专利名称:一种用鲤鱼鱼皮制备胶原蛋白肽的方法
技术领域：
本发明涉及一种胶原蛋白肽的制备方法，特别是一种利用淡水鱼鱼皮酶解制备胶 原蛋白的方法。
技术背景
我国淡水鱼产量居世界首位，淡水鱼加工工业随着淡水鱼产量的增长而快速发展。 目前，淡水鱼加工过程仅局限于对鱼体肌肉的利用，而对鱼皮、鱼鳞等通常认为的下 脚料加工利用甚少，绝大多数被抛弃。据统计，我国每年淡水鱼加工业的废弃物总量
达到200万吨以上，其中鱼皮约占8%，即16万吨。这样既造成环境污染，又浪费了 资源。为了充分合理的利用资源，出现了利用淡水鱼皮制备胶原蛋白的技术。早期多 采用清水高温蒸煮法、酸水解法和碱水解法等，但上述方法都会破坏胶原蛋白、氨基 酸等活性成分，成品利用价值低。近年来，酶水解法逐渐取代了各种传统蛋白水解法。 中国专利申请(公开号CN)公开了利用河豚鱼皮制备胶原蛋白及其肽的方法，其工艺 操作步骤包括鱼皮原料的处理、非胶原蛋白的去除和酶解。酶水解后得到的鱼皮胶原 蛋白及其肽成品纯度高、复溶性好、理化性质稳定，是化妆品、食品工业等的高档原 料。酶水解法尤其适于活性胶原蛋白的制备。而且胶原蛋白来源于鱼类，免除了因疯 牛病等疾病对陆生动物来源的胶原蛋白安全性的担忧。
但是，无论是酸(碱)水解法还是酶解法，都存在耗时长、脂肪残存的问题。
发明内容
本发明的目的是提供一种酶解反应更加迅速且成品无脂肪残留的利用淡水鱼皮制
备胶原蛋白肽的新方法。
为了实现上述发明目的，本发明采用的技术方案是 一种用鲤鱼鱼皮制备胶原蛋白肽的方法，其特征在于包括如下步骤 U)原料处理将去除鱼肉、鱼鳍、鱼鳞，清洗干净的鲤鱼鱼皮剪成小碎片，-20°C
冷冻备用；
(2) 非胶原蛋白的去除将解冻的碎鱼皮放入30倍鱼皮体积的3.5%氯化钠溶液 中，于5'C连续搅拌24h，用尼龙纱过滤，弃去滤液；滤渣用IO倍鱼皮体积的蒸馏水 清洗，重复三次，即得到去除了非胶原蛋白的鲤鱼鱼皮；
(3) 脂肪的去除所述步骤(2)得到的去除了非胶原蛋白的鲤鱼鱼皮加入0.5 倍鱼皮体积的蒸馏水，然后于4'C用1-3倍鱼皮体积的石油醚萃取，静置分层后，弃 去上层石油醚，重复三次，下层用蒸馏水清洗，挥去残留的石油醚，得到去除了非胶原蛋白、脂肪的鱼皮；
(4) 胶原蛋白的提取所述步骤(3)得到的去除了非胶原蛋白、脂肪的鱼皮加 入20倍鱼皮体积的0. 1M柠檬酸溶液进行溶胀，均质3分钟，即得到鱼皮胶原蛋白的
粗提取液，将所述粗提取液连续搅拌2h，真空抽滤，滤液用20。/。Na2C03调节PH至中性， 得到预处理好的胶原蛋白粗提取液；
(5) 胶原蛋白肽的制备将所述步骤(4)得到的预处理好的胶原蛋白粗提取液 升温至10(TC，保持10分钟，再降低温度至48t:，调节所述粗提取液PH至9，加入 0.03% (酶/底物，重量百分比)的木瓜蛋白酶和0.06% (酶/底物，重量百分比)的风 味蛋白酶，酶解30分钟，85t:灭酶5分钟，得到相对分子量8000-15000的鲤鱼鱼皮 胶原蛋白肽，经过减压浓縮，喷雾千燥，得到白色粉状、没有腥味的鲤鱼鱼皮胶原蛋 白肽。
本发明的有益效果是
1、 由于本发明酶解工艺采用木瓜酶和风味蛋白酶同时水解鱼皮胶原蛋白，酶解时 间只需30分钟，就可以将鲤鱼皮胶原蛋白水解为胶原蛋白肽。而采用胃蛋白酶、木瓜 蛋白酶酶解胶原蛋白，通常需要10小时以上，甚至更长，有可能造成活性胶原蛋白肽 的失活。本发明极大地縮短了鱼皮胶原蛋白水解反应的时间，尽可能地保证了蛋白肽 的活性，提高了利用淡水鱼皮制备胶原蛋白肽的生产效率。
2、 利用动物源性的原料制备胶原蛋白及其肽都存在脂肪和脂溶性杂质残留的问 题，影响了制备的胶原蛋白肽的水溶性和稳定性。本发明利用石油醚萃取法去除脂肪， 大大降低了鲤鱼皮胶原蛋白肽成品中的脂肪和脂溶性色素的残留，提高了成品的质量。
3、 本发明的产率可达15%，胶原蛋白肽的提出率高达79%，产品纯度达80-85%。
4、 利用本发明方法制得的鲤鱼皮胶原蛋白肽色泽洁白、没有腥味，水溶性好。
具体实施方式
实施例
用鲤鱼鱼皮制备胶原蛋白肽的方法，包括下列步骤
(一) 原料处理
新鲜鲤鱼经去头、去内脏后，对剖成二片式，然后将鱼片放入鱼肉采取机进行采 肉，实现鱼肉和鱼皮的分离。将分离得到的鱼皮剪去鱼鳍、刮去鱼鳞，并将与鱼皮粘 连的鱼肉也一同刮擦除去。然后将干净的鱼皮剪成小碎块，-2(TC冷冻备用。
(二) 非胶原蛋白的去除
将解冻的碎鱼皮放入30倍鱼皮体积的3. 5%氯化钠溶液中，于5'C连续搅拌24h， 用尼龙纱过滤，弃去滤液；滤渣用IO倍鱼皮体积的蒸馏水清洗，重复三次，得到的滤渣即是去除了非胶原蛋白的鱼皮。通过这步处理，可以同时去除鲤鱼皮中大部分水溶 性和盐溶性杂蛋白，以及部分水溶性色素。
(三) 脂肪的去除
在去除了非胶原蛋白的鲤鱼鱼皮加入0.5倍鱼皮体积的蒸馏水，然后于4"C用l-3
倍鱼皮体积的石油醚萃取，静置分层后，弃去上层石油醚，重复三次，下层用蒸馏水 清洗，挥去残留的石油醚，得到去除了非胶原蛋白、脂肪的鱼皮，同时可以除去绝大 部分脂溶性色素。
(四) 胶原蛋白的提取
将去除了非胶原蛋白、脂肪的鱼皮加入20倍鱼皮体积的0. 1M柠檬酸溶液进行溶 胀，均质3分钟，即得到鱼皮胶原蛋白的粗提取液，将所述粗提取液连续搅拌2h，真 空抽滤，去除粗提液中的残留色素。然后滤液用20。/。Na2C03调节ra至中性，得到预处 理好的胶原蛋白粗提取液。
(五) 胶原蛋白肽的制备 将预处理好的胶原蛋白粗提取液升温至IO(TC，保持10分钟，再降低温度至48°C，
调节所述粗提取液PH至9，加入O. 03%(酶/底物，重量百分比)的木瓜蛋白酶和0. 06% (酶/底物，重量百分比)的风味蛋白酶，酶解30分钟，85'C灭酶5分钟，得到相对 分子量8000-15000的鲤鱼鱼皮胶原蛋白肽，经过减压浓縮，喷雾干燥，得到白色粉状、 没有腥味的鲤鱼鱼皮胶原蛋白肽。
(六) 对成品进行检验、计量和包装
通过上述工艺步骤，1Kg新鲜鲤鱼鱼皮，可以得到纯度为80-85%的鲤鱼鱼皮胶原 蛋白肽140-150g。
权利要求
1、一种用鲤鱼鱼皮制备胶原蛋白肽的方法，其特征在于包括如下步骤(1)原料处理将去除鱼肉、鱼鳍、鱼鳞，清洗干净的鲤鱼鱼皮剪成小碎片，-20℃冷冻备用；(2)非胶原蛋白的去除将解冻的碎鱼皮放入30倍鱼皮体积的3.5％氯化钠溶液中，于5℃连续搅拌24h，用尼龙纱过滤，弃去滤液；滤渣用10倍鱼皮的体积蒸馏水清洗，重复三次，即得到去除了非胶原蛋白的鲤鱼鱼皮；(3)脂肪的去除所述步骤(2)得到的去除了非胶原蛋白的鲤鱼鱼皮加入0.5倍鱼皮体积的蒸馏水，然后于4℃用1-3倍鱼皮体积的石油醚萃取，静置分层后，弃去上层石油醚，重复三次，下层用蒸馏水清洗，挥去残留的石油醚，得到去除了非胶原蛋白、脂肪的鱼皮；(4)胶原蛋白的提取所述步骤(3)得到的去除了非胶原蛋白、脂肪的鱼皮加入20倍鱼皮体积的0.1M柠檬酸溶液进行溶胀，均质3分钟，即得到鱼皮胶原蛋白的粗提取液，将所述粗提取液连续搅拌2h，真空抽滤，滤液用20％Na2CO3调节PH至中性，得到预处理好的胶原蛋白粗提取液；(5)胶原蛋白肽的制备将所述步骤(4)得到的预处理好的胶原蛋白粗提取液升温至100℃，保持10分钟，再降低温度至48℃，调节所述粗提取液PH至9，加入0.03％(酶/底物，重量百分比)的木瓜蛋白酶和0.06％(酶/底物，重量百分比)的风味蛋白酶，酶解30分钟，85℃灭酶5分钟，得到相对分子量8000-15000的鲤鱼鱼皮胶原蛋白肽，经过减压浓缩，喷雾干燥，得到白色粉状、没有腥味的鲤鱼鱼皮胶原蛋白肽。
专利摘要
本发明公开了一种利用鲤鱼鱼皮酶解制备胶原蛋白的方法，包括原料处理，氯化钠去除非胶原蛋白，石油醚萃取去除脂肪，柠檬酸提取胶原蛋白和木瓜酶、风味酶共同酶解，减压浓缩，喷雾干燥即得到相对分子量8000-15000、色泽洁白、没有腥味的鲤鱼鱼皮胶原蛋白肽。本发明酶解工艺采用木瓜酶和风味蛋白酶同时水解鱼皮胶原蛋白，酶解时间大为缩短，只需30分钟。利用石油醚萃取法去除脂肪，大大降低了鲤鱼皮胶原蛋白肽成品中的脂肪和脂溶性色素的残留，提高了成品的质量。本发明的产率和胶原蛋白肽的提出率高，产品纯度好。
文档编号C12P21/06GKCN101481723SQ200910114887
公开日2009年7月15日 申请日期2009年1月23日
发明者江 朱, 熊新安 申请人:熊新安;朱 江导出引文BiBTeX, EndNote, RefMan