1.含有gat-tpinⅡ结构转基因植物实时PCR精准检测的引物和探针,其特征在于,
上游引物序列,gat-tpinⅡ-F1:5'-AGTTRGGMTTCAGYGAGCARGGAGA-3';
下游引物序列,gat-tpinⅡ-R:5'-CCAATCCAGAAGATGGACAAGTC-3';
荧光探针序列,
gat-tpinⅡ-P2:5'-FAM-CCKCCAGTWGGACCTCACATCCTGATGTAT-TAMRA-3'。
2.含有gat-tpinⅡ结构转基因植物实时PCR精准检测方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)合成以下引物及与引物配合使用的荧光探针,
上游引物序列,gat-tpinⅡ-F1:5'-AGTTRGGMTTCAGYGAGCARGGAGA-3';
下游引物序列,gat-tpinⅡ-R:5'-CCAATCCAGAAGATGGACAAGTC-3';
荧光探针序列,
gat-tpinⅡ-P2:5'-FAM-CCKCCAGTWGGACCTCACATCCTGATGTAT-TAMRA-3';
(2)制备DNA稀释液;
(3)配制PCR反应体系;
(4)定量PCR检测。
3.根据权利要求2所述的含有gat-tpinⅡ结构转基因植物实时PCR精准检测方法,其特征在于,步骤(1)中合成的引物及荧光探针的浓度均为10μmol/l,步骤(2)中制备的DNA稀释液的浓度为50ng/μl。
4.根据权利要求3所述的含有gat-tpinⅡ结构转基因植物实时PCR精准检测方法,其特征在于,步骤(3)中所述的配制PCR反应体系,即将DNA稀释液加入到反应体系中,所述反应体系包括以下组分:
5.根据权利要求4所述的含有gat-tpinⅡ结构转基因植物实时PCR精准检测方法,其特征在于,所述PCR反应条件为:95℃预变性10min,1个循环;95℃变性15s,56℃退火60s,45个循环。