1.用于通过培养细胞来表达糖蛋白的培养基,所述培养基包含浓度为0.5-10mM的尿苷和浓度为1-15mM的N-乙酰基-D-甘露糖胺。
2.权利要求1的培养基,其中尿苷的浓度为1-8mM和N-乙酰基-D-甘露糖胺的浓度为4-12mM。
3.权利要求1的培养基,其中尿苷的浓度为2-5mM和N-乙酰基-D-甘露糖胺的浓度为5-10mM。
4.权利要求1的培养基,其中尿苷的浓度为约3mM和N-乙酰基-D-甘露糖胺的浓度为约8mM。
5.权利要求1-4中任一项的培养基,进一步包含L-丙氨酰基-L-谷氨酰胺。
6.权利要求5的培养基,其中L-丙氨酰基-L-谷氨酰胺的浓度为0.5-5mM。
7.权利要求5的培养基,其中L-丙氨酰基-L-谷氨酰胺的浓度为1-3mM。
8.权利要求5的培养基,其中L-丙氨酰基-L-谷氨酰胺的浓度为约2mM。
9.权利要求1-8中任一项的培养基,其中所述培养基不包含血清。
10.权利要求1-9中任一项的培养基,其中所述细胞选自哺乳动物细胞、植物细胞和昆虫细胞。
11.权利要求10的培养基,其中所述细胞是哺乳动物细胞。
12.权利要求11的培养基,其中所述哺乳动物细胞是CHO细胞。
13.糖蛋白的生产方法,所述方法包括在权利要求1-10中任一项的培养基中培养用编码糖蛋白的外源DNA转化的细胞。
14.权利要求13的生产方法,其中将所述编码糖蛋白的外源DNA掺入至表达载体中以使糖蛋白在转化的细胞中表达。
15.权利要求13或14的生产方法,其中所述编码糖蛋白的外源DNA是人来源的DNA。
16.糖蛋白的生产方法,所述方法包括在权利要求11或12的培养基中培养用编码糖蛋白的外源DNA转化的哺乳动物细胞。
17.权利要求16的生产方法,其中将所述编码糖蛋白的外源DNA掺入至表达载体中以使糖蛋白在转化的哺乳动物细胞中表达。
18.权利要求16或17的生产方法,其中所述编码糖蛋白的外源DNA是人来源的DNA。
19.权利要求16-18中任一项的生产方法,其中将所述哺乳动物细胞在36-37℃的温度下温育,和然后在30-35℃的温度下温育。
20.权利要求16-18中任一项的生产方法,其中将所述哺乳动物细胞在36-37℃的温度下温育,和然后在31-33℃的温度下温育。
21.权利要求16-18中任一项的生产方法,其中将所述哺乳动物细胞在36-37℃的温度下温育,和然后在约32℃的温度下温育。
22.权利要求13-21中任一项的生产方法,其中所述糖蛋白选自:溶酶体酶,例如α-半乳糖苷酶A、酸性鞘磷脂酶、溶酶体酸性脂酶、N-乙酰半乳糖胺-4-硫酸酯酶、己糖胺酶、α-N-乙酰基半乳糖胺酶、α-甘露糖苷酶、艾杜糖醛酸-2-硫酸酯酶、葡糖脑苷脂酶、加硫酶、α-L-艾杜糖苷酸酶、唾液酸酶和酸性α-糖苷酶;组织纤溶酶原激活物(t-PA);凝血因子,例如凝血因子VII、凝血因子VIII、凝血因子IX;淋巴因子,例如白介素-6;生长因子,例如粒细胞集落刺激因子(G-CSF)、粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF);促红细胞生成素;干扰素;血栓调节素;促卵泡激素;DNA酶I;促甲状腺激素(TSH);小鼠抗体;人源化小鼠抗体;人/小鼠嵌合抗体;人抗体;PD-1;PD-1配体;和促卵泡激素。
23.权利要求13-21中任一项的生产方法,其中所述糖蛋白是促红细胞生成素。
24.权利要求13-23中任一项的生产方法,其中所述糖蛋白是在其聚糖中包含唾液酸的糖蛋白。
25.权利要求13-24中任一项的生产方法,进一步包括下述步骤:在培养后收集培养物,随后从收集的培养物中除去哺乳动物细胞以制备包含糖蛋白的培养物上清液。