙酯、甲醇、水，按1-3:3-5:3-7:2-5混合，取上相做固定相、下相为流动相，主机转速700-1000rpm，流速为
l-3ml/min。采用本法制备野菰内酯，操作简便，制备量大，产品纯度高，而且低污染。下面将结合具体实施方式
进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。
具体实施方式
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实施例1:
野菰全草切段，取5kg，每次用50L70%甲醇溶液超声提取30分钟，提取2次，提取液减压浓缩至500ml，加等体积乙酸乙酯萃取3次，合并萃取液回收乙酸乙酯得萃取物。萃取物加适量热水搅拌加入HZ816大孔树脂柱中吸附，7倍柱体积60%甲醇溶液洗脱，洗脱液减压浓缩得粗提物。取正己烷、乙酸乙酯、甲醇、水，按2:3:5:3混合，充分分层后，取上相注满高速逆流色谱管做固定相，开转主机，转速800rpm，同时泵入下相做流定相，建立动态平衡后，流速调节为2ml/min，用流动相溶解粗提物，由进样阀进样，紫外检测器在线监测，收集目标成分，连续制备，流分回收试剂，得野菰内酯4.lg，经HPLC检测，含量98.1%，经UV、IR、MS、2HNMR, 13CNMR等表征其物理性状的数据与现有技术相一致。实施例2:野菰全草切段，取5kg，每次用30L75%甲醇溶液超声提取30分钟，提取3次，提取液减压浓缩至600ml，加等体积乙酸乙酯萃取3次，合并萃取液回收乙酸乙酯得萃取物。萃取物加适量热水搅拌加入AB-8大孔树脂柱中吸附，6倍柱体积50%甲醇溶液洗脱，洗脱液减压浓缩得粗提物。取正己烷、乙酸乙酯、甲醇、水，按1:3:3:2混合，充分分层后，取上相注满高速逆流色谱管做固定相，开转主机，转速850rpm，同时泵入下相做流定相，建立动态平衡后，流速调节为3ml/min，用流动相溶解粗提物，由进样阀进样，紫外检测器在线监测，收集目标成分，连续制备，流分回收试剂，得野菰内酯4.2g，经HPLC检测，含量97.3%，经UV、IR、MS、2HNMR, 13CNMR等表征其物理性状的数据与现有技术相一致。实施例3:
野菰全草切段，取5kg，每次用50L70%甲醇溶液超声提取30分钟，提取2次，提取液减压浓缩至500ml，加等体积乙酸乙酯萃取3次，合并萃取液回收乙酸乙酯得萃取物。萃取物加适量热水搅拌加入HPD-500大孔树脂柱中吸附，8倍柱体积70%甲醇溶液洗脱，洗脱液减压浓缩得粗提物。取正己烷、乙酸乙酯、甲醇、水，按3:5:7:5混合，充分分层后，取上相注满高速逆流色谱管做固定相，开转主机，转速800rpm，同时泵入下相做流定相，建立动态平衡后，流速调节为2ml/min，用流动相溶解粗提物，由进样阀进样，紫外检测器在线监测，收集目标成分，连续制备，流分回收试剂，得野菰内酯3.7g，经HPLC检测，含量96.7%，经UV、IR、MS、2HNMR、13CNMR等表征其物理性状的数据与现有技术相一致。实施例4:
野菰全草切段，取5kg，每次用50L70%甲醇溶液超声提取30分钟，提取2次，提取液减压浓缩至600ml，加等体积乙酸乙酯萃取3次，合并萃取液回收乙酸乙酯得萃取物。萃取物加适量热水搅拌加入ADS-7大孔树脂柱中吸附，6倍柱体积70%甲醇溶液洗脱，洗脱液减压浓缩得粗提物。取正己烷、乙酸乙酯、甲醇、水，按1:3:5:4混合，充分分层后，取上相注满高速逆流色谱管做固定相，开转主机，转速800rpm，同时泵入下相做流定相，建立动态平衡后，流速调节为2m l/min，用流动相溶解粗提物，由进样阀进样，紫外检测器在线监测，收集目标成分，连续制备，流分回收试剂，得野菰内酯3.8g，经HPLC检测，含量97.3%，经UV、IR、MS、2HNMR, 13CNMR等表征其物理性状的数据与现有技术相一致。
权利要求
1.一种野菰内酯的制备方法，其特征在于取野菰全草切段，加入5-10倍量50-80%甲醇溶液超声提取2-3次，提取液浓缩后用乙酸乙酯溶液萃取，收集萃取液回收试剂加入大孔树脂吸附，5-10倍柱体积50-70%甲醇溶液洗脱，洗脱液浓缩，浓缩液再用高速逆流色谱仪分离，紫外检测器在线监测，收集流分减压干燥即得。
2.根据权利要求I所述的野菰内酯的制备方法，其特征在于所述的大孔树脂可选HZ816、HPD-500、ADS-7、AB-8。
3.根据权利要求I所述的野菰内酯的制备方法，其特征在于所述的高速逆流色谱仪分离条件为取正己烷、乙酸乙酯、甲醇、水，按1-3:3-5:3-7:2-5混合，取上相做固定相、下相为流动相，主机转速700-1000rpm,流速为l_3ml/min。
全文摘要
本发明公开了一种操作简便、污染小的野菰内酯的制备方法。方法是取野菰全草切段，加入5-10倍量50-80%甲醇溶液超声提取2-3次，提取液浓缩后用乙酸乙酯溶液萃取，收集萃取液回收试剂加入大孔树脂吸附，5-10倍柱体积50-70%甲醇溶液洗脱，洗脱液浓缩，浓缩液再用高速逆流色谱仪分离，紫外检测器在线监测，收集流分减压干燥即得。采用本发明制备野菰内酯，产品纯度高，易于产业化放大。
文档编号C07D307/83GK103254163SQ20131018336
公开日2013年8月21日 申请日期2013年5月17日 优先权日2013年5月17日
发明者刘东锋, 万冬梅 申请人:南京泽朗医药科技有限公司