溴-4-氯-3-吲哚酚辛酸酯、5-溴-6-氯-3-吲哚酚辛酸酯、5-溴-3-吲哚酚壬酸酯、 6-氯-3-吲哚酚壬酸酯或5-溴-3-吲哚酚癸酸酯。在这点上，还应当提到蒽醌衍生的生色 酯酶底物，比如2-茜素辛酸酯。
[0082] 在任何情况下，这些生色的和/或荧光的合成底物对于本领域技术人员是熟知 的，他们将知道取决于寻求的酶活性或多种酶活性来选择待使用的酶底物。
[0083] 根据本发明的优选的实施方案，烃基（硫代）糖苷对应于通式（I):
[0084] R-X- (G)n(I)
[0085]其中：
[0086] -R代表直链或支链的、饱和或不饱和的脂肪族基团，优选地是直链的，有利地是直 链且饱和的，含有2至12个碳原子、优选地6至12个碳原子、且优选地8至12个碳原子；
[0087] -X是-0-或-S-，优选地是-0-;
[0088] -G代表碳水化合物残基；
[0089] _n是在1和10之间、优选地在1和3之间的整数，有利地n是整数1或2。
[0090] 根据本发明的烃基（硫代）糖苷的此定义使得获得期望的检测灵敏度水平成为可 能，即使得从使用的生色和/或荧光酶底物获得非常良好的显色和/或荧光强度成为可能。 没有被理论所束缚，可能的是，这种/这些烃基（硫代）糖苷-特别地通式（I)的那些-改 进靶向酶表达的检测，即微生物的酯酶和/或糖苷酶和/或肽酶和/或硫酸酯酶和/或磷 酸酯酶活性。
[0091] 根据本发明的检测介质可以包含优选地对应于上文提到的通式（I)的一种烃基 (硫代）糖苷或多种烃基（硫代）糖苷（即至少两种烃基（硫代）糖苷）。当检测介质包 含至少两种烃基（硫代）糖苷时，后者可以是相同的或不同的，全部优选地对应于所述通式 ⑴。
[0092] 依据本发明，优选的烃基（硫代）糖苷是以下的烃基糖苷：正辛基-0-D-吡喃葡 萄糖苷和正十二烷基-0 -D-麦芽糖苷（后者是特别优选的）。
[0093] 根据本发明的微生物检测介质能够通过在溶剂（S)中混合对寻求的酶活性是特 异性的（优选地对酯酶活性是特异性的）至少一种生色底物和/或荧光底物与比如先前定 义的至少一种烃基（硫代）糖苷来获得。
[0094] 相当明显地且特别地关于在本申请的前文中提到的问题，根据本发明的微生物检 测介质呈准备好使用的形式（液体或琼脂）且是储存稳定的，这意指显色和/或荧光强度 被保持稳定持续至少若干周，有利地持续至少三周。
[0095] 优选地，取决于使用的烃基（硫代）糖苷或多种烃基（硫代）糖苷，烃基（硫代） 糖苷在介质中的浓度在0. 5g/L和8g/L之间，优选地在0. 5g/L和6g/L之间。
[0096]溶剂（S)是用于溶解感兴趣的生色和/或荧光酶底物、特别地关于生色酶底物的 助剂。其还补充充当稳定-乳化剂的烃基（硫代）糖苷的作用。
[0097] 根据本发明的有利的实施方案，溶剂（S)选自包括以下的组：
[0098]-醇，优选地甲醇、乙醇、甲氧基乙醇，
[0099]-极性非质子溶剂，优选地二甲基甲酰胺（DMF)、二甲基亚砜（DMSO)，
[0100]-含水溶剂，优选地水或缓冲水，
[0101] -以及其混合物；
[0102] 优选地所述溶剂⑶是二甲基亚砜（DMS0)。
[0103] 在实践中，优选地使用的溶剂是甲醇或极性非质子溶剂，优选地DMF和DMS0 (优选 地DMS0)。特别地，当使用酯酶底物时，后者被溶于DMS0类型的有机溶剂中，向其中添加感 兴趣的烃基（硫代）糖苷。
[0104] 关于生色底物和/或荧光底物，后者包含：对其存在将被示出的酶是特异性的靶 标部分，优选地对酯酶活性是特异性的靶标部分；以及发色团和/或荧光团标记物部分，当 所述标记物部分不再与所述靶标部分连接时，即在通过所述酶裂解之后，所述标记物部分 发射光和/或焚光。
[0105] 根据优选的实施方案，酶底物是由待检测的酶的靶标部分和发色团或荧光团部分 构成的生色底物或荧光底物，优选地，靶标选自特别地包括以下的组：
[0106] -糖苷，其由单糖、二糖和/或多糖单元构成，与荧光团或发色团部分的羟基官能 a_或0 _结合；
[0107] -a-氨基酸或肽；
[0108] -有机酸，比如-0-C0(CH2)n-CH3，其中n在0和20之间；
[0109] _无机酸，比如硫酸盐、磷酸盐、焦硫酸盐或磷酸二酯。
[0110] -醌类/蒽醌类以及衍生物，特别地二羟基蒽醌（茜素）；
[0111] -氨基香豆素或羟基香豆素以及衍生物；
[0112] _荧光素以及衍生物；
[0113] -吲哚酚或ALD0L?以及衍生物；
[0114] -氨基苯酚以及衍生物；
[0115] -硝基苯酚以及衍生物；
[0116] _氨基苯基或羟基苯基以及衍生物；
[0117] -吩噁嗪酮以及衍生物；
[0118] -邻苯二酚以及衍生物；
[0119] -喹唑啉酮以及衍生物（包括ELF?97 );
[0120]-二羟基黄酮以及衍生物；
[0121] -3-羟基黄酮（3-HF)以及衍生物；
[0122] _七叶亭以及衍生物。
[0123] 优选地，酶底物是基于吲哚酚或基于其衍生物中的一种的底物。在这种情况下，本 发明还涉及适用于在绝氧和/或微量需氧的条件（在反应介质中的分子氧浓度低于大气浓 度）下使用的检测介质，所述介质包含促进吲哚酚衍生物的氧化聚合的试剂，比如柠檬酸 铁铵络合物。
[0124] 高锰酸钾、铁氰酸盐/铁氰化物也可以被提及作为"促进吲哚酚衍生物的氧化聚 合的试剂"。
[0125] 促进吲哚酚衍生物的氧化聚合的试剂（例如柠檬酸铁铵类型的金属络合物）优选 地以在大约0.lmg/ml和大约2mg/ml之间（优选地约0. 6mg/ml)的浓度使用。
[0126] 在根据本发明的反应介质中酶底物必须被使用的浓度可以由本领域技术人员基 于他的/她的一般知识并且从例行测试（在适用的情况下）容易地测定。此浓度必须足以 实现需要的检测灵敏度水平，但不能太大以便不冒抑制微生物的生长的风险。
[0127] 举例来说，生色底物和/或荧光底物的浓度在lmg/L和10g/L之间、优选地在5mg/ L和6g/L之间、有利地在25mg/L和2g/L之间。
[0128] 有利地，根据本发明的反应介质包含适合的培养介质，比如在"Handbookof culturemedia"（CRCPress)中描述的介质，优选地所述培养介质选自：
[0129]_麦康凯（MacConkey)、Hektoen选择性介质、被意图用于选择性地检测 chromlDK沙门氏菌的沙门氏菌的选择性生色介质、哥伦比亚ANC(ColumbiaANC)、PALCAM、沙保弱（Sabouraud)庆大霉素-氯霉素类型，优选麦康凯介质或被意图用于选择性 地检测chroinTD?:沙门氏菌类型的沙门氏菌的选择性生色介质，
[0130]-哥伦比亚+/_血液、Trypcase大豆（TSA)、营养琼脂、沙保弱类型的非选择性介 质，优选哥伦比亚介质。
[0131]在实践中，本领域技术人员应当取决于靶标微生物（且特别地取决于靶标细菌）、 根据本领域技术人员完全已知的且在本领域技术人员力所能及的范围内的标准选择培养 介质。
[0132] 在以任何方式都不是限制性的情况下，显现的是根据本发明的介质特别地适合用 于检测医学或工业兴趣的微生物（特别地用于表征和/或枚举的目的），以及特别地革兰氏 阴性细菌，更特别地沙门氏菌属和假单胞菌属中的那些。
[0133] 如整个本申请所指示，主要目标中的一个是开发使得检测具备酯酶活性（特别地 用于表征和/或枚举的目的）的微生物（以及特别地细菌）比如沙门氏菌属、假单胞菌属、 不动杆菌属等的细菌成为可能的介质。
[0134] 关于沙门氏菌的检测，例如，麦康凯介质、Hektoen介质或c.hroiTl丨D?沙门氏菌介 质，应当被选作培养介质。
[0135] 此外，介质可以潜在地含有其他添加剂，比如，例如：一种或更多种其他酶底物，其 是例如生色和/或荧光的蛋白胨；一种或更多种生长因子；碳水化合物；一种或更多种选择 性试剂；缓冲液；一种或更多种胶凝试剂等。
[0136] 根据本发明的反应介质采取准备好使用的形式，优选地液体或凝胶形式。准备好 使用的形式可以被理解为意指准备好在管、烧瓶中或在培养皿上接种的形式。
[0137] 根据本发明的反应介质的优点中的一个是，其能够在4°C下以液体或凝胶的形式 储存持续若干周。
[0138] 本发明的另一个目标涉及获得根据本发明的介质的方法，所述方法包括以下步 骤：
[0139]a)在溶剂（S)中制备具有至少一种生色底物和/或荧光底物（比如上文定义的） 以及至少一种烃基（硫代）糖苷的至少一种储备溶液，
[0140]b)任选地将至少一种添加剂添加至所述介质中，以及
[0141]c)使全部均质化。
[0142] 关于上述步骤a)应当注意的是，可以在相同步骤期间将所述底物和所述至少一 种烃基（硫代）糖苷添加至溶剂（S)中，或根据替代方案，将所述底物在第一阶段中引入溶 剂（S)中，且然后将所述至少一种烃基（硫代）糖苷用先前获得的溶液（包含被所述溶剂 (S)溶解的所述底物）摄取。
[0143]有利地，通过相继地并入酶底物、溶剂（S)以及比如先前定义的至少一种烃基（硫 代）糖苷（可能地同时添加）单独地制备储备溶液。使用的产品和量如先前所定义。在均 质化之后，将储备溶液添加至被过冷并且先前在水中被再生的胶凝培养介质。其还可以是 非胶凝的液体介质，比如例如营养肉汤。
[0144]在将培养介质和储备溶液混合之后，获得准备好被接种的液体或胶凝检测介质。
[0145]本发明的目标还是根据本发明的介质用于检测具有酯酶和/或糖苷酶和/或肽酶 和/或硫酸酯酶和/或磷酸酯酶活性的微生物（显著地用于表征和/或枚举的目的）、优选 地用于检测具有酯酶活性的微生物比如沙