本发明属于烟草产品加工领域，尤其涉及一种烟叶中绿原酸的提取方法。
背景技术：
绿原酸(Chlorogenic acid)是一种十分重要的药用活性物质，不仅具有抗菌和抵抗病毒的功能，还具有防止白血球的增加、保护肝脏和胆囊、抗肿瘤、降血压、清除自由基和兴奋中枢神经系统等功能，对消化系统、血液系统和生殖系统疾病均有显著疗效，对金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌、痢疾杆菌、伤寒杆菌有显著的抑制作用，高纯度的绿原酸价格昂贵，是目前国际公认的“植物黄金”。
烟草(Nicotiana tabacum L.)为茄科烟属一年生草本植物，是一种重要的经济作物，其在植物学、生命科学、物理化学以及生物技术方面都有广泛的研究。但每年有大量废弃烟叶不能用于卷烟生产，既浪费资源，又对环境造成污染。绿原酸在烟叶中的含量高达3％，目前国内主要从金银花、杜仲、葵花籽中提取绿原酸，其价高量少的原料和产品的巨大需求反差迫使人们寻求更加广泛的原料，因此，利用废次烟叶生产绿原酸不仅拓宽绿原酸的原料来源，还可以提高烟草种植户的附加值，对科学利用烟草具有重要现实意义。此外，我国作为烟草生产大国，每年有30％的低次烟叶、烟末等下脚料被废弃，这不仅对植物资源是一种浪费，也严重污染了环境。如何发挥这些废弃物的潜在价值和作用，更好地利用烟草资源，提高其经济价值，已成为近年来的热点话题，尤其受到医药、化工、食品等行业的极大关注。
现有技术中，提取绿原酸的方法主要有：微波提取法、超声波提取法、酶提取法以及加热回流法等。其中，微波提取法、超声波提取法和酶提取法虽然提取效率高，但其成本过高，只适用于实验室等小规模的提取，在工业化生产过程中具有局限性。因此，现有技术中，烟叶中绿原酸的提取方法具有成本高，不适合于工业化提取的技术缺陷。
因此，研发出一种烟叶中绿原酸的提取方法，用于解决现有技术中，烟叶中绿原酸的提取方法具有成本高，不适合于工业化提取的技术缺陷，成为了本领域技术人员亟待解决的问题。
技术实现要素：
有鉴于此，本发明提供了一种烟叶中绿原酸的提取方法，用于解决现有技术中，烟叶中绿原酸的提取方法具有成本高，不适合于工业化提取的技术缺陷。本发明提供的提取方法，简单、便捷，成本低廉，适合于大规模的工业化推广。
本发明提供了一种烟叶中绿原酸的提取方法，所述提取方法为：
步骤一、提取：烟叶与提取剂混合后，回流加热，得浸提液；
步骤二、浓缩：所述浸提液浓缩后，得浓缩液；
步骤三：提纯：所述浓缩液提纯，得绿原酸。
优选地，所述提取方法还包括：预处理，所述预处理在所述提取前进行；
所述预处理的方法为：烟叶烘干后，依次经粉碎和过筛，得预处理产品。
优选地，所述烘干的温度为50～60℃，所述烘干的时间为48～72h，所述预处理产品的粒径为40目。
优选地，所述提取剂为质量分数为95％的乙醇水溶液，所述提取剂的pH为4～6。
优选地，所述提取方法还包括：抽滤：
所述抽滤在所述步骤一和步骤二之间进行。
优选地，所述回流加热的温度为60～80℃，所述回流加热的时间为75～105min。
优选地，所述浓缩的方法为减压浓缩，所述减压浓缩的温度为40～45℃。
优选地，所述提纯的方法为：所述浓缩液静置后，离心收集上清液，所述上清液依次经冷冻干燥和重结晶，得绿原酸。
优选地，所述静置的温度为4℃，所述静置的时间为12～24h；
所述离心的转速为12000r/min，所述离心的时间为20～30min；
所述重结晶的溶剂为甲醇。
优选地，所述冷冻干燥的方法为：所述上清液于-40℃～-60℃冷冻0.5～1h后，在-0.05～-0.09MPa和40～60℃条件下干燥。
综上所述，本发明提供了一种烟叶中绿原酸的提取方法，所述提取方法为：步骤一、提取：烟叶与提取剂混合后，回流加热，得浸提液；步骤二、浓缩：所述浸提液浓缩后，得浓缩液；步骤三：提纯：所述浓缩液提纯，得绿原酸。经实验测定可得，本发明提供的技术方案，提取得到的绿原酸纯度可达到87.4％，绿原酸的收率可得1.762％。本发明提供的技术方案中，原料为废次烟叶，原料成本低，满足了当今绿色社会废物利用的宗旨；同时，本发明提供的技术方案，简单便捷，适合工业化大规模推广。解决了现有技术中，烟叶中绿原酸的提取方法具有成本高，不适合于工业化提取的技术缺陷。本发明提供的提取方法，简单、便捷，成本低廉，适合于大规模的工业化推广。
具体实施方式
本发明提供了一种烟叶中绿原酸的提取方法，用于解决现有技术中，烟叶中绿原酸的提取方法具有成本高，不适合于工业化提取的技术缺陷。本发明提供的提取方法，简单、便捷，成本低廉，适合于大规模的工业化推广。
下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
为了更详细说明本发明，下面结合实施例对本发明提供的一种烟叶中绿原酸的提取方法，进行具体地描述。
实施例1
废次烟叶于50℃烘箱烘干48h后，置于粉碎机中粉碎，过40目筛，得烟叶粉末1。
10g烟叶粉末1和100mL提取剂1混合，60℃条件下回流加热75min，得浸提液1。其中，提取剂1为质量浓度为95％的乙醇水溶液，提取剂1的pH为4。
提取剂1抽滤后，所得抽滤液40℃条件下减压浓缩，得浓缩液1。
浓缩液1在4℃条件下静置12h后，以12000r/min的转速离心20min，收集上清液，将离心后的沉淀蒸馏水洗涤后以12000r/min的转速离心20min，收集上清液；合并两次所得上清液，得上清液1。
上清液1在-60℃条件下冷冻0.5h后，在-0.09MPa、40℃条件下于真空干燥机中干燥；所得干燥产品用甲醇重结晶，得绿原酸产品1 0.244g。
本实施例中，绿原酸产品1的产率为86.17％，绿原酸产品1的纯度为1.726％。
实施例2
废次烟叶于55℃烘箱烘干60h后，置于粉碎机中粉碎，过40目筛，得烟叶粉末2。
10g烟叶粉末2和120mL提取剂2混合，70℃条件下回流加热90min，得浸提液2。其中，提取剂2为质量浓度为95％的乙醇水溶液，提取剂2的pH为5。
提取剂2抽滤后，所得抽滤液40℃条件下减压浓缩，得浓缩液2。
浓缩液2在4℃条件下静置18h后，以12000r/min的转速离心25min，收集上清液，将离心后的沉淀蒸馏水洗涤后以12000r/min的转速离心25min，收集上清液；合并两次所得上清液，得上清液2。
上清液2在-50℃条件下冷冻0.5h后，在-0.07MPa、50℃条件下于真空干燥机中干燥；所得干燥产品用甲醇重结晶，得绿原酸产品2 0.267g。
本实施例中，绿原酸产品2的产率为91.21％，绿原酸产品2的纯度为1.856％。
实施例3
废次烟叶于60℃烘箱烘干72h后，置于粉碎机中粉碎，过40目筛，得烟叶粉末3。
10g烟叶粉末3和140mL提取剂3混合，80℃条件下回流加热105min，得浸提液3。其中，提取剂3为质量浓度为95％的乙醇水溶液，提取剂3的pH为6。
提取剂3抽滤后，所得抽滤液45℃条件下减压浓缩，得浓缩液3。
浓缩液3在4℃条件下静置24h后，以12000r/min的转速离心30min，收集上清液，将离心后的沉淀蒸馏水洗涤后以12000r/min的转速离心30min，收集上清液；合并两次所得上清液，得上清液3。
上清液3在-40℃条件下冷冻1h后，在-0.05MPa、60℃条件下于真空干燥机中干燥；所得干燥产品用甲醇重结晶，得绿原酸产品3 0.238g。
本实施例中，绿原酸产品3的产率为84.82％，绿原酸产品3的纯度为1.703％。
综上所述，本发明提供了一种烟叶中绿原酸的提取方法，所述提取方法为：步骤一、提取：烟叶与提取剂混合后，回流加热，得浸提液；步骤二、浓缩：所述浸提液浓缩后，得浓缩液；步骤三：提纯：所述浓缩液提纯，得绿原酸。经实验测定可得，本发明提供的技术方案，提取得到的绿原酸纯度可达到87.4％，绿原酸的收率可得1.762％。本发明提供的技术方案中，原料为废次烟叶，原料成本低，满足了当今绿色社会废物利用的宗旨；同时，本发明提供的技术方案，简单便捷，适合工业化大规模推广。解决了现有技术中，烟叶中绿原酸的提取方法具有成本高，不适合于工业化提取的技术缺陷。本发明提供的提取方法，简单、便捷，成本低廉，适合于大规模的工业化推广。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。