本发明涉及到解一株淀粉芽孢杆菌(bacillusamyloliquefaciens)h47和短小芽孢杆菌及苏云金杆菌微生物发酵苍耳制备植物源杀虫剂的生产方法，属于微生物和发酵技术领域。
背景技术：
苍耳(xanthiumsibiricumpatrinexwidder)(原变种)一年生草本，高20-90cm。根纺锤状，分枝或不分枝。茎直立不枝或少有分枝，下部圆柱形，径4-10mm，上部有纵沟，被灰白色糙伏毛。叶三角状卵形或心形，长4-9cm，宽5-10cm，近全缘，或有3-5不明显浅裂，顶端尖或钝，基部稍心形或截形，与叶柄连接处成相等的楔形，边缘有不规则的粗锯齿，有三基出脉，侧脉弧形，直达叶缘，脉上密被糙伏毛，上面绿色，下面苍白色，被糙伏毛；叶柄长3-11cm。雄性的头状花序球形，径4-6mm，有或无花序梗，总苞片长圆状披针形，长1-1.5mm，被短柔毛，花托柱状，托片倒披针形，长约2mm，顶端尖，有微毛，有多数的雄花，花冠钟形，管部上端有5宽裂片；花药长圆状线形；雌性的头状花序椭圆形，外层总苞片小，披针形，长约3mm，被短柔毛，内层总苞片结合成囊状，宽卵形或椭圆形，绿色，淡黄绿色或有时带红褐色，在瘦果成熟时变坚硬，连同喙部长12-15mm，宽4-7mm，外面有疏生的具钩状的刺，刺极细而直，基部微增粗或几不增粗，长1-1.5mm，基部被柔毛，常有腺点，或全部无毛；喙坚硬，锥形，上端略呈镰刀状，长2.5mm，常不等长，少有结合而成1个喙。瘦果2，倒卵形。花期7-8月，果期9-10月。
含苍耳甙(xanthostrumarin)。叶含苍耳醇(xanthanol)、异苍耳醇(jsoxanthanol)、苍耳酯(xanthumin)等。果实含苍耳甙、脂肪油、树脂、生物碱、维生素c。苍耳甙(strumaroside)，即b-谷甾醇葡萄糖甙)、黄质宁(xanthinin)、苍耳明(xanthumin，是黄质宁的立体异构体)、8-(△2-异戊烯基)-5，7，3，4-四羟基黄酮[8-(△2-isopen-tenyl)-5，7，3，4-tetrahydroxy-flavone]，以及咖啡酸和1，4-二咖啡酰奎宁酸等次生代谢产物，具有一定的杀虫效果，尤其是对蝇蛆类和桃蚜有较好的杀灭作用。
植物源杀虫剂具有安全、高效、低毒、低残留等特点，符合害虫绿色防治的要求，将成为研究者的新宠。利用合适的植物促生菌发酵苍耳，不仅有利于生理活性物质的提取，还不易造成活性物质的失活，促生菌本身还有较好的杀虫防病和促生作用。有利于改善植物生长和增强杀虫效果，有利于环境保护和苍耳植物本身的有效利用。
技术实现要素：
针对现有技术存在的上述缺陷，本发明利用苍耳植物为原料，用2013年6月24日保存于中国典型培养物保藏中心的，保藏编号为：cctccno：m2013283的解淀粉芽孢杆菌(bacillusamyloliquefaciens)h47(该菌株以下简称：解淀粉芽孢杆菌h47cctccm2013283)和市售短小芽孢杆菌及市售苏云金杆菌发酵制备植物源杀虫剂，有利于改善植物生长和增强杀虫效果，有利于环境保护。
发明的发酵技术方案：
1)菌种准备：将解淀粉芽孢杆菌h47cctccm2013283和市售短小芽孢杆菌、市售苏云金杆菌分别接种于种子培养基，于30℃，250r/min震荡培养12h；所述种子培养基成分按g/l计为：蛋白胨10，酵母膏5，nacl10，其余成分为水，121℃高压灭菌15min，调整ph至7.0。按一定比例混合做种子。
2)发酵液准备：选用质量优良的苍耳，用水冲洗，70％—75％酒精浸泡3min，用水洗净，经搅碎机搅碎后待用。
3)发酵罐空消及空气管道消毒：按相关说明书进行发酵罐空消。
4)发酵液实消：将步骤2所得苍耳放入发酵罐中，补充自来水至终体积为10l，按相关说明书进行实消灭菌。
5)接种培养：当发酵罐温度降至37℃时，将步骤1所得种子按体积比1％的接种量，接种至装有苍耳的发酵罐中，25—30℃条件下培养3—12天，设置工艺要求的通气量并保持罐压，设置各其他培养参数培养。
6)出料：培养完毕，放出发酵液，过滤，过滤后所得发酵液即为杀虫剂成品。本发明的有益效果：
本发明提供了发酵苍耳制得一种生物源杀虫剂的方法。本发明制备方法及过程中无污染安全可靠，发酵时间周期短，工艺环节少，简单易操作，可节省投资和运行费用。与传统化学药剂相比，其具绿色安全，环境友好等优势，且促生菌本身还有较好的杀虫防病和促生作用，拥有广阔的应用前景。
具体实施方法：
下面结合实施例对本发明进行进一步描述。以下实施例仅为本发明的几个具体实施例，但本发明的设计构思并不局限于此，凡利用此构思对本发明进行非实质性的改动，均应属于侵犯本发明保护范围的行为。
实施例1
1)菌种准备：将解淀粉芽孢杆菌h47cctccm2013283和市售短小芽孢杆菌、市售苏云金杆菌分别接种于种子培养基，于30℃，250r/min震荡培养12h；所述种子培养基成分按g/l计为：蛋白胨10，酵母膏5，nacl10，其余成分为水，121℃高压灭菌15min，调整ph至7.0。按2:2:1混合做种子。
2)发酵液准备：选用质量优良的苍耳，用水冲洗，70％—75％酒精浸泡3min，用水洗净，经搅碎机搅碎后待用。
3)发酵罐空消及空气管道消毒：按相关说明书进行发酵罐空消。
4)发酵液实消：将步骤2所得苍耳放入发酵罐中，补充自来水至终体积为10l，按相关说明书进行实消灭菌。
5)接种培养：当发酵罐温度降至37℃时，将步骤1所得种子按体积比1％的接种量，接种至装有苍耳的发酵罐中，25℃条件下培养6天，设置工艺要求的通气量并保持罐压，设置各其他培养参数培养。
6)出料：培养完毕，放出发酵液，过滤，过滤后所得发酵液即为杀虫剂成品。
实施例2
1)菌种准备：将解淀粉芽孢杆菌h47cctccm2013283和市售短小芽孢杆菌、市售苏云金杆菌分别接种于种子培养基，于30℃，250r/min震荡培养12h；所述种子培养基成分按g/l计为：蛋白胨10，酵母膏5，nacl10，其余成分为水，121℃高压灭菌15min，调整ph至7.0。按1:2:1混合做种子。
2)发酵液准备：选用质量优良的苍耳，用水冲洗，70％—75％酒精浸泡3min，用水洗净，经搅碎机搅碎后待用。
3)发酵罐空消及空气管道消毒：按相关说明书进行发酵罐空消。
4)发酵液实消：将步骤2所得苍耳放入发酵罐中，补充自来水至终体积为10l，按相关说明书进行实消灭菌。
5)接种培养：当发酵罐温度降至37℃时，将步骤1所得种子按体积比1％的接种量，接种至装有苍耳的发酵罐中，27℃条件下培养6天，设置工艺要求的通气量并保持罐压，设置各其他培养参数培养。
6)出料：培养完毕，放出发酵液，过滤，过滤后所得发酵液即为杀虫剂成品。
实施例3
1)菌种准备：将解淀粉芽孢杆菌h47cctccm2013283和市售短小芽孢杆菌、市售苏云金杆菌分别接种于种子培养基，于30℃，250r/min震荡培养12h；所述种子培养基成分按g/l计为：蛋白胨10，酵母膏5，nacl10，其余成分为水，121℃高压灭菌15min，调整ph至7.0。按1:2:2混合做种子。
2)发酵液准备：选用质量优良的苍耳，用水冲洗，70％—75％酒精浸泡3min，用水洗净，经搅碎机搅碎后待用。
3)发酵罐空消及空气管道消毒：按相关说明书进行发酵罐空消。
4)发酵液实消：将步骤2所得苍耳放入发酵罐中，补充自来水至终体积为10l，按相关说明书进行实消灭菌。
5)接种培养：当发酵罐温度降至37℃时，将步骤1所得种子按体积比1％的接种量，接种至装有苍耳的发酵罐中，30℃条件下培养6天，设置工艺要求的通气量并保持罐压，设置各其他培养参数培养。
6)出料：培养完毕，放出发酵液，过滤，过滤后所得发酵液即为杀虫剂成品。