本发明涉及药物合成技术领域，具体涉及一种恩替卡韦中间体N8的提纯方法。
背景技术：
恩替卡韦是百时美施贵宝公司自主研发的鸟嘌呤核苷类似物口服药。2005年3月美国食品药品管理局批准恩替卡韦上市；2005年底通过中国食品与药品监督管理局审批，并于2006年初由中美上海施贵宝制药有限公司在中国上市。
恩替卡韦是一种强效选择性鸟嘌呤核苷类似物，具有显著的抗乙型肝炎病毒(HBV)的活性。临床研究证实，恩替卡韦较拉米夫定具有更加显著的病毒抑制作用，几乎没有副作用，且耐药性很低，在治疗慢性乙型肝炎药物中被认为有很好的临床应用前景。但因进口产品售价太高，而无法惠及普通的肝炎患者，为了能使更多的肝炎患者得到及时有效的治疗，开发国产品是十分必要的。
目前，恩替卡韦的合成工艺路线较长，反应条件苛刻，对产品的杂质要求很高，单杂小于0.1％，总杂小于0.3％。每一步反应的杂质或副产物如果不及时除去，可能在后面的步骤中会生成新的杂质，影响最终产品的纯度。为了更好地控制产品质量，需要严格控制恩替卡韦粗品合成的最后一个中间体N8的纯度，降低中间体N8中的杂质含量，提高恩替卡韦粗品的纯度。现有技术中对于恩替卡韦中间体N8的纯化基本是采用硅胶柱柱层析法，收率较低，约为70％，且不容易放大，不适合工业化生产。
技术实现要素：
本发明的目的在于提供一种恩替卡韦中间体N8的提纯方法，以期在提高恩替卡韦中间体N8纯度的同时提高产品收率，且使提纯方法操作简单，易于实现工业化生产。
本发明提供了一种恩替卡韦中间体N8的提纯方法，包括以下步骤：
(1)将恩替卡韦中间体N8原料与二甲基甲酰胺混合；
(2)采用活性炭对所述步骤(1)得到的混合溶液进行脱色处理，将得到的混合物料进行固液分离；
(3)向所述步骤(2)得到的分离液中加入亚硫酸氢钠水溶液，进行养晶处理，得到恩替卡韦中间体N8晶体。
优选的，所述步骤(1)中恩替卡韦中间体N8原料与二甲基甲酰胺的质量比为1:(10～30)。
优选的，所述步骤(2)中活性炭与所述步骤(1)中恩替卡韦中间体N8原料的质量比为(0.01～0.1)：1。
优选的，所述步骤(3)中亚硫酸氢钠水溶液的质量百分含量为5％～10％。
优选的，所述步骤(3)中亚硫酸氢钠水溶液的质量与所述步骤(1)中恩替卡韦中间体N8原料的质量比为(10～60)：1。
优选的，所述步骤(3)中加入亚硫酸氢钠水溶液的方式为滴加。
优选的，所述步骤(3)中养晶处理在10～25℃的条件下进行。
优选的，所述步骤(3)中养晶处理在搅拌速率为10～200r/min的条件下进行。
优选的，所述养晶处理的时间为2～3h。
优选的，所述步骤(3)中养晶处理后还包括：
将得到的结晶物料进行固液分离，对所述固液分离后得到的晶体进行洗涤、干燥，得到恩替卡韦中间体N8纯品。
本发明提供了一种恩替卡韦中间体N8的提纯方法，将恩替卡韦中间体N8原料与二甲基甲酰胺混合；采用活性炭对得到的混合溶液进行脱色处理，将得到的混合物料进行固液分离；向得到的分离液中加入亚硫酸氢钠水溶液，进行养晶处理，得到恩替卡韦中间体N8晶体。采用本发明提供的提纯方法，能够将纯度为95％～98％的恩替卡韦中间体N8原料提纯至99.2％以上；提纯恩替卡韦中间体N8的方法收率高，达95％。经本发明提供的提纯方法得到的恩替卡韦中间体N8，在进行恩替卡韦粗品制备时，能够使恩替卡韦粗品的纯度达到99.5％以上，将恩替卡韦粗品一次精制，即可得到纯度99.7％以上的恩替卡韦。此外本发明提供的提纯方法操作简单，易于实现工业化生产。
具体实施方式
本发明提供了一种恩替卡韦中间体N8的提纯方法，包括以下步骤：
(1)将恩替卡韦中间体N8原料与二甲基甲酰胺混合；
(2)采用活性炭对所述步骤(1)得到的混合溶液进行脱色处理，将得到的混合物料进行固液分离；
(3)向所述步骤(2)得到的分离液中加入亚硫酸氢钠水溶液，进行养晶处理，得到恩替卡韦中间体N8晶体。
采用本发明提供的提纯方法，能够将纯度为95％～98％的恩替卡韦中间体N8原料提纯至99.2％以上；提纯后恩替卡韦中间体N8产品收率高，达95％。此外本发明提供的提纯方法操作简单，易于实现工业化生产。
所述恩替卡韦中间体N8的化学名称为：(1S,3R,4S)-2-氨基-1,9-二氢-9-[2-亚甲基-4-苄氧基-3[(苄氧基)甲基]环戊基-6H-嘌呤-6-酮，结构式如下：
本发明将恩替卡韦中间体N8原料与二甲基甲酰胺混合。在本发明中，所述恩替卡韦中间体N8原料与二甲基甲酰胺的质量比优选为1:(10～30)，更优选为1:(12.5～25)，最优选为1:(15～20)。本发明对于所述恩替卡韦中间体N8原料的来源没有特殊的限定，采用本领域技术人员熟知的技术方案制备得到的恩替卡韦中间体N8即可。现有技术中，本领域技术人员熟知的恩替卡韦中间体N8原料的纯度优选为95％～98％。
本发明对于所述恩替卡韦中间体N8原料与二甲基甲酰胺混合的方式没有特殊的限定，采用本领域技术人员熟知的物料混合的技术方案即可。在本发明中，所述恩替卡韦中间体N8原料与二甲基甲酰胺的混合优选在30～60℃的条件下进行，更优选为35～55℃，最优选为40～50℃。在本发明中，所述恩替卡韦中间体N8原料与二甲基甲酰胺的混合优选在搅拌速率为10～200r/min的条件下进行，更优选为50～150r/min，最优选为80～120r/min。在本发明中，控制恩替卡韦中间体N8原料与二甲基甲酰胺混合时的温度和搅拌速率均是为了能够使恩替卡韦中间体N8原料完全溶解在二甲基甲酰胺中。在本发明的实施例中，具体是在搅拌速率为10～200r/min的条件下，将所述二甲基甲酰胺加入到所述恩替卡韦中间体N8原料中，在30～60℃的条件下继续搅拌至恩替卡韦中间体N8原料完全溶解在二甲基甲酰胺中。
将恩替卡韦中间体N8原料与二甲基甲酰胺混合后，本发明采用活性炭对得到的混合溶液进行脱色处理，将得到的混合物料进行固液分离。在本发明中，所述活性炭与恩替卡韦中间体N8原料的质量比优选为(0.01～0.1)：1，更优选为(0.02～0.07):1，最优选为(0.03～0.05)：1。本发明对于所述活性炭的种类没有特殊的限定，采用本领域技术人员熟知的用于进行脱色处理的活性炭即可。在本发明的实施例中，具体选择767针用活性炭进行脱色处理。
在本发明中，所述脱色处理优选在搅拌速率为10～200r/min的条件下进行，更优选为50～150r/min，最优选为80～120r/min。在本发明中，所述脱色处理的时间优选为20～60min，更优选为30～50min，最优选为35～45min。
完成所述脱色处理后，本发明将脱色处理后得到的混合物料进行固液分离。本发明对于所述固液分离的方式没有特殊的限定，采用本领域技术人员熟知的固液分离的技术方案即可。本发明优选将脱色处理后得到的混合物料进行过滤。本发明对于所述过滤的方式没有特殊的限定，采用本领域技术人员熟知的过滤的技术方案即可。本发明优选采用微孔过滤膜对脱色处理后得到的混合物料进行过滤。本发明对于所述微孔过滤膜没有特殊的限定，采用本领域技术人员熟知的适用于对所述混合物料进行过滤的微孔过滤膜即可。在本发明的实施例中，具体采用0.8μm醋酸纤维微孔过滤膜对脱色处理后得到的混合物料进行过滤。
完成所述固液分离后，本发明向得到的分离液中加入亚硫酸氢钠水溶液，进行养晶处理，得到恩替卡韦中间体N8晶体。在本发明中，所述亚硫酸氢钠水溶液的质量百分含量优选为5％～10％，更优选为6％～9％，最优选为7％～8％。在本发明中，所述亚硫酸氢钠水溶液的质量与中恩替卡韦中间体N8原料的质量比优选为(10～60)：1，更优选为(12.5～50)：1，再优选为(20～40)：1，最优选为(25～30)：1。
在本发明中，向分离液中加入亚硫酸氢钠水溶液的方式优选为滴加；所述滴加的时间优选为30～40min，更优选为33～37min。本发明优选在搅拌速率为10～200r/min的条件下进行所述滴加，更优选为50～150r/min，最优选为80～120r/min。本发明优选在10～25℃的条件下进行所述养晶处理，更优选为15～20℃。本发明优选在搅拌速率为10～200r/min的条件下进行所述养晶处理，更优选为50～150r/min，最优选为80～120r/min。在本发明中，所述养晶处理的时间优选为2～3h，具体可为2h、2.5h或3h。在本发明的实施例中，具体是在搅拌速率为10～200r/min的条件下，向所述分离液中滴加亚硫酸氢钠水溶液30～40min，在10～25℃的条件下继续搅拌进行所述养晶处理2～3h。
完成所述养晶处理后，本发明优选将得到的结晶物料进行固液分离，对所述固液分离后得到的晶体进行洗涤、干燥，得到恩替卡韦中间体N8纯品。本发明对于将所述结晶物料进行固液分离的方式没有特殊的限定，采用本领域技术人员熟知的固液分离的技术方案即可。本发明优选将所述结晶物料进行过滤。本发明对于所述过滤的方式没有特殊的限定，采用本领域技术人员熟知的过滤的技术方案即可。
完成所述固液分离后，本发明优选对得到的晶体进行洗涤。本发明对于所述洗涤没有特殊的限定，采用本领域技术人员熟知的对晶体进行洗涤的技术方案即可。本发明优选采用纯化水对所述晶体进行洗涤。在本发明中，所述洗涤的次数优选为3～4次；每次洗涤所需的纯化水的质量与所述晶体的质量比优选为(8～12)：1，更优选为(9～11)：1。
完成所述洗涤后，本发明优选将洗涤后得到的晶体进行干燥，得到恩替卡韦中间体N8纯品。本发明对于所述干燥没有特殊的限定，采用本领域技术人员熟知的对晶体进行干燥的技术方案即可。本发明优选采用真空干燥。在本发明中，所述真空干燥的温度优选为40～45℃；所述真空干燥的时间优选为2～4h；所述真空干燥的真空度优选为0.085～0.09MPa。
下面将结合本发明中的实施例，对本发明中的技术方案进行清楚、完整地描述。显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1
(1)在搅拌速率为100r/min的条件下，将500mL二甲基甲酰胺加入到40g恩替卡韦中间体N8原料(纯度为95.2％)中，在50℃条件下继续搅拌至恩替卡韦中间体N8原料完全溶解；
(2)将步骤(1)得到的混合溶液与2.0g 767针用活性炭混合，在搅拌速率为150r/min的条件下进行20min脱色处理，采用0.8μm醋酸纤维微孔过滤膜对脱色处理后得到的混合物料进行过滤；
(3)在搅拌速率为10r/min的条件下，向(2)得到的分离液中滴加质量百分含量为5％的亚硫酸氢钠水溶液500mL，滴加时间为30min；在20℃条件下继续搅拌进行2h养晶处理；
(4)将步骤(3)得到的结晶物料进行过滤，采用纯化水对过滤后得到的晶体洗涤3次，每次洗涤所用纯化水为400mL；对洗涤后得到的晶体于温度为42℃、真空度为0.085MPa的条件下进行3h真空干燥，得到38g恩替卡韦中间体N8。
得到的恩替卡韦中间体N8的纯度为99.2％，收率为95.0％。
实施例2
(1)在搅拌速率为120r/min的条件下，将500mL二甲基甲酰胺加入到40g恩替卡韦中间体N8原料(纯度为98.1％)中，在30℃条件下继续搅拌至恩替卡韦中间体N8原料完全溶解；
(2)将步骤(1)得到的混合溶液与2.0g 767针用活性炭混合，在搅拌速率为120r/min的条件下进行60min脱色处理，采用0.8μm醋酸纤维微孔过滤膜对脱色处理后得到的混合物料进行过滤；
(3)在搅拌速率为200r/min的条件下，向(2)得到的分离液中滴加质量百分含量为10％的亚硫酸氢钠水溶液500mL，滴加时间为40min；在25℃条件下继续搅拌进行3h养晶处理；
(4)将步骤(3)得到的结晶物料进行过滤，采用纯化水对过滤后得到的晶体洗涤3次，每次洗涤所用纯化水为400mL；对洗涤后得到的晶体于温度为40℃、真空度为0.085MPa的条件下进行4h真空干燥，得到38g恩替卡韦中间体N8。
得到的恩替卡韦中间体N8的纯度为99.4％，收率为95％。
实施例3
(1)在搅拌速率为80r/min的条件下，将600mL二甲基甲酰胺加入到40g恩替卡韦中间体N8原料(纯度为96.5％)中，在50℃条件下继续搅拌至恩替卡韦中间体N8原料完全溶解；
(2)将步骤(1)得到的混合溶液与3.0g 767针用活性炭混合，在搅拌速率为100r/min的条件下进行40min脱色处理，采用0.8μm醋酸纤维微孔过滤膜对脱色处理后得到的混合物料进行过滤；
(3)在搅拌速率为100r/min的条件下，向(2)得到的分离液中滴加质量百分含量为8％的亚硫酸氢钠水溶液800mL，滴加时间为35min；在20℃条件下继续搅拌进行2h养晶处理；
(4)将步骤(3)得到的结晶物料进行过滤，采用纯化水对过滤后得到的晶体洗涤4次，每次洗涤所用纯化水为400mL；对洗涤后得到的晶体于温度为43℃、真空度为0.09MPa的条件下进行3.5h真空干燥，得到37.0g恩替卡韦中间体N8。
得到的恩替卡韦中间体N8的纯度为99.5％，收率为92.5％。
实施例4
(1)在搅拌速率为150r/min的条件下，将600mL二甲基甲酰胺加入到40g恩替卡韦中间体N8原料(纯度为97.5％)中，在40℃条件下继续搅拌至恩替卡韦中间体N8原料完全溶解；
(2)将步骤(1)得到的混合溶液与3.0g 767针用活性炭混合，在搅拌速率为150r/min的条件下进行30min脱色处理，采用0.8μm醋酸纤维微孔过滤膜对脱色处理后得到的混合物料进行过滤；
(3)在搅拌速率为50r/min的条件下，向(2)得到的分离液中滴加质量百分含量为5％的亚硫酸氢钠水溶液1000mL，滴加时间为40min；在10℃条件下继续搅拌进行2h养晶处理；
(4)将步骤(3)得到的结晶物料进行过滤，采用纯化水对过滤后得到的晶体洗涤4次，每次洗涤所用纯化水为350mL；对洗涤后得到的晶体于温度为40℃、真空度为0.085MPa的条件下进行2h真空干燥，得到37.6g恩替卡韦中间体N8。
得到的恩替卡韦中间体N8的纯度为99.4％，收率为94％。
实施例5
(1)在搅拌速率为80r/min的条件下，将800mL二甲基甲酰胺加入到40g恩替卡韦中间体N8原料(纯度为96.3％)中，在35℃条件下继续搅拌至恩替卡韦中间体N8原料完全溶解；
(2)将步骤(1)得到的混合溶液与2.5g 767针用活性炭混合，在搅拌速率为50r/min的条件下进行50min脱色处理，采用0.8μm醋酸纤维微孔过滤膜对脱色处理后得到的混合物料进行过滤；
(3)在搅拌速率为120r/min的条件下，向(2)得到的分离液中滴加质量百分含量为5％的亚硫酸氢钠水溶液1000mL，滴加时间为35min；在15℃条件下继续搅拌进行2.5h养晶处理；
(4)将步骤(3)得到的结晶物料进行过滤，采用纯化水对过滤后得到的晶体洗涤4次，每次洗涤所用纯化水为380mL；对洗涤后得到的晶体于温度为45℃、真空度为0.09MPa的条件下进行2.5h真空干燥，得到37.1g恩替卡韦中间体N8。
得到的恩替卡韦中间体N8的纯度为99.4％，收率为92.8％。
实施例6
以本发明实施例1得到的恩替卡韦中间体N8为原料制备恩替卡韦，具体步骤如下：
(1)氮气保护下，将实施例1制备的恩替卡韦中间体N820g与600mL二氯甲烷混合，搅拌；温至-78℃，滴加1mol/L三氯化硼的二氯甲烷溶液400mL；
(2)将步骤(1)得到的混合物料升温至-40℃，反应3h；
(3)向步骤(2)得到的物料中滴加3000mL甲醇，旋蒸除去溶剂，经乙酸乙酯、水依次洗涤，干燥，得到恩替卡韦粗品12g，纯度99.6％；
(4)将步骤(3)得到的12g恩替卡韦粗品中加入100mL水，升温回流完全溶解后静置析晶，过滤、干燥，得恩替卡韦纯品10g，纯度99.8％。
对照例1
采用硅胶柱柱层析法对实施例1中恩替卡韦中间体N8原料(纯度为95.2％)进行提纯，具体步骤如下：
(1)装柱：称取200～300目的硅胶200g，用洗脱液(石油醚：乙酸乙酯＝3:1)润湿，搅拌均匀至没有气泡，倒入直径为5cm、长度为30cm的柱子中，真空抽实；
(2)上样：用200mL二氯甲烷溶解实施例1中恩替卡韦中间体N8原料(纯度为95.2％)20.0g，向步骤(1)中装好硅胶的柱子里缓慢均匀的加入；
(3)洗脱：先用1.0L洗脱液I(石油醚：乙酸乙酯＝3:1)洗脱，再用1.5L洗脱液II(石油醚：乙酸乙酯＝1:1)洗脱；然后40℃减压浓缩至无馏分得14.0g恩替卡韦中间体N8。
得到的恩替卡韦中间体N8的纯度为99.0％，收率为70％。
由以上实施例和对比例可以看出，采用本发明提供的提纯方法，能够将纯度为95％～98％的恩替卡韦中间体N8原料提纯至99.2％以上；提纯恩替卡韦中间体N8的方法收率高，达95％。经本发明提供的提纯方法得到的恩替卡韦中间体N8，在进行恩替卡韦粗品制备时，能够使恩替卡韦粗品的纯度达到99.5％以上，将恩替卡韦粗品一次精制，即可得到纯度99.7％以上的恩替卡韦。此外本发明提供的提纯方法操作简单，易于实现工业化生产。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。