专利名称：制备有机酸的方法
技术领域：
本发明涉及一种从发酵获得的溶液中制备有机酸和/或其盐的方法。
某些有机酸，例如柠檬酸、乳酸和葡糖酸，大多是通过发酵来制备的。发酵中，在有微生物的情况下(例如，制备柠檬酸时为黑曲霉)，从适宜的含糖原料生产有机酸溶液。发酵后进行大量用于纯化这种酸性溶液的步骤，以达到可出售产品所需要的纯度。甚至只有从相对较纯的酸性溶液中才能结晶出有机酸，所述酸性溶液含有低含量的未反应糖类、蛋白质、氨基酸和盐。对于特别高纯度的产品，例如食品工业中的应用所需要的那样，特别是对依据药品质量规范的产品例如按照描述于“Pharmacopeia of the United States”，XXII Edition，p315中的USP标准的产品，甚至晶粒也必须具有很高的纯度。这只能通过大量纯化步骤来实现。例如，通过以钙盐的形式沉淀酸、分离柠檬酸钙以及使产生的柠檬酸钙与硫酸反应来对柠檬酸进行纯化。在这种方法中，消耗大量硫酸，此外还产生污染了的硫酸钙和大量废水。即使在发酵中使用相对较纯的含糖原料时，迄今为止还是需要采用大量纯化步骤。这类含糖原料例如有葡萄糖、右旋糖、蔗糖或纯化的和液化的淀粉。
US-A-4,275,234中描述了一种方法，其中有机酸是用不溶于水的溶剂从水溶液中提取出来的。按照EP-A-0 167 957中公开的方法，把有机酸吸附在离子交换剂上，然后再进行解吸。DE-A3502294也描述了一种方法，其中在膜过滤之后在非离子化吸附树脂上进行吸附。上述所有方法都具有共同点在所需的解吸过程中有机酸的损失大而且为合理限制这种损失需要很大努力。另外，为获得很高纯度和相应颜色的有机酸，必须有进一步的纯化步骤。
在EP-A-0 163 836和EP-A-0 479 048中描述了用于有机酸粒化的方法。在这些方法中，待粒化的溶液仍有残留量的未反应含糖原料，以发酵所产生的酸为基准，其残留量在2～30wt％范围内。粒化过程不能起到进一步纯化酸的作用，而是起到把液态酸转化为有利于运输的固态、粒态的作用。
本发明的目的是提供一种从发酵获得的溶液中制备有机酸和/或其盐的高效、廉价的方法，这种酸能满足对药品质量的相对较高的要求。而且，消除了以钙盐形式沉淀酸这一纯化方法的缺点。特别是不会产生象污染的硫酸钙和废水这样的大量废物。
这一目的是用这样一种方法实现的，该方法中，纯的含糖原料用于基质制备，把用发酵制备的含酸溶液供给细胞分离，把得自细胞分离的含酸滤过物供给蛋白质沉淀，滤过物在此与含硅沉淀剂于2～70℃温度下混合，把由此得到的溶液供给蛋白质分离，对得自蛋白质分离的含酸滤过物进行浓缩然后供给单级或多级结晶或粒化。
“纯的”含糖原料是指例如糖的纯度高于95％。有用的含糖原料例如有葡萄糖、右旋糖、蔗糖或纯化和液化的淀粉。细胞分离首先是用于分离多分子杂质，特别是象菌丝和凝固蛋白质这样的生物量。例如，细胞分离可以用过滤或离心来完成。特别是用含硅沉淀剂可以杂质形式将溶解蛋白质沉淀，采用的2～70℃温度保证了有效沉淀和安全操作。例如，蛋白质分离可通过过滤或离心来完成。沉淀出的杂质和残留的多分子杂质得以分离。对溶液进行浓缩，例如通过单级或多级蒸发而浓缩。可以由这种浓缩的酸性溶液完成最终产品的直接结晶。例如，可以以蒸发结晶或冷结晶的形式进行结晶，可以连续或间歇进行。利用本发明的方法，可以制备有机酸，例如柠檬酸、乳酸和葡糖酸。这样制得的酸具有惊人高的纯度，达到了食品质量的纯度要求。本发明方法的独特优点是，在采用含硅沉淀剂这一沉淀过程中只有杂质被沉淀。而在现有技术的沉淀法中，全部酸性溶液被沉淀，例如以钙盐形式沉淀，而且产生大量的象硫酸钙这样的废物。此外，在采用钙盐形式沉淀的方法中，还产生极其大量的废水，而本发明方法中不会产生。因此，无论从经济学角度还是从生态学角度来看，本发明的方法明显优于现有技术的方法。
根据本发明的另一方面，纯葡萄糖、蔗糖或者高级糖含量低于5％的纯的酶法液化的残液1级淀粉被用作基质制备用的纯含糖原料。就此而言，当葡萄糖和蔗糖只具有低于1～2％的高级糖含量时，是特别有利的。
根据本发明的另一方面，把用于基质制备的纯含糖原料在进行发酵之前供给阳离子交换。用这一步骤，分离出了象铁和镁、特别是镁这样的金属阳离子，否则这些金属阳离子会干扰产酸过程。
根据本发明的另一方面，利用过滤进行细胞分离。通过这种技术上较易实现因而也廉价的方法，可以大大减少溶液中多分子杂质的含量。例如，可以使用带式过滤器、直空鼓过滤器或膜过滤器。膜过滤器可用于温度低于大约50℃的溶液。通过这种分离，多分子杂质被分离至含量低于约1g/l。
根据本发明的另一方面，细胞分离是用采用孔径大小为0.1～5μm的过滤器的膜过滤进行的。这个孔径大小的优点在于过滤器惊人高的渗透效率。
根据本发明的另一个方面，把得自细胞分离的滤过物在进行蛋白质沉淀之前加热0.5～10分钟，达到高于70℃的温度。由于这种热处理，待沉淀的蛋白质至少部分凝固，而菌丝的活性蛋白酶失活。
根据本发明的另一方面，30～300分钟的沉降时间之后，把得自蛋白质沉淀的沉降物送回到细胞分离之前的含酸溶液中，把得自蛋白质沉淀的上清液供给蛋白质分离。由于得自蛋白质沉淀的沉降物的再循环，后续的细胞分离得以改善。
根据本发明的另一方面，利用膜过滤进行蛋白质分离。例如，可以用陶瓷材料制成的膜以交叉流形式进行膜过滤。
根据本发明的另一方面，利用膜过滤进行蛋白质分离，其包括采用孔径大小为0.05～5μm的过滤器的微量过滤和采用颗粒排阻限低于5000道尔顿的超过滤的组合。通过这一步骤，非常有利地把多分子杂质分离至含量低于约2mg/l。
根据本发明的另一方面，利用膜过滤进行蛋白质分离，其包括采用孔径大小为0.05～5μm的过滤器的微量过滤、采用颗粒排阻限低于2000道尔顿的超过滤，和采用颗粒排阻值低于200道尔顿的纳过滤(nanofiltration)的组合。通过这一步骤，非常有利地把多分子杂质分离至含量低于约1mg/l。
根据本发明的另一方面，把得自蛋白质分离的残留物送回到细胞分离之前的含酸溶液中，或者用完全去离子水把残留物洗出来，而把洗脱出的柠檬酸供给离子交换剂、膜电渗析或以钙盐形式沉淀，并且再送回到细胞分离之前的含酸溶液中，或者供给其它应用。通过这一步骤，可以非常有利地以高浓度分离出残留的酸。所得酸浓缩物可以结晶或粒化以作它用。可以把得自蛋白质分离的含很少柠檬酸或不含柠檬酸的残留物与从细胞分离中洗出的菌丝合并。
根据本发明的另一方面，把得自蛋白质分离的滤过物供给离子交换和/或脱色。例如，可以把聚合物或凝胶基体上的阳离子交换剂和弱碱性阴离子交换剂用作离子交换剂。这样，残留物特别是低分子盐类和氨基酸得以很好地分离。结果，杂质的残留含量范围为每升中0.2～2mg游离氨基酸氮。通过用活性炭处理可以很好地进行脱色，例如，其中的处理过程可以在浓缩溶液之前进行。例如，用活性炭进行处理的过程可以在固定床中进行。
根据本发明的另一方面，离子交换剂由强酸性阳离子交换剂和/或弱碱性阴离子交换剂组成，阴离子交换剂首先用5～10％盐酸溶液洗脱柠檬酸，然后再用3～7％氢氧化钠溶液再生，或者用氨溶液再生阴离子交换剂。在阳离子交换剂上，除阳离子之外还滞留了溶液中所含的大部分氨基酸，而阴离子交换剂滞留阴离子和另一部分氨基酸。最好以大约5％的浓度使用用于再生的氢氧化钠溶液。已经证实，2～3％的氨溶液特别适合于阴离子交换剂的再生。
根据本发明的另一方面，结晶分三级进行，其中，把得自第一结晶级的晶粒溶解于完全去离子水中并且供给第二结晶级，得自第二结晶级的母液供给第三结晶级，把得自第三结晶级的晶粒溶解于完全去离子水中并且送回到第二结晶级中，而第三结晶级的母液供作它用。得自第二结晶级的晶粒经干燥或喷雾干燥后以晶体或酸性颗粒形式出售。这种酸的纯度达到药品标准。
根据本发明的另一方面，对得自酸结晶或第三结晶级的母液进行中和并把有机酸盐供给单级或多级盐结晶。例如，可以用氢氧化钠溶液进行中和，由此形成有机酸的钠盐。
根据本发明的另一方面，盐结晶分三级进行，其中，把得自第一盐结晶级的母液供给第二盐结晶级，把第二盐结晶级的晶粒与第一盐结晶级的晶粒合并，把由第一和第二盐结晶级合并而成的晶粒溶解于完全去离子水中并供给第三盐结晶级，把得自第三盐结晶级的母液与得自第二盐结晶级的母液合并并且供进一步应用。得自第三盐结晶级的晶粒经干燥或喷雾干燥后以晶体或酸性颗粒形式出售。这种酸的纯度达到药品标准。
根据本发明的另一方面，把得自第三结晶级的母液或得自盐结晶的母液或得自第二和第三盐结晶级的合并的母液供给离子交换和/或脱色。为进行离子交换，例如可以使用阳离子交换剂和阴离子交换剂或阳离子交换剂和阴离子交换剂组合使用。这样可以很好地分离出低分子盐和氨基酸。通过用活性炭处理，例如在固定床中处理，可以很有利地进行脱色。
根据本发明的另一方面，把得自结晶或第二结晶级和/或盐结晶或第三盐结晶级的晶粒悬浮于液体中，然后进行粒化。例如，可以将酸性晶体悬浮于完全去离子水中，并利用喷雾粒化将其转变成固体产品。通过这一步骤，可以很好地生产较初始晶粒固体性质得以改善的酸性颗粒。
根据本发明的另一方面，把得自结晶或第一结晶级和/或盐结晶或第三盐结晶级的母液供给离子交换剂、膜电渗析或以钙盐形式沉淀，然后送回到得自细胞分离的滤过物中或者供进一步应用。通过这一步骤，可以很好地从杂质中以高浓度分离出残留酸。可以对酸浓缩物进行结晶或粒化以供进一步应用。例如，可利用喷雾粒化将母液很好地转变成固体产品。例如，在加工技术或食品技术中，都可以把上述所得酸性颗粒用作商品。
根据本发明的另一方面，把25～35％的SiO2溶液用作含硅沉淀剂，其中SiO2的比表面大于100m2/g。在这种25～35％SiO2溶液中，SiO2最好以胶态形式溶解。已经发现，例如30％SiO2溶液(其中SiO2比表面至少为100m2/g)是很适宜的沉淀剂，其中SiO2最好应具有至少500m2/g的比表面。
根据本发明的另一方面，采用本发明方法制备柠檬酸。用本发明的方法制备柠檬酸是优选的，正如通过在约1.5～2.0的pH下、用含硅沉淀剂进行蛋白质沉淀那样，相当大量的蛋白质和残留多分子杂质得以沉淀。这样，可以很好地制备相当纯的柠檬酸，而不以钙盐形式进行酸的沉淀。
现将参照实施方案和两张工艺流程图(
图1和图2)详细阐述本发明。
图1参照食品级柠檬酸的制备说明本发明方法的过程。图2参照药品级柠檬酸的制备说明本发明方法的过程。
实施例1从发酵法获得的柠檬酸溶液制备晶粒或颗粒状食品级商品形式的柠檬酸(参见图1)首先制备基质(1)。为此，对高度纯化的、酶法液化的淀粉或葡萄糖浆进行稀释，或者将残液级1的结晶葡萄糖或蔗糖以相应浓度溶解。将所制备的糖或淀粉溶液经过阳离子交换剂(2)，然后供给连续巴氏杀菌。发酵所需的盐在单独的混合器中混合。把得自基质制备(1)的培养基供给发酵(3)。在发酵器中，用真菌黑曲霉的孢子对培养基接种。发酵(3)之后，把溶液供给细胞分离(4)，细胞在此从发酵液中分离出来，例如用真空带式过滤器进行分离。柠檬酸溶液的制备是间歇进行的，每批体积至少为50m3，优选150～200m3，柠檬酸的量为180～200kg一水柠檬酸/m3或者27～40吨一水柠檬酸/批。得自细胞分离(4)的滤过物约含10～25％的溶解态柠檬酸，除了其它溶解的有机和无机成分外，有少量未溶解的残留生物量。加热含酸滤过物2～3分钟，达到约75℃的温度(5)，然后供给蛋白质沉淀(6)。在间歇操作中，通过每立方米加入SiO2比表面至少为500m2/g的1～101 30％SiO2溶液，胶态溶解的蛋白质和其它有机物得以沉淀。蛋白质沉淀(6)过程中的温度大约为50℃，而溶液的pH在1.5～2.0范围内。经1～2小时这一较短的沉降时间后，把沉降物送回到细胞分离(4)之前的发酵液中，而把上清液通过膜过滤供给蛋白质分离(7)中。膜过滤是连续进行的，体积流量根据过滤单元的型式和大小而定。例如，体积流量在5～15m3/h的范围内。膜过滤是通过这种方法进行的该方法包括采用孔径大小为0.05～5μm的过滤器的微量过滤和颗粒排阻限低于5000道尔顿、优选低于2000道尔顿的超过滤的组合。此外，可以进行颗粒排阻限低于200道尔顿的纳过滤。在蛋白质分离(7)过程中，残留物被浓缩并加到细胞分离(4)之前的发酵液中，或者用去离子水把粘附的柠檬酸从蛋白质分离(7)的残留物中洗脱并返回到工艺过程中，与此同时把现已几乎不含柠檬酸的残留物从工艺系统中排出。这些残留物包括没有用真空带式过滤器沉淀出的未溶解物形式的细胞，以及沉淀出的蛋白质和其它颗粒大小至少为5000～2000或200道尔顿的有机成分。透明溶液形式的滤过物含有溶解的柠檬酸以及溶解的有机和无机成分。为进行进一步加工，将得自蛋白质分离(7)的滤过物连续经过离子交换剂(8)。例如，离子交换剂(8)由两级组成，包括强酸性阳离子交换剂和弱碱性阴离子交换剂。在阳离子交换剂上，除了阳离子之外，溶液中所含大部分氨基酸也被滞留。阴离子交换剂则滞留阴离子和另一部分氨基酸。用电导剂或pH计测定物质的穿透。如有必要，把系统转接到另一对离子交换剂上，这样就可以保证干扰性阳离子、阴离子和氨基酸相对安全地分离。用5～10％盐酸溶液把柠檬酸从阴离子交换剂上洗脱下来，然后阴离子交换剂再用约5％氢氧化钠溶液或用氨溶液、最好是2～3％氨溶液来再生。在用氨溶液再生的过程中形成柠檬酸铵，它在加热时分解，又导致柠檬酸的形成。可以把这种柠檬酸送回到工艺过程中。它可以送回到细胞分离(4)之后的溶液中，或者送回到蛋白质分离(7)的超过滤之前的溶液中。可以通过洗涤以纯度达20％的储液形式回收氨。同样可能用再生后的离子交换剂来纯化后续处理过程中形成的母液。在母液中有浓度较高的残留糖和游离氨基酸的情形中，这一点就特别有利。例如，当母液被循环时就能达到较高浓度。所再生的柠檬酸溶液含有一定量的着色剂。在脱色(9)中，从活性炭固定床中的溶液中连续脱除着色剂。把脱过色的溶液供给浓缩(10)，酸性溶液在此通过多级方法连续蒸发至浓度为60～70％，优选约67％。将浓缩过的柠檬酸供给结晶(11)或进行浓缩和粒化。结晶(11)的母液被送回到细胞分离(4)的滤过物中。在这样做之前，可以用离子交换剂、电渗析或以柠檬酸盐形式沉淀酸来对母液进行再生。在这第一级结晶中产生的柠檬酸晶粒已经达到相当于食品级的纯度。干燥(12)后，这些晶粒可以作为最终产品出售。实施例2从发酵法获得的柠檬酸溶液制备晶粒或颗粒状药品级商品形式的柠檬酸(参见图2)把按照实施例1的方法获得的得自第一结晶级(11a)的晶粒溶解于完全去离子水中，并供给第二结晶级(11b)。干燥(13)后可以出售。这些晶粒已经具有按照USP和BP标准的药品质量。得自第二结晶级(11b)的母液在第三结晶级(11c)中回收，把这些晶体溶于完全去离子水中并送回到第二结晶级(11b)。除了柠檬酸之外还含有工艺过程中所剩浓缩形式残留杂质的第三结晶级(11c)母液进一步用于回收柠檬酸钠，对其进行粒化或再生并再次供给蛋白质沉淀(6)。可以通过离子交换剂、电渗析或以柠檬酸钙的形式沉淀酸来进行再生。结晶过程可以连续或间歇进行。实施例3从发酵法获得的柠檬酸溶液的结晶母液制备晶粒或颗粒状药品级商品形式的柠檬酸钠(参见图2)把按实施例2得自第三结晶级的母液供给中和(14)。这样做时，通过加入氢氧化钠溶液对含酸母液进行中和，并且将其供给第一盐结晶级(15a)，在此处由柠檬酸钠形成晶粒。从这一步骤中产生的母液中在第二盐结晶级(15b)中进一步回收晶粒，把这些晶粒与第一盐结晶级(15a)合并。把合并后的晶粒溶于完全去离子水中并供给第三盐结晶级(15c)。将得自第三盐结晶级(15c)的母液与得自第二盐结晶级(15b)的母液合并。得自第三盐结晶级(15c)的晶粒具有按照USP和BP标准的药品质量。把它们供给干燥(16)或喷雾干燥并且用作晶粒或颗粒状商品。柠檬酸钠的回收是连续操作的。得自第二(15b)和第三盐结晶级(15c)的母液含有柠檬酸，另外还有得自工艺过程的残留杂质。从这些母液中回收残余的柠檬酸，送回到再生工艺过程。为进行残余柠檬酸的回收，把母液供给活性炭固定床上的脱色(17)，然后供给阳离子交换(18)，以获得游离柠檬酸。也可以通过进一步的离子交换、膜电渗析或以柠檬酸钙的形式沉淀酸来进行再生。把这种柠檬酸溶液送回到得自细胞分离(4)的滤过物的工艺步骤。脱色(17)和阳离子交换(18)是连续进行的。
通过实施例3中所述过程，柠檬酸总产率达到约95％，其中大约70～90％是在实施例2的第一加工级中获得的，而另外约20～30％是在实施例3的第二加工级中获得的。
权利要求
1.从发酵(3)获得的溶液中制备有机酸和/或其盐的方法，其中，纯的含糖原料用于基质制备(1)，把用发酵(3)制备的含酸溶液供给细胞分离(4)，把得自细胞分离(4)的含酸滤过物供给蛋白质沉淀(6)，滤过物在此与含硅沉淀剂于2～70℃温度下混合，把由此得到的溶液供给蛋白质分离(7)，对得自蛋白质分离(7)的含酸滤过物进行浓缩(10)，然后供给单级或多级结晶(11)或粒化。
2.如权利要求1中所要求的方法，其中，纯葡萄糖、蔗糖或者高级糖含量低于5％的纯的酶法液化的残液1级淀粉被用作基质制备(1)用的纯含糖原料。
3.如权利要求1或2中所要求的方法，其中，把用于基质制备(1)的纯含糖原料在进行发酵(3)之前供给阳离子交换(2)。
4.如权利要求1-3中任一项所要求的方法，其中，利用过滤进行细胞分离(4)。
5.如权利要求4中所要求的方法，其中，细胞分离是用采用孔径大小为0.1～5μm的过滤器的膜过滤进行的。
6.如权利要求1-5中任一项所要求的方法，其中，把得自细胞分离(4)的滤过物在进行蛋白质沉淀(6)之前加热0.5～10分钟，达到高于70℃的温度(5)。
7.如权利要求1-6中任一项所要求的方法，其中，30～300分钟的沉降时间之后，把得自蛋白质沉淀(6)的沉降物送回到细胞分离(4)之前的含酸溶液中，而其中把得自蛋白质沉淀(6)的上清液供给蛋白质分离(7)。
8.如权利要求1-7中任一项所要求的方法，其中，利用膜过滤进行蛋白质分离(7)。
9.如权利要求8中所要求的方法，其中，利用膜过滤进行蛋白质分离(7)，其包括采用孔径大小为0.5～5μm的过滤器的微量过滤和采用颗粒排阻限低于5000道尔顿的超过滤的组合。
10.如权利要求8中所要求的方法，其中，利用膜过滤进行蛋白质分离(7)，其包括采用孔径大小为0.05～5μm的过滤器的微量过滤、采用颗粒排阻限低于2000道尔顿的超过滤，和采用颗粒排阻限低于200道尔顿的纳过滤的组合。
11.如权利要求1-10中任一项所要求的方法，其中，把得自蛋白质分离(7)的残留物送回到细胞分离(4)之前的含酸溶液中，或者用完全去离子水把残留物洗出来，而把洗脱出的柠檬酸供给离子交换剂、膜电渗析或以钙盐形式沉淀，并且再送回到细胞分离(4)之前的含酸溶液中，或者供给其它应用。
12.如权利要求1-11中任一项所要求的方法，其中，把得自蛋白质分离(7)的滤过物供给离子交换(8)和/或脱色(9)。
13.如权利要求12中所要求的方法，其中，离子交换剂(8)由强酸性阳离子交换剂和/或弱碱性阴离子交换剂组成，其中，首先用5～10％盐酸溶液从阴离子交换剂洗脱柠檬酸，然后再用3～7％氢氧化钠溶液再生，或者其中，用氨溶液再生阴离子交换剂。
14.如权利要求1-13中任一项所要求的方法，其中，结晶(11)分三级(11a、11b、11c)进行，其中，把得自第一结晶级(11a)的晶粒溶解于完全去离子水中，并且供给第二结晶级(11b)，得自第二结晶级(11b)的母液供给第三结晶级(11c)，把得自第三结晶级(11c)的晶粒溶解于完全去离子水中并且送回到第二结晶级(11b)中，而得自第三结晶级(11c)的母液供作它用。
15.如权利要求1-14中任一项所要求的方法，其中，对得自酸结晶(11)或第三结晶级(11c)的母液进行中和(14)并把有机酸盐供给单级或多级盐结晶。
16.如权利要求15中所要求的方法，其中，盐结晶分三级(15a、15b、15c)进行，其中，把得自第一盐结晶级(15a)的母液供给第二盐结晶级(15b)，把第二盐结晶级(15b)的晶粒与第一盐结晶级(15a)的晶粒合并，把由第一和第二盐结晶级(15a和15b)合并而成的晶粒溶解于完全去离子水中并供给第三盐结晶级(15c)，把得自第三盐结晶级(15c)的母液与得自第二盐结晶级(15b)的母液合并并且供进一步应用。
17.如权利要求14-16中任一项所要求的方法，其中，把得自第三结晶级(11c)的母液或得自盐结晶的母液或得自第二和第三盐结晶级(15b和15c)的合并的母液供给离子交换(18)和/或脱色(17)。
18.如权利要求1-17中任一项所要求的方法，其中，把得自结晶(11)或第二结晶级(11b)和/或盐结晶或第三盐结晶级(15c)的晶粒悬浮于液体中，然后进行粒化。
19.如权利要求1-18中任一项所要求的方法，其中，把得自结晶(11)或第一结晶级(11a)和/或盐结晶或第三盐结晶级(11c)的母液供给离子交换剂、膜电渗析或以钙盐形式沉淀，然后送回到得自细胞分离(4)的滤过物中或者供进一步应用。
20.如权利要求1-19中任一项所要求的方法，其中，把25～35％的SiO2溶液用作含硅沉淀剂，其中SiO2的比表面大于100m2/g。
21.如权利要求1-20中任一项所要求的方法用于制备柠檬酸的应用。
全文摘要
一种从发酵获得的溶液中制备有机酸和/或其盐的方法。其中，使用一种纯的含糖原料。把用发酵制备的含酸溶液供给细胞分离，把含酸滤过物供给蛋白质沉淀，滤过物在此与含硅沉淀剂于2～70℃温度下混合，把由此得到的溶液供给蛋白质分离，对含酸滤过物进行浓缩然后供给单级或多级结晶或粒化。
文档编号C07C51/47GK1156759SQ9611855
公开日1997年8月13日 申请日期1996年12月5日 优先权日1995年12月5日
发明者B·阿勒斯, R·博恩施, M·艾凯尔斯巴彻尔, J·库恩, U·桑德, J·潘德尔, F·霍泰克, V·瑟尼 申请人:金属股份有限公司