含桉烷型倍半萜的药物组合物及其在制药中的应用的制作方法
【专利摘要】本发明提供以结构式（I）所示的两个桉烷型倍半萜7-桉烷-4(15)-1β,6α-二醇[7-eudesm-4(15)-ene-1β,6α-diol,1]和pumilaside?A(2)为活性成分与可药用载体组成的药物组合物，它们在制备抗乙型病毒性肝炎的药物中的应用，以及化合物1和2及其药物组合物的制备方法。
【专利说明】含桉烷型倍半萜的药物组合物及其在制药中的应用
【技术领域】:
[0001]本发明属于药物【技术领域】，具体地说，涉及含桉烷型倍半萜化合物I或/和2与可药用载体组成的治疗乙型病毒性肝炎的药物组合物，它们的制备方法，以及化合物I和2及其药物组合物在制备抗乙型病毒性肝炎的药物中的应用。
【背景技术】:
[0002]乙型病毒性肝炎简称乙型肝炎，是由乙型肝炎病毒(h印atitis B virus, HBV)弓丨起的，一般通过血液和体液传播、呈慢性携带状态的传染病。其传染性比艾滋病强50~100倍，健康人群被感染后罹患肝硬化和肝细胞癌的风险增加1000倍，并最终导致死亡。据世界卫生组织(WHO)统计，全世界共有20亿HBV携带者，其中慢性乙型肝炎(chronichepatitis B, CHB)患者3.5亿；仅在中国就有约1.2亿人携带HBV，其中CHB患者超过3000万，每年约35万例患者死于CHB相关疾病。现有的抗HBV药物(主要包括疫苗、干扰素和核苷类)的疗效已得到确认，但由于易产生耐药性、作用靶点单一、副作用明显等原因仍无法满足临床需要。迄今为止，乙型肝炎依旧是威胁全世界人类健康的重要问题，抗HBV药物仍然是全球药物研发的热点之一。
[0003]天然产物由于结构复杂多样，从中寻找高效低毒、作用靶点新颖的先导化合物已经成为新型抗HBV药物研发的重要组成部分。据统计，通过体内和体外活性筛选被证实具有潜在抗HBV活性的天然产物类型包括木脂素、萜类、生物碱、黄酮、香豆素、环肽等。茵陈为菊科植物滨蒿 Artemisia scoparia Waldst.et Kit.或茵陈蒿 Artemisia capillarisThunb.的干燥地上部分。春季幼苗高6~IOcm时采收或秋季花蕾长成至花初开时采割，除去杂质和老茎，晒干。春季 采收的习称“绵茵陈”，秋季采割的称“花茵陈”。本品味苦、辛，微寒。归脾、胃、肝、胆经。关于茵陈药理活性的记载最早见于《神农本草经》中，谓其能除“热结黄疸，久服轻身益气耐老”。中医认为其气芳香，有清湿热，退黄疸的功效，临床上主要用来治疗黄疸尿少、湿疮瘙痒、黄疸型传染性肝炎等症状。
[0004]茵陈广泛用于慢性乙型肝炎的治疗。《中国药典》中收录的多种治疗乙肝的中药制剂(乙肝宁颗粒、乙肝养阴活血颗粒、小儿肝炎颗粒、护肝片、利肝隆颗粒、肝炎康复丸、茵芪肝复颗粒、茵桅黄口服液、茵胆平肝胶囊、黄疸肝炎丸、清肝利胆胶囊等)中均以茵陈作为主要药效组分。为揭示茵陈的活性成分，中外研究者其化学成分进行了大量研究，结果表明茵陈中主要含有香豆素，黄酮，色原酮，三萜，留体，烯炔，长链脂肪族化合物，嘧啶，挥发油等。然而，现有文献中对于这些化合物活性的报导主要集中在保肝利胆方面，其抗HBV活性物质仍然不清楚。
[0005]桉烷型倍半萜存在于多种植物中，先前的研究表明该类化合物对HIV以及I型单纯疱疹病毒(HSV-1)病毒具有一定的抑制作用[Hayashi等，Journal ofAntimicrobial Chemotherapyl996, 37, 759-68;Zhihua Sun 等，Journal of NaturalProducts2004, 67，1975-9]。赵昱等从菊科六棱菊属植物中分离得到的一系列对映桉烷型倍半萜醇和苷对HBsAg的分泌和HBV DNA的复制均具有一定的抑制作用[赵昱CN1935762A]。它们的结构与本申请所要求保护的化合物完全不同。
[0006]现有的研究表明，7-桉烷-4 (15)-1 β，6α-二醇(I)具有一定的抗疟原虫、抗炎活性，而pumilaside A(2)对肿瘤的生长具有一定的抑制作用。II1-Min Chung等研究表明化合物I对氯喹敏感的恶性疟原虫(P.falciparum)具有一定的抑制作用，IC5tl为 42.1 ±2.1 μChung 等，Phytotherapy Research2010, 24，451-3)。PisethKhiev等也对其抗炎活性进行了研究，结果表明化合物I在0.5mg/耳的剂量下对豆蘧酰佛波醇乙酯(TPA)引起的小鼠耳水肿具有一定的抑制作用，抑制率为29.9%(A.BereniceAG 等，Journal of Natural Products, 2004，67，914-7)。此外，Xinya Xu 等研究也表明pumilaside A(2)在A549, LAC, Hela以及HepG2细胞系中均显示出一定的抗肿瘤活性，IC5tl在 0.012-6.29 μ M 之间(Xu XY 等，Food Chemistry2010, 123，1123-6)。
[0007]迄今，现有技术中没有关于7-桉烷-4(15)-1 β，6α-二醇(I)和pumilasideA(2)抗乙型肝炎活性的报道，也没有它们及其药物组合物在制备或治疗乙型病毒性肝炎的药物中的应用的报道。
【发明内容】
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[0008]本发明的目的在于提供一类具有治疗乙型病毒性肝炎药用价值的式(I)所示的化合物I和2以及与可药用载体或赋形剂组成的药物组合物在制备抗乙型病毒性肝炎药物中的应用；化合物I和2及其药物组合物的制备方法。
[0009]为了实现本发明的上述目的，本发明提供了如下的技术方案:
[0010]结构式(I)所示的桉烷 型倍半萜化合物I或/和2在制备抗乙型肝炎性病毒药物
中的应用，
[0011]
【权利要求】
1.结构式(I)所示的桉烷型倍半萜化合物I或/和2在制备抗乙型肝炎病毒药物中的应用，
2.用于治疗乙型病毒性肝炎的药物组合物，其中含有治疗有效量的权利要求1中结构式(I)所示的桉烷型倍半萜化合物I或/和2和药学上可接受的载体。
3.权利要求1所述式(I)化合物I和2的制备方法,取茵陈蒿(Artemisiacapillaris)全草，粉碎，用90%乙醇回流提取两次，每次3小时，合并乙醇提取液，过滤，减压浓缩至无醇味，将该提取液悬浮于水溶液中，用乙酸乙酯萃取，乙酸乙酯部分用甲醇-氯仿溶解吸附于硅胶上，室温放置挥干溶剂，研碎后经硅胶柱层析，用甲醇-氯仿(0:100-60:40)洗脱，得到7个组分(A-G)，组分D经过MCI CHP-20P gel柱中压制备，甲醇-水(30:70-100:0)洗脱，得到4个流份D-1~D-4.D-1再通过硅胶柱层析，以乙酸乙酯-石油醚(20:80)洗脱，并经S印hadex LH-20柱(甲醇)纯化得到化合物I ;组分F经过MCI CHP-20P gel柱中压制备，甲醇-水(30:70-100:0)洗脱，得到4个流份F-1~F-4，F-2再通过硅胶柱层析，以甲酸-甲醇-氯仿(0.1:3:97)洗脱，并经Sephadex LH-20柱(甲醇)纯化得到化合物2。
4.制备权利要求2所述的药物组合物的方法,首先取茵陈蒿(Artemisiacapillaris)全草，粉碎，用90%乙醇回流提取两次，每次3小时，合并乙醇提取液，过滤，减压浓缩至无醇味，将该提取液悬浮于水溶液中，用乙酸乙酯萃取，乙酸乙酯部分用甲醇-氯仿溶解吸附于硅胶上，室温放置挥干溶剂，研碎后经硅胶柱层析，用甲醇-氯仿(0:100-60:40)洗脱，得到7个组分(A-G)，组分D经过MCI CHP-20P gel柱中压制备，甲醇-水(30:70-100:0)洗脱，得到4个流份D-1~D-4.D-1再通过硅胶柱层析，以乙酸乙酯-石油醚(20:80)洗脱，并经S印hadex LH-20柱(甲醇)纯化得到化合物I ;组分F经过MCI CHP-20P gel柱中压制备，甲醇-水(30:70-100:0)洗脱，得到4个流份F-1~F-4，F-2再通过硅胶柱层析，以甲酸-甲醇-氯仿(0.1:3:97)洗脱，并经Sephadex LH-20柱(甲醇)纯化得到化合物2 ；然后化合物I或/和2按常规制剂制作方法加入可药用载体或赋形剂。
【文档编号】C07C29/76GK103784427SQ201410074452
【公开日】2014年5月14日 申请日期:2014年3月3日 优先权日:2014年3月3日
【发明者】陈纪军, 赵勇, 马云保, 黄晓燕, 耿长安, 张雪梅 申请人:中国科学院昆明植物研究所