专利名称：2－苯氧基苯胺类衍生物的制作方法
技术领域：
本发明涉及对Na+/Ca2+交换体系具有抑制作用的苯氧基苯胺类衍生物或其可药用盐。
背景技术：
在现有技术中，在细胞内选择性抑制Na+/Ca2+交换体系并防止Ca2+过载的化合物被认为对局部缺血或再灌注后的细胞损伤机制很重要，其中日本特许公开7-41465中描述了具有喹唑啉骨架的已知化合物。但未报导本发明所述的对Na+/Ca2+交换体系具有抑制作用的含有苯氧基苯胺骨架的化合物。
发明公开鉴于大量对具有Na+/Ca2+交换体系抑制作用的化合物的研究结果，本发明人业已发现具有苯氧基苯胺骨架的某些类型的化合物满足所述目的，并且已基于该发现完成了本发明。
因此，本发明涉及式(1)表示的2-苯氧基苯胺衍生物
其中R1是氢原子、氨基或NHCOR3；R2是卤素原子、氨基、氰基、C1-6烷基、C1-3全氟烷基、NHCOR3、CH2OR、OCH2R5或COR6；R3是C1-6烷基；R4是氢原子或C1-6烷基；R5是氢原子、C1-6烷基、C1-5氨基烷基、C2-7烷氧羰基或氨基甲酰基；以及R6是C1-6烷基，或未经取代或被卤素原子、氨基、氰基或C1-6烷基取代的C3-8环烷基；或其可药用盐。
此外，本发明涉及一种含有上述化合物或其可药用盐作为有效组分的药物组合物。
而且，本发明涉及一种用于治疗或预防缺血性心脏病、脑缺血性疾病或缺血性肾病的药物组合物，该药物组合物含有上述化合物或其可药用盐作为有效组分。
另外，本发明涉及上述化合物或其可药用盐在制造用于治疗或预防缺血性心脏病、脑缺血性疾病或缺血性肾病的药物组合物中的应用。
此外，本发明涉及一种治疗或预防缺血性心脏病、脑缺血性疾病或缺血性肾病的方法，其中的步骤包括用药理有效量的上述化合物或其可药用盐对人体给药。
而且，本发明涉及一种在溶血栓疗法、血管成形术、冠状动脉搭桥术或器官移植期间用于保护细胞的药物组合物，该药物组合物含有上述化合物或其可药用盐作为有效组分。
此外，本发明涉及上述化合物或其可药用盐在制造用于保护溶血栓疗法、血管成形术、冠状动脉搭桥术或器官移植中的细胞的药物组合物中的应用。
另外，本发明涉及一种在溶血栓疗法、血管成形术、冠状动脉搭桥术或器官移植中用于保护细胞的方法，该方法的步骤包括用药理有效量的上述化合物或其可药用盐对人体给药。
在本发明中，卤素原子是指氟原子、氯原子、溴原子或碘原子。
C1-6烷基是指直链或支链C1-6烷基，其具体例子是甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、异戊基、新戊基、叔戊基、1-甲基丁基、2-甲基丁基、1，2-二甲基丙基、己基和异己基。
C1-3全氟烷基的具体例子是三氟甲基和五氟乙基。
C1-5氨基烷基是指直链或支链C1-5氨基烷基，并且其具体例子是氨甲基、2-氨基乙基、3-氨基丙基、4-氨基丁基和5-氨基戊基。
C2-7烷氧羰基是指直链或支链C2-7烷氧羰基，并且其具体例子是甲氧羰基、乙氧羰基、丙氧羰基、异丙氧羰基、丁氧羰基、异丁氧羰基、仲丁氧羰基、叔丁氧羰基、戊氧羰基、异戊氧羰基和己氧羰基。
C3-8环烷基的具体例子是环丙基、环丁基、环戊基和环己基。
本发明优选的苯氧基苯胺类衍生物是式(1)中R1为氢原子的化合物。
本发明中，优选R2为OCH2R5(其中R5是氢原子或C1-6烷基)，并且更优选OCH2R5(其中R5为氢原子或C1-2烷基)。
可以按照如下列制备路线来制得本发明所述的苯氧基苯胺衍生物(其中R1和R2如上述定义，当R1为氨基时R7是硝基，或当R1是非氨基的取代基时R7与R1相同；当R2为氨基时R8是硝基，或当R2是非氨基的取代基时R8与R2相同；以及X是氟原子或氯原子)。
也就是，将4-(苄氧基)苯酚和式(2)表示的化合物在碱存在的条件下反应，得到式(3)表示的化合物。在此所用碱的例子是有机碱和无机碱，例如叔丁醇钾、氢氧化钠或氢化钠。作为反应溶剂可采用N，N-二甲基甲酰胺或四氢呋喃，反应温度范围在室温至回流温度之间。
此后，将式(3)化合物还原，得到本发明式(1)所示的化合物。在此可以采用铁-氯化铵，铁-乙酸，碳载钯-氢，氢化锂铝，氯化镍-硼氢化钠等作为还原剂。作为反应溶剂在此可以采用水、甲醇、乙醇、四氢呋喃等，并且它们可以单独使用或以混合物形式使用。反应温度适宜在0℃至回流温度之间。
本发明的苯氧基苯胺衍生物或其可药用盐一般经口服或非肠道对人体给药。
在口服给药的情况中，所述苯氧基苯胺衍生物或其可药用盐是与填充剂、崩解剂、粘合剂、润滑剂、包衣剂等混合，形成随后可用于给药的颗粒剂、粉剂、胶囊或片剂；在非肠道给药情况中，其可以以注射制剂、滴注制剂或栓剂形式给药。
可以通过常规制备方法如搅拌制粒法、流化床制粒法或崩解制粒法来制备上述药物制剂。
所述填充剂的例子是甘露醇、木糖醇、山梨醇、葡萄糖、蔗糖、乳糖和结晶纤维素。
所述崩解剂的例子是低取代羟丙基纤维素、羧甲基纤维素、羧甲基纤维素钙和羧甲基纤维素钠。
所述粘合剂的例子是甲基纤维素、羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、明胶、阿拉伯树胶和乙基纤维素。
所述润滑剂的例子是硬脂酸、硬脂酸镁和硬脂酸钙。
如果需要，可将抗氧剂、包衣剂、着色剂、矫味剂、表面活性剂、增塑剂及其他物质加至所述药物制剂中。
本发明中所述药物制剂的有效组分的剂量可随年龄、体重或给药途径改变，但对成年人来说其通常为0.1-1000mg/天，它可单剂量给药或分次剂量给药。工业实用性本发明的化合物对Na+/Ca2+交换体系具有抑制作用，因此，它们可以防止细胞内Ca2+过载，适于治疗或预防缺血性心脏病(如心肌梗塞)、脑缺血性疾病(如脑梗塞)或缺血性肾病，并且还适合在溶血栓疗法、血管成形术、冠状动脉搭桥术或器官移植过程中保护细胞。
实施本发明的最佳方式通过下列实施例和试验更详细地说明本发明。此外，实施例1-24中的化合物的结构式如表1所示。
表1
实施例12-[4-(苄氧基)苯氧基]-5-甲氧基苯胺盐酸盐(1)向4-(苄氧基)苯酚(2.00g，10mmol)在N，N-二甲基甲酰胺(20ml)的溶液中加入叔丁醇钾(1.12g，10mmol)，随后搅拌10分钟。将4-氯-3-硝基苯甲醚(1.88g，10mmol)加入到该溶液中，进而在150℃下搅拌6小时。放置过夜后，将反应溶液倾入水中并用乙酸乙酯提取。用水和饱和氯化钠水溶液洗涤后干燥，此后减压蒸发溶剂。所得粗结晶在乙醇中重结晶，得到4-[4-(苄氧基)苯氧基]-3-硝基苯甲醚(2.13g)。
熔点88-89.5℃。
(2)向4-[4-(苄氧基)苯氧基]-3-硝基苯甲醚(1.23g，3.5mmol)在乙醇(20ml)的溶液内加入铁粉(0.90g，16.1毫克-原子)和溶于水(2ml)的氯化铵(0.11g，2.1mmol)溶液，随后回流3小时。过滤不溶物，并且将滤液倾入水中，进而用乙酸乙酯提取。依次用水和饱和氯化钠水溶液洗涤有机层，干燥，此后减压下蒸发溶剂。将残余物溶于少量乙酸乙酯中，在加入4N氯化氢/乙酸溶液(2ml)后，将所得溶液搅拌30分钟。过滤收集沉淀的结晶并在减压下干燥，得到本标题化合物(0.65g)。
熔点170-170.5℃按照与实施例1中相同的方式合成下列实施例2-16的化合物，并且这些化合物的物理性质测定值如下所示。实施例22-[4-(苄氧基)苯氧基]-5-甲基苯胺熔点105.5-106.5℃实施例32-[4-(苄氧基)苯氧基]-5-(二氟甲基)苯胺熔点100-101.5℃实施例42-[4-(苄氧基)苯氧基]-3-氯苯胺盐酸盐熔点176-177℃实施例52-[4-(苄氧基)苯氧基]-4-甲基苯胺熔点116.5-117.5℃实施例62-[4-(苄氧基)苯氧基]-5-氯苯胺熔点107-108℃实施例72-[4-(苄氧基)苯氧基]-3-甲基苯胺盐酸盐熔点193.5-194℃实施例82-[4-(苄氧基)苯氧基]-5-(三氟甲基)-1，3-苯二胺二盐酸盐熔点186.5-187℃实施例92-[4-(苄氧基)苯氧基]-5-(环丙基羰基)-苯胺熔点138-140℃实施例104-乙酰氨基-2-[4-(苄氧基)苯氧基]-5-氯苯胺盐酸盐1H-NMR(DMSO-d6，200MHz)δ(ppm)1.99(s，3H)，5.08(s，2H)，7.05(s，4H)，7.11(s，1H)，7.30-7.50(m，6H)，8.18(宽峰，3H)，9.41(s，1H)。实施例115-乙酰基-2-[4-(苄氧基)苯氧基]-苯胺熔点135.5-136.5℃实施例124-[4-(苄氧基)苯氧基]-6-甲基-1，3-苯二胺1H-NMR(CDCl3，200MHz)δ(ppm)2.03(s，3H)，3.50(宽峰，4H)，5.00(s，2H)，6.18(s，1H)，6.60(s，1H)，6.86(s，4H)，7.25-7.48(m，5H)。实施例132-[4-(苄氧基)苯氧基]-5-氟苯胺盐酸盐熔点176.5-177℃实施例142-[4-(苄氧基)苯氧基]-1，3-苯二胺二盐酸盐熔点173-173.5℃实施例152-[4-(苄氧基)苯氧基]-5-氰基苯胺盐酸盐熔点170-171℃实施例162-[4-(苄氧基)苯氧基]-5-氰基-1， 3-苯二胺三盐酸盐熔点160-161.5℃实施例17
2-[4-(苄氧基)苯氧基]-5-乙氧基苯胺盐酸盐(1)向4-氯-3-硝基苯酚(5.00g，29mmol)在丙酮(50ml)的溶液中加入碘乙烷(4.95g，32mmol)和碳酸钾(4.37g，32mmol)，随后在室温下搅拌20小时。过滤不溶物后，将滤液在减压下蒸发除去溶剂，并将残余物经硅胶柱色谱(洗脱剂氯仿)纯化，得到4-乙氧基-1-氯-2-硝基苯(5.71g)。
(2)按照与实施例1相同的方式，由4-(苄氧基)苯酚和4-乙氧基-1-氯-2-硝基苯得到本标题化合物。
熔点164-164.5℃。
按照与实施例1中同样的方式合成下列实施例18-20的化合物，并且这些化合物的物理性质测定值如下所示。实施例182-[4-(苄氧基)苯氧基]-5-丙氧基苯胺熔点103-103.5℃实施例193-氨基-4-[4-(苄氧基)苯氧基]苯氧基-乙酰胺盐酸盐熔点198.5-199.5℃实施例203-氨基-4-[4-(苄氧基)苯氧基]苯氧基乙酸甲酯盐酸盐熔点179-180℃实施例213-氨基-4-[4-(苄氧基)苯氧基]苯甲醇(1)采用与实施例1(1)相同的方式由4-(苄氧基)苯酚和4-氯-3-硝基苯甲醛制得4-[4-(苄氧基)苯氧基]-3-硝基苯甲醛。
熔点111-112.5℃(2)向4-[4-(苄氧基)苯氧基]-3-硝基苯甲醛(2.48g，7.1mmol)在乙醇(100ml)的溶液中加入硼氢化钠(0.27g，7.3mmol)，随后在室温下搅拌2小时。将反应溶液倾入水中并用乙酸乙酯提取。将溶剂干燥并在减压下蒸发。残余物经硅胶柱色谱[洗脱剂氯仿-乙酸乙酯(4∶1)]纯化，得到4-[4-(苄氧基)苯氧基]-3-硝基苯甲醇(2.48g)。
熔点72-73℃(3)按照与实施例1(2)同样的方式由4-[4-(苄氧基)苯氧基]-3-硝基苯甲醇制得本标题化合物。
熔点128-130℃。实施例222-[4-(苄氧基)苯氧基]-5-(甲氧基甲基)苯胺(1)向4-[4-(苄氧基)苯氧基]-3-硝基苯甲醇(9.43g，26.9mmol)在氯仿(60ml)的溶液中加入亚硫酰氯(2ml)，随后在室温下搅拌6小时。静置过夜后，用水洗涤该反应溶液并干燥，减压下蒸发溶剂。残余物经硅胶柱色谱[洗脱剂己烷-氯仿(1∶1)]纯化，得到4-[4-(苄氧基)苯氧基]-3-硝基苄基氯(7.63g)。
熔点106-107℃(2)在冰冷却的条件下，将60％的含油氢化钠(0.22g，5.5mmol)加至冰浴的甲醇(50ml)中，并在室温下搅拌30分钟，将4-[4-(苄氧基)苯氧基]-3-硝基苄基氯(1.00g，2.7mmol)加入其中，随后搅拌3小时。将反应溶液倾入水中并用乙酸乙酯提取。干燥后，减压下蒸发溶剂，残余物经硅胶柱色谱[洗脱剂己烷-氯仿(1∶1)]纯化，得到1-[4-(苄氧基)苯氧基]-4-(甲氧基甲基)-2-硝基苯(0.92g)。
(3)采用与实施例1(2)相同的方式由1-[4-(苄氧基)苯氧基]-4-(甲氧基甲基)-2-硝基苯制得本标题化合物。
熔点79.5-81℃实施例23N-[3-氨基-4-[4-(苄氧基)苯氧基]苯基]-丁酰胺(1)向4-氯-3-硝基苯胺(3.45g，30mmol)在氯仿(100ml)的溶液中加入丁酸酐(5ml)，随后在室温下搅拌2小时。静置过夜后，加入饱和碳酸钠水溶液，进而搅拌30分钟。分离有机层并且干燥，减压下蒸发溶剂。残余物经硅胶柱色谱[洗脱剂己烷-氯仿(1∶1)]纯化，得到N-(4-氯-3-硝基苯基)丁酰胺(4.66g)。
(2)采用与实施例1相同的方式由4-(苄氧基)苯酚和N-(4-氯-3-硝基苯基)-丁酰胺制得本标题化合物。
熔点122.5-123.5℃实施例243-[3-氨基-4-[4-(苄氧基)苯氧基]苯氧基]-丙胺盐酸盐(1)向4-氯-3-硝基苯酚(5.00g，29mmol)在N，N-二甲基甲酰胺(100ml)的溶液中加入N-(3-溴丙基)邻苯二甲酰亚胺(9.27g，35mmol)和碳酸钾(4.93g，36mmol)，随后在60℃下搅拌6小时。静置过夜后，将反应溶液倾入水中，通过过滤收集不溶物并用乙酸乙酯洗涤，然后减压下干燥，得到N-[3-(4-氯-3-硝基苯氧基)-丙基]邻苯二甲酰亚胺(7.78g)。
(2)按照与实施例1(1)相同的方式由4-(苄氧基)苯酚和N-[3-(4-氯-3-硝基苯氧基)-丙基]邻苯二甲酰亚胺制得N-[3-[4-[4-(苄氧基)苯氧基]-3-硝基苯氧基]邻苯二甲酰亚胺。
熔点140-141℃(3)向N-[3-[4-[4-(苄氧基)苯氧基]-3-硝基苯氧基]丙基]邻苯二甲酰亚胺(2.06g，3.9mmol)在甲醇(60ml)的溶液中加入肼的一水合物(2ml)，随后搅拌3小时。在静置过夜后，将反应溶液倾入水中并用氯仿提取。干燥后，减压下蒸发溶剂，将所得残余物溶解在少量乙酸乙酯中。向该溶液中加入4N盐酸/乙酸乙酯溶液(2ml)，进而在室温下搅拌30分钟。经过滤收集沉淀的结晶并干燥，得到3-[4-[4-(苄氧基)苯氧基]-3-硝基苯氧基]丙胺盐酸盐(1.42g)。
熔点179-181℃(4)采用与实施例1(2)相同的方式由3-[4-(苄氧基)苯氧基]-3-硝基苯氧基]丙胺盐酸盐制得本标题化合物。
1H-NMR(DMSO-d6，200MHz)δ(ppm)2.02(四重峰，J＝6Hz，2H)，2.94(六重峰，J＝6Hz，2H)，4.00(t，J＝6Hz，2H)，5.06(s，2H)，6.60(dd，J＝2.9Hz，1H)，6.67(d，J＝9Hz，1H)，6.88(d，J＝2Hz，1H)，6.92-7.08(m，4H)，7.28-7.50(m，5H)，8.09(宽峰，3H)。试验用肌纤维膜(myosarcolemmal)囊测定对Na+/Ca2+交换体系的抑制作用参照文献所公开的方法(L.R.Jones，酶学方法(Method，Enzymol)，1988，157，第85页)由狗的心室肌制备肌纤维膜囊。
按照文献描述的方法(K.D.Philipson等，生物化学杂志(J.Biol.Chem)，1980，第6880页)用肌纤维膜囊测定Na+/Ca2+交换活性。首先，将肌纤维膜囊(sarcolemmal vesicles)悬浮在含钠溶液[160mM氯化钠，20mM Tris-盐酸(pH 7.4)]中以制得1.5mg/ml的蛋白质浓度，并且令其静置1小时以使Na+进入肌膜囊中。向2.5μl该肌膜囊中加入125μl[45Ca]-氯化钙溶液〔20μM[45Ca]-氯化钙，160mM氯化钾和20mM Mops(3-(N-吗啉代)丙磺酸)-Tris(三(羟甲基)氨基甲烷)(pH 7.4)〕，10秒钟后，加入900μl冰冷的氯化镧溶液[10mM氯化镧，160mM氯化钾和20mM Mops-Tris(pH 7.4)]。经抽滤在硝酸纤维素滤器上回收肌纤维膜囊，用900μl氯化镧溶液洗涤3次。通过用闪烁器测定45Ca的放射活性来确定肌纤维膜囊摄入的Ca2+的浓度。此外，利用相同的方法并用含钾溶液〔160mM氯化钾，20mM Tris-盐酸(pH 7.4)〕替代含钠溶液测出Na+/Ca2+交换活性-独立的哦Ca2+摄取作用。
试验采用被测化合物的二甲亚砜溶液，并且将其抑制作用和赋形剂处理组进行比较。通过最小方差法(minimum square)由被测化合物的剂量抑制曲线测出IC50值。结果如表2所示。
权利要求
1.一种如式(1)所示的2-苯氧基苯胺衍生物或其可药用盐
其中R1是氢原子、氨基或NHCOR3；R2是卤素原子、氨基、氰基、C1-6烷基、C1-3全氟烷基、NHCOR3、CH2OR4、OCH2R5或COR6；R3是C1-6烷基；R4是氢原子或C1-6烷基；R5是氢原子、C1-6烷基、C1-5氨基烷基、C2-7烷氧羰基或氨基甲酰基；以及R6是C1-6烷基，或未经取代或被卤素原子、氨基、氰基或C1-6烷基取代的C3-8环烷基。
2.权利要求1所述的2-苯氧基苯胺衍生物或其可药用盐，其中式(1)中的R1是氢原子。
3.权利要求1所述的2-苯氧基苯胺衍生物或其可药用盐，其中式(1)中的R1为氢原子并且R2为OCH2R5，其中R5为氢原子或C1-6烷基。
4.一种含有权利要求1-3任一项所述的2-苯氧基苯胺衍生物或其可药用盐作为有效组分的药物组合物。
5.权利要求1-3任一项所述的2-苯氧基苯胺衍生物或其可药用盐用作药物活性组分。
6.一种含有权利要求1-3任一项所述的2-苯氧基苯胺衍生物或其可药用盐作为有效组分的Na+/Ca2+交换体系抑制剂。
7.一种用于治疗或预防缺血性心脏病、脑缺血性疾病和缺血性肾病的药物组合物，其中含有权利要求1-3任一项所述的2-苯氧基苯胺衍生物或其可药用盐作为有效组分。
8.权利要求1-3任一项所述的2-苯氧基苯胺衍生物或其可药用盐在制备用于治疗或预防缺血性心脏病、脑缺血性疾病和缺血性肾病的药物组合物中的应用。
9.一种治疗或预防缺血性心脏病、脑缺血性疾病和缺血性肾病的方法，其中包括用药理有效量的权利要求1-3任一项所述的2-苯氧基苯胺衍生物或其可药用盐对人体给药的步骤。
10.一种用于在溶血栓疗法、血管成形术、冠状动脉搭桥术或器官移植期间保护细胞的药物组合物，其中含有权利要求1-3任一项所述的2-苯氧基苯胺衍生物或其可药用盐作为有效组分。
11.权利要求1-3任一项所述的2-苯氧基苯胺衍生物或其可药用盐在制备用于在溶血栓疗法、血管成形术、冠状动脉搭桥术或器官移植期间保护细胞的药物组合物中的应用
12.一种用于在溶血栓疗法、血管成形术、冠状动脉搭桥术或器官移植期间保护细胞的方法，其中包括用药理有效量的权利要求1-3任一项所述的2-苯氧基苯胺衍生物或其可药用盐对人体给药的步骤。
全文摘要
本发明涉及式(1)所示的2－苯氧基苯胺类衍生物或其可药用盐,其中R
文档编号C07C225/00GK1251571SQ98803768
公开日2000年4月26日 申请日期1998年3月26日 优先权日1997年3月27日
发明者太田知己, 中西美砂, 田口稔, 冨沢一雪 申请人:大正制药株式会社