本发明涉及1-羰基丹参酮IIA衍生物及其制备，及其在制备心血管疾病、脑血管疾病、肝肾疾病、呼吸系统疾病、肿瘤等1-羰基丹参酮IIA磺酸相关靶点药物中的用途。
背景技术：
丹参的脂溶性成分中含有丹参酮IIA，隐丹参酮，丹参酮I等十五种成分。研究表明，丹参酮类化合物具有抗菌消炎，抗氧化，抗肿瘤，抗纤维化及治疗心血管疾病的潜力。近年来，丹参酮IIA在心血管疾病的治疗，肝、肾疾病的治疗，呼吸系统疾病的治疗，肿瘤的治疗，脑血管疾病的治疗，具有良好的治疗效果。
目前，已有丹参酮类商品有：丹参酮IIA磺酸钠注射液，丹参注射液，丹参片，丹参胶囊，丹参酮胶囊，丹参颗粒，丹参膏，丹参冲剂，注射用丹参多酚酸盐等。丹参酮IIA和丹参酮IIA磺酸钠注射液主要存在溶液稳定性较差；低温时容易析出结晶等缺陷。
技术实现要素：
本发明的技术目的在于提供一种新的1-羰基丹参酮IIA衍生物，将来用于提供本发明所述1-羰基丹参酮IIA衍生物在制备治疗与1-羰基丹参酮IIA相关疾病的药物中的应用。
为了实现本发明的技术目的，本发明的技术方案如下。
结构如式（I）所示的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或药学上可接受的盐：
R选自：；
R1选自氢、烷基、杂环烷基，且烷基及杂环烷基均可被取代基取代，取代基为烷基、烷基氨基烷基；
R2选自氢、烷基、杂环烷基，且烷基及杂环烷基均可被取代基取代，取代基为烷基、烷基氨基烷基。
一种药用组合物，其包含治疗有效量的式（Ⅰ）化合物、其立体异构体、互变异构体或药学上可接受的盐，以及药学上可接受的载体、辅助剂或溶媒。并且式（Ⅰ）化合物、其立体异构体、互变异构体、前药或药学上可接受的盐，其用作药物。
进一步说明（Ⅰ）化合物、其立体异构体、互变异构体、前药或药学上可接受的盐，其用作治疗心血管疾病药物，脑血管疾病药物，治疗肝、肾疾病药物，治疗呼吸系统疾病药物，治疗肿瘤药物的应用。
详细说明
除非有相反陈述，下列用在说明书和权利要求中的术语具有下述含义。
“烷基”可以是取代的或未取代的，当被取代时，优选的基团为：卤素、C2-C6烯基、C6-C10芳基、C5-C10杂芳基、卤代C1-C6烷基、4至8元杂脂环基、羟基、C1-C6烷氧基、C6-C10芳氧基。
“药学上可接受的盐”表示保留母体化合物的生物有效性和性质的那些盐。这类盐包括：
（1）与酸成盐，通过母体化合物的游离碱与无机酸或有机酸的反应而得，无机酸包括盐酸、氢溴酸、硝酸、磷酸、偏磷酸、硫酸、亚硫酸和高氯酸等，有机酸包括乙酸、丙酸、丙烯酸、草酸、（D）或（L）苹果酸、富马酸、马来酸、羟基苯甲酸、γ-羟基丁酸、甲氧基苯甲酸、邻苯二甲酸、甲磺酸、乙磺酸、萘-1-磺酸、萘-2-磺酸、对甲苯磺酸、水杨酸、酒石酸、柠檬酸、乳酸、扁桃酸、琥珀酸或丙二酸等。
（2）存在于母体化合物中的酸性质子被金属离子代替或者与有机碱配位化合所生成的盐，金属例子例如碱金属离子、碱土金属离子或铝离子，有机碱例如乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、氨丁三醇、N-甲基葡糖胺等。
“药物组合物”指将本发明中的化合物中的一个或多个或其药学上可接受的盐、溶剂化物、水合物或前药与别的化学成分，例如药学上可接受的载体，混合。药物组合物的目的是促进给药给动物的过程。
“药用载体”指的是对有机体不引起明显的刺激性和不干扰所给予化合物的生物活性和性质的药物组合物中的非活性成分，例如但不限于：碳酸钙、磷酸钙、各种糖（例如乳糖、甘露醇等）、淀粉、环糊精、硬脂酸镁、纤维素、碳酸镁、丙烯酸聚合物或甲基丙烯酸聚合物、凝胶、水、聚乙二醇、丙二醇、乙二醇、蓖麻油或氢化蓖麻油或多乙氧基氢化蓖麻油、芝麻油、玉米油、花生油等。
前述的药物组合物中，除了包括药学上可接受的载体外，还可以包括在药（剂）学上常用的辅剂，例如：抗细菌剂、抗真菌剂、抗微生物剂、保质剂、调色剂、增溶剂、增稠剂、表面活性剂、络合剂、蛋白质、氨基酸、脂肪、糖类、维生素、矿物质、微量元素、甜味剂、色素、香精或它们的结合等。
具体实施方式
实施例1：化合物D1的制备
合成路线：
500ml三口瓶中加入25g化合物01，375mlPOCl3,插入温度计后，控制温度在50℃左右反应，搅拌过夜，隔日送样，原料几乎反应完全，处理，旋去POCl3，冷却后加入适量的MTBE搅拌1~2h后，均匀后，过滤，固体用MTBE冲洗几次，抽干，固体测HPLC，显示纯度约为95%，烘干，得到化合物02，备用。
100ml三口瓶中加入0.2g N-甲基哌嗪，0.5ml吡啶和50ml DCM，搅拌溶解后，氮气保护，冰浴下，加入0.5g化合物02，加完后搅拌反应过夜，隔日送样，显示原料已经反应完全，处理，过滤除去固体，水洗1到2次，为防止变坏，有机层加入HCl/EtOH后，硫酸钠干燥，过滤，旋干，送分析HPLC制备，制备后所得滤液加入盐酸调PH至酸性,冻干机冻干后，最后得棕黄色固体50mg化合物D1，收率约8%。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6, TMS): δ1.30 (s, 6H), 1.65 (m, 2H), 1.73-1.75 (m, 2H), 2.54 (s, 3H), 2.78 (s, 3H), 3.13 (m, 8H), 3.91 (m, 2H), 7.68 (d, 1H, J=10.4 Hz), 7.90 (d, 1H, J=8.4 Hz)
实施例2：化合物D2的制备
合成路线：
100ml三口瓶中加入0.38g 4-Boc氨基哌啶，0.5ml 吡啶和50ml DCM，搅拌溶解后，氮气保护，冰浴下，加入0.5g 化合物02，加完后搅拌反应过夜， LCMS显示原料已经反应完全，处理，过滤除去固体，水洗1到2次，硫酸钠干燥，过滤，旋干，旋干后粗品加入HCl/EtOH,后，继续搅拌反应，送样检测LCMS，已经反应完全，停止反应，直接旋干后，通过HPLC制备，制备后所得滤液加入盐酸调PH至酸性,冻干机冻干后，最后得棕黄色固体27mg化合物D2，收率约4%。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6, TMS): δ1.10-1.40 (m, 12H), 1.61 (m, 2H), 1.75 (m, 2H), 2.54 (m, 3H), 2.85 (m, 1H), 3.41 (m, 6H), 7.65 (m, 1H), 7.90 (m, 1H).
实施例3：化合物D3的制备
合成路线：
100ml三口瓶中加入0.2g 1-甲基-4-甲氨基哌啶，0.4ml 吡啶和40ml DCM，搅拌溶解后，氮气保护，冰浴下，加入0.4g 化合物02，加完后搅拌反应过夜，隔日送样，LCMS显示原料已经反应完全，处理，过滤除去固体，水洗1到2次，硫酸钠干燥，过滤，旋干，柱层析得粗品，将其加入HCl/EtOH后，调成酸性，旋干后， LCMS显示纯度：76%，将此粗品通过HPLC制备，制备后所得滤液加几滴盐酸调PH至酸性,冻干机冻干后，最后得棕黄色固体40mg化合物D3，收率约8%。
1H NMR (400 MHz, CDCl3, TMS): δ1.33 (s, 6H), 1.67-1.85 (m, 8H), 2.39-2,42 (m, 2H), 2.58 (s, 3H), 2.80-2.86 (s, 3H), 2.93 (s, 3H), 3.19-3.22 (m, 2H), 3.63-3.66 (m, 2H), 4.13 (m, 6H), 7.53 (m, 1H), 7.71 (m, 1H).
实施例4:化合物D4的制备
合成路线：
100ml三口瓶中加入1.2g1-Boc氨基哌嗪，2ml 吡啶和50ml DCM，搅拌溶解后，氮气保护，冰浴下，加入2g 化合物02，加完后搅拌反应过夜，隔日送样，LCMS显示原料已经反应完全，处理，过滤除去固体，水洗1到2次，硫酸钠干燥，过滤，旋干，旋干后粗品加入HCl/EtOH,后，继续搅拌反应，送样检测LCMS反应完全，停止反应，直接旋干后，送分析HPLC制备，制备后所得滤液加入盐酸调PH至酸性,冻干机冻干后，最后得棕黄色固体800mg化合物D4，收率约33%。
1H NMR (400 MHz, CDCl3, TMS): δ1.30 (s, 6H), 1.64-1.67 (m, 2H), 1.77-1.78 (m, 2H), 2.54 (s, 3H), 2.96-2.97 (m, 4H), 3.16-3.18 (m, 2H), 3.26-3.28 (m, 4H), 7.60-7.69 (m, 2H)。
实施例5: 化合物D5的制备
合成路线：
100ml三口瓶中加入0.22g 1-甲基-4-氨基哌啶，0.5ml 吡啶和40ml DCM，搅拌溶解后，氮气保护，冰浴下，加入0.5g化合物02，加完后搅拌反应过夜，隔日送样， LCMS显示原料已经反应完全，处理，过滤除去固体，水洗1到2次，有机相加入HCl/EtOH后，硫酸钠干燥，过滤，旋干，旋干后，将此粗品送分析HPLC制备，制备后所得滤液加几滴盐酸调PH至酸性,冻干机冻干后，最后得棕黄色固体65mg化合物D5，收率约11%。
1H NMR (400 MHz, CDCl3, TMS): δ1.35 (s, 6H), 1.70-1.71 (m, 2H), 1.83-1.84 (m, 2H), 2.16-2.29 (m, 4H), 2.54 (s, 3H), 2.85-2.89 (m, 4H), 3.10-3.29 (m, 2H), 3.35 (s, 1H), 3.50-3.80 (m, 3H), 7.60-7.74 (m, 2H)
实施例6: 化合物D6的制备
合成方法参考化合物D1的合成方法。
1H NMR (400 MHz, CDCl3, TMS): δ1.32 (s, 6H), 1.67-1.68 (m, 2H), 1.79-1.81 (m, 2H), 2.30 (s, 6H), 2.57-2.59 (m, 5H), 3.18-3.23 (m, 4H), 7.66-7.71 (m, 2H)
实施例7: 化合物D7的制备
合成路线：
100ml三口瓶中加入1.17g 1-Boc-4-氨基哌啶，2ml 吡啶和50ml DCM，搅拌溶解后，氮气保护，冰浴下，加入2g 化合物02，加完后搅拌反应过夜，隔日送样，LCMS显示原料未反应完全，继续搅拌过夜，LCMS显示几乎反应完全，处理，过滤，水洗1到2次，硫酸钠干燥，过滤，旋干，旋干后粗品加入HCl/EtOH,后，继续搅拌反应，送样检测反应完全，停止反应，直接旋干后，送分析HPLC制备，制备后所得滤液加入盐酸调PH至酸性,冻干机冻干后，最后得棕黄色固体16mg.同比例又投了一锅，最后制备后得纯品9mg D7，收率约1%。
1H NMR (400 MHz, MeOD, TMS): δ1.34 (s, 6H), 1.65-1.69 (m, 4H), 1.75-1.80 (m, 2H), 2.07-2.09 (m, 2H), 2.54 (s, 3H), 2.85-2.87 (m, 2H), 3.13-3.20 (m, 3H), 3.96-3.99 (m, 2H), 7.71 (d, J=8.0Hz, 1H), 7.86 (d, J=8.0 Hz, 1H)
实施例8: 化合物D8的制备
合成方法参考化合物D1的合成。
1H NMR (400 MHz, CDCl3, TMS): δ1.29 (s, 6H), 1.64-1.65 (m, 2H), 1.78 (m, 2H), 2.07-2.09 (m, 2H), 2.53 (s, 3H), 2.78 (s, 6H), 3.15-3.18 (m, 4H), 3.31-3.34 (m, 2H), 7.66-7.71 (m, 2H)
实施例9: 化合物D9的制备
合成方法参考化合物D1的合成。
1H NMR (400 MHz, CDCl3, TMS): δ1.18 (s, 6H), 1.30 (s, 6H), 1.64-1.66 (m, 2H), 1.76 (m, 2H), 2.54 (s, 3H), 2.75-2.85 (m, 6H), 3.16 (m, 2H), 3.34 (m, 2H), 7.89 (s, 2H)
实施例10:
通过半最大效应浓度对比以上化合物活性。
1 细胞株复苏、传代
细胞复苏后进行体外传代三次，细胞的复苏、换液、传代严格按照相关SOP执行。确保进行接种时细胞生长状况处于最佳时期。
2 对异丙肾上腺素心肌细胞损伤的作用
将分离的心肌细胞接种于96 孔培养板中（细胞浓度1×104个/mL），每孔100μL，培养48 h后更换培养基，加入异丙肾上腺素（终浓度10μmol/L），同时设平行孔3 个。设立对照组，给药组加入异丙肾上腺素（终浓度10μmol/L）与不同浓度的供试品（1 μM、2.5 μM、5μM、10 μM、20μM），阳性对照组加入相应浓度的艾司洛尔，于37℃、5% CO2条件下继续培养48 h，用CCK-8法测定吸收度(A )值。计算药物抗心肌细胞损伤效果，公式为：[1-（OD正常-OD给药）/（OD正常-OD模型）]×100%。用SPSS软件分析半数抗损伤恢复浓度EC50。
3 实验结果
表1
从表1中可以看出，心肌细胞H9C2经异丙肾上腺素处理建立损伤模型后，样品D1、D2、D3和D7处理模型细胞并未表现出抗损伤作用。而D4、D5、D6、D8、D9均表现出抗损伤作用效果。