1.一种观察植物液泡的方法,包括如下步骤:取植物组织,分离获得液泡,然后将所述液泡置于经多聚赖氨酸处理的装置上进行观察。
2.如权利要求1所述的方法,其特征在于:所述“分离获得液泡”的方法,依次包括如下步骤:
(1)取植物组织,用酶解液进行处理,获得原生质体;所述酶解液中含有0.3-0.5M甘露醇、15-25mM MES、8-12mM KCl、10-30U/mL纤维素酶、10-100U/mL离析酶、8-12mMCaCl2、0.0005-0.0015g/mLBSA和0.5-0.9μL/mLβ-巯基乙醇;
(2)裂解所述原生质体,获得液泡。
3.如权利要求2所述的方法,其特征在于:所述步骤(1)中,所述处理的参数为a1)或a2):
a1)避光、25-29℃、3-4h;
a2)避光、25-29℃振荡3-4h。
4.如权利要求2所述的方法,其特征在于:所述步骤(1)中还包括如下步骤a:完成所述处理后,收集原生质体。
5.如权利要求4所述的方法,其特征在于:所述收集原生质体的方法为:过滤,收集滤液,然后将所述滤液进行离心并收集沉淀甲;所述沉淀甲中含有原生质体。
6.如权利要求4或5所述的方法,其特征在于:所述步骤(1)中还包括如下步骤b:完成步骤a后,取沉淀甲,使用洗涤液洗涤,然后离心并收集沉淀乙;所述沉淀乙中含有原生质体;所述洗涤液中含有0.3-0.5M甘露醇和15-25mM MES。
7.如权利要求2所述的方法,其特征在于:所述步骤(2)中还包括如下步骤c:完成所述裂解后,离心并收集上清液;所述上清液中含有液泡。
8.如权利要求4至7任一所述的方法,其特征在于:
所述步骤a中,收集原生质体的方法中的离心为4-6℃离心15-20min,离心参数为60-100g、brake1-4;
所述步骤b中,洗涤的方法中的离心为4-6℃离心15-20min,离心参数为60-100g、brake1-4;
所述步骤c中,裂解后的离心为4-6℃离心1-10min,离心参数为60-150g、brake1-4。
9.一种分离液泡的方法,依次包括如下步骤:
(1)取植物组织,用酶解液进行处理,获得原生质体;所述酶解液中含有0.3-0.5M甘露醇、15-25mM MES、8-12mM KCl、10-30U/mL纤维素酶、10-100U/mL离析酶、8-12mMCaCl2、0.0005-0.0015g/mLBSA和0.5-0.9μL/mLβ-巯基乙醇;
(2)裂解所述原生质体,获得液泡。
10.权利要求1至8任一所述的方法或权利要求9所述的分离液泡的方法在观察液泡膜上蛋白质的运动、观察液泡膜上蛋白质的分布、观察液泡膜上蛋白质的胞吞途径或判断待测蛋白是否在液泡膜上表达中的应用。