本发明属于化学药物领域，具体涉及一种和厚朴酚衍生物及其制备方法与应用。
背景技术：
：和厚朴酚是木兰科植物或中药厚朴中含有的一种活性成分，在传统医药中使用的历史已经很长，味辛、性温，具有行气化湿、温中止痛、降逆平喘的功效。然而，和厚朴酚极难溶于水，不容易被生物体吸收和利用，严重影响其发挥药效。技术实现要素：本发明的目的在于提供一种和厚朴酚衍生物及其制备方法与应用。本发明提供的如式ⅰ所示的化合物：式中，r1、r2选自h、硫酸酯或其药学上可以接受盐、磷酸酯或其药学上可以接受盐，且r1、r2不同时为h。进一步的，r1、r2选自h、硫酸酯或其药学上可以接受盐，且r1、r2不同时为h；所述的硫酸酯或其药学上可以接受盐如下所示：其中，r3为h、碱金属或有机胺。进一步的，r1、r2同时为硫酸酯或其药学上可以接受盐时，所述的化合物如式ⅰa所示：式中，r1a、r2a分别或同时选自h、碱金属或有机胺。进一步的，r1a、r2a同时为h。进一步的，r1a、r2a分别或同时选自h或碱金属，且r1a、r2a不同时为h；所述的碱金属为锂、钠或钾。进一步的，所述的化合物为单钠或双钠盐。进一步的，所述的化合物为单或双三乙醇胺盐、单或双赖氨酸盐。进一步的，r1、r2选自h、磷酸酯或其药学上可以接受盐，且r1、r2不同时为h；所述的磷酸酯或其药学上可以接受盐如下所示：其中，r4、r5分别或同时选自h、碱金属或有机胺。进一步的，r1、r2同时为磷酸酯或其药学上可以接受盐时，所述的化合物如式ⅰb所示：式中，r1b、r2b、r3b、r4b分别或同时选自h、碱金属或有机胺。进一步的，r1b、r2b、r3b、r4b同时为h。进一步的，r1b、r2b、r3b、r4b分别或同时选自h或碱金属，且r1b、r2b、r3b、r4b不同时为h；所述的碱金属为锂、钠或钾。进一步的，所述的化合物为单钠或四钠盐。进一步的，所述的化合物为单三乙醇胺盐、单赖氨酸盐。本发明还提供了上述化合物的制备方法，其特征在于：它包括以下步骤：①、和厚朴酚与磷酰化试剂或硫酸酯化试剂，在碱性条件下反应，得到反应产物；②、将步骤①所得的反应产物后处理或/和成盐，即得式ⅰ所示的化合物。进一步的，所述的磷酰化试剂选自三氯氧磷或三溴氧磷；所述的硫酸酯化试剂选自吡啶三氧化硫络合物、三乙胺三氧化硫络合物。本发明还提供了上述的化合物或其药学上可接受的盐在制备预防和/或治疗肿瘤的药物中的应用。进一步的，所述的肿瘤为胰腺癌或头颈部鳞癌。本发明还提供了上述的化合物或其药学上可接受的盐在制备具有细菌抑制活性的药物中的应用。进一步的，所述的细菌为革兰氏阴性菌、变形链球菌或幽门螺旋杆菌。本发明还提供了上述的化合物或其药学上可接受的盐在制备预防和/或治疗龋齿的药物中的应用。进一步的，所述的龋齿是由变形链球菌引起的龋齿。本发明还提供了上述的化合物或其药学上可接受的盐在制备预防和/或治疗胃溃疡的药物中的应用。进一步的，所述的胃溃疡是由幽门螺旋杆菌引起的胃溃疡。本发明还提供了上述的化合物或其药学上可接受的盐在制备预防和/或治疗炎症的药物中的应用。本发明还提供了一种药物组合物，它是以上述的化合物或其药学上可接受的盐为活性成分，加上药学上常用的辅料或辅助性成分制备得到的制剂。进一步的，所述的辅料或辅助性成分选自稀释剂、填充剂、着色剂、助流剂、润滑剂、粘合剂、稳定剂、助悬剂、缓冲剂中的任意一种或两种以上。进一步的，所述的制剂包括片剂、胶囊、口服液、注射剂、透皮剂、气雾剂固体制剂、脂质体和/或缓控释制剂。本发明提供的新化合物，相对于和厚朴酚在水中具有更好的溶解性，更有利于制备成片剂、注射剂等各种剂型，容易被人体或动物体吸收和利用，从而发挥更好的药效。显然，根据本发明的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本发明上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。以下通过实施例形式的具体实施方式，对本发明的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。显然，根据本发明的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本发明上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。以下通过实施例形式的具体实施方式，对本发明的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。具体实施方式本发明具体实施方式中使用的原料、设备均为已知产品，通过购买市售产品获得。实施例1制备和厚朴酚硫酸酯及其盐在50ml吡啶中加入和厚朴酚(cas35354-74-6,分子量266)10g,吡啶三氧化硫络合物(cas26412-87-3,分子量159)17克(3当量)，室温搅拌过夜，减压浓缩，加入50ml稀酸水，100ml乙酸乙酯分三次萃取，乙酸乙酯层干燥后浓缩至干，得到白色固体和厚朴酚双硫酸酯10.5克；在50ml吡啶中加入和厚朴酚(cas35354-74-6,分子量266)10g,三乙胺三氧化硫络合物(cas761-01-3,分子量181.25)19.4克(3当量)，室温搅拌过夜，减压浓缩，加入50ml稀酸水，100ml乙酸乙酯分三次萃取，乙酸乙酯层干燥后浓缩至干，得到白色固体和厚朴酚双硫酸酯10.2克；和厚朴酚双硫酸酯：1hnmr(300mhz,d2o):δ(ppm)7.36-7.38(m,4h),7.21(brs,2h),5.97(brs,2h),5.00-5.06(m,4h),3.33-3.43(m,4h)；esi-msm/z:426。和厚朴酚双硫酸酯的结构式如下：在50ml吡啶中加入和厚朴酚(cas35354-74-6,分子量266)10g,吡啶三氧化硫络合物(cas26412-87-3,分子量159)5.7克(1当量)，室温搅拌过夜，减压浓缩，加入50ml稀酸水，100ml乙酸乙酯分三次萃取，乙酸乙酯层干燥后浓缩至干，通过制备型高效液相色谱得到和厚朴酚单硫酸酯2.5克；取5克和厚朴酚双硫酸酯分散在10ml水中，加入2当量稀氢氧化钠以及50ml丙酮，得到白色固体，过滤得到和厚朴酚双硫酸酯双钠盐4.7克；和厚朴酚双硫酸酯双钠盐：1hnmr(300mhz,d2o):δ(ppm)7.36-7.39(m,4h),7.21(brs,2h),5.97(brs,2h),5.00-5.06(m,4h),3.33-3.43(m,4h)；esi-msm/z:470；元素分析(elementalanalysis)：c45.90；h,3.49；na,9.80；o,27.21；s,13.61。和厚朴酚双硫酸酯双钠盐的结构式如下：取5克和厚朴酚双硫酸酯分散在10ml水中，加入1当量稀氢氧化钠以及50ml丙酮，得到白色固体，过滤得到和厚朴酚双硫酸酯单钠盐4.7克；和厚朴酚双硫酸酯单钠盐：1hnmr(300mhz,d2o):δ(ppm)7.36-7.39(m,4h),7.22(brs,2h),5.96(brs,2h),5.00-5.06(m,4h),3.33-3.43(m,4h)；esi-msm/z:447；元素分析(elementalanalysis)：c,48.15；h,3.88；na,5.11；o,28.54；s,14.4。取5克和厚朴酚双硫酸酯溶解在50ml丙酮中，加入1或2当量赖氨酸，分别得到其单赖氨酸或双赖氨酸盐；加入1或2当量三乙醇胺，分别得到其单三乙醇胺或双三乙醇胺盐；和厚朴酚双硫酸酯双三乙醇胺盐：1hnmr(300mhz,d2o):δ(ppm)7.36-7.39(m,4h),7.22(brs,2h),5.96(brs,2h),5.00-5.06(m,4h),3.97(m,12h),3.48(m,12h),3.33-3.43(m,4h)。实施例2制备和厚朴酚磷酸酯及其盐在50ml吡啶中加入和厚朴酚(cas35354-74-6,分子量266)10g,三氯氧磷(cas10025-87-3,分子量153.33)23克(4当量)，室温搅拌过夜，减压浓缩，加入50ml冰水搅拌，减压浓缩，加入50ml丙酮，析出白色固体，过滤得到和厚朴酚双磷酸酯10.1克；和厚朴酚双磷酸酯：1hnmr(300mhz,d2o):δ(ppm)7.21-7.43(m,6h)6.01(brs,2h),4.96-5.07(m,4h),3.33-3.66(m,4h)；esi-msm/z:425.2[m-h]-。和厚朴酚双磷酸酯的结构式如下：在50ml吡啶中加入和厚朴酚(cas35354-74-6,分子量266)10g,三氯氧磷(cas10025-87-3,分子量153.33)5.8克(1当量)，室温搅拌过夜，减压浓缩，加入50ml冰水搅拌，减压浓缩，通过制备型高效液相色谱得到和厚朴酚单磷酸酯1.2克；取5克和厚朴酚双磷酸酯分散在10ml水中，加入1当量稀氢氧化钠以及50ml丙酮，得到白色固体，得到和厚朴酚双磷酸酯单钠盐4.2克；和厚朴酚双磷酸酯单钠盐：1hnmr(300mhz,d2o):δ(ppm)7.3-7.45(m,6h)，6.00(brs,2h),5.00-5.06(m,4h),3.38-3.68(m,4h)；esi-msm/z:446.9[m-h]-。元素分析(elementalanalysis)：c,48.28；h,4.22；na,5.12；o,28.59；p,13.81。和厚朴酚双磷酸酯单钠盐的结构式如下：取5克和厚朴酚双磷酸酯分散在10ml水中，加入4当量稀氢氧化钠以及50ml丙酮，得到白色固体，得到和厚朴酚双磷酸酯四钠盐4.4克；和厚朴酚双磷酸酯四钠盐：1hnmr(300mhz,d2o):δ(ppm)7.3-7.45(m,6h)，6.00(brs,2h),5.01-5.06(m,4h),3.37-3.68(m,4h)；元素分析(elementalanalysis)：c,42.00；h,3.11；na,17.92；o,24.84；p,12.10。和厚朴酚双磷酸酯四钠盐的结构式如下：取5克和厚朴酚双磷酸酸酯溶解在50ml丙酮中，加入1当量赖氨酸，得到其单赖氨酸。实施例3和厚朴酚硫酸酯、磷酸酯及其盐的水溶性测试试验检测方法：称取研成细粉的供试品，至于25℃±2℃一定容量的蒸馏水中，每隔5min强力振摇30s，观察30min内的溶解情况，如无目视可见的的溶质颗粒或液滴时，即视为完全溶解。极易溶解系指溶质1g(ml)能在溶剂不到1ml中溶解；易溶系指溶质1g(ml)能在溶剂1～不到10ml中溶解；溶解系指溶质1g(ml)能在溶剂10～不到30ml中溶解；略溶系指溶质1g(ml)能在溶剂30～不到100ml中溶解；微溶系指溶质lg(ml)能在溶剂100～不到1000ml中溶解；极微溶解系指溶质1g(ml)能在溶剂1000～不到10000ml中溶解；几乎不溶或不溶系指溶质1g(ml)在溶剂10000ml中不能完全溶解。试验结果见表1.表1、水溶性试验结果供试品名称水溶性和厚朴酚极微溶解和厚朴酚双硫酸酯溶解和厚朴酚双硫酸酯单钠盐易溶和厚朴酚双硫酸酯双钠盐极易溶解和厚朴酚双硫酸酯双赖氨酸盐易溶和厚朴酚双磷酸酯溶解和厚朴酚双磷酸酯单钠盐易溶和厚朴酚双磷酸酯四钠盐极易溶解和厚朴酚双磷酸酯单赖氨酸盐易溶结果表明，本发明化合物相对于和厚朴酚在水中具有更好的溶解性，更有利于制备成片剂、注射剂等各种剂型，容易被人体或动物体吸收和利用，从而发挥更好的药效。实施例4本发明化合物在制备抗肿瘤药物中的应用裸鼠皮下注射约100万个肿瘤细胞(胰腺癌)，接种3周左右，一旦肿瘤肉眼可见，选择无出血、坏死、感染、肿瘤直径为0.3-0.4cm裸鼠进行实验。将荷瘤裸鼠随机分为生理盐水对照组、dmso对照组，给药组分为40mg/kg和厚朴酚组(dmso溶解，简称给药1组)，40mg/kg和厚朴酚双硫酸酯双钠盐组(生理盐水溶解，简称给药2组)，40mg/kg和厚朴酚双磷酸酯单钠盐组(生理盐水溶解，简称给药3组)，40mg/kg和厚朴酚双磷酸酯四钠盐组(生理盐水溶解，简称给药4组)，每组8只裸鼠。药物组按每只每次腹腔注射；每隔6天测量和统计一次，并测定生长曲线，30天治疗后,处死裸鼠剥离瘤体称重，计算各组抑瘤率；结果见表2和表3。表2、不同化合物在不同时间点裸鼠荷瘤体积(单位cm3,平均数±标准差)0天6天12天18天24天30天生理盐水组0.251±0.0550.413±0.1050.980±0.2892.078±1.2473.154±1.1344.467±1.97dmso组0.229±0.0480.458±0.9701.232±0.5502.166±1.1133.301±1.2754.772±1.68给药1组0.266±0.0760.450±0.1230.909±0.3571.378±0.6851.883±0.8212.690±0.992给药2组0.240±0.0570.441±0.2210.885±0.4761.345±0.5761.612±0.7142.207±0.981给药3组0.256±0.0770.438±0.3520.900±0.4751.361±0.6221.745±0.8462.375±0.765给药4组0.261±0.0840.461±0.4750.901±0.2841.359±0.7011.801±0.7952.402±0.893表3、不同化合物30天后移植瘤重量和抑瘤率(单位g,平均数±标准差)移植瘤重量抑瘤率生理盐水组2.536±0.754-dmso组2.210±543-给药1组1.424±0.40735.6％给药2组1.102±0.72656.6给药3组1.211±0.49252.2％给药4组1.223±0.69351.8％与对照组的体积相比有统计学差异(p<0.05)。结果表明，与和厚朴酚相比，本发明化合物具有更高的抑瘤率。实施例5本发明化合物在制备抗菌药物和/或抗龋齿药物中的应用采用纸片扩散法进行，实验结果见表4.表4、不同化合物的最小抑菌浓度(mic，μg/ml)结果表明，和厚朴酚对于革兰氏阴性菌e.coli以及p.aeruginosa无抑制活性，而本发明化合物(和厚朴酚双硫酸酯双钠盐、和厚朴酚双磷酸单钠盐、和厚朴酚双磷酸酯四钠盐)均表现出抗菌活性，可以应用于制备具有细菌抑制活性的药物。同时，变形链球菌是引起龋齿原因的主要致病菌，幽门螺旋杆菌是胃溃疡的致病菌，本发明化合物(和厚朴酚双硫酸酯双钠盐、和厚朴酚双磷酸单钠盐、和厚朴酚双磷酸酯四钠盐)，可以应用于制备预防和/或治疗龋齿的药物，或者，应用于制备预防和/或治疗胃溃疡的药物。实施例6本发明化合物在制备抗炎药物中的应用大鼠卡拉胶足跖肿胀实验：sd雄性大鼠右后足跖腱膜下注射1％卡拉胶0.2ml/只致炎，给药组一次性腹膜内注射0.3ml的，分为：给药1组40mg/kg和厚朴酚dmso溶液、给药2组40mg/kg和厚朴酚双硫酸酯双钠盐水溶液，给药3组40mg/kg和厚朴酚双硫酸酯双赖氨酸盐水溶液，给药4组40mg/kg和厚朴酚双磷酸酯四钠盐水溶液，对照组注射等量生理盐水，并测定给药前、0.5、1、2、3和4h的右后足直径。各大鼠致炎前后足直径的差值为肿胀度，试验结果见表5。表5、不同化合物的抗炎效果结果表明，本发明化合物对于由卡拉胶引起的炎症，具有良好的抗炎和/或消炎作用，可以应用于制备预防和/或治疗炎症的药物。实施例7和厚朴酚双硫酸酯双钠盐的一种药用片剂组合物本发明公开了一种和厚朴酚双硫酸酯双钠盐药用片剂组合物及其制备方法。和厚朴酚双硫酸酯双钠盐药用片剂组合物，含有0.5g或1g和厚朴酚双硫酸酯双钠盐，93.5g或93g微晶纤维素，4g羧甲基淀粉钠，2g硬脂酸镁。本发明所述片剂组合物的制备方法，包括以下步骤：a，使用常规方法混合和厚朴酚双硫酸酯双钠盐和微晶纤维素；b，将混合物a制粒；c，将羧甲基淀粉钠、硬脂酸镁与所制颗粒混合，压制1000片。实施例8和厚朴酚双磷酸酯单钠盐的一种药用注射液组合物本发明公开了一种和厚朴酚双磷酸酯单钠盐药用注射液组合物及其制备方法。和厚朴酚双磷酸酯单钠盐药用注射液组合物，含有0.2g和厚朴酚双磷酸酯单钠盐，20g无水枸橼酸钠，10g亚硫酸钠，足量注射用水。本发明所述注射液组合物的制备方法，包括以下步骤：a，用注射用水溶解和厚朴酚双磷酸酯单钠盐，枸橼酸钠和亚硫酸钠，并配制到2000ml；b，a步骤所得溶液滤过，并于惰性气体保护下灌封于干燥灭菌的2ml安瓿，共1000瓶；c，安瓿热压灭菌、检漏。实施例9和厚朴酚双硫酸酯双钠盐抗头颈部鳞癌的多药耐药性裸鼠皮下注射经交叉耐药性处理的头颈部鳞癌细胞ycu-n861，一旦肿瘤肉眼可见，用游标卡尺测量肿瘤，并利用公式体积＝(宽平方*长)*0.52，其中宽度是最小径，计算肿瘤体积v0。随即用每天40mg/kg和厚朴酚双硫酸酯双钠盐水溶液进行处理，每天将0.3ml该溶液每天腹膜内注射，同时以注射等量阿霉素、顺铂、甲氨蝶呤、长春新碱和生理盐水为对照，14天后用游标卡尺测量肿瘤，并利用公式体积＝(宽平方*长)*0.52，其中宽度是最小径，计算肿瘤体积vt。利用公式相对肿瘤体积(rtv)＝最终肿瘤体积(vt)/初次给药前肿瘤体积(v0)，计算相对肿瘤体积，结果见表6。表6、不同药物组抗头颈部鳞癌的试验结果p<0.01，给药组与各组相比较；p>0.05，生理盐水组与除给药组外其他各组比较。结果表明，本发明化合物对于头颈部鳞癌细胞生成的肿瘤，具有很好的抑制效果，与其他对比组相比，相对肿瘤体积(rtv)更小。综上，本发明提供的新化合物，相对于和厚朴酚在水中具有更好的溶解性，更有利于制备成片剂、注射剂等各种剂型，容易被人体或动物体吸收和利用，从而发挥更好的药效。当前第1页12