焦谷氨酸沃替西汀的制作方法

本发明涉及焦谷氨酸沃替西汀及其在药物组合物中的用途。背景包括wo03/029232和wo2007/144005在内的国际专利申请披露了化合物1-[2-(2,4-二甲基-苯基硫烷基)-苯基]-哌嗪及其药学上可接受的盐。who曾经公布沃替西汀是1-[2-(2,4-二甲基-苯基硫烷基)-苯基]-哌嗪的推荐的国际非专有名称(inn)。沃替西汀从前在文献中被称为luaa21004。在2013年9月和12月，fda和ema分别批准沃替西汀在商品名brintellixtm下用于治疗重性抑郁障碍/重性抑郁发作。令人特别感兴趣的是，沃替西汀在患有复发性重性抑郁障碍的老年人中也已经显示出效果[int.clin.psychopharm.(《国际临床精神药理学》)，27，215-227，2012]。沃替西汀是5-ht3、5-ht7和5-ht1d受体的拮抗剂，是5-ht1a受体的激动剂和5-ht1b受体的部分激动剂并且是血清素转运体抑制剂。另外，已经证明沃替西汀在脑的特定区域中增强神经递质血清素、去甲肾上腺素、多巴胺、乙酰胆碱以及组胺的水平。所有这些活性被认为是临床相关的并且可能涉及该化合物的作用机制[j.med.chem.(《药物化学杂志》)，54，3206-3221，2011；eur.neuropshycopharmacol.(《欧洲神经精神药理学》)，18(增刊4)，s321，2008；《欧洲神经精神药理学》，21(增刊4)，s407-408，2011；int.j.psychiatryclinpract.(《精神病学与临床实践国际杂志》)5，47，2012]。药理学特性使人们有理由相信沃替西汀可能具有促认知效果。这种观点似乎得到以下临床证据的支持，即已经显示沃替西汀独立于其抗抑郁效果对认知具有直接的有益作用[int.clin.psychopharm.(《国际临床精神药理学》)，27，215-227，2012；intjneurophychopharm(《国际神经精神药理学杂志》)17，1557-1567，2014；neuropsychopharmacol(《神经精神药理学》)，40，2025-2037，2015]。沃替西汀作为薄膜包衣速释(ir)片剂以及作为口服滴剂溶液在市场上是可获得的，所述片剂含有作为hbr盐的5、10、15和20mg沃替西汀，所述滴剂溶液包含作为dl乳酸盐的20mg/ml沃替西汀。非常确定的是，吞咽片剂和胶囊剂对于相当数量的患者而言可能会有问题，并且这可能最终导致缺乏顺应性以及随之发生的增加的治疗应答不足或复发风险。研究表明，三分之一的女性和六分之一的男性报告吞咽片剂有问题。值得注意的是，片剂吞咽困难似乎在老年人群和儿童之中更广泛[pharmworldsci(《世界药学与科学》)，23，185-188，2001]。已应用不同技术来克服吞咽片剂和胶囊剂的问题。例如，可以使用口服给药的替代方案，如肠胃外、经皮、经鼻、经颊、舌下或直肠给药。可替代地，可以应用易于吞咽的口服给予形式，例如口服溶液、口服分散片、撒在食物上的粉剂或颗粒剂或口服凝胶。用于口服给药的凝胶组合物是片剂和胶囊剂的有吸引力的替代物，因为它们将口服给药的容易性和简单性与有很少或没有吞咽阻力组合。由于药物产品在液体或半固体(例如凝胶形式)组合物中的固有稳定性下降，通常将凝胶组合物提供为干粉剂，这些干粉剂在使用之前立即与液体(典型地是水或唾液)混合以形成凝胶。us6,709,678披露了包含与可水合聚合物(例如海藻酸盐或羧甲基纤维素)组合的活性成分的药物组合物，其在与唾液接触后在口中形成凝胶。wo01/76610披露了包含维生素d和淀粉衍生物的组合物，其在与水混合后形成布丁样胶化悬浮液。wo2005/107713披露了包含活性成分连同结冷胶的组合物，其在添加水后膨胀或胶化成具有类似软布丁的质地。这样的给予形式已经在商品名parvulettm下开发用于商业用途。parvulettm作为预装有活性成分和成胶聚合物并被包在箔中的匙剂出现。使用者将匙剂打开并且添加水以形成凝胶。通过使用成胶聚合物来达到胶化或膨胀是这些技术的共同特征。在任何药物组合物中应用另外的赋形剂总是有问题的，因为这增加了活性成分与赋形剂之间的或赋形剂之间的缺乏兼容性的风险。本发明的一个目标在于提供在无需成胶聚合物的情况下可以作为口服凝胶给予的沃替西汀盐。wo2011/023194和wo2011/136376披露了包含沃替西汀的肠溶包衣(ec)制剂。本发明的一个目标在于提供具有优越药代动力学特性的肠溶包衣制剂。发明概述诸位发明人已经出人意料地发现，处于其不同形式的沃替西汀的特定酸加成盐(即焦谷氨酸沃替西汀)在水溶液中在盐的存在下形成凝胶。因此，在一个实施例中，本发明涉及焦谷氨酸沃替西汀。在一个实施例中，本发明涉及用于在治疗中使用的焦谷氨酸沃替西汀。在一个实施例中，本发明涉及包含焦谷氨酸沃替西汀的药物组合物。在一个实施例中，本发明涉及包含焦谷氨酸沃替西汀、盐和水的凝胶组合物。在一个实施例中，本发明涉及用于制备凝胶的方法，所述方法包括混合焦谷氨酸沃替西汀、盐和水溶液的步骤。在一个实施例中，本发明涉及焦谷氨酸沃替西汀在制造用于治疗cns疾病的药物中的用途。在一个实施例中，本发明涉及用于在治疗cns疾病的方法中使用的焦谷氨酸沃替西汀。在一个实施例中，本发明涉及用于治疗cns疾病的方法，该方法包括向有需要的患者给予治疗有效量的焦谷氨酸沃替西汀。在一个实施例中，本发明涉及用于治疗cns疾病的方法，该方法包括向有需要的患者给予治疗有效量的本发明的凝胶组合物。附图图1：沃替西汀(l)-焦谷氨酸盐的x射线粉末衍射(xrpd)谱。图2：沃替西汀(l)-焦谷氨酸盐的热重分析(tga)热谱图。图3：沃替西汀(l)-焦谷氨酸盐的差示扫描量热法(dcs)。图4：沃替西汀(l)-焦谷氨酸盐的动态蒸汽吸附(dvs)谱。(——)：相对于干燥状态的质量变化(％)。(---)目标相对湿度(％)。图5：沃替西汀(dl)-焦谷氨酸盐mh的x射线粉末衍射谱。图6：沃替西汀(dl)-焦谷氨酸盐mh的差示扫描量热法。图7：沃替西汀(dl)-焦谷氨酸盐mh的热重分析热谱图。图8：沃替西汀(dl)-焦谷氨酸盐mh的动态蒸汽吸附谱。(——)：相对于干燥状态的质量变化(％)。(---)目标相对湿度(％)。图9：沃替西汀(dl)-焦谷氨酸盐α-形式的x射线粉末衍射谱。图10：沃替西汀(dl)-焦谷氨酸盐α-形式的差示扫描量热法。图11：沃替西汀(dl)-焦谷氨酸盐α-形式的热重分析热谱图。图12：沃替西汀(dl)-焦谷氨酸盐α-形式的动态蒸汽吸附谱。(——)：相对于干燥状态的质量变化(％)。(---)：目标相对湿度(％)。图13：沃替西汀在人类中的血浆浓度-时间曲线。x-轴是给药后时间(以小时计)。y-轴是血浆浓度(以ng/ml计)。·ir(20mg)；△ph5.5(20mg)；■ph6.0(20mg)；7.0(20mg)图14：沃替西汀在狗中的血浆浓度曲线。x-轴是给药后时间(以小时计)。y-轴是血浆浓度(以ng/ml计)。·20mg溶液；◇20mgechbr；irhbr；▲20mgec焦谷氨酸盐。发明详述本发明涉及沃替西汀的焦谷氨酸盐。沃替西汀是可商购的或者可以如披露于例如wo03/029232、wo2007/144005或wo2014/128207中地合成。下面描绘了沃替西汀的分子结构。本发明的焦谷氨酸盐可以在沃替西汀游离碱与焦谷氨酸之间的反应以及随后的沉淀中获得，如实例中所示的。当谷氨酸的氨基基团与侧链羧酸环化形成内酰胺时形成焦谷氨酸(其又称5-羟脯氨酸和氧脯氨酸)，如下图所示的如由*所指示的，焦谷氨酸盐包含不对称碳原子并且因此焦谷氨酸盐以三种形式存在，即dl(外消旋形式)以及d和l(两种对映异构)形式。沃替西汀焦谷氨酸盐的物理特性原则上可以取决于反离子是处于外消旋形式还是任一对映异构形式的焦谷氨酸盐。然而，如实例所示的，dl-焦谷氨酸和l-焦谷氨酸沃替西汀盐两者均可以形成本发明的凝胶组合物。由于沃替西汀自身不包含不对称碳原子并且因此不会以其对映异构形式存在，沃替西汀l-焦谷氨酸盐和沃替西汀d-焦谷氨酸盐具有相同的物理特性，包括诸位发明人所观察的胶化特性。因此，本发明提供了如在此所述的焦谷氨酸沃替西汀及其用途，其中焦谷氨酸盐是dl-焦谷氨酸盐、d-焦谷氨酸盐或l-焦谷氨酸盐或其任何混合物。dl-焦谷氨酸和l-焦谷氨酸两者与沃替西汀均形成1:1盐。如通过示于实例中的xrpd反射所证明的，这些盐是结晶的并且水合形式和无水形式两者均存在。然而，因为焦谷氨酸沃替西汀先于凝胶形成而溶解或作为凝胶形成的一部分，焦谷氨酸沃替西汀的成凝胶特性不可能依赖于焦谷氨酸沃替西汀的特定结晶形式。在一个实施例中，本发明涉及在10.72、12.14、16.22和18.59(°2θ)；例如10.72、12.14、16.05、16.22、17.53、17.70、18.45和18.59(°2θ)，例如7.02、10.72、12.14、14.45、14.61、15.56、16.05、16.22、17.53、17.70、18.45和18.59(°2θ)处具有xrpd反射的沃替西汀d-焦谷氨酸盐或l-焦谷氨酸盐。所有值都是±0.1°2θ。在一个实施例中，本发明涉及具有如图1所示的xrpd反射的沃替西汀d-焦谷氨酸盐或l-焦谷氨酸盐。在一个实施例中，本发明涉及在6.16、9.25、17.68和18.12(°2θ)处，例如在6.16、9.25、14.61、15.02、15.88、16.33、17.68和18.12(°2θ)处，例如在6.16、9.25、9.38、12.10、14.03、14.61、15.02、15.88、16.33、16.91、17.68和18.12(°2θ)处具有xrpd反射的沃替西汀(dl)-焦谷氨酸盐mh(即一水合物)。所有值都是±0.1°2θ。在一个实施例中，本发明涉及具有如图5所示的xrpd反射的沃替西汀(dl)-焦谷氨酸盐mh。在一个实施例中，本发明涉及在14.27、15.75、17.06和18.59(°2θ)处，例如在7.42、10.78、13.58、14.27、14.60、15.75、17.06和18.59(°2θ)处，例如在7.42、10.78、13.58、13.99、14.27、14.60、15.75、15.90、16.89、17.06、17.87和18.59(°2θ)处具有xrpd反射的沃替西汀(dl)-焦谷氨酸盐α-形式。所有值都是±0.1°2θ。在一个实施例中，本发明涉及具有如图9所示的xrpd反射的沃替西汀(dl)-焦谷氨酸盐α-形式。如实例所示的，焦谷氨酸沃替西汀的水溶解度显著高于任何已知沃替西汀盐的水溶解度。沃替西汀dl-焦谷氨酸盐mh和沃替西汀dl-焦谷氨酸盐α-形式的溶解度是至少278mg/ml，并且沃替西汀d-焦谷氨酸盐或沃替西汀l-焦谷氨酸盐的溶解度是225mg/ml。这些溶解度值是在大约20℃下在水中确定的。如下表所描绘的，将其与已知沃替西汀盐的溶解度数据进行比较显而易见的是焦谷氨酸沃替西汀具有空前的溶解度，其可溶性是第二种最具可溶性的盐(甲磺酸盐)的约5倍并且是市售盐(hbr和dl-乳酸盐)的可溶性的约200倍和约25倍。如果将沃替西汀以较高的浓度在例如液体制剂(如输注浓缩物和口服滴剂)中给予或销售，这种高溶解度是有益的。在一个实施例中，本发明涉及用于在治疗中使用的焦谷氨酸沃替西汀。在一个实施例中，本发明涉及包含焦谷氨酸沃替西汀的药物组合物。可以通过本领域的常规方法制备本发明的药物制剂。可以通过混合活性成分与普通载体和/或稀释剂并且随后在常规压片机中压紧混合物来制备片剂。载体或稀释剂的实例包括：无水磷酸氢钙、pvp、pvp-va共聚物、微晶纤维素、淀粉乙醇酸钠、玉米淀粉、甘露醇、马铃薯淀粉、滑石、硬脂酸镁、明胶、乳糖、树胶以及类似物。可以使用通常用于此类目的的任何其他载体或添加剂，例如着色剂、调味剂、防腐剂等，其条件是它们与活性成分兼容。可以通过将活性成分和可能的添加剂溶解在注射用溶剂(优选无菌水)的一部分中，将溶液调节至希望的体积，将溶液灭菌并且将它填入适合的安瓿或小瓶中来制备注射用溶液。可以添加本领域常规使用的任何适合的添加剂，例如张度剂、防腐剂、抗氧化剂等。可以通过任何适合的途径给予本发明的药物组合物，例如口服给予的形式片剂、胶囊剂、粉剂、糖浆剂等，或肠胃外给予的形式注射用溶液。用于制备此类组合物，可以使用本领域熟知的方法，并且可以使用药学上可接受的载体、稀释剂、赋形剂或本领域通常使用的其他添加剂。便利地，以单位剂型给予焦谷氨酸沃替西汀，所述单位剂型含有量为约1至50mg的所述化合物(作为游离碱)。每日总剂量通常处于约1-20mg，例如约1至10mg、约5-10mg、约10-20mg或约10-15mg的本发明化合物的范围内。特别提及的每日剂量是5、10、15或20mg。沃替西汀焦谷氨酸盐的极端溶解度使得这些盐有用于制备针对例如输注浓缩物和口服滴剂的液体制剂。口服滴剂是旨在用于容易地口服给药的高度浓缩的液体制剂。当给予口服滴剂时，患者或陪护者量出预定体积的口服滴剂，将该体积与一杯可饮用液体(水、饮料等)混合，并且患者饮用该液体。这种给药形式对于例如吞咽片剂或胶囊剂有困难的老年患者而言可以是有益的。通过希望收集的滴数(即体积)和希望给予的沃替西汀的量确定口服滴剂制剂中的沃替西汀浓度。人们普遍认为，量出5-20滴左右是一方面的安全性/疗效与另一方面的便利性之间的最佳折衷。如果焦谷氨酸沃替西汀的浓度太高，即如果仅仅量出少数几滴，则可能危害治疗的安全性或疗效。就少数几滴而言，比希望的多或少一滴或两滴将显著增加提供的剂量的不确定性。另一方面，如果沃替西汀的浓度太低，则有待量出的滴数较高，这对于患者或陪护者而言是不方便的。除焦谷氨酸沃替西汀之外，本发明的口服滴剂制剂还可以包括药学上可接受的溶剂、表面张力调节剂、粘度调节剂、防腐剂、抗氧化剂、着色剂、掩味剂、调味剂等。溶剂的实例包括水以及与水或增溶剂可混溶并且适于口服目的的其他溶剂。适合的溶剂的实例是乙醇、丙二醇、丙三醇、聚乙二醇、泊洛沙姆、山梨醇以及苯甲醇。可以通过添加药学上可接受的共溶剂、环糊精或其衍生物的溶液来进一步增强活性成分的水溶解度。可以包括表面张力调节剂，以针对浓缩口服制剂调节滴数。表面张力调节剂的实例是乙醇，其降低表面张力并且增加滴数。可以包括粘度调节剂，以针对浓缩口服制剂调节滴速。有待从配备有液滴集料器的容器中以不连续滴量出的制剂的滴速优选应该不超过每秒2滴。粘度调节剂的实例包括乙醇、羟乙基纤维素、羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙二醇以及甘油。可以添加可能会重复使用的防腐剂，以防止微生物(例如细菌、酵母和真菌)在液体制剂中的生长。适合的防腐剂在希望的ph范围内应该是物理化学稳定的且有效的。防腐剂的实例包括乙醇、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酯以及苯甲醇。药品在溶解形式时典型地比在固体形式时对化学降解更敏感；因此在液体制剂中包括抗氧化剂可能是必要的。抗氧化剂的实例包括没食子酸丙酯、抗坏血酸棕榈酸酯、抗坏血酸、亚硫酸钠、柠檬酸以及edta。在一些制剂中可以使用着色剂，以便为产品引入均匀的外观。一些活性成分还可能对光非常敏感并且可以证明向滴剂制剂中添加着色剂是必要的，以防止它们受光影响并且用于稳定化的目的。适合的着色剂包括例如酒石黄和日落黄。甜味剂可以掩蔽与一些制剂相关的使人不愉快的味道或用于实现希望的味道。甜味剂的实例是葡萄糖、山梨醇、甘油、乙酰磺胺酸钾以及新橙皮苷二氢查尔酮。可以通过添加一种或多种食用香料来进一步优化味道。适合的食用香料是水果香精(例如樱桃、覆盆子、红醋栗、柠檬或草莓香精)或其他香精(例如甘草、八角、薄荷、焦糖等)。本发明的口服滴剂制剂可以包括7.2％焦谷氨酸沃替西汀(约5％游离碱)0.08％对羟基苯甲酸甲酯0.2％对羟基苯甲酸丙酯水适量补足至100％。在一个实施例中，本发明涉及包含焦谷氨酸沃替西汀和盐的可胶化药物组合物。在本发明上下文中，“可胶化”指示当添加水溶液(例如水)后组合物形成凝胶。这种干燥组合物易于储存和运输并且因此作为可销售产品是有用的。在一个实施例中，所述药物组合物包括焦谷氨酸沃替西汀和盐，其中焦谷氨酸沃替西汀:盐的摩尔比在1:0.1至1:100，例如1:0.5至1:50，例如1:1至1:20之间。本发明的可胶化药物组合物不需要成胶聚合物来形成凝胶。在一个实施例中，本发明的可胶化药物组合物不包括成胶聚合物。在本发明上下文中，“不包括”旨在指示此类聚合物不以导致制剂胶化的量存在。在本发明上下文中，“成胶聚合物”是在与水相(例如水或具有ca++-离子的水)混合后胶化或膨胀形成凝胶的聚合物。成胶聚合物的实例包括淀粉、结冷胶、羧甲基纤维素、果胶、海藻酸盐以及明胶。成胶聚合物的更多实例可以例如在remington:thescienceandpracticeofpharmacy(《雷明顿：药学科学与实践》)，第21版，lippincott,williams&wilkins(利平科特·威廉斯·威尔金斯出版公司)，2005中找到。在一个实施例中，本发明涉及包含单位剂量的焦谷氨酸沃替西汀和盐的可胶化组合物，其中所述单位剂量包括1mg-50mg沃替西汀(作为游离碱)，例如1、5、10、15或20mg沃替西汀(作为游离碱)。不受具体理论的束缚，据推测诸位发明人所观察到的凝胶形成是焦谷氨酸沃替西汀的极端溶解度和其他盐的显著更低的溶解度的结果。沃替西汀最初作为焦谷氨酸盐被纳入溶液中。最终，沃替西汀将与阴离子一起从盐中沉淀出来；然而，首先形成亚稳的凝胶，其对于使得凝胶有用于口服给药而言是足够稳定的。因此，在本发明上下文中，“盐”旨在指示在药学上可接受的酸与药学上可接受的碱之间的反应中形成的盐。药学上可接受的酸包括盐酸、氢溴酸、磷酸、亚硝酸、硫酸、苯甲酸、柠檬酸、葡糖酸、乳酸、马来酸、琥珀酸、酒石酸、乙酸、丙酸、草酸、马来酸、谷氨酸、焦谷氨酸、水杨酸、水杨酸以及磺酸(例如乙磺酸、甲苯磺酸和苯磺酸)。药学上可接受的碱包括碱金属碱(例如氢氧化钠、氢氧化锂、氢氧化钾)、碱土金属碱(例如氢氧化钙和氢氧化镁)以及有机碱(例如氨、三甲胺、三乙胺)。有用于形成药学上可接受的盐的酸和碱的另外实例可以例如在stahl(斯特尔)和wermuth(韦穆特)(编辑)“handbookofpharmaceuticalsalts.properties,selection,anduse(《药用盐手册：特性，选择和使用》)”，wiley-vch(威利-vch出版社)，2008中找到。具体而言，“盐”旨在指示具有选自氯离子、溴离子、富马酸根、苹果酸根、内消旋-酒石酸根、l-酒石酸根、d-酒石酸根、硫酸根、磷酸根和硝酸根的阴离子的盐。具体而言，“盐”旨在指示具有选自钠、钾、锂、钙、镁、铵、三甲基铵和三乙基铵的阳离子的盐。具体而言，“盐”旨在指示kbr、nacl或nabr。为免生疑，“盐”不包括焦谷氨酸沃替西汀。除焦谷氨酸沃替西汀和盐之外，本发明的可胶化药物组合物还可以包括药物科学中已知的其他成分。其他成分可以包括味道改良剂，例如甜味剂和调味剂。甜味剂的实例包括阿斯巴甜、乙酰磺胺酸钾、甜蜜素、甘草酸、乳糖、甘露醇、糖精、蔗糖以及三氯蔗糖。调味剂的实例包括乙基香兰素、薄荷、甘草、茴香以及柠檬皮。在一个实施例中，本发明涉及包含焦谷氨酸沃替西汀、盐和水的凝胶。本发明的凝胶的形成不需要成胶聚合物。在一个实施例中，本发明的凝胶不包括成胶聚合物。本发明的凝胶对于口服给药而言是特别有用的，因为它与其他口服给予形式(特别是片剂和胶囊剂)相比易于吞咽。本发明的凝胶可以包括药物科学中已知的其他成分(特别是味道改良剂)，如上所讨论的。在本发明上下文中并且与凝胶的usp定义一致，凝胶旨在指示由被液体穿插的小有机颗粒或大有机分子组成的半固体系统。凝胶因此作为相干相、粘滞相、塑性相或非崩解相存在。实际上，如果如实例1所述的将焦谷氨酸沃替西汀、盐和水溶液混合在4ml小瓶中并且在振荡以允许形成粘滞相后将小瓶颠倒5分钟，在此期间内所述粘滞相基本上维持其物理形状并且在所述粘滞相不崩解或离开小瓶的情况下，则形成凝胶。在一个实施例中，所述凝胶包括1.5mg-20mg焦谷氨酸沃替西汀/ml，例如2mg-15mg/ml，例如3mg-10mg/ml。在一个实施例中，所述凝胶包括0.1m-1m盐，例如0.1m-0.5m盐，例如0.1m-0.3m盐。在一个实施例中，所述凝胶包括0.5-20mg焦谷氨酸沃替西汀/ml和0.1m-1m盐，例如0.1m-0.5m盐，例如0.1m-0.3m盐。焦谷氨酸沃替西汀的量作为游离碱指示。诸位发明人的经验是当凝胶在治疗相关体积中包括治疗相关剂量时，水相和最终凝胶的体积大致相似。通过混合焦谷氨酸沃替西汀、盐和水溶液(典型地是水)形成本发明的凝胶。凝胶形成对混合顺序不敏感，并且可以在与其他成分混合之前，将焦谷氨酸沃替西汀和/或盐纳入溶液中。在一个实施例中，本发明涉及通过混合焦谷氨酸沃替西汀、盐和水形成的凝胶。在一个实施例中，将基本上干燥状态的焦谷氨酸沃替西汀和盐混合，并且添加水溶液(例如水)，以形成凝胶。在一个实施例中，本发明涉及形成凝胶的方法，该方法包括混合焦谷氨酸沃替西汀、盐和水溶液(例如水)。作为wo2011/023194和wo2011/136376公开的国际专利申请披露了包含沃替西汀的肠溶包衣制剂。具体而言，wo2011/023194披露了如下实验，其中作为五路交叉研究的一部分，向受试者给予无线电控制的胶囊剂(enteriontm)(参见‘194的实例1)。在所述研究中，在被释放到小肠(近端肠或远端肠)中的20mg沃替西汀hbr速释(ir)、9mg沃替西汀hbriv和20mghbr溶液之间比较了生物利用度和胃肠(gi)道不良事件。第五组没有活性化合物。结果出人意料地显示，被释放到近端或远端肠中的20mg沃替西汀hbrir制剂和20mg沃替西汀hbr溶液的血浆浓度-时间曲线几乎是相同的。换言之，这三种制剂是生物等效的。此外，结果示出了显著更低水平的gi道不良事件，特别是与ir制剂相比被释放到肠中的两种制剂的更低水平的恶心和腹泻。组合起来，披露于wo2011/023194中的结果显示，在递送相同的血浆浓度因此达到相同的治疗效果时，与在ir制剂中给予的沃替西汀相比，被释放到肠中的沃替西汀(例如在肠溶制剂中)与优越的gi道不良事件特性相关。然而，如实例17所示的，沃替西汀hbr在肠溶包衣片剂中具有不足的生物利用度并且因此以此状态不是有用的。实例17是在健康志愿者中比较作为ir制剂给予的和在具有ph5.5、6.0和7.0下的释放的肠溶包衣制剂中给予的20mg沃替西汀hbr的血浆浓度-时间曲线的4-组人类研究。胃中的ph酸性很强并且在1-1.5左右。ph从胃进入小肠急剧增加并且从近端部分向远端部分从5.5左右增加到7.5[advdrugdeliv(《先进药物输送评论》)，25，3-14，1997]。针对肠溶包衣制剂研究的释放ph因此跨小肠的整个长度上的释放。如图13所示的，肠溶包衣制剂具有显著降低的生物利用度，其中具有5.5和6.0的释放ph的两种肠溶包衣制剂的auc0-72h(曲线下面积)是50％左右，并且具有7.0的释放ph的肠溶包衣制剂的auc0-72h是10％左右(相对于ir片剂的auc0-72h)。肠溶包衣沃替西汀hbr片剂因此与沃替西汀hbrir制剂不是生物等效的，并且其结果是它将不提供相同的治疗效果。不能排除增加肠溶包衣片剂中的沃替西汀hbr的量可以增加auc；然而，由于若干原因，这可能是不可能的或不合宜的。首先，增加肠溶包衣片剂的剂量可以导致血浆浓度-时间曲线的形状不同，由于这个原因不能获得生物等效性。其次，每位患者对任何给定的药物具有不同的摄取，并且将所有患者都暴露于高剂量增加了出人意料的高的和不想要的药物吸收风险以及与其相关的安全性忧虑。描绘在图13中的血浆浓度-时间曲线的上升部分的斜率指示对于沃替西汀hbr而言，在肠中的溶解速率显著低于在胃中的溶解速率。据建议，在肠相关ph下沃替西汀hbr的溶解速率不足可以导致该化合物无法从肠吸收到血浆中并且因此不适于在肠溶包衣制剂中给予。报告于实例18中的数据示出了沃替西汀hbr和焦谷氨酸沃替西汀的溶解速率。结果显示与hbr盐相比，沃替西汀的焦谷氨酸盐具有显著更高的溶解速率。进行报告于实例19中的实验来检验以下假设，即当在肠溶包衣制剂中提供所述盐时，与沃替西汀hbrir片剂相比，沃替西汀盐的高溶解速率指示生物等效性。该研究是在狗中比较在ir制剂中给予的沃替西汀hbr、在ec制剂中给予的沃替西汀hbr；作为口服溶液给予的沃替西汀hbr以及作为ec制剂给予的焦谷氨酸沃替西汀的血浆浓度-时间曲线的4-组交叉研究。如从图14中呈现的数据所见的，归因于延迟释放，ir制剂形式的沃替西汀hbr和ec制剂形式的焦谷氨酸沃替西汀的血浆浓度-时间曲线除时移之外是相似的。与其相比较，ec制剂形式的沃替西汀hbr具有非常不同的曲线，其auc低得多。图14中的血浆浓度-时间斜率的初始斜率也确认，ir制剂形式的沃替西汀hbr和ec制剂形式的焦谷氨酸沃替西汀的溶解速率几乎是相同的并且比ec制剂形式的沃替西汀hbr的溶解速率大得多。在实例17和19中获得的数据之间的相似性用于验证在狗研究中获得的结果。在实例19中获得的数据显示，ec制剂形式的焦谷氨酸沃替西汀提供了与来自ir片剂形式的沃替西汀hbr的相似的血浆浓度-时间曲线。基于这种相似性，得出的结论是从两种这样的制剂获得相似的治疗效果。另外，披露于wo2011/023194中的数据显示，如果沃替西汀被释放在肠中而非被释放在胃中，这与胃肠不良事件的显著减少相关。在结果中，预期用固体肠溶包衣制剂形式的沃替西汀焦谷氨酸盐对患者进行治疗提供与用固体ir制剂形式的沃替西汀hbr进行治疗相同的治疗效果以及与其相比更低水平的胃肠不良事件。这与用肠溶包衣片剂中的沃替西汀hbr进行治疗形成对照，其与活性成分的低得多的吸收和随之发生的差的治疗效果相关。ir制剂形式的沃替西汀hbr现在已经在许多主要市场得到批准。沃替西汀的新制剂(其与现存的得到批准的ir制剂是生物等效的)在许多国家可以依赖于监管安全性和疗效数据，依赖于此数据沃替西汀hbrir制剂被批准其自身得到认可。因此，可以将焦谷氨酸沃替西汀的肠溶包衣制剂引入市场而无需漫长而昂贵的临床研究。在一个实施例中，本发明提供了包含焦谷氨酸沃替西汀的肠溶包衣制剂。具体而言，所述肠溶制剂是固体并且用于口服给药。在一个实施例中，所述焦谷氨酸沃替西汀是沃替西汀(dl)-焦谷氨酸盐α-形式、沃替西汀(l)-谷氨酸盐、沃替西汀(d)-焦谷氨酸盐、沃替西汀(dl)-焦谷氨酸盐一水合物或其混合物中的任一种。每日总剂量典型地在1与50mg沃替西汀之间(游离碱)，例如1-10mg，例如5、10、15或20mg。在本发明上下文中，“肠溶包衣”旨在指示ph敏感包衣，其基本上不允许沃替西汀在胃中被释放或溶解而基本上仅在肠中被释放或溶解。有用的两阶段体外溶解测试如下。设备：标准usp旋转叶片仪；桨叶速度75rpm；37℃。第一阶段：将单位剂量暴露于600ml0.1mhcl持续2小时。第二阶段：将单位剂量转移到具有0.3w/w-％十六烷基三甲基溴化铵的900mltris缓冲液(0.6m)中，在5.5或5.5以上的ph下持续2小时。将样品在适合的时间点取出并且针对沃替西汀进行分析，以确定释放的沃替西汀的量。在第二阶段中可以调节ph，以便更确切地确定药物被释放在肠的何处。例如，第二阶段的ph可以是5.5、6.0、6.5或7.0。单位剂量典型地包括1-50mg沃替西汀。在一个实施例中，如果包衣制剂在第一阶段中释放少于10％(例如小于5％)的单位剂量并且在第二阶段中释放余量，则所述包衣制剂被认为是肠溶包衣的。tris缓冲液的使用不是关键的，并且可以使用其他缓冲液。肠溶包衣包括ph敏感聚合物，例如聚丙烯酰胺；邻苯二甲酸酯衍生物，例如碳水化合物的酸式邻苯二甲酸酯、直链淀粉乙酸邻苯二甲酸酯、乙酸邻苯二甲酸纤维素、其他纤维素酯邻苯二甲酸酯、纤维素醚邻苯二甲酸酯、羟丙基纤维素邻苯二甲酸酯、羟丙基乙基纤维素邻苯二甲酸酯、羟丙基甲基纤维素邻苯二甲酸酯、甲基纤维素邻苯二甲酸酯、聚乙酸乙烯邻苯二甲酸酯、聚乙酸乙烯氢邻苯二甲酸酯、乙酸邻苯二甲酸纤维素钠、淀粉酸式邻苯二甲酸酯、苯乙烯-马来酸二丁基邻苯二甲酸酯共聚物、苯乙烯-马来酸聚乙酸乙烯邻苯二甲酸酯共聚物、苯乙烯和马来酸共聚物；聚丙烯酸衍生物，例如丙烯酸和丙烯酸酯共聚物、聚甲基丙烯酸及其酯、聚丙烯酸甲基丙烯酸共聚物；虫胶以及乙酸乙烯酯和巴豆酸共聚物。甲基丙烯酸和甲基丙烯酸甲酯或丙烯酸乙酯的阴离子丙烯酸共聚物是特别有用的ph依赖性包衣材料。这种类型的肠溶包衣在商品名eudragit下可从德固赛公司(degussa)获得。特别有用的是产品丙烯酸树脂l30d-55，其包括分子量在320,000g/mol左右的聚(甲基丙烯酸-共-丙烯酸乙酯)1:1，在高于5.5的ph下提供溶解；丙烯酸树脂l100，其包括分子量在125,000g/mol左右的聚(甲基丙烯酸-共-甲基丙烯酸甲酯)1:1，在高于6.0的ph下提供溶解；以及丙烯酸树脂fs30d，其包括分子量在280,00g/mol左右的聚(丙烯酸甲酯-共-甲基丙烯酸甲酯-共-甲基丙烯酸)7:3:1，在高于7.0的ph下提供溶解。因此，通过应用处于纯形式或作为其混合物的eudragit聚合物，可能的是控制释放发生的肠的位置。在一个实施例中，本发明的肠溶包衣制剂的单位剂量被包含在单片或几片片剂中。可替代地，本发明的肠溶包衣制剂的单位剂量被包含在多片(例如像20-60片)较小的片剂中。所述一片或多片片剂可以被呈现在胶囊剂中，其中所述胶囊剂而非一片或多片单独的片剂被肠溶包衣。在一个实施例中，本发明的肠溶包衣制剂是多颗粒制剂，其中该肠溶包衣制剂的单位剂量被包含在多片片剂中，每片片剂都被肠溶包衣。这通常被称为肠溶包衣迷你片。这个实施例具有以下另外的优点，即对包衣的损害较不敏感，包衣的损害可以导致剂量倾释。可以通过药物层化技术(如粉末包衣)将焦谷氨酸沃替西汀施加到惰性核心上，或通过例如在流化床包衣机或旋转式混合机中将焦谷氨酸沃替西汀和适合的粘合剂的溶液喷到核心上来制备本发明的肠溶包衣制剂。随后将所得核心用适合的肠溶包衣进行包衣。这些颗粒可以被压成片剂或在胶囊剂中、作为粉剂或在小袋中呈现。肠溶包衣片剂可以通过本领域的普通技术人员可获得的多种方式来制备。可以通过混合焦谷氨酸沃替西汀与普通佐剂和/或稀释剂并且随后在常规压片机中压紧混合物来制备片剂。佐剂或稀释剂的实例包括pvp、pvp-va共聚物、微晶纤维素、淀粉乙醇酸钠、玉米淀粉、甘露醇、马铃薯淀粉、滑石、硬脂酸镁、明胶、乳糖、树胶、交联羧甲基纤维素钠以及类似物。可以使用通常用于这些目的的任何其他佐剂或添加剂，例如着色剂、调味剂、防腐剂等，其条件是它们与其他成分兼容。随后将获得的片剂用适合的肠溶包衣进行包衣，例如通过将包含包衣材料的溶液喷到片剂上。在一个实施例中，本发明提供了片剂形式的包含焦谷氨酸沃替西汀的肠溶制剂，该片剂被分子量在320,000g/mol左右的聚(甲基丙烯酸-共-丙烯酸乙酯)1:1或分子量在125,000g/mol左右的聚(甲基丙烯酸-共-甲基丙烯酸甲酯)1:1或分子量在280,000g/mol左右的聚(丙烯酸甲酯-共-甲基丙烯酸甲酯-共-甲基丙烯酸)7:3:1包衣。在本发明上下文中，“分子量”旨在指示“重量平均摩尔质量”。在一个实施例中，本发明提供了片剂形式的包含焦谷氨酸沃替西汀、甘露醇、微晶纤维素、淀粉乙醇酸钠、羟丙基纤维素和硬脂酸镁的肠溶制剂，该片剂被分子量在320,000g/mol左右的聚(甲基丙烯酸-共-丙烯酸乙酯)1:1或分子量在125,000g/mol左右的聚(甲基丙烯酸-共-甲基丙烯酸甲酯)1:1或分子量在280,000g/mol左右的聚(丙烯酸甲酯-共-甲基丙烯酸甲酯-共-甲基丙烯酸)7:3:1包衣。在一个实施例中，本发明提供了片剂形式的包含焦谷氨酸沃替西汀、微晶纤维素、交联羧甲基纤维素钠和硬脂酸镁的肠溶包衣制剂，该片剂被分子量在320,000g/mol左右的聚(甲基丙烯酸-共-丙烯酸乙酯)1:1或分子量在125,000g/mol左右的聚(甲基丙烯酸-共-甲基丙烯酸甲酯)1:1或分子量在280,000g/mol左右的聚(丙烯酸甲酯-共-甲基丙烯酸甲酯-共-甲基丙烯酸)7:3:1包衣。具体而言，在包衣之前所述制剂包括10％焦谷氨酸沃替西汀、86w/w-％微晶纤维素、3w/w-％交联羧甲基纤维素钠以及1w/w-％硬脂酸镁。具体而言，每片片剂包括1mg沃替西汀(作为游离碱)。沃替西汀被若干卫生当局批准用于治疗重性抑郁或重性抑郁发作。如在例如wo03/029232和wo2007/144005披露的，预期沃替西汀的药理学特性还使得该化合物有用于治疗广泛性焦虑障碍；强迫性障碍(ocd)、恐慌症；创伤后应激障碍；认知缺损；轻度认知缺损(mci)；与阿尔茨海默病、抑郁相关的认知缺损或与精神分裂症相关的认知缺损(cias)；以及注意缺陷多动障碍(adhd)。认知缺陷、认知缺损或认知功能障碍包括在认知功能或认知域例如工作记忆、注意力和警觉、言语学习和记忆、视觉学习和记忆、推理和问题解决(例如执行功能、处理速度和/或社会认知)方面的下降。具体而言，认知缺陷可以指示注意力缺陷、思维瓦解、思维迟钝、理解困难、注意力不集中、解决问题的能力损害、记忆力差、思维表达困难和/或思维、感觉和行为整合困难或无关思维消退困难。术语“认知缺陷”、“认知缺损”和“认知功能障碍”旨在指示相同含义并且可互换地使用。在一个实施例中，本发明涉及焦谷氨酸沃替西汀在制造用于治疗选自以下各项的疾病的药物中的用途：重性抑郁障碍；重性抑郁发作；广泛性焦虑障碍；强迫性障碍(ocd)、恐慌症；创伤后应激障碍；认知缺损；轻度认知缺损(mci)；与阿尔茨海默病、抑郁相关的认知缺损或与精神分裂症相关的认知缺损(cias)；以及注意缺陷多动障碍(adhd)。在一个实施例中，本发明涉及焦谷氨酸沃替西汀和盐在制造用于治疗选自以下各项的疾病的药物中的用途：重性抑郁障碍；重性抑郁发作；广泛性焦虑障碍；强迫性障碍(ocd)、恐慌症；创伤后应激障碍；认知缺损；轻度认知缺损(mci)；与阿尔茨海默病、抑郁相关的认知缺损、与精神分裂症相关的认知缺损(cias)；以及注意缺陷多动障碍(adhd)。在一个实施例中，本发明涉及用于在治疗选自以下各项的疾病的方法中使用的焦谷氨酸沃替西汀：重性抑郁障碍；重性抑郁发作；广泛性焦虑障碍；强迫性障碍(ocd)、恐慌症；创伤后应激障碍；认知缺损；轻度认知缺损(mci)；与阿尔茨海默病、抑郁相关的认知缺损、与精神分裂症相关的认知缺损(cias)；以及注意缺陷多动障碍(adhd)。在一个实施例中，本发明涉及用于在治疗选自以下各项的疾病的方法中使用的焦谷氨酸沃替西汀和盐：重性抑郁障碍；重性抑郁发作；广泛性焦虑障碍；强迫性障碍(ocd)、恐慌症；创伤后应激障碍；认知缺损；轻度认知缺损(mci)；与阿尔茨海默病、抑郁相关的认知缺损、与精神分裂症相关的认知缺损(cias)；以及注意缺陷多动障碍(adhd)。在一个实施例中，本发明涉及用于治疗选自以下各项的疾病的方法：重性抑郁障碍；重性抑郁发作；广泛性焦虑障碍；强迫性障碍(ocd)、恐慌症；创伤后应激障碍；认知缺损；轻度认知缺损(mci)；与阿尔茨海默病、抑郁相关的认知缺损、与精神分裂症相关的认知缺损(cias)；以及注意缺陷多动障碍(adhd)，该方法包括向有需要的患者给予治疗有效量的焦谷氨酸沃替西汀。在一个实施例中，本发明涉及用于治疗选自以下各项的疾病的方法：重性抑郁障碍；重性抑郁发作；广泛性焦虑障碍；强迫性障碍(ocd)、恐慌症；创伤后应激障碍；认知缺损；轻度认知缺损(mci)；与阿尔茨海默病、抑郁相关的认知缺损、与精神分裂症相关的认知缺损(cias)；以及注意缺陷多动障碍(adhd)，该方法包括向有需要的患者给予治疗有效量的凝胶，该凝胶包含焦谷氨酸沃替西汀、盐和水。在一个实施例中，本发明涉及用于治疗选自以下各项的疾病的方法：重性抑郁障碍；重性抑郁发作；广泛性焦虑障碍；强迫性障碍(ocd)、恐慌症；创伤后应激障碍；认知缺损；轻度认知缺损(mci)；与阿尔茨海默病、抑郁相关的认知缺损、与精神分裂症相关的认知缺损(cias)；以及注意缺陷多动障碍(adhd)，该方法包括向有需要的患者给予治疗有效量的凝胶，该凝胶是通过混合治疗有效量的焦谷氨酸沃替西汀、盐和水溶液(例如水)而制备的。在一个实施例中，根据本发明的方法治疗的患者已经被诊断患有所述患者接受针对其的治疗的适应症。在本发明上下文中，“治疗(treatment)”或“治疗(treating)”旨在指示管理并护理患者，用于缓解、抑制、部分抑制疾病的临床表现或延迟其进展或者治愈疾病的目的。有待治疗的患者优选是哺乳动物，特别是人。在本发明上下文中，“治疗有效量”旨在指示化合物的以下量，该量在包括向患者给予所述化合物的治疗中达到治疗效果。在此所引用的所有文献(包括出版物、专利申请、以及专利)均通过引用以其全部内容由此结合，并且引用的程度如同每个文献被个别地并且明确地指示通过引用结合并且以其全部内容在此阐述(至法律允许的最大程度)，而不考虑在此其他地方做出的特定文件的任何单独提供的结合。除非在此另外指示或与上下文明显矛盾，否则在描述本发明的上下文中，术语“一个/种”和“该”以及类似指称对象的使用应解释为包括单数和复数二者。例如，除非另外指示，否则短语“该化合物”应理解为是指本发明的多种化合物或具体描述的方面。除非另外陈述或与上下文明显矛盾，否则在此使用涉及一种或多种要素的术语如“包括(comprising)”、“具有(having)”、“包括(including)”或“包含(containing)”的本发明的任何一方面或多方面的描述，旨在提供对“由那一种或多种特定要素组成”、“基本上由那一种或多种特定要素组成”或“基本上包括那一种或多种特定要素”的本发明的类似一方面或多方面的支持(例如，除非另外陈述或与上下文明显矛盾，否则在此所述的包含特定要素的组合物应理解为也描述由那种要素组成的组合物)。实例将x射线粉末衍射图在panalyticalx’pertprox射线衍射仪上使用cukα1辐射来测量。将样品以反射模式在2θ-角5°-40°内使用x’加速器(x’celerator)检测器来测量。在来自ta仪器(tainstruments)的以5℃/分钟校准的设备(dsc-q2000)上获得差示扫描量热法热谱图，以给出作为起始值的熔点。将大约2mg的样品在盖上具有针孔的封闭锅中并且在氮流下以5℃/分钟加热。使用ta-仪器tga-q500完成用于测量经干燥样品的溶剂/水含量的热重分析热谱图。将1-10mg样品在敞口锅中在氮流下以10℃/分钟加热。在来自sms系统(smssystems)的设备(dvsadvantage)上获得动态蒸汽吸附谱。将样品(10-20mg)的质量变化(相对于干燥状态)确定为25℃下的相对湿度(p/p0)的函数。在内径大约1cm的4ml圆柱形小瓶中进行胶化实验。实例1-沃替西汀(dl)-焦谷氨酸盐凝胶向4ml小瓶中的5.5mg沃替西汀(dl)焦谷氨酸盐mh中添加水中的溴化钾溶液(0.17m，1.0ml)并且将所得混合物振荡5秒。静置不到1分钟之后，形成澄清凝胶。将小瓶颠倒放置1个小时以上，在此期间维持凝胶的凝胶特性并且凝胶留在小瓶的顶部(底部)。实例2-沃替西汀(dl)-焦谷氨酸盐凝胶向4ml小瓶中的10.2mg沃替西汀(dl)-焦谷氨酸盐α-形式中添加水中的溴化钾溶液(0.23m，1.0ml)并且将所得混合物振荡5秒。静置不到1分钟之后，形成澄清凝胶。将小瓶颠倒放置1个小时以上，在此期间维持凝胶的凝胶特性并且凝胶留在小瓶的顶部(底部)。实例3-沃替西汀(dl)-焦谷氨酸盐凝胶向4ml小瓶中的6.2mg沃替西汀(dl)-焦谷氨酸盐mh中添加水(0.15ml)和水中的溴化钠溶液(0.307m，0.85ml，共计0.26m)并且将所得混合物振荡5秒。静置不到1分钟之后，形成澄清凝胶。将小瓶颠倒放置30分钟以上，在此期间维持凝胶的凝胶特性并且凝胶留在小瓶的顶部(底部)。实例4-沃替西汀(dl)-焦谷氨酸盐凝胶向4ml小瓶中的10.7mg沃替西汀(dl)-焦谷氨酸盐mh中添加水(0.35ml)和水中的溴化钠溶液(0.307m，0.65ml，共计0.20m)并且将所得混合物振荡5秒。静置少于1分钟之后，形成澄清凝胶。将小瓶颠倒放置1个小时以上，在此期间维持凝胶的凝胶特性并且凝胶留在小瓶的顶部(底部)。实例5-沃替西汀(dl)-焦谷氨酸盐凝胶向250ml圆底烧瓶中的0.80g沃替西汀(dl)焦谷氨酸盐mh中添加水中的氯化钠溶液(0.20m，100ml)并且将所得混合物振荡5秒。静置2分钟之后，形成澄清凝胶。将烧瓶颠倒放置30分钟以上，在此期间维持凝胶特性并且凝胶留在烧瓶的顶部(底部)。实例6-沃替西汀(dl)-焦谷氨酸盐凝胶向4ml小瓶中的8.0mg沃替西汀(dl)-焦谷氨酸盐mh中添加水(0.15ml)和水中的氯化钠溶液(0.31m，0.85ml，共计0.26m)并且将所得混合物振荡5秒。静置6分钟之后，形成澄清凝胶。将小瓶颠倒放置1个小时以上，在此期间维持凝胶的凝胶特性并且凝胶留在小瓶的顶部(底部)。实例7-沃替西汀(dl)-焦谷氨酸盐凝胶向4ml小瓶中的11.2mg沃替西汀(dl)-焦谷氨酸盐mh中添加水(0.20ml)和水中的氯化钠溶液(0.31m，0.80ml，共计0.25m)并且将所得混合物振荡5秒。静置5分钟之后，形成澄清凝胶。将小瓶颠倒放置30分钟以上，在此期间维持凝胶的凝胶特性并且凝胶留在小瓶的顶部(底部)。实例8-沃替西汀(l)-焦谷氨酸盐凝胶向4ml小瓶中的7.6mg沃替西汀(l)-焦谷氨酸盐中添加水中的溴化钠溶液(0.18m，1.0ml)并且将所得混合物振荡5秒。静置少于1分钟之后，形成澄清凝胶。将小瓶颠倒放置30分钟以上，在此期间维持凝胶的凝胶特性并且凝胶留在小瓶的顶部(底部)。实例9-沃替西汀(dl)-焦谷氨酸盐凝胶向4ml小瓶中的14mg沃替西汀(dl)焦谷氨酸盐mh中添加氯化钠(26mg)和水(2.0ml)并且将所得混合物振荡5秒。静置少于1分钟之后，形成凝胶。将小瓶颠倒放置10分钟以上，在此期间维持凝胶的凝胶特性并且凝胶留在小瓶的顶部(底部)。实例10-沃替西汀(l)-焦谷氨酸盐的制备在60℃下，将沃替西汀(2.98g)溶解于2-丙醇(15ml)中。向这个搅拌的反应混合物中滴加2-丙醇(15ml)中的l-焦谷氨酸(1.29g)的温溶液(60℃)。将反应经2小时的时间冷却至室温并且然后在过滤之前冷却至0-5℃持续1.5h。通过过滤分离沃替西汀(l)-焦谷氨酸盐。将滤饼用2-丙醇(2x5ml)洗涤并在真空下干燥过夜，以产生4.09g(96％收率)。1hnmr(dmso-d6):7.65(s,1h),7.33(d,1h),7.24(s,1h),7.10(m,3h),6.93(dd,1h),6.40(d,1h),3.87(dd,1h),3.10(bs,8h),2.32(s,3h),2.24(s,3h),2.23(mp,1h),2.08(mp,2h),1.95(mp,1h)。实例11-沃替西汀(l)-焦谷氨酸盐的表征在实例10中获得的产物的元素分析给出了以下结果：63.5％c，6.95％h，9.44％n，卡尔费休(karlfisher)(kf)：1.6％水(针对1.6％水校正的理论值：63.58％c，6.91％h，9.67％n)。在实例10中获得的产物的xrpd谱示于图1中。该谱显示产物基本上处于结晶形式。沃替西汀(l)-焦谷氨酸盐在10.72、12.14、16.22和18.59(°2θ)；例如10.72、12.14、16.05、16.22、17.53、17.70、18.45和18.59(°2θ)，例如7.02、10.72、12.14、14.45、14.61、15.56、16.05、16.22、17.53、17.70、18.45和18.59(°2θ)处具有特征性xrpd反射。所有值都是±0.1°2θ。在实例10中获得的产物的tga热谱图示于图2中。水的初始损失之后是小的重量损失，其可能来自在熔融期间截留在晶体中的溶剂。在实例10中获得的产物的dsc热谱图示于图3中。水的初始损失之后，在138.9℃下出现尖熔融峰(起始值)。在实例10中获得的产物的dvs谱示于图4中。当开始测量时，样品含有4％的水。当湿度增加到95％相对湿度时，另外2.7％逐渐被吸收。随着湿度降到0％rh，所有的水逐渐被释放。可以注意到样品似乎具有kf水含量测定与dvs测量之间的吸收水。在21℃下，向500mg沃替西汀(l)-焦谷氨酸盐中添加900μl水。将含有弱沉淀的粘性液体离心，过滤并且在稀释之后通过hplc确定上清液的浓度。hplc方法：结果显示沃替西汀(l)-焦谷氨酸盐的溶解度为225mg/ml。实例12-沃替西汀(dl)-焦谷氨酸盐mh的制备将沃替西汀hbr盐(750g)、(dl)-焦谷氨酸(250g)和甲基四氢呋喃(10l)在反应器中混合。向这个混合物中添加氢氧化钠溶液(1m，3.4l)并且然后将混合物加热至大约40℃。一旦形成澄清溶液，便停止搅拌并且允许将反应静置，以允许各相分离。将有机相保留并且将水相丢弃。将有机相用水(3l)洗涤并且随后用氢氧化钠溶液(1m，2l)洗涤并且搅拌30分钟，这之后停止搅拌并且允许将反应静置，以允许各相分离。将有机相保留并且将水相丢弃。将(dl)-焦谷氨酸(0.250kg)添加至有机相中并且然后通过蒸馏减小体积(通过蒸馏除去大约5.3l)。允许将混合物冷却并且将产物通过过滤分离。将滤饼用冷甲基四氢呋喃(2.5l)洗涤并且在40℃下在减压下干燥，以给出希望的沃替西汀(dl)-焦谷氨酸mh盐(705g)。(dl)-焦谷氨酸的初始添加是个错误。这个错误对合成结果没有影响。实例13-沃替西汀(dl)-焦谷氨酸盐mh的表征在实例12中获得的产物的元素分析给出了以下结果：61.94％c，6.99％h，9.40％n(针对一水合物的理论值：62.00％c，7.01％h，9.43％n)在实例12中获得的产物的xrpd谱示于图5中。该谱显示产物基本上处于结晶形式。沃替西汀(dl)-焦谷氨酸盐mh在6.16、9.25、17.68和18.12(°2θ)处，例如在6.16、9.25、14.61、15.02、15.88、16.33、17.68和18.12(°2θ)处，例如在6.16、9.25、9.38、12.10、14.03、14.61、15.02、15.88、16.33、16.91、17.68和18.12(°2θ)处具有特征性xrpd反射。所有值都是±0.1°2θ。在实例12中获得的产物的dsc热谱图示于图6中。去溶剂化之后(在约95℃下的第一个宽峰)，形成α形式，其然后熔融。在示于图7中的在实例12中获得的产物的tga热谱图中也可以鉴定出对应于去溶剂化的两步重量损失。在实例12中获得的产物的dvs谱示于图8中。在25℃下，沃替西汀(dl)-焦谷氨酸盐mh直到80％的相对湿度也不吸湿。在90％相对湿度下，一些水被吸收，并且在95％相对湿度下，它是吸湿的。没有达到平衡，因此超过10％被吸收并且在95％相对湿度下存储延长时间段的样品变成液体。在室温下，将200mg沃替西汀(dl)-焦谷氨酸盐mh溶解于200μl水中。归因于诱导的体积的变化，浓度被计算为278mg/ml。由此确定溶解度为至少278mg/ml。实例14-沃替西汀(dl)-焦谷氨酸盐α-形式的制备将沃替西汀hbr盐(750g)和甲基四氢呋喃(10l)在反应器中混合。向这个混合物中添加氢氧化钠溶液(1m，3.4l)并且然后将混合物加热至大约40℃。一旦形成澄清溶液，便停止搅拌并且允许将反应静置，以允许各相分离。将有机相保留并且将水相丢弃。将有机相用水(3l)洗涤并且将(dl)-焦谷氨酸(0.250kg)添加至有机相中并且然后通过蒸馏减小体积(通过蒸馏除去大约7l)。添加另外的甲基四氢呋喃(2l)并且再稍微蒸馏，直到反应混合物是大约77℃。然后将混合物冷却至大约10℃并且将产物通过过滤分离。将滤饼用冷甲基四氢呋喃(2l)洗涤并且在减压下干燥，以给出希望的沃替西汀(dl)-焦谷氨酸α-形式盐(807g)。实例15-沃替西汀(dl)-焦谷氨酸盐α-形式的表征在实例14中获得的产物的元素分析给出了以下结果：64.52％c，6.83％h，9.73％n(理论值：64.61％c，6.84％h，9.83％n)。在实例14i中获得的产物的xrpd谱示于图9中。该谱显示沃替西汀(dl)焦谷氨酸盐α-形式基本上处于结晶形式。沃替西汀(dl)焦谷氨酸盐α-形式在14.27、15.75、17.06和18.59(°2θ)处，例如在7.42、10.78、13.58、14.27、14.60、15.75、17.06和18.59(°2θ)处，例如在7.42、10.78、13.58、13.99、14.27、14.60、15.75、15.90、16.89、17.06、17.87和18.59(°2θ)处具有特征性xrpd反射。所有值都是±0.1°2θ。在实例14中获得的产物的dsc热谱图示于图10中。沃替西汀(dl)焦谷氨酸盐α-形式的熔点为178.2℃(起始值)。在实例14中获得的产物的tga热谱图示于图11中。如由数据所证明的，在熔点之前沃替西汀(dl)焦谷氨酸盐α-形式没有重量损失。在实例14中获得的产物的dvs谱示于图12中。该谱显示沃替西汀(dl)焦谷氨酸盐α-形式是不吸湿的。高达95％相对湿度时，不到0.3％被吸收。在室温下，将200mg沃替西汀(dl)-焦谷氨酸盐α-形式溶解于200μl水中。归因于诱导的体积的变化，浓度被计算为278mg/ml。由此确定溶解度为至少278mg/ml。实例16-沃替西汀(dl)-焦谷氨酸盐α-形式的制备将沃替西汀hbr盐(750g)、甲基四氢呋喃(10.5l)和水(3l)在反应器中搅拌。向这个混合物中添加氢氧化钠溶液(27.7％，3.8l)并且将混合物加热至大约70℃。一旦形成澄清溶液，便停止搅拌并且允许将反应静置，以允许各相分离。将有机相保留并且将水相丢弃。将dl-焦谷氨酸(0.263kg)添加至有机相中，然后将其通过蒸馏减小体积(通过蒸馏除去大约8l)。然后将混合物冷却至大约10℃并且将产物通过过滤分离。将滤饼用冷甲基四氢呋喃(2l)洗涤并且在减压下干燥，以给出希望的沃替西汀(dl)-焦谷氨酸α-形式盐(803g)。通过xrpd确认结晶形式。实例17用肠溶包衣制剂形式的沃替西汀hbr进行临床研究如下表所示的用相同的核心制备三种不同的肠溶包衣制剂剂量(mg)1片剂质量(mg)15％w/w沃替西汀hbr8.47微晶纤维素15.00甘露醇69.53羟丙基纤维素3.0淀粉乙醇酸钠(a型)3.0硬脂酸镁1.0总和100将沃替西汀hbr(粒度分布x101.9μm；x509.3μm；x9049μm；x99150μm，所有都是体积平均直径)与甘露醇、微晶纤维素和羟丙基纤维素在流化床中混合并且添加造粒水，并且允许混合物造粒，之后将粒料干燥并过筛。将粒料与微晶纤维素和淀粉乙醇酸钠(a型)连同硬脂酸镁一起在掺混机中混合。使用3mm冲头将所得粒料压成片剂核心。随后将核心片剂用欧巴代粉红(opadrypink)(3.5％w/w)的子包衣和三种不同的肠溶包衣进行包衣，以实现在高于5.5的ph、高于6.0的ph和高于7.0的ph下的释放。下文指示了包衣悬浮液。将丙烯酸树脂l30d-55、丙烯酸树脂l100和丙烯酸树脂fs30d分别对应于15.3mg/cm2、18mg/cm2和11mg/cm2应用。应用子包衣以使得迷你片更具球形，以用肠溶聚合物实现更均匀的包衣。欧巴代粉红是包含2910型羟丙甲纤维素、二氧化钛、聚乙二醇400和氧化铁红的着色包衣。上文讨论了丙烯酸树脂l30d-55、丙烯酸树脂l100和丙烯酸树脂fs30d的组成。plasacrylt20是包含单硬脂酸甘油酯、柠檬酸三乙酯和聚山梨酯80的可商购增塑剂。在健康女性中在单中心、随机、双盲、四路交叉、单剂量研究中测试含有如上制备的迷你片(20mg沃替西汀游离碱)的胶囊剂连同20mgir片剂(商业的，胶囊化的)。每次给药相隔至少21天的洗脱期。给药之后，在直到72小时的预定点抽取血液样品，用于分析沃替西汀血浆水平。商业20mg片剂包括甘露醇、微晶纤维素、羟丙基纤维素、淀粉乙醇酸钠、硬脂酸镁以及薄膜包衣，所述薄膜包衣由羟丙甲纤维素、二氧化钛、聚乙二醇400和着色剂组成。下表给出了四组中每组的平均药代动力学数据，并且血浆浓度-时间曲线示于图17中。下面示出了相关统计数据ci：置信区间。生物等效性典型地需要比率在0.8与1.15之间。实例18沃替西汀盐的固有溶解速率固有溶解速率(idr)被表示为溶解的mg沃替西汀/cm2表面/min。使用“纺盘法(spinning-discmethod)”测量固有溶解速率(来自介子仪器(pioninstruments)的μdiss剖面仪(profilerinstrument))。为了定义测试化合物自其溶解的表面，制备压实的纯测试化合物的微型盘(10mg)。将容纳测试化合物的盘插入含有嵌入磁体的特氟龙杯中。将杯插入含有20ml溶解介质的小瓶中(37℃/200rpm)。通过纤维光学检测系统(200-400nm)测量溶解的测试化合物。通过与标准溶液进行比较来确定浓度并且将计算的每表面面积释放的测试化合物的量(作为游离碱)相对于时间标绘出来。斜率给出了固有溶解速率。一式两份地进行测量。溶解介质是ph6.8的50mmtris。沃替西汀hbrβ-形式定义在wo2007/144005中(参见例如实例4c和4d)。实例19用肠溶包衣制剂形式的沃替西汀盐在狗中进行的临床前研究将两种不同的肠溶包衣沃替西汀制剂与商业ir片剂和沃替西汀溶液进行比较。第一种肠溶包衣制剂包括在高于5.5的ph下释放的沃替西汀hbr，并且如实例17所指示的制备。第二种肠溶包衣制剂包括具有如下所指示的核心组成的沃替西汀(dl)-焦谷氨酸盐α-形式剂量(mg)1片剂质量(mg)15％w/w焦谷氨酸沃替西汀9.55微晶纤维素86.45交联羧甲基纤维素钠3.0硬脂酸镁1.0总和100通过直接压片制备片剂核心。通过以1:1比率混合焦谷氨酸沃替西汀与微晶纤维素制备预掺混物。将剩余的微晶纤维素和交联羧甲基纤维素钠添加在掺混机中。最后，添加硬脂酸镁。使用3mm冲头冲压片剂核心。在用丙烯酸树脂l30d-55包衣之前将核心片剂用欧巴代粉红(20％w/w)进行子包衣，以达到高于5.5的释放ph。下文指示了包衣悬浮液％w/w欧巴代l30d-55丙烯酸树脂l30d-5557.9欧巴代粉红15柠檬酸三乙酯0.9plasacrylt208.7水8532.5总计(％)100100用于狗体内研究的方案依据监管动物实验的丹麦法律得到了机构伦理委员会的批准并且符合关于动物福利的eu指令2010/63/eu和nih指南。将公比格犬用于非随机交叉设计中，其中平均体重为9.23-11.2kg。每天用大约240克的合格犬日粮(certifieddogdietdaily)(北京维通科奥饲料有限公司(beijingvitalkeaofeedco.,ltd.)，北京，中国)将动物饲喂两次并且将其关在相对湿度受控且受监测(40％至70％rh)并且温度在从18℃至26℃的房间中，每小时进行10至20次换气。房间为12-小时光暗循环，除了当研究活动需要中断的时候。在给予制剂之前，在给药当日之前在下午(在3:30至4:00pm)饲喂动物并且在早晨取出剩余的食物。拒绝给予食物直到给药后10-小时。在整个研究过程中，动物自由饮水。给予口服制剂之前30min，向动物肌内注射盐溶液中的6μg/kg的五肽胃泌素。每次向动物口服给予20mg沃替西汀，作为三个片剂或含有溶解在5％2-羟丙基-β-环糊精中的1mg/ml沃替西汀的口服溶液。给予胶囊剂/片剂之后，立即向动物的口中给水，剂量体积为约10ml/动物，以帮助吞咽胶囊剂。在给药前5、15和30min以及给药后1、2、4、6、8、12和24小时采集血液样品，用于分析血浆中的沃替西汀水平。血浆浓度-时间曲线描绘在图14中，并且下表给出了平均药代动力学数据。相关统计数据示于下表中当前第1页12